反流性食管炎、Barrett食管和食管腺癌中PCNA、Ki-67、bcl-2的表达

目的观察反流性食管炎、Barrett食管、食管腺癌的PCNA、Ki-67、bcl-2的表达。方法免疫组化法测定反流性食管炎、Barrett食管、食管腺癌及正常对照组的PCNA、Ki-67、bcl-2的表达。结果食管腺癌组的PCNA、Ki-67、bcl-2表达高于反流性食管炎、Barrett食管、正常对照组（P〈0.01）;反流性食管炎组及Barrett食管组的PCNA、Ki-67表达分别高于正常对照组（P〈0.01）,但bcl-2表达与正常对照组相比无明显统计学差异。结论联合监测PCNA、Ki-67、bcl-2的表达有助于判断食管细胞的增殖活性和肿瘤恶性倾向。     

Cripto-1蛋白和mRNA在食管鳞癌中的表达及其生物学意义

目的研究Cripto-1在食管鳞癌组织中的表达情况及其与食管鳞癌发生、发展的关系。方法采用免疫组化SP法和原位杂交方法对60例食管鳞癌及60例正常食管黏膜组织进行Cripto-1蛋白和mRNA的检测。结果（1）原位杂交结果显示,Cripto-1mRNA在食管鳞癌组织中表达的阳性率为63．33％,显著高于正常食管黏膜组织中Cripto-1mRNA的表达的阳性率（8-33％）,两组之间Cripto-1mRNA表达的差异具有统计学意义（P〈0．05）。（2）免疫组织化学结果表明,Cripto-1蛋白在食管鳞癌组织中表达的阳性率为58．33％,显著高于正常食管黏膜组织中Cripto-1蛋白的表达的阳性率（6．67％）,两组之间Cripto-1蛋白表达的差异具有统计学意义（P〈0．05）。（3）对60例食管鳞癌患者的临床病理学参数进行统计分析,结果显示Cripto-1mRNA和蛋白的表达均与食管鳞癌患者的年龄和性别无关（P〉0．05）,但与食管鳞癌的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期具有显著的相关性（P〈0．05）。（4）相关性分析结果表明,在60例食管鳞癌标本中,Cripto-1 mRNA阳性表达的38例患者中,Cripto-1蛋白阳性表达患者占31例。而Cripto-1mRNA阴性表达的22例患者中,Cripto-1蛋白阴性表达占18例。Cripto-1 mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈正相关关系（7=0．600,P=0．000）。结论食管鳞癌组织中Cripto-1 mRNA和蛋白均呈现高表达,表明Cripto-1高表达可能与食管鳞癌的发生和进展密切相关。     

Chk1表达与食管鳞癌浸润转移的关系

目的 探讨Chk1表达与食管鳞癌浸润转移的关系。方法 采用Western Blot、RT-PCR技术分别检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中Chk1蛋白及mRNA的表达,探讨Chk1表达与食管鳞状细胞癌浸润转移之间的关系。结果 正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织以及食管鳞癌组织中,Chk1蛋白、mRNA的表达水平依次升高,三者间两两比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;深层浸润组食管鳞癌组织中Chk1蛋白、mRNA的表达水平均显著高于浅层浸润组,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;有淋巴结转移组的食管鳞癌组织中Chk1蛋白、mRNA的表达水平显著高于无淋巴结转移组,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 Chk1高表达与食管鳞癌浸润转移有关。     

食管鳞癌组织及癌细胞株EC9706中COX-2与15-PGDH的表达及临床意义

【摘要】目的 研究食管鳞癌组织及癌细胞株中环氧合酶（COX）-2及15-羟基前列腺素脱氢酶（15-PGDH）的表达及临床意义。方法 采用免疫组化（PV-9000）法检测正常食管黏膜（对照组,n=35)、食管鳞癌组织(n=35)及食管癌细胞株EC9706中COX-2和15-PGDH蛋白表达,RT-PCR法检测食管鳞癌组织及对照组15-PGDH mRNA表达。结果 与对照组比较,食管鳞癌组织COX-2蛋白表达较高,15-PGDH蛋白及15-PGDH mRNA表达减低（均P <0.05）。COX-2、15-PGDH在不同浸润深度、有无淋巴结转移食管鳞癌中比较差异有统计学意义（P < 0.05）,在不同性别、年龄及肿瘤分化程度组织中比较差异无统计学意义。食管癌细胞株中COX-2阳性表达,15-PGDH阴性表达。结论 食管鳞癌组织及癌细胞株中COX-2表达增高,15-PGDH表达减少,两者可能参与食管癌的发生、发展。     

