免疫胶乳球对细胞表面抗原和受体的标记技术及其应用

为了了解生物膜的结构与功能,研究细胞表面特异抗原和受体的分布规律及其与细胞活动的关系,近廿年来,在光镜和透射电镜水平的荧光标记、酶标记、铁蛋白标记以及用其它生物大分子为标记物的免疫标记术已有较多的应用和报道。从七十年代起,随着扫描电镜产品分辨力的提高和制样技术的改善,免疫细胞学方法与扫描电镜技术的结合才得到实现和发展。至今,已成功地对多种细胞表面成份进行了标记,获得了细胞表面抗原,受体动态     

介绍一种新的复合免疫标记技术—光镜荧光免疫标记结合电镜免疫金标记

荧光免疫细胞化学已广泛应用于病理学、临床检验学等许多方面,尤其在各类白血病细胞的免疫分型诊断中发挥了重要的作用.许多学者认为该技术虽有一定的灵敏性和特异性,但仍有某些缺点,例如荧光标本不能长期保存,且要在性能较好的荧光显微镜下观察,对有些荧光标记比较弱的样品,不能明确诊断.因此常常需要另做其它指标,     

用免疫金标记技术对LAK细胞和CTL细胞中穿孔素和丝氨酸酯酶进行亚细胞水平定位

已知CTL,NK 和LAK 细胞胞浆颗粒中含有包括穿孔素和丝氨酸酯酶家族在内的多种介质,其中穿孔素可在胞浆膜上形成管状通道而溶解靶细胞。目前对这两种介质的确切分布尚不清楚。现采用胶体金标记技术对LAK 和CTL 细胞颗粒中这两种介质进行了定位研究。LAK 细胞由C_(57)BL/6小鼠脾细胞制备。将脾细胞过尼龙毛柱收获不粘附细胞,用重组人IL-2刺激2天,去除不粘附塑料之细胞后再培养2天收获LAK 细胞,所得LAK 细     

应用免疫金标记技术分析福氏2a痢疾杆菌膜抗原

本文报告应用抗福氏２ａ痢疾杆菌膜成份ＭｃＡｂ及胶体金探针对细菌膜抗原进行了定位。结果显示４种抗脂多糖ＭｃＡｂ（３Ａ６、２Ｅ６、４Ｆ１．２Ａ３）可不均一的识别位于细菌表面的抗原，而另外一种抗ＬＰＳＭＣＡｂ（１Ｇ８）和一抗膜蛋白ＭｃＡｂ（１Ａ１）识别的抗原未暴露于细菌表面。应用细菌膜碎片包埋前染色成功地定位了抗胰蛋白ＭｃＡｂ１Ａ１位于细菌内膜的抗原。与ＭｃＡｂ的生物学活性比较表明。阳性标记细菌表面抗原的ＭｃＡｂ的抗原与其阻断志贺氏菌接触性溶血试验和对小鼠的被动保护力密切相关。提示免疫电镜标记技术确定抗原表位在细菌表面的可及性和拷贝数对构建和筛选痢疾工程菌苗具有重要意义。     

微波抗原修复法在免疫组织化学双标记技术中的应用

微波抗原修复法在免疫组织化学双标记技术中的应用孙保存赵秀兰章明放林建韶随着免疫组织化学方法的普及，双标记技术的应用日益增多。但该技术操作复杂，影响因素多，不易获得满意结果。利用微波辐射对组织抗原进行修复可明显提高免疫组化染色效果。我们在对克隆病组织中...     

