大黄素对角朊细胞体外增殖分化影响的研究

目的观察大黄素对角朊细胞体外增殖分化的影响。方法以人转化型角朊细胞株ＣＯＬＯ－１６细胞为模型，采用活细胞计数、３Ｈ－ＴｄＲ参入法、细胞因子生物活性检测、电镜及ＡＢＣ法进行研究。结果大黄素能以一种剂量依赖方式抑制角朊细胞的体外增殖和ＤＮＡ合成；减少角朊细胞肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）、白细胞介素－６（ＩＬ－６）的产生；对角朊细胞超微结构有直接损伤作用；并抑制角朊细胞角蛋白表达，破坏细胞骨架。结论大黄素通过不同途径抑制角朊细胞的体外增殖分化，是角朊细胞增殖分化的有效抑制剂。     

rhIL-10对银屑病动物模型的治疗作用及免疫功能的影响

目的　研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对银屑病动物模型的治疗作用以及免疫功能的影响。方法　用小鼠雌激素期阴道上皮模型、鼠尾鳞片表皮模型观察重组人白细胞介素 10的抗银屑病作用 ,并检测ConA诱导T淋巴细胞增殖、LPS诱导B淋巴细胞增殖、NK细胞活性及细胞因子(IFN γ、IL 2、IL 1、TNF α)水平。结果　rhIL 10 (5 ,2 0 ,80μg·kg-1·d-1,sc)对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂有抑制作用 ,促进小鼠尾鳞片颗粒层的形成。对ConA诱导T淋巴细胞增殖反应及IL 2、IFN γ产生有抑制作用 ;对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生IL 1、TNF α具有抑制作用 ;对NK细胞活性有抑制作用 ;对LPS诱导B淋巴细胞增殖有促进作用。结论　rhIL 10可能是通过抑制表皮细胞增殖与促进其分化 ,并参与抗炎与免疫调节过程而发挥治疗银屑病动物的作用     

壮药透骨香抗类风湿关节炎药物活性部位筛选及机制研究

目的 探讨壮药透骨香抗类风湿关节炎作用的药物活性部位及作用机制。方法 体外培养法制备BALB/c小鼠脾淋巴细胞,经刀豆蛋白A（CoA）刺激作用后,以透骨香各药物部位进行干预, 细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测细胞增殖情况,计算刺激指数;体外培养小鼠脾细胞,刀豆蛋白A刺激T淋巴细胞增殖,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测观察透骨香活性部位对细胞因子白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-10（IL-10）含量的影响。结果 小鼠脾细胞经刀豆蛋白A刺激后,细胞计数试剂盒-8检测光密度（OD）值与刺激指数显著升高（P＜0.05）,透骨香正丁醇部位及水溶部位能明显降低光密度值及刺激指数,其中水溶部位（5 μg·mL^-1）作用最强（P＜0.05）;刀豆蛋白A刺激脾淋巴细胞增殖后,细胞因子白细胞介素-2、白细胞介素-10分泌显著增强,透骨香水溶部位干预后能明显抑制白细胞介素-2分泌,提高白细胞介素-10含量（P＜0.05）。结论 透骨香水溶部位对T淋巴细胞增殖具有较强抑制作用,是透骨香抗RA活性部位,其机制可能与调节细胞因子白细胞介素-2、白细胞介素-10分泌有关。     

重组人白细胞介素对人外周血淋巴细胞功能的影响及芍药苷的作用

目的 观察重组人白细胞介素-1β(rhlL-1β)对人外周血淋巴细胞(PBLC)增殖及产生白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-10(IL-10)的影响及芍药苷(Pae,抗炎免疫中药)对PBLC的作用.方法 用密度梯度离心法,分离人PBLC;用MTT法检测PBLC的增殖反应;用放射免疫法检测PBLC培养的上清液中IL-2水平;用酶联免疫吸附法检测PBLC培养的上清液中IL-10水平.结果 体外给予rhIL-1β(1×10-2、0.1、1.0、10.0、100.0μg·L-1)可不同程度促进人PBLC增殖和IL-2产生;但可抑制IL-10产生.体外给予1μg·L-1 rhlL-1β(3、6、12、24、48 h),可使人PBLC产生IL-2水平升高和IL-10水平降低;不同浓度(1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5mol·L-1)Pae体外可不同程度抑制1μg·L-1rhlL-1β对人PBLC促增殖反应和IL-2产生;但可促进IL-10产生.结论 rhlL-1β体外,可促进人PBLC的增殖,升高IL-2水平;而降低IL-10水平.Pae体外可逆转rhlL-1β对其增殖及产生IL-2和IL-10的影响.     