PINCH蛋白在人食管鳞状细胞癌中的表达及临床病理意义

目的：探讨PINCH蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床病理意义。方法：采用免疫组化SP法检测25例正常食管黏膜组织和52例食管鳞状细胞癌组织中PINCH蛋白的表达。结果：PINCH蛋白在人食管鳞状细胞癌组织中,其阳性表达率为73．1％（38／52）,明显高于正常食管黏膜组织0（0／25）,二者差异有统计学意义（P〈0．01）;WestemBlotting结果与免疫组化结果一致。结论：PINCH蛋白在食管鳞癌中表达可能与肿瘤的浸润和转移有关,提示PINCH蛋白可作一个肿瘤相关间质的标志物来猜测肿瘤浸润和淋巴结转移的能力。     

Barrett食管424例内镜诊断结果分析

目的在应用国际公认的Barrett食管内镜诊断标准的基础上,总结永康市第二人民医院近3年来胃镜检查中Barrett食管检出情况。方法分析2008年7月至2011年7月因各种主诉来本院行胃镜检查诊断为Barrett食管患者的病例资料。结果424例Barrett食管,其中2例食管腺瘤,2例食管腺癌;其中70例患者在内镜诊断Barrett食管黏膜中行黏膜活检,柱状上皮检出率为92．9％,肠化检出率20．0％。结论内镜诊断可以作为长Barrett食管诊断的金标准,本研究也初步反映浙江省永康市古山地区Barrett食管及其转变丽来的食管腺癌不是少见疾病。     

食管黏膜上皮癌变过程中FHIT与增殖细胞核抗原的表达及临床意义

目的探讨食管黏膜上皮癌变过程中脆性组氨酸三联体（FHIT）基因与PCNA的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学sP法分别检测FHIT在37例正常食管黏膜、非典型增生、食管鳞癌组织中的表达。结果食管鳞癌组织中FHIT蛋白阳性表达率43．2％（16／37）显著低于非典型增生组70．3％（26／37）和正常食管黏膜组89．2％（33／37）（均P〈0．05）。食管鳞癌组织中PCNA的表达明显高于非典型增生组织（P〈0．05）;FHIT与PCNA的平均标记指数呈显著负相关（L=-0．583,P〈0．05）。食管鳞癌高、中分化组FHIT蛋白阳性表达率46．2％（12／26）显著高于低分化组36．4％（4／11）（P〈0．05）;淋巴结转移患者FHIT蛋白阳性表达率39．3％（11／28）显著低于无淋巴转移组55．6％（5／9）,（P〈0．05）。结论PTEN在食管黏膜上皮癌变过程中有明显缺失现象,在食管鳞癌的发生、发展中起重要作用,对其蛋白的检测可作为判定食管鳞癌发生及转移能力的一项客观指标。     

亚临床动脉粥样硬化患者血液环氧合酶-2水平研究

目的：探讨亚临床动脉粥样硬化（AS）患者血浆中环氧合酶Ⅱ（COX-2）的活性和单个核细胞COX-2mRNA的表达水平。方法：分别应用酶联免疫法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测100例亚临床AS患者和40例健康对照血浆COX-2活性与单个核细胞COX-2mRNA表达,并结合临床资料进行分析。结果：亚临床AS组COX-2血浆活性水平[（10.84±3.11）U/L]明显高于正常对照组[（6.97±1.25）U/L],差异有统计学意义（P〈0.05）;RT-PCR半定量分析发现亚临床AS组血液中单个核细胞COX-2mRNA表达的平均吸光度（0.2448±0.0903）较正常对照组（0.0058±0.0027）显著升高（P〈0.01）。结论：COX-2血浆活性水平和COX-2mRNA的表达水平与亚临床AS有明显相关性,检测血浆COX-2活性和COX-2mRNA的表达可作为亚临床AS监测的参考指标。     