~(125)I标记单克隆抗体竞争结合试验在研究细胞表面抗原中的应用

用氯胺-T法将~(125)I标记到经高压液相纯化的单克隆抗体上进行竞争结合试验,对刺激前后人T细胞白血病细胞株Jurkat和H-TLV-1感染的HUT 102 B2细胞表面活化抗原进行定量检测,结果表明,静止Jurkat细胞不表达Tac抗原(CD25),TLisA1抗原为2.8×10~3/每个细胞,kd值为1.37×10~(-9)M;PMA 20ng/ml刺激24h后Jurkat细胞表面Tac分子为3930/每个细胞,kD值为1.56×10~(-10)M,TLisA1分子增加到2.4×10~4/每个细胞,kD值无明显变化。未刺激HUT     

应用免疫金标记技术分析福氏2a痢疾杆菌膜抗原

本文报告应用抗福氏２ａ痢杆菌膜成份ＭｃＡｂ及胶体金探针对细菌膜抗原进行了定位。结果显示４种抗脂多糖ＭｃＡｂ（３Ａ６，２Ｅ６，４Ｅ６，４Ｆ１，２Ａ３）可不均一的识别位于细菌表面的抗原，而另外一种抗ＬＰＳＭｃＡｂ（１Ｇ８）和一抗膜蛋白ＭｃＡｂ（１Ａ１）识别的抗朱未暴露于细菌表面。应用细菌膜碎片包埋前染色成功地定位了抗膜蛋白ＭｃＡｂ１Ａ１位于细菌内膜的抗原。与ＭｃＡｂ的生物学活性比较表明。阳性标记细菌表     

免疫活性细胞进展(综述)

参予免疫反应的细胞主要有两大类。一类即淋巴细胞。它们在抗原的激发下能进一步分化成为分泌各种球旦白的浆细胞或分化成为致敏淋巴细胞。这类细胞因为对抗原的反应有明显的专一性,所以是特异免疫反应的主要细胞。第二类细胞具有捕获抗原、处理抗原并将     

微波辐射固定和微波辐射与甲醛结合固定动物组织方法

利用微波辐射固定组织和微波辐射与固定液结合固定组织的报道已有不少[1-4],但多是某一具体方法的报道,而很少对在利用微波辐射固定组织中起决定作用的因素进行探讨,也很少有对微波辐射与固定液结合固定组织的方法进行全面性探讨。为此,我们进行了微波辐射固定动物组织和微波辐     

检测抗细胞表面抗原抗体的玫瑰花形成试验(文献综述)

<正> 为了检测抗细胞表面抗原的抗体及其特异性,曾试用过许多方法,诸如免疫荧光法、补体结合法、放射免疫法、免疫酶标法及微量细胞毒试验等,但从灵敏度及简便实用而言,利用单层组织培养细胞进行玫瑰花形成试验(Rosetting assay)是较为理想的方法。作者在筛选抗人肿瘤单克隆抗体时,     

利用微波辐射固定消化道黏液细胞的方法

微波辐射能使液体中极性分子高频振动,增加液体分子间的摩擦和碰撞,从而使液体内部迅速产热和某些化学反应加快。许多研究者利用此原理进行了微波辐射固定组织、微波辐射与固定液结合固定组织和微波辐射促进组织染色的实验[1-7]等,均取得良好的效果,但微波辐射固定或微波辐射与     

环磷酰胺免疫删减法制备细胞表面抗原单克隆抗体小鼠模型的建立

目的:观察不同剂量环磷酰胺(CP)诱导免疫耐受的作用, 建立一个免疫删减法制备细胞表面抗原单克隆抗体(mAb)的动物免疫模型.方法:雌性 BALB/c小鼠经CHO细胞免疫后分别给予不同剂量的CP诱导免疫耐受, 选择血清抗体效价最低的一组小鼠按常规方式腹腔注射CHO-TM5细胞进行免疫.ELISA测定各小鼠血清中CHO抗体及CHO-TM5抗体效价, 检测血清抗体对CHO细胞与CHO-TM5细胞结合反应的差异性.结果:BALB/c小鼠腹腔注射不同剂量的CP后, 各剂量组均出现不同程度的免疫耐受作用.CP 100 mg/kg组与CP 125 mg/kg组小鼠血清抗体效价较低, 接近阴性对照组.ELISA检测显示CP 100 mg/kg组血清抗体与CHO-TM5细胞呈阳性结合反应, 不与CHO细胞结合;而CP 0 mg/kg组血清抗体与CHO细胞与CHO-TM5细胞的结合反应均呈阳性.结论:CP 100 mg/kg具有良好诱导小鼠对CHO和CHO-TM5细胞的共同抗原表位产生免疫耐受, 相对增强对CHO-TM5细胞目的抗原hTM的免疫应答的作用, 为免疫删减法制备细胞表面抗原mAb提供了一个理想的动物免疫模型.     

