动态观察柴胡皂苷a对实验性癫痫小鼠痫性发作的影响

目的研究柴胡皂苷a(saikosaponin a,SSa)对戊四氮(PTZ)诱导的小鼠痫性发作的影响,了解其药效特点.方法采用PTZ诱导小鼠急性痫性发作来制作癫痫模型,通过记录不同时间点小鼠痫性发作潜伏期和强直性惊厥率的变化,研究SSa抗小鼠PTZ致痫作用的动态特征.结果 SSa 腹腔注射30、60、90 min组能显著延长阵发性痉挛潜伏期(P<0.05),其中SSa 90 min组作用最为显著(P<0.01).在60、90、120 min组中,SSa 腹腔注射也能明显延长强直性惊厥潜伏期(P<0.05),其中尤以90 min组作用显著(P<0.01);SSa 90 min组对过渡时间延长作用显著(P<0.05);SSa 30 min、60 min组能减少PTZ致痫小鼠强直性惊厥发作例数(P<0.05),且以SSa 60 min组作用最为显著.结论 SSa具有对抗小鼠PTZ致痫作用;腹腔注射SSa对PTZ诱导小鼠的痫性发作在120 min内以60 min、90 min药效作用较强.     

柴胡皂苷a对难治性癫痫大鼠痫性发作的影响

目的探讨柴胡皂苷a(SSa)对匹罗卡品致难治性癫痫模型大鼠痫性发作的影响。方法将制备成功的48只SD难治性癫痫大鼠模型随机分为模型组(B)、丙戊酸钠组(C)、柴胡皂苷a低剂量组(D)和高剂量组(E)4组,每组各12只,另有空白对照组(A)12只。A、B组给予等量生理盐水,C组用量为200mg/kg,D、E组用药浓度依次为1.09mg/kg、2.18mg/kg,A、B、C组灌胃给药,D、E组腹腔注射给药。分别观察给药4周、8周后痫性发作次数、平均发作时间及发作级别的变化。结果痫性发作方面,A组无痫性发作,B组大鼠痫性发作明显(P>0.05),C、D、E组大鼠痫性发作均有不同程度的减轻(P<0.05),E组大鼠痫性发作减轻最明显。结论柴胡皂苷a能减轻难治性癫痫大鼠的痫性发作,有明显的抗癫痫作用。     

PTZ致痫大鼠海马TNFR1动态表达变化及柴胡皂苷a的干预作用

目的:探讨戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)急性致痫模型大鼠海马区肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)的动态变化及柴胡皂苷a(saikosaponin a,SSa)的干预作用。方法:将96只健康SD大鼠随机分为4组:A组为对照组,B组为模型组,C组为SSa组,D组为丙戊酸钠(Sodium Valproate,VPA)组;其中A组6只,B组、C组与D组各30只(时间点0.5 h、2 h、4 h8、h、12 h各6只)。采用腹腔注射PTZ急性致痫,用免疫组织化学方法观察各时间点海马区TNFR1的表达水平。结果:PTZ致痫大鼠海马区TNFR1的表达显著升高(P<0.05),但在12 h时其水平有所下降并逐渐接近对照组(P>0.05),而SSa和VPA能明显抑制PTZ致痫大鼠海马区TNFR1的表达升高(P<0.05)。结论:PTZ致痫大鼠海马区TNFR1表达显著升高,而SSa可以抑制其表达的升高,这可能为SSa抗癫痫机制之一。     

柴胡总皂甙对戊四氮慢性点燃大鼠痫性发作及脑电图的影响

目的 评价柴胡有效成分中柴胡总皂甙对戊四氮（PTZ）慢性点燃大鼠痫性发作及脑电图的影响。方法 将48只健康SD大鼠随机等分为6组,即空白组、生理盐水组、丙戊酸钠（VPA）组和柴胡总皂甙高、中、低3种剂量组,除空白组不做处理外．其他组采用腹腔注射PTZ进行慢性点燃造模,造模同时给予以上不同处理因素,连续4周．在此期间记录大鼠痫性发作级别及次数,最后描记大鼠脑电图。结果 柴胡总皂甙高、中、低3个剂量组在实验2周时可以降低大鼠的痫性发作率,其中以高剂量组显著（P〈0．05）,柴胡皂甙高剂量组应用4周时能明显降低PTZ慢性点燃大鼠的点燃率（P〈0．05）,并明显降低痫性发作级别（P〈0．01）;各组间脑电图也存在一定差异。结论 柴胡总皂甙可拮抗PTZ慢性点燃大鼠的痫性发作．并有一定的对抗PTZ慢性点燃作用。     