奥美拉唑对大鼠反流性食管黏膜损伤后细胞增殖相关基因表达的影响

目的：观察奥美拉唑对反流性管黏膜损伤后细胞增殖相关基因表达的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分为5组,假手术组、单纯胃食管反流动物模型组（模型组）、模型组＋奥美拉唑低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组15只。分别取食管标本肉眼观察黏膜状况,HE染色,光镜观察组织病理学变化,应用免疫组化染色等方法检测p21,PCNA,CyclinD1,CDK4的表达情况。结果假手术组大鼠食管颜色淡红,有光泽,黏膜光滑。模型组大鼠食管颜色变淡白,黏膜粗糙、增厚、皱襞灰白色斑块状增生。与模型组比较,奥美拉唑低、中、高剂量治疗组大鼠食管病变明显减轻（ P ＜0 n．05）。 HE染色显示,假手术组大鼠食管各层结构完整,黏膜厚薄适中,黏膜基底膜清楚,各层细胞排列整齐,表面可见较少的角化。模型组大鼠黏膜层增厚,基底细胞层及棘细胞层细胞数目增多,角化层增厚,局部黏膜基底细胞层明显增生,部分黏膜组织向外呈乳头样突起。与模型组比较,奥美拉唑治疗组大鼠食管黏膜损伤及增生病变明显减轻（ P ＜0．05）。免疫组织化学检测显示,假手术组大鼠食管黏膜有p21蛋白表达,PCNA ,CyclinD1和CDK4蛋白呈阳性基础表达。模型组大鼠食管黏膜p21蛋白的表达减弱,PCNA ,CyclinD1和CDK4蛋白表达显著增强（ P＜0．05）。奥美拉唑治疗组大鼠食管黏膜p21蛋白的表达增强,PCNA,CyclinD1和CDK4蛋白表达明显降低（ P ＜0．05）。结论奥美拉唑抑制细胞增殖可能是其治疗反流性食管损伤的重要机制。     

胃肠道腺癌组织中HIF-1α、COX-2及Bax蛋白的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子1（HIF-1α）、环氧化酶-2（COX-2）及Bax在胃肠道癌组织中的表达及其临床意义。方法以经病理证实的胃肠道腺癌组织37例为胃肠道腺癌组,以其胃肠道腺癌淋巴结转移组织37例作为淋巴结转移癌组,正常胃肠道黏膜组织37例作为正常胃肠道黏膜组。采用链霉素-生物素（S-P）免疫组化技术,分别测定3组癌组织中HIF-1α、COX-2及Bax的表达。采用Wilcoxon秩和检验进行组间比较。结果胃肠道腺癌、胃肠道腺癌淋巴结转移组织中HIF-1α、COX-2及Bax蛋白阳性表达率均明显高于正常胃肠道黏膜组织（P〈0.01）;胃肠道腺癌组织淋巴结转移的癌组织及胃肠道腺癌组织中HIF-1α、COX-2及Bax蛋白阳性表达率间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论HIF-1α、COX-2及Bax蛋白在胃肠道腺癌及其淋巴结转移癌的组织中表达水平高于正常胃肠道黏膜,其表达水平与肿瘤的发生、发展、浸润、转移相关,检测上述标志物有一定的临床及病理意义。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ在反流性食管炎、Barrett管和食管癌中的表达

目的 探讨食管癌、Barrett食管和反流性食管炎中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达情况.方法 选取2014年12月至2016年5月期间本院收治的慢性浅表性胃炎、Barrett食管、反流性食管炎患者各21例,食管腺癌患者7例,对其食管粘膜组织进行活检,采用免疫印迹法和免疫组化法对各组粘膜组织食管上皮细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和PPAR γ的单蛋白表达情况进行检测,并对各组分布水平的差异进行观察分析.结果 EAC(42.86％)、BE(33.33％)、RE(33.33％)组患者的PPAR γ阳性率均明显高于对照组(4.76％),差异有统计学意义(P＜0.05),但三组之间并无统计学差异(P＞0.05);EAC组(l00.00％)、BE组(76.19％)、RE组(61.90％)样本中PCNA阳性表达率均明显高于对照组(19.05％),差异有统计学意义(P＜0.05),其中EAC组样本PCNA阳性表达率为100％,远高于RE组和BE组,差异有统计学意义(P＜0.05);EAC[(0.33±0.12)]、BE[(0.20±0.17)]、RE[(0.29±0.14)]组PPARγ蛋白的表达量均明显高于对照组[(0.09±0.05)],差异有统计学意义(P＜0.05),其中以EA组表达最高,但三组之间并无统计学差异(P＞0.05).结论 在反流性食管炎、Barrett食管和食管腺癌中,PPARγ的表达逐渐增加,同时伴随细胞增殖的不断加快,此种现象表明在此类患者的发病过程中,PPARγ的调控作用发挥着十分重要的作用.     

Molecular changes in the esophageal epithelium after a subchronic exposure to cigarette smoke in the presence of bile-acid reflux

Background: Gastroesophageal reflux of bile acids plays an important role in the development of Barrett’s esophagus (BE)–associated esophageal adenocarcinoma (EAC). Cigarette smoke has been demonstrated to exacerbate the effects of reflux and thus the initial stages of EAC carcinogenesis. To date, no in vivo studies have been conducted to look at the concomitant effects of cigarette smoke and bile acids on EAC incidence.

