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1.
目的 验证单克隆抗体BDI 1导向的三氧化二砷免疫蛋白微球 [As2 O3 (HAS NS) BDI 1]对膀胱癌细胞BIU 87的特异性杀伤作用。 方法 通过还原电泳 (SDS PAGE)鉴定免疫蛋白微球抗体BDI 1与微球的共价连接 ,用3 氢 胸腺嘧啶核苷 (3 H TDR)掺入法检测As2 O3 (HAS NS) BDI 1的细胞杀伤活性 ,流式细胞计数法测定细胞凋亡与分期。 结果 SDS PAGE还原电泳可见As2 O3 (HAS NS) BDI 1组有 2条条带。3 H TDR掺入法进一步验证了其特异性杀伤膀胱肿瘤细胞的活性。肿瘤细胞被诱导凋亡 ,G0 /G1期细胞百分比减少 ,G2 /M期百分比明显增加 ,Sub G1期细胞 2 4h增高到 18.4 %。 结论 As2 O3 (HAS NS) BDI 1能特异性地与膀胱肿瘤细胞结合并产生更加有效的杀伤肿瘤细胞的作用。 相似文献
2.
目的探讨三氧化二砷(As2O3)对前列腺癌非雄激素依赖细胞系DU-145细胞的增殖抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响.方法应用体外细胞生长抑制试验(MTT比色法)研究As2O3对DU-145细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞周期分布情况及凋亡情况,琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA的变化.结果As2O3对DU-145细胞的增殖有明显的抑制作用,随着药物浓度增加和作用时间延长,凋亡细胞明显增加,出现G2/M期阻滞和DNA的断裂.结论As2O3可明显抑制前列腺癌DU-145细胞的增殖,诱导细胞凋亡,抑制细胞周期. 相似文献
3.
p16重组腺病毒联合顺铂或三氧化二砷对人膀胱癌EJ细胞作用的实验研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 探讨 p16重组腺病毒 (Ad p16 )与顺铂 (CDDP)或三氧化二砷 (As2 O3 )联合应用对人膀胱癌EJ细胞体内外生长的抑制效应及机制。 方法 将Ad p16与CDDP或As2 O3 联合应用 ,通过细胞生长抑制实验 ,克隆形成实验 ,细胞周期分析 ,免疫组织化学分析 ,以及裸鼠皮下移植瘤模型 ,观察其对人膀胱癌EJ细胞的作用及机制。 结果 与单独应用相比 ,Ad p16与低剂量的CDDP或As2 O3 联合应用可明显抑制EJ细胞的体外生长 ,诱导EJ细胞凋亡 ,明显阻滞EJ细胞G1期 ;裸鼠体内肿瘤发生时间延迟 ,4周后肿瘤体积与单独应用时相比差别有显著性意义 (P <0 .0 5 )。 结论 Ad p16与CDDP或As2 O3 联合应用 ,有可能进一步提高膀胱癌的治疗效果 相似文献
4.
p53重组腺病毒联合顺铂或三氧化二砷对人膀胱癌EJ细胞的作用 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:探讨p53重组腺病毒(Ad-p53)与顺铂(CDDP)或三氧化二砷(As2O3)联合应用提高膀胱癌疗效的可能性及其机制。方法:将Ad-p53[100感染强度(MOI)]与CDDP(0.5mg/L)或As2O3(2.0μmol/L)联合应用,通过细胞生长抑制实验、克隆形成实验、细胞周期分析、免疫组织化学分析以及裸鼠皮下移植瘤模型,观察其对膀胱癌EJ细胞的作用及机制。结果:与单独应用相比,Ad-p53与低剂量的CDDP或As2O3联合可明显抑制EJ细胞体外生长,诱导EJ细胞凋亡,EJ细胞G2/M期阻滞更明显;裸鼠体内肿瘤发生时间延迟,4周后肿瘤体积与单独应用时相比,差异有显著性(P<0.05)。结论:基因治疗与化疗联合应用,可进一步提高膀胱癌的疗效。 相似文献
6.
目的研究三氧化二砷(As2O3)诱导人类胆管癌QBC939细胞凋亡。方法应用MTT法检测As2O3对胆管癌细胞的抑制作用;采用光镜、荧光显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测Rhodamine 123染色并分析DNA含量及细胞周期。结果1~16μmol/L As2O3均能抑制人胆管癌细胞QBC939的生长,且抑制率具有浓度一时间依赖性。4μmol/L As2O3作用细胞后出现典型的凋亡形态特征,可检测到亚二倍体凋亡峰,Rhodamine 123荧光强度降低。结论As2O3能诱导QBC939细胞发生凋亡,其机制可能与线粒体膜电位去极化有关。 相似文献
7.