迷走神经刺激对戊四氮致痫大鼠行为及脑电图的影响

为探讨迷走神经刺激（ＶＮＳ）的抗癫痫作用,观察了ＶＮＳ对正常大鼠和戊四氮（ＰＴＺ）致痫大鼠行为和脑电图的影响。结果发现,ＶＮＳ可明显延长致痫大鼠癫痫发作和痫波释放的潜伏期（Ｐ〈０．０５）,减轻癫痫发作的严重程度（Ｐ〈０．０１）,并能抑制皮层及海马癫痫波的释放（Ｐ〈０．０１）,而对正常大鼠脑电图无影响。结果提示ＶＮＳ可明显抑制ＰＴＺ诱导的大鼠癫痫。     

柴胡皂甙a减轻戊四氮诱发的皮质酮抑郁模型小鼠的急性癫痫发作：基于小胶质细胞介导的炎症反应

目的 探讨柴胡皂甙a(SSa)对皮质酮（CORT）抑郁模型基础上诱发小鼠急性癫痫的干预作用及机制。方法 选用雄性SPF C57BL/6J小鼠,使用皮质酮口服给药,制备CORT抑郁模型,之后予戊四氮诱发小鼠急性癫痫发作,并腹腔注射柴胡皂苷a进行干预。根据干预方式的不同将小鼠分成对照组、Epilepsy组、Epilepsy+SSa组、CORT+Epilepsy、CORT+Epilepsy+SSa组,6只/组。利用旷场实验、十字高架实验、强迫游泳实验、糖水偏好实验评估抑郁相关指标,通过ELISA实验检测血皮质酮含量;采用痫性发作分级、海马形态学评估癫痫发作程度;RT-qPCR检测炎症相关因子、免疫荧光实验观察小胶质细胞活化情况。结果成功构建皮质酮诱导的小鼠抑郁模型,小鼠的体质量、糖水偏好率、旷场的总路程、中央格停留时间和路程、开放臂进入次数和开放臂停留时间百分比均降低（P<0.05）,强迫游泳不动时间和血清CORT含量增加（P<0.05）;与Epilepsy组相比,CORT+Epilepsy组小鼠痫性发作潜伏期缩短,发作次数、发作等级以及发作持续时间都明显增加（P<0.05...     

侧脑室注射IL-6对大鼠脑电活动的影响及柴胡皂苷a的干预作用

目的:研究IL-6对大鼠脑电活动的影响,以及柴胡皂苷a(saikosaponin a,SSa)的干预作用。方法:采用侧脑室注射IL-6观察24 h内对大鼠脑电活动的影响,通过对脑电图描记,计算尖波个数以及高频(100 Hz)脑电的功率和波幅的变化,并研究SSa的干预作用。结果:IL-6可诱发大鼠脑电痫性活动,使大鼠高频(100 Hz)脑电波的功率和波幅的增大(P<0.05);SSa高剂量组2,4,8,12 h时能显著抑制大鼠脑电中尖波个数(P<0.05),抑制脑电的功率(4,8,12 h时)和波幅(1,4,8,12 h时)的增大(P<0.05)。结论:SSa高剂量可以抑制IL-6诱发大鼠脑电的痫性放电。     