Methods: In this pilot study, rats that underwent esophagoduodenal anastomosis (EDA) surgery to induce reflux were exposed to whole-body cigarette smoke 3 weeks after surgery. Smoke exposure (135?mg/m³/day) was done for 4?h/day for 5 consecutive days and animals were euthanized after a 48-h recovery period.

Results: Exposure to EDA-smoke accelerated the development of BE when compared to EDA-air. The presence of reflux caused a significant 3.5-fold increase in nuclear factor-κB-inducing kinase (NIK) staining (1.47?±?0.6; p?=?0.01). Animals with both reflux and smoking had the highest (10-fold; 4?±?0.9) induction of cyclooxygenase-2 (COX-2) expression (p?<?0.05). Similarly, there was a 10-fold increase in 4-aminobiphenyl (4-ABP) protein adducts identified in all smoke-exposed animals (p?<?0.01).

Conclusion: Cigarette smoke aggravates reflux-induced BE and potentially accelerates the progression of BE to EAC through the loss of manganese superoxide dismutase (MnSOD), and overexpression of NF-κB- and COX-2-mediated factors.     

Targeting the Wnt signaling pathway to treat Barrett’s esophagus

Barrett’s esophagus (BE) is an acquired condition in which the normal squamous epithelium in the distal esophagus is replaced by a metaplastic columnar epithelium, as a complication of chronic gastroesophageal reflux. The clinical significance of this disease is its associated predisposition to esophageal adenocarcinoma (EAC). Recently, and similarly to other human malignancies, the Wnt signaling pathway and its key component β-catenin have been implicated in the carcinogenesis of BE. Although mutations in adenomatous polyposis coli (APC) or β-catenin are rare in EAC, alterations of upstream components, such as overexpression of Wnt2 ligand or downregulation of Wnt antagonists may play dominant roles in the activation of the Wnt pathway. Increasing evidence suggests that inhibiting the Wnt pathway may be a new targeted therapy for the treatment of cancers and could, therefore, be promising for the cure of EAC, which remains a highly lethal disease.     

Targeting the Wnt signaling pathway to treat Barrett's esophagus

Barrett's esophagus (BE) is an acquired condition in which the normal squamous epithelium in the distal esophagus is replaced by a metaplastic columnar epithelium, as a complication of chronic gastroesophageal reflux. The clinical significance of this disease is its associated predisposition to esophageal adenocarcinoma (EAC). Recently, and similarly to other human malignancies, the Wnt signaling pathway and its key component beta-catenin have been implicated in the carcinogenesis of BE. Although mutations in adenomatous polyposis coli (APC) or beta-catenin are rare in EAC, alterations of upstream components, such as overexpression of Wnt2 ligand or downregulation of Wnt antagonists may play dominant roles in the activation of the Wnt pathway. Increasing evidence suggests that inhibiting the Wnt pathway may be a new targeted therapy for the treatment of cancers and could, therefore, be promising for the cure of EAC, which remains a highly lethal disease.     

Characterization of the prostaglandin E2 pathway in a rat model of esophageal adenocarcinoma

Accumulating evidence indicates that the cyclooxygenase-2 (COX-2)/prostaglandin E2 (PGE2) pathway plays a key role in esophageal carcinogenesis. A better understanding of the pathway downstream of COX-2 may reveal novel targets for the prevention of esophageal adenocarcinoma (EAC). The objective of this study was to characterize the profile of genes involved in PGE2 metabolism and signaling in an experimental model of EAC. Esophagojejunostomy with gastric preservation was performed in wistar rats to induce gastroduodenal reflux. Rats were sacrificed 2 or 4 months after surgery. Nine non-operated rats were used to obtain normal (control) esophageal tissues. RESULTS: All rats that underwent esophagojejunostomy developed inflammation. In addition, 90% of the animals showed intestinal metaplasia; of those, 40% progressed to AC. This process was accompanied by a significant increase in esophageal PGE2 levels and the induction of both mRNA and protein levels of COX-2, COX-1, prostaglandin E synthase, 15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase, and PGE2 receptors EP3, EP4 and especially EP2, which rose to particularly high levels in experimental rats. In addition, exposure to a selective COX-2 inhibitor (SC58125) or an EP1/EP2 antagonist (AH6809), but not an EP4 antagonist (AH23848B), significantly reduced cell proliferation of esophageal explants in 24 hour-organ culture experiments. Our data suggest that, in addition to COX-2, other components of the PGE2 pathway, including COX-1, may play important roles in the development of EAC induced by gastroduodenal reflux in the rat. Although it must be confirmed in vivo, the EP2 receptor may represent a promising selective target in the prevention of Barrett's associated AC.     