青黛克银丸对普萘洛尔致银屑病豚鼠血清细胞因子影响的研究

目的通过研究青黛克银丸对实验性银屑病豚鼠血清细胞因子白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-8、IL-10水平的影响,探讨青黛克银丸治疗银屑病的作用机制。方法采用5%普萘洛尔乳膏外涂豚鼠耳背皮肤建立银屑病样病理模型,再给予青黛克银丸治疗。分别采用放射免疫法(RIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定豚鼠血清中IL-2、IL-4、IL-8、IL-10的含量。结果与空白组比较,普萘洛尔致银屑病样皮损模型组动物血清IL-2和IL-8水平明显升高,而IL-4和IL-10水平显著降低;青黛克银丸能明显降低豚鼠银屑病皮损模型血清中IL-2、IL-8水平,并可显著提高IL-4、IL-10的含量表达。结论青黛克银丸治疗银屑病作用机制可能与其调节细胞因子平衡,改善皮肤免疫功能密切相关。     

黄芪对寻常型银屑病患者IL-6、IL-8及IL-10血浆水平的影响

目的研究黄芪对进展期寻常型银屑病患者血浆IL-6、IL-8与IL-10水平的影响。方法采用放射免疫法检测57例进展期寻常型银屑病患者用黄芪治疗前后血浆IL-6、IL-8与IL-10水平的变化。结果黄芪能降低血浆中过高的IL-6、IL-8水平(P<0.01),升高IL-10水平(P<0.05)。结论黄芪能通过调节细胞因子与淋巴细胞功能而治疗银屑病。     

银杏叶提取物对兔血管平滑肌细胞分泌细胞因子的影响

目的 :探讨氧化低密度脂蛋白 (oxLDL)对兔血管平滑肌细胞 (VSMC)分泌细胞因子的影响 ,以及银杏叶提取物 (GbE)的干预作用。方法 :兔血管平滑肌细胞分 6组处理 ,以酶联免疫法检测培养上清液中细胞因子肿瘤坏死因子α(TNFα) ,白细胞介素 6(IL 6) ,白细胞介素 8(IL 8)水平。结果 :oxLDL(5 0mg·L-1)对TNFα,IL 6,IL 8分泌水平的增加于刺激后 8h达 6.4～ 8.5倍 ;GbE呈浓度 (1～ 2 0 0mg·L-1)、时间 (1～ 2 4h)依赖地抑制细胞因子分泌 ,并可显著降低oxLDL的上述作用 (与对照组比较均P <0 .0 5 )。结论 :oxLDL可促进兔VSMC分泌细胞因子TNFα,IL 6和IL 8。GbE可能通过抑制基础的及oxLDL刺激的细胞因子分泌对兔VSMC生物学功能发挥调控效用     

复方黄芪提取物对细菌脂多糖诱导大鼠腹腔巨噬细胞分泌TNFα、NO及IL-1的影响

目的研究复方黄芪提取物(CAE)对细菌脂多糖诱导大鼠腹腔巨噬细胞(PMΦs)释放肿瘤坏死因子((TNFα)、白细胞介素-1(IL-1)及一氧化氮(NO)的影响。方法10 mg/L LPS体外诱导大鼠PMΦs分泌TNFα、IL-1与NO等因子,采用小鼠成纤维细胞瘤株(L929)杀伤法检测TNFα的含量、小鼠胸腺细胞增殖法检测IL-1的活性、G riess法检测NO的水平。结果CAE(11.3~90 mg.L-1)能显著抑制LPS激活的巨噬细胞对TNFα、IL-1与NO的分泌。结论CAE抑制巨噬细胞的分泌功能可能是其保肝作用的机制之一。     