柴胡皂苷a对体外培养大鼠海马星形胶质细胞激活的抑制作用

目的 研究柴胡皂苷a(SSa)对体外培养大鼠海马星形胶质细胞激活的干预作用,为癫痫的中医药防治提供实验依据.方法 首先分离剥取SD大鼠(1～3 d)大脑海马.体外培养海马星形胶质细胞,经纯化鉴定后将其分为5组:a组(正常组)、b组(谷氨酸激活组)和c、d、e组(SSa药物干预组,分别为5、2.5、1.25 mg/L),经相应处理后,分别运用MTT法、流式细胞技术、Western-blotting测定星形胶质细胞数量及活性、细胞周期、星形胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达量,并分析比较各组星形胶质细胞激活情况.结果 与b组比较,MTT比色法检测结果显示SSa抑制了谷氨酸激活星形胶质细胞的增殖(P<0.05);流式细胞技术检测结果显示SSa阻滞了谷氨酸激活星形胶质细胞的分裂周期(P<0.05);Western-blotting检测结果显示SSa可抑制谷氨酸激活星形胶质细胞异常增加的GFAP表达量(P<0.05);与a组比较,3种检测结果均显示2.5 mg/L SSa对体外培养星形胶质细胞激活的抑制作用较强,并可维持其在正常范围(P>0.05).结论 SSa具有抑制谷氨酸激活体外培养星形胶质细胞的作用,其可能通过抑制星形胶质细胞的激活来发挥抗癫痫作用.     

迷走神经刺激对戊四氮致痫大鼠行为及脑电图的影响

为探讨迷走神经刺激（ＶＮＳ）的抗癫痫作用,观察了ＶＮＳ对正常大鼠和戊四氮（ＰＴＺ）致痫大鼠行为和脑电图的影响,结果发现,ＶＮＳ可明显延长致痫大鼠癫痫发作和痫波释放的潜伏期（Ｐ＜０．０５）,减轻癫痫发作的严重程度（Ｐ＜０．０１）,并能抑制皮层及海马癫痫波的释放（Ｐ＜０．０１）,而对正常大鼠脑电图无影响。结果提示ＶＮＳ可明显抑制ＰＴＺ诱导的大鼠癫痫。     

褪黑素对戊四氮致痫大鼠海马Bax和Bcl-2的影响

目的:探讨褪黑素对癫痫发作中Bax和Bcl-2的影响。方法:将24只成年Wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组、戊四氮(PTZ)组和褪黑素(MT)组;PTZ组和MT组腹腔注射PTZ(60 mg/kg),诱导癫痫发作。MT组按体重10 mg/kg于注射PTZ之前20min、注射0,1,2 h分别经腹腔注射MT并观察1 h。然后处死大鼠取脑,应用SP法检测海马神经元Bax和Bcl-2的表达。结果:大鼠海马神经元Bax的表达:MT组明显低于PTZ组,但高于NC组;大鼠海马神经元Bcl-2的表达:MT组明显高于PTZ组,也高于NC组。结论:MT可以通过增强海马神经元Bcl-2的表达和降低Bax的表达而对抗癫痫中细胞的凋亡。     

乙酰谷酰胺对戊四氮致痫大鼠大脑病理改变的影响

目的研究乙酰谷酰胺对戊四氮致痫大鼠大脑病理改变的影响。方法戊四氮腹腔注射建立癫痫模型,每组分别给予不同剂量乙酰谷酰胺治疗,经主动脉灌注取脑组织,HE染色观察大脑病理改变情况。结果治疗组神经元平均坏死率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)结论乙酰谷酰胺对癫痫导致的脑损伤有治疗作用,并且其疗效呈现一定的剂量和治疗时间依赖性。     

柴胡皂苷a人工抗原的合成及免疫原性鉴定

目的合成柴胡皂苷a(SSa)免疫抗原和包被抗原,为柴胡皂苷a单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立奠定基础。方法采用高碘酸钠氧化法分别合成柴胡皂苷a免疫抗原(SSa-BSA)和包被抗原(SSa-PLL);用紫外光谱和薄层色谱法鉴定人工抗原是否偶联成功,并免疫小鼠,通过ELISA方法测定血清中抗体效价,通过间接竞争ELISA(ic-ELISA)检测抗体特异性。结果薄层色谱法检测结果显示柴胡皂苷a与BSA/PLL偶联成功。小鼠经SSa-BSA免疫后,体内可产生抗柴胡皂苷a抗体,效价1∶80 000以上。结论与其他人工抗原的鉴定方法相比,薄层色谱法具有独特的优势。成功合成的柴胡皂苷a人工抗原可用于下一步的单克隆抗体制备以及相应免疫方法的建立。     

马桑内酯致小鼠癫痫脑内环磷酸腺苷的改变

作者给小鼠肌肉注射马桑内酯2.5mg/kg,引起重型癫痫发作,测定小鼠皮层和海马的环磷酸腺苷(cAMP)水平。结果表明:在癫痫发作之前和轻型发作时,小鼠皮层和海马的cAMP含量无明显改变;重型发作和发作结束后,小鼠皮层和海马的cAMP水平显著增加。此结果提示癫痫发作时脑内cAMP水平增加,很可能是发作的结果而不是引起发作的原因。     