鼻咽癌中环氧化酶-2的实验研究

目的 研究环氧化酶-2在鼻咽癌中的表达,探讨其与鼻咽癌的增生、浸润及转移的关系。方法 在26例鼻咽癌及相应癌旁组织和10例正常鼻咽部黏膜组织中,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测环氧化酶-2 mRNA的表达。结果 在鼻咽癌组织中环氧化酶-2 mRNA高表达,在正常鼻咽部黏膜环氧化酶-2 mRNA中低表达,差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论 环氧化酶-2与鼻咽癌的生长、浸润及转移有密切关系。     

肝复康经JNK信号通路在肝星状细胞凋亡中的调节机制

目的探讨中药肝复康经JNK(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路在肝星状细胞凋亡中的调节机制。方法将SD大鼠随机分为5组:正常对照组(C),模型组(M),肝复康高(HT)、中(MT)、低(LT)剂量治疗组,每组给予相应的处理;HSC-T6细胞株随机分为3组:正常对照组、乙醛组及肝复康治疗组。HE染色法观察肝组织形态结构变化;RT-PCR法测定MKK4、MKK7、JNK1、JNK2、COX-2、Survivin、Caspase-3、α-SMA、collagenⅠ和collagenⅢ的基因表达水平;免疫组织化学法和免疫蛋白印记法观察COX-2在肝组织和肝星状细胞中的表达。结果正常组中COX-2几乎不表达。与正常组相比,模型组中COX-2表达显著增加(P<0.05)。与模型组相比,肝复康治疗组各组中COX-2表达均明显降低,其中,中剂量组最明显(P<0.05)。与正常组相比,模型组中MKK4、MKK7、JNK1、JNK2、COX-2、Survivin的基因表达水平均显著上调(P<0.05)。与模型组相比,肝复康治疗组各基因表达水平均明显减弱,中剂量组最明显(P<0.05),其中Caspase-3基因表达呈相反趋势。COX-2和Survivin的表达呈正相关,和Caspase-3的表达呈负相关。检测α-SMA、collagenⅠ与collagenⅢ基因表达,与模型组相比,中剂量治疗组表达水平明显下调(P<0.05)。结论肝复康可通过抑制JNK信号通路的传导诱导肝星状细胞凋亡,发挥抗纤维化作用。     

戊地昔布对裸鼠食管癌移植瘤凋亡的影响及其可能机制

目的探讨戊地昔布对裸鼠食管癌移植瘤凋亡的影响及其可能机制。方法建立食管癌裸鼠原位移植瘤模型,给予戊地昔布4 wk。剥离瘤结节,计算瘤体体积和肿瘤生长抑制率;FCM法检测移植瘤中的细胞凋亡率;免疫组织化学和FCM法检测COX-2、c-jun和c-fos蛋白的表达变化;RT-PCR检测移植瘤中COX-2 mRNA表达变化。结果①用戊地昔布的裸鼠组,裸鼠体重明显增加,且随用药时间延长,其体重也随之增加。②戊地昔布可明显降低肿瘤重量,肿瘤生长抑制率为45.80%。③戊地昔布可增加肿瘤细胞的凋亡率。④戊地昔布可下调COX-2 mRNA和蛋白的表达;同时凋亡基因c-jun和c-fos蛋白表达升高。⑤肿瘤组织的凋亡率与COX-2蛋白表达呈负相关(r=-0.726,P=0.008),与c-jum、c-fos蛋白表达呈正相关。⑥给予戊地昔布后,裸鼠胃肠上皮细胞形态没有明显异常。结论戊地昔布能够抑制裸鼠移植瘤的生长和诱导凋亡,其机制部分与抑制COX-2表达及上调凋亡基因c-jun,c-fos有关。     

Snail mRNA与环氧化酶-2mRNA在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨Snail mRNA及环氧化酶-2(COX-2) mRNA在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床意义.方法 应用原位杂交技术测定30例乳腺单纯性增生、30例乳腺导管内癌和70例乳腺浸润性导管癌组织中Snail mRNA及COX-2 mRNA的表达.结果 ①Snail mRNA及COX-2 mRNA在乳腺单纯性增生...