豹皮樟总黄酮对胶原性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞产生细胞因子及其免疫功能的影响

目的研究豹皮樟总黄酮(total flavonoids of LitseacoreanaLeve,TFLC)对胶原性关节炎大鼠(collagen-inducedarthritis,CIA)腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage,PMΦ)产生细胞因子及其免疫功能的影响。方法Ⅱ型胶原蛋白(collagenⅡ,CII)和氟氏完全佐剂(CFA)诱导大鼠胶原性关节炎(CIA)模型,采用体重、足爪肿胀及病理组织学变化等指标评价TFLC对CIA大鼠的治疗作用;无菌取PMΦ,体外用药(TFLC0.05、0.5、5mg·mL-1),采用小鼠胸腺细胞增殖法检测CIA大鼠PMΦ分泌白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)的水平,小鼠脾淋巴细胞增殖法检测CIA大鼠脾细胞分泌白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)的水平,放射免疫测定法和反转录RT-PCR法分别检测CIA大鼠PMΦ中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的分泌和表达,中性红法测定CIA大鼠PMΦ的吞噬功能。结果TFLC(50、100、200mg.kg-1)能抑制关节肿胀,增加CIA大鼠体重,改善膝关节病理损伤。TFLC(0.05、0.5、5mg·mL-1)可降低CIA大鼠PMΦ过强的吞噬功能,下调脾细胞IL-2的分泌水平和腹腔巨噬细胞IL-1的分泌水平,同时抑制PMΦTNF-α的分泌水平以及TNF-αmRNA的表达。结论TFLC对CIA大鼠关节炎具有明显抑制作用,其抗炎和免疫抑制作用与其降低CIA大鼠PMΦ过强的吞噬功能,抑制细胞因子的分泌和表达有关。     

瘦素对体外子宫内膜间质细胞和上皮细胞的影响

目的观察瘦素对体外培养人子宫内膜间质细胞(ESC)和上皮细胞株(HHUA)分泌白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的影响,探讨瘦素对女性生殖生理的调节作用。方法采用ELISA方法测定加入不同浓度瘦素时ESC和HHUA分泌IL-6和IL-8的含量。结果在ESC和HHUA上清液中IL-6的浓度与瘦素呈剂量-浓度依赖关系。当瘦素浓度≥1.0μg/ml时,ESC产生IL-6、IL-8有明显的影响,随着瘦素浓度的增加IL-6浓度增加。而瘦素浓度为10μg/ml时,才对HHUA产生IL-8有明显的意义。结论瘦素是细胞因子在子宫内膜产生的一种附加调节剂,通过调节局部细胞因子而调节生殖生理过程。     

淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对THP-1细胞分泌细胞因子的影响

目的：比较淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对人组织细胞瘤THP-1细胞分泌4种细胞因子的影响。方法：放射免疫测定方法(RIA)。 结果：在LPS和PMA存在下, 淫羊藿苷及其肠菌代谢产物(宝藿苷I和淫羊藿苷元）对IL-6的产生有促进作用, 代谢物的作用更强, 对IL-8的产生有一定的抑制作用。当LPS和PMA不存在时,对IL-6的产生无明显影响, 而对IL-8的产生则有促进作用。 不论LPS和PMA存在与否,原苷对TNFα的产生有抑制作用, 原苷及其肠菌代谢产物对IL-1α的产生均有明显抑制作用。结论：在不同的实验条件下,淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对各种炎症性细胞因子的产生均有特异的调节作用。     

Differential upregulation of TNF-alpha, IL-6, and IL-8 production by deoxynivalenol (vomitoxin) and other 8-ketotrichothecenes in a human macrophage model.