目的:探讨p16和p53联合转导对膀胱癌EJ细胞增殖活性的影响。方法:用复制缺陷型腺病毒(Ad)将p16和p53表达质粒PUCl6和PC53—SD3导人细胞,通过细胞形态观察、MTT法、流式细胞术、免疫组织化学、克隆形成及裸鼠肿瘤模型,分析其对EJ细胞生长的影响及机制。结果:Ad-p16和Ad-p53单独应用可抑制EJ细胞体外增殖活性,Ad-p53诱导部分EJ细胞凋亡,Ad-p16感染3d后发生Gl期阻滞,而细胞凋亡不明显;Ad-p16和Ad-p53联合转导可使EJ细胞生长显著抑制、克隆形成率降低、大量EJ细胞凋亡;裸鼠体内肿瘤发生时间、4周后肿瘤体积与单独应用相比有显著性差异。结论:Ad-p16和Ad-p53联合应用可显著抑制膀胱癌EJ细胞的体内外生长。 相似文献
8.
目的:探讨芸香对人膀胱癌EJ细胞的作用。方法:MTT法检测EJ细胞生长抑制率;流式细胞仪检测细胞周期改变和免疫组化SP法检测Ki-67蛋白表达的变化。结果:芸香浓度为30、60、90μmol/ml时,EJ细胞的生长受到不同程度的抑制,且具有时间和浓度依赖性。EJ细胞经不同浓度的芸香作用24h后G0/G1期细胞比率明显下降,而G2/M期比率明显上升。EJ细胞Ki-67的阳性率随芸香浓度的增高而下降(P<0.05)。结论:芸香能抑制癌细胞的生长增殖。其机制可能通过诱导癌细胞周期阻滞于G2/M期、下调Ki-67表达有关。 相似文献
9.
三氧化二砷抑制骨肉瘤细胞及二倍体细胞增殖的研究 总被引:3,自引:1,他引:2
目的 研究三氧化二砷 (As2 O3 )对骨肉瘤细胞及二倍体细胞增殖的影响。方法 应用噻唑蓝 (MTT)法和集落形成能力测定、形态学观察、流式细胞术和电镜观察等方法检测和观察As2 O3 对骨肉瘤细胞株MG 63及二倍体细胞株MRC 5增殖的影响。结果 As2 O3 对骨肉瘤细胞及二倍体细胞株的增殖有抑制作用 ,并具有时间依赖性和一定范围内的剂量依赖性。≥ 1μmol/L浓度的As2 O3 对MG 63骨肉瘤细胞的抑制率达 70 % ,而≥ 8μmol/L浓度的As2 O3 对MRC 5细胞的增殖才达到相近的抑制率 ;0 .5~ 2 .0 μmol/L浓度的As2 O3 对MG 63细胞的生长抑制率高 ,而对MRC 5细胞的生长抑制率低 ,表现为明显的选择性抑制 ( P <0 .0 1)。 1μmol/LAs2 O3 处理的MG 63细胞第 3天呈典型的凋亡形态学改变 ;流式细胞仪分析显示 ,在G1期细胞前出现明显亚二倍体峰 ,凋亡率与As2 O3 处理时间呈正相关 ;MRC 5细胞则未见明显凋亡峰。结论 As2 O3 通过诱导细胞凋亡抑制骨肉瘤细胞和二倍体细胞增殖 ,在一定浓度内As2 O3 可选择性抑制骨肉瘤细胞的生长增殖。 相似文献
10.