戊四氮致癫痫大鼠脑内nNOS表达的实验研究

目的探讨一氧化氮合酶(NOS)的nNOS(神经元型)亚型在戊四氮致癫痫大鼠模型中海马部位的变化情况。方法 PTZ点燃癫痫大鼠,随机分为对照组、PTZ组观察大鼠癫痫发作后的行为学变化,脑电图描记,采用免疫组化,免疫印迹(Western blot)方法检测大鼠海马组织中nNOS表达的影响。结果注射PTZ后大鼠出现癫痫发作。EEG表现为尖、棘波节律。nNOS在癫痫大鼠大脑海马区阳性细胞表达升高。结论 PTZ诱导癫痫发作大鼠海马区内nNOS阳性细胞表达升高,起到致癫痫的作用。     

利血平对马桑内酯致痫作用和癫痫小鼠脑内cAMP水平的影响

给White Chengdu number 1(WC_1)小鼠腹腔注射利血平1mg/kg,能明显降低其皮层和海马的cAMP水平,加重马桑内酯所致WC_1小鼠癫痫发作的程度,增加癫痫的发作率,减小引起发作的阈值剂量。利血平预处理动物还能明显抑制癫痫发作时皮层和海马cAMP的增加。这些结果提示,癫痫发作活动引起的某些脑区cAMP增加可能与单胺递质活性有关。     

愈痫灵对慢性致痫大鼠海马区氨基酸含量的影响

目的探讨以化瘀通络为组方原则的愈痫灵 (YXL)颗粒剂对慢性致痫大鼠氨基酸含量的影响。方法采用腹腔注射戊四氮 (PTZ)造成慢性癫痫大鼠模型 ,以高效液相色谱法 (HPLC)检测海马区氨基酸的含量。结果愈痫灵颗粒剂可明显减轻癫痫大鼠发作程度或缩短发作时间 ;使癫痫大鼠海马区兴奋性氨基酸Glu、Asp的含量减少 ,抑制性氨基酸GABA含量升高 ,与模型组比较具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论愈痫灵颗粒剂可调节海马区兴奋性和抑制性氨基酸含量的平衡失调 ,从而减轻癫痫大鼠发作程度和发作时间     

高迁移率族蛋白-1在戊四氮致痫大鼠不同脑区的表达与意义

目的：研究高迁移率族蛋白-1（HMGB-1）在戊四氮（PTZ）致幼鼠癫痫（EP）后在不同脑区的变化,探讨EP发作后脑组织的损伤情况。方法40只21日龄幼年雄性SD大鼠,随机分对照组（A组,8只）及实验组（32只）。实验组按体质量40 mg/kg腹腔注射PTZ ,对照组腹腔注射与致痫剂同等容量的生理盐水。根据EP发作后的时间,随机于其发作后1 h（B组）、6 h（C组）、24 h（D组）、72 h（E组）取脑,采用免疫组织化学方法,观察各组大鼠海马组织中 HMGB-1的改变;RT-PCR方法观察各组大鼠额叶、海马、中脑中 HMGB-1的变化。结果EP发作后,幼鼠额叶、海马、中脑HMGB-1的表达随着时间的推移呈动态升高,其中额叶、海马HMGB-1蛋白于发作6 h后开始升高,24 h达高峰,72 h逐渐下降,其中额叶、海马在发作后6、24、72 h高于对照组,中脑升高值仅于72 h高于对照组。结论 EP发作可造成大脑损伤。     

电针对戊四唑点燃型癫痫大鼠脑电图的影响

目的:探讨戊四唑(PTZ)致痫大鼠脑电图的变化及电针对其影响.方法:成年SD大鼠30只随机分为正常对照组、PTZ致痫组和电针组,每组10只.采用多导生理记录仪记录大鼠脑电变化情况.结果:电针组大鼠脑电痫波潜伏期较PTZ致痫组延长(P《0.05);痫波持续时间明显缩短(P《0.01);发作频率明显减少(P《0.01).结论:电针可明显抑制PTZ诱导的大鼠癫痫发作.