The effects of deoxynivalenol (DON or vomitoxin) and four closely related 8-ketotrichothecenes on proinflammatory cytokine and chemokine production were evaluated in a clonal human macrophage model. U-937 cells, which represent a human monocytelike histocytic lymphoma, were differentiated into macrophages by preincubation with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA). Differentiated macrophages were incubated with DON in the absence or presence of lipopolysaccharide (LPS), and supernatant was analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the proinflammatory cytokines interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), and for the chemokine interleukin-8 (IL-8). In the absence of LPS, DON at 500 or 1,000 ng/ml upregulated TNF-alpha production as early as 3 h and up to 6 h, whereas 100 to 1,000 ng/ml of DON significantly increased production of IL-6 from 3 to 24 h and IL-8 from 6 to 48 h. In cells costimulated with 0.2 microg/ml LPS, DON at 500 or 1000 ng/ml markedly superinduced TNF-alpha and IL-8 production. Although 100 ng/ml of DON also potentiated LPS-induced IL-6 production, 500 or 1,000 ng/ ml of the toxin suppressed the LPS-induced IL-6 response. Four other 8-ketotrichothecenes, fusarenon X, nivalenol, 3-acetyl DON, and 15-acetyl DON, were also capable of upregulating or suppressing TNF-alpha, IL-6, and IL-8 production at concentrations similar to that of DON. In total, the results suggest that DON and other 8-ketotrichothecenes have the potential to both directly induce and superinduce proinflammatory cytokine and chemokine expression in human macrophages, even at toxin concentrations that are cytotoxic.     

松杉灵芝菌丝体多糖(FI_0-c)对人组织瘤细胞和人外周血白细胞产生炎症性细胞因子的影响(Ⅱ)(英文)

目的:比较研究水溶性多糖(FI_0-c)及其氯磺酸修饰产物(FI_0-c-S)对人炎症性细胞因子产生的影响.方法:应用氯磺酸修饰法对多糖进行化学修饰.用放射免疫分析法(RIA)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测FI_0-c和FI_0-c-S对人组织瘤细胞(THP-1)和人外周血单核细胞(PBMC)分泌各种与炎症有关的细胞因子,白介素-1(IL-1α)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的影响及对mRNA表达的影响.结果:FI_0-c和FI_0-c-S(浓度分别为4,40,400 mg/L)显著提高 低剂量组LPS 10 mg/L协同PMA 200 nmol/L诱导的THP-1细胞产生TNFα的量,然而,这些多糖明显地抑制高剂量组LPS 100 mg/L协同PMA诱导的THP-1细胞产生TNFα.在无刺激的条件下FI_0-c能够诱导比较多量的IL-1α产生,但是FI_0-c或FI_0-c-S却都明显抑制高剂量或低剂量LPS和PMA诱导的THP-1细胞产生IL-1α.低浓度FI_0-c 4 mg/L显著抑制高剂量组LPS 100 mg/L协同PMA诱导的THP-1细胞产生IL-1或TNFα mRNA及蛋白质的量.结论:松杉灵芝菌丝体水溶性多糖在不同的刺激条件下具有双向免疫调节作用.化学修饰的多糖可改变原多糖对细胞因子产生的调节方向.     

Effect of environmental pollutants on the production of pro-inflammatory cytokines by normal human dermal keratinocytes

The effect of the environmental pollutants, diesel exhaust particles (DEP) and formaldehyde (FA), on the production of pro-inflammatory cytokines (interleukin (IL)-1alpha, IL-1beta, tumor necrosis factor (TNF)-alpha and IL-8) by normal human dermal keratinocytes (hKCs) was investigated. Normal hKCs were incubated with various concentrations of DEP (0.4, 0.8, 4, or 20 microg/ml) or FA (0.25, 0.5, 1, or 5 microg/ml), and cytokine production was then determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). DEP (20 microg/ml) induced IL-1beta production without altering cell growth. The increased production of IL-1beta induced by this concentration of DEP was further enhanced by the presence of phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), although PMA alone did not affect the levels of IL-1beta. IL-8 production was also increased by DEP (0.4 and 0.8 microg/ml), which is consistent with the results that these concentrations of DEP increased the number of cells significantly after 72 h incubation. Although FA alone did not stimulate the production of IL-1beta or IL-8 by keratinocytes, FA (0.5 microg/ml and 5 microg/ml) significantly increased IL-8 and IL-1beta production, respectively, in cells stimulated with PMA. IL-1alpha production was not modulated by FA or DEP even in the presence of PMA. TNF-alpha was produced by unstimulated keratinocytes at barely detectable levels after 48 h incubation. Although basal levels of TNF-alpha in the culture supernatants were increased after stimulation with PMA, neither pollutant alone nor combination with PMA affected the levels of TNF-alpha. These in vitro findings suggest that environmental pollutants may act as modulating factors of cutaneous inflammation by affecting the ability of keratinocytes to release pro-inflammatory cytokines.     