摘要:目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对人乳腺癌细胞系MCF 7细胞裸鼠背部皮下移植瘤生长的抑制作用及其作用机制。方法 建立BALB/C nu/nu裸鼠MCF 7人乳腺癌皮下移植瘤模型,以不同浓度的As2O3行腹腔内注射,与5 氟脲尿嘧啶(5 FU)治疗进行对比,观察移植瘤的瘤重及瘤重抑制率。通过流式细胞仪检测移植瘤的凋亡情况,免疫组织化学法检测bcl 2,Fas基因表达水平的变化,并进行血常规及骨髓涂片检查。结果 5 FU(8mg/kg)组,As2O3 (4mg/kg)组,As2O3(8mg/kg)组均能明显抑制裸鼠皮下肿瘤的生长,抑瘤率分别为38.33%,51.42%和62.43%;As2O3对移植瘤的生长抑制作用明显强于5 FU,差异有显著性 (P<0.01)。两种浓度As2O3组MCF 7细胞凋亡率明显高于5 FU组。各实验组乳腺癌细胞存在G2/M期阻滞,在G1峰前出现明显的凋亡峰。移植瘤组织中bcl 2蛋白阳性细胞数明显减少,Fas蛋白阳性细胞数明显增加。血常规及骨髓涂片计数显示As2O3实验组未见造血系统功能受抑,与5 FU组相比较,差异有显著性(P<0.05)。结论 As2O3可明显抑制乳腺癌移植瘤的生长,诱导移植瘤MCF 7细胞凋亡;其作用的机制可能是下调bcl 2基因表达,上调Fas基因表达。 相似文献
11.
目的:探讨HIPK3在膀胱癌发生、发展中的作用及其意义。方法:培养膀胱癌细胞系EJ,以丝裂霉素诱导细胞凋亡,利用细胞爬片免疫组化的方法测定HIPK3在被诱导凋亡的EJ细胞中的表达情况,并进一步经由流式细胞仪研究HIPK3抗体对细胞凋亡的影响。结果:被诱导凋亡的EJ细胞中,HIPK3表达呈阳性,其阳性率随着诱导凋亡的时间增加,但不同剂量的丝裂霉素作用,其表达没有统计学意义;HIPK3抗体可对抗丝裂霉素诱导的细胞凋亡作用,减少凋亡的EJ细胞。结论:HIPK3在被诱导凋亡的膀胱癌细胞系EJ中表达增加,揭示膀胱癌细胞凋亡过程同HIPK3有密切关系。 相似文献
12.
PCNA反义cDNA基因转导抑制人膀胱癌细胞增殖的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探讨增殖细胞核抗原(PCNA)基因反义cDNA对人膀胱癌细胞体外增殖活性的抑制作用。方法 构建PCNA反义cDNA真核表达载体并转染膀胱癌DJ细胞,通过细胞生长曲线、MTT比色分析、H^3-TdR掺入法检测癌细胞增殖活性,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期时相变化,SABC免疫组化观察癌细胞PCNA蛋白表达水平。结果 PCNA反义cDNA导入后,膀胱癌DJ细胞生长速率显著减慢(P<0.01),增殖活性抑制率59.02%(P<0.05),DNA合成速率降低52.31%(P<0.01),S期细胞减少,细胞周期阻滞于G0/G1期,PCNA蛋白表达显著减弱(P<0.05),差别均有显著性意义。结论 PCNA反义cDNA基因转导能有效抑制膀胱癌细胞的PCNA蛋白表达及体外增殖活性,为肿瘤基因治疗提供了有效途径。 相似文献
13.
三氧化二砷抑制人膀胱癌细胞BIU-87体外生长的实验研究 总被引:9,自引:0,他引:9
目的:观察三氧化二砷对人膀胱癌细胞的生长抑制作用,并探讨其机制。方法:采用MTT法检测不同浓度的As2O3对人膀胱细胞株BIU_87的生长抑制率,原位末端转移酶标记技术检测细胞凋亡,SABC免疫组织化分析BIU-87中bcl-2的表达。结果:As2O3可有铲地抑制BIU_87细胞生长,具有时间、浓度依赖性特点;经药物作用后,膀胱癌凋亡细胞明显增多,凋亡率随作用时间的延长而增高,BIU-87细胞中的 相似文献
14.