细胞表面抗原的定量测定方法

介绍了用流式细胞仪定量测定细胞表面抗原的方法, 测定了淋巴细胞表面CD4分子的数量. 该法操作简单, 结果可靠.     

细胞表面抗原单克隆抗体的筛选

本文采用固定细胞ELISN,间接免疫光和SPA花环三种方法同时检测抗白血病细胞表面抗原单克隆抗体.结果证明固定细胞ELISA法阳性率最高.SPA花环法较低,间接免疫荧光法是筛选细胞表面单抗的最好方法. 采用双抗体夹心法检测杂交瘤上悬液中免疫球蛋白分泌情况。结果提示双抗体夹心法阳性者用三种筛选方法证明可为阴性.提示这种抗体可能是非特异性抗体.不与细胞表面抗原反应。     

免疫金技术及其在免疫组织化学和细胞化学中的应用

随着荧光素、各种酶类、放射性同位素等被用作免疫组化技术中的标记物,胶体金的应用也引起了学者们的注意。胶体金作为细胞化学的标记物这一技术是从本世纪七十年代发展起来的。1971年Faulk和Taylor首先将兔抗沙门氏菌抗血清与胶体金颗粒结合,用直接免疫细胞化学技术检测沙门氏菌的表面抗原。1974、1975年Romano报道了间接法检测技术。1974年Bauer等报道凝集素—金复合物应用。1975、1977年Horisberger等将胶体金引入扫描电镜,作为细胞化学标记物。1978年Geoghegan     

自然杀伤(NK)细胞固有免疫记忆的研究进展

自然杀伤(NK)细胞等固有免疫细胞中的特定亚群经抗原初次刺激诱导,可分化为记忆性免疫细胞,并对抗原的再刺激产生更加快速强烈的免疫应答,这种免疫记忆被称为固有免疫记忆。大量研究表明,半抗原诱导的接触性超敏反应、巨细胞病毒(CMV)感染、卡介苗接种等途径均可以诱导NK细胞产生固有免疫记忆。表观遗传学改变和免疫微环境调控是NK细胞产生固有免疫记忆的重要原因。我们主要总结了上述途径中NK细胞产生固有免疫记忆的表观遗传学调控机制及细胞因子与NK细胞表面受体互相作用网络的研究现状。目前不同研究模型中记忆性NK细胞的表面分子标志尚存差异,固有免疫记忆产生的分子机制仍不明确,对记忆性NK细胞的研究将为深入了解其生物学功能及临床应用提供新的理论依据。     

布氏杆菌病患者游离及结合的抗原和循环免疫复合物

作者测定了85名布氏杆菌病患者(其中15人为急性,70人为慢性。)的布氏杆菌抗原,为了检出游离的及结合的免疫复合物中的布氏杆菌抗原,首先使用凝集物血凝反应。     

微波固定对琥珀酸脱氢酶细胞化学影响的电镜观察

对浸泡在四种不同液体（生理盐水、０．２５％戊二醛、２．５％戊二醛、５％戊二醛）中的鼠肝组织进行微波照射固定，并按琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）常规孵育、制片、电镜观察。结果表明：四个组都皮照射时间增加，液体温度不断高，肝细胞内一粒体ＳＤＨ酶活性由强膛减弱，定位趋于稳定；其中生理盐水组ＳＤＨ酶活性存最好，且以微波４０ｓ时，ＳＤＨ酶活性及定位最佳，超微结构清晰。