Priming effect of recombinant human interleukin-2 and recombinant human interferon-gamma on human neutrophil superoxide production

The effect of recombinant human interleukin-2 (rhIL-2) and recombinant human interferon-gamma (rhIFN-gamma) were evaluated on superoxide (O2-) production of human polymorphonuclear neutrophils (PMNs). Ten minutes incubation with rhIL-2 showed a dose-dependent enhancement of n-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine (FMLP)-induced O2-production of human PMNs, and the rate of enhancement reached 49.6% at the concentration of 3000 U/ml rhIL-2. Same pretreatment with rhIFN-gamma also showed a dose-dependent enhancement of FMLP-induced O2-production of human PMNs, and the maximal rate of enhancement was 47.0% at the concentration of 3000 U/ml rhIFN-gamma. Any cytokines given alone did not induce O2- production. These cytokines showed no enhancement of phorbol myristate acetate (PMA)-induced O2- production, neither. The effects of these cytokines to FMLP-induced O2- production were kept in calcium-free medium. Moreover, incubation with these cytokines caused no elevation of intracellular free calcium concentration [( Ca++]i) in resting PMNs. Incubation with them did not change the increase of [( Ca++]i) of PMNs induced by FMLP significantly, neither. Recombinant forms of cytokines are used clinically, now. These results may be helpful for the use of them.     

中等强度静磁场对THP-1细胞分泌炎症因子的影响

目的 观察中等强度静磁场对人单核细胞白血病细胞 THP-1 增殖和炎症因子肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、IL-8 分泌的影响。 方法 取对数生长期 THP-1 细胞, 分为对照组和磁场处理组, 利用 60 mT、200mT、400 mT 的静磁场分别作用细胞 18 h、24 h,、48 h 后, CCK-8 法检测细胞增殖情况。 另取细胞分为对照组、磁场处理组、脂多糖（LPS）活化组、LPS+磁场组。 利用 60 mT、200 mT、400 mT 的静磁场分别作用磁场处理组和 LPS+磁场组 18 h、24 h、48 h 后, 酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组 TNF-α、IL-6、IL-8 的水平。 结果 （1）与对照组相比, 3种强度磁场处理组对 THP-1 细胞增殖无明显影响（P > 0.05）。（2）各组 24 h 时 TNF-α、IL-6 水平较 18 h 升高, IL-8 则无明显变化。 而 48 h 与 24 h 相比较, TNF-α出现下降, IL-6 无明显变化, IL-8 出现升高。 3 个时点 LPS 活化组 TNF-α、IL-6、IL-8 水平较对照组及磁场处理组升高, 经过磁场处理后, LPS+磁场组 IL-6、IL-8、TNF-α水平均较 LPS活化组下降（P < 0.05）。 结论 静磁场对 THP-1 细胞释放炎症因子有一定抑制作用, 可为类风湿关节炎的治疗提供理论依据。     

4种刺激剂及抗炎药对HL-60细胞生成IL-8的影响

目的：探讨4种刺激剂脂多糖(LPS)、佛波脂(PMA)、甲酰三肽(fMLP)和钙离子载体A23187及抗炎药物对HL-60细胞生成白细胞介素8（IL-8）的作用。方法：用ELISA方法测定IL-8的含量。结果：LPS对3种浓度HL-60细胞IL-8生成均有刺激作用,PMA,fMLP 0.01,0.1,1,10 nmol.L^-1和A₂₃₁₈₇　 0.01,0.1 nmol.L^-1亦有明显促进作用。Asp,Sali,Hcort在1×10^-5 mol.L^-1和Iso 1×10^-6～1×10^-4 mol.L^-1可明显抑制IL-8生成。结论：本研究建立了可靠的筛选IL-8生成抑制剂的模型,表明异丹叶大黄素具有明显的IL-8生成抑制作用。