丝裂霉素对膀胱癌EJ细胞作用机制的研究 总被引:16,自引:2,他引:14
目的 从诱导坏死和凋亡角度探讨丝裂霉素 (MMC)对膀胱癌EJ细胞的作用机制。 方法 将不同浓度的MMC作用于膀胱癌EJ细胞 ,在不同时间内采用流式细胞术 (FCM )和 3’末端脱氧核苷酸转移介导生物素 (TUNEL)及伊红排斥实验检测EJ细胞的凋亡情况和对其的杀伤作用。 结果 不同浓度的MMC在 2 4h内可以持续诱导EJ细胞凋亡 ,MMC 0 .1mg/ml组 2 4h时凋亡率为 71% ,对EJ细胞的杀伤作用与剂量呈正比。 结论 MMC对膀胱癌EJ细胞的抑制作用是通过促凋亡机制和促坏死机制完成的 相似文献
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三氧化二砷抗膀胱癌作用机制的实验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 观察三氧化二砷(As2O3)对膀胱癌T24细胞株生长、Caspase-3基因表达以及裸鼠移植瘤体积及质量变化的影响. 方法 以不同浓度的As2O3加入对数生长期的T24细胞并设立对照组,分别培养24、48、72 h,噻唑盐比色法检测膀胱癌细胞生长抑制情况,荧光染色观察细胞核形态变化,流式细胞术检测As2O3对细胞凋亡率的影响,蛋白质印迹法检测As2O3对Caspase-3蛋白表达的影响;将对数生长期T24细胞接种于30只裸鼠背部皮下,3周成瘤后随机分为As2O3腹腔注射组、皮下注射组及对照组,用药2周后处死裸鼠测量药物作用前后裸鼠瘤体积及质量变化. 结果 随着As2O3浓度增加及时间延长,T24细胞生长抑制率由(25.8±1.1)%增加至(86.6±1.6)%,其中各实验组与对照组比较、实验组各时间段比较、各实验组与前一组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);随着As2O3作用时间延长,荧光显微镜下可见细胞核内荧光增强,细胞核呈新月形改变等凋亡形态学变化; T24细胞凋亡率由29.6%增加至60.6%;Caspase-3表达分别为对照组的1.15、1.98及2.76倍,差异具有统计学意义(P<0.05);As2O3腹腔注射组及皮下注射组鼠瘤体积分别为(2612.9±77.7)及(1908.2±102.3)mm3,瘤重分别为(2.0±0.9)及(0.7±0.7)g,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),皮下注射组与腹腔注射组间差异亦有统计学意义(P<0.05). 结论 As2O3对膀胱癌T24细胞生长和裸鼠移植瘤均有抑制作用,其抗癌机制可能与增加Caspase-3蛋白表达有关. 相似文献
16.
转bak基因促膀胱癌多药耐药细胞凋亡的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 观察转入bak基因对膀胱癌多药耐药 (MDR)细胞的杀伤效果 ,探讨其可能的机制。 方法 用脂质体将bak基因导入MDR细胞 ,通过原位杂交法检测bakmRNA的表达 ,SABC免疫组化法分析bak和bcl 2的表达。采用细胞计数法检测细胞生长抑制率 ,流式细胞仪检测细胞周期的变化。荧光染色观察细胞形态。 结果 bak基因可成功转入MDR细胞 ,转染第 3天bakmR NA阳性率 64 % ,bak表达阳性率 60 % ,明显高于对照组 ;转染后细胞中bcl 2表达显著减少 ,P <0 .0 5。转染第 4天EJ/bak细胞抑制率 32 % ,显著高于对照组 ,P <0 .0 5。细胞周期分析可见凋亡峰 ,凋亡率 35 %。凋亡细胞在荧光显微镜下形成凋亡小体。 结论 转入bak基因可显著促进MDR细胞的凋亡 ,其作用机制与下调bcl 2基因的表达有关 相似文献
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Genistein对酸性成纤维细胞生长因子诱导的EJ细胞增殖的抑制作用 总被引:1,自引:1,他引:1
目的观察酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对人膀胱癌细胞株EJ细胞的促增殖作用;以及酪氨酸蛋白激酶(TPK)抑制剂Genistein对aFGF诱导的EJ细胞增殖的抑制作用。方法以不同浓度的aFGF刺激EJ细胞,再对由aFGF引起的细胞增殖施加不同浓度的Gemstein;以MTT法检测细胞的增殖程度。原位凋亡细胞检测(TUNEL)和流式细胞仪(FCM)检测Genistein对EJ细胞凋亡和细胞周期的影响。结果aFGF可以使EJ细胞增殖比明显增加,Genistein可引起EJ细胞增殖比明显下降,其程度均随浓度增高而增强;Gemstein可以促进EJ细胞的凋亡,使细胞阻滞于G2-M期。结论aFGF可以促进EJ细胞的增殖;Genistein可以诱导日细胞株的凋亡,对aFGF诱导的细胞增殖有抑制作用。可能为膀胱肿瘤的治疗提供新的尝试。 相似文献