复方氨基酸注射液中乙酸的离子色谱法测定

建立了离子色谱法测定复方氨基酸注射液中的乙酸.采用IonPac ICE-AS1色谱柱和AMMS-ICE II微膜抑制器,以0.5mmol/L辛烷磺酸为淋洗液,以5mmol/L四丁基氢氧化铵为再生液,采用电导检测器.结果乙酸在0.3～2.7mmol/L浓度范围内线性关系良好,定量限为8.0×10-6mmol.4种复方氨基酸注射液中乙酸的平均回收率为98.7%～101.2%.     

在线固相萃取-HPLC法测定比格尔犬血浆中丹参素的含量

目的:建立测定比格尔犬血浆中丹参素含量的在线固相萃取-HPLC法。方法:血浆样品经蛋白质沉淀,采用Lichrospher C18为富集柱,以乙腈-10 mmol/L NaH2 PO4(5∶95)为富集流动相,流速2 ml/min;选择Ultimate XB-C18(50 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,以乙腈-10 mmol/L NaH2 PO4(11∶89)为分析流动相,流速为0.8 ml/min,检测波长285 nm。结果:丹参素在20~2 000 ng/ml浓度范围内线性关系良好,最低定量限为20.0 ng/ml,日内和日间RSD均<10%,平均绝对回收率>80%。结论:本方法简便、快速、灵敏、可靠,适用于比格尔犬血浆中丹参素含量的测定。     

分光光度法测定水中微量铝的体会

人体摄入过量铝可对多系统产生危害。为研究水质酸度对铝测定结果的影响,我们采用分光光度法对水质中铝进行了测定,井对实验条件进行了探讨,现报告如下。1 材料与方法1.1 仪器和试剂1.1.1 仪器:721分光光度计,50ml玻璃比色管,0.45um微孔滤膜和酸式砂芯漏斗。1.1.2 试剂:试剂均采用去离子水配制,试剂均为AR级。铝标准贮备液:18.5×10~(-3)mmol/L,称取0.500g铝粉用浓盐酸溶解,NaOH中和,再用5×10~(-4)mmol/LNaCl溶解,定溶至1.0L。铝标准使用液:(A3.7×10~(-7)mmol/L,B3.7×10~(-8)mmol/L)。用5×10~(-4)mmol/L NaCl溶液稀释铝贮备液配制成。显     

危重新生儿应激性高血糖的临床研究

为探讨应激性高血糖对危重新生儿的影响,我院对255例患儿进行了血糖监测.结果血糖＞6.67mmol/L者107例(占41.96%);高血糖与器官功能障碍关系密切,一个和三个器官功能衰竭时血糖分别为(8.89±3.03)mmol/L和(13.20±4.45)mmol/L(P＜0.01),两个和四个器官功能衰竭时血糖分别为(10.63±4.82)mmol/L和(16.80±10.46)mmol/L(P＜0.05),血糖越高其预后越差,血糖＜10mmol/L时病死率6.25%,10～15mmol/L时11.54%,＞15mmol/L时达41.5%,且死亡组14例血糖值达(17.35±11.23)mmol/L,说明血糖＞15mmol/L时提示病情凶险和预后不良.     

毛细管电泳法测定一清颗粒中七种成分的含量

建立了毛细管电泳法测定一清颗粒中的7种有效成分--盐酸小檗碱、汉黄芩苷、汉黄芩素、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚和大黄素甲醚.采用未涂层弹性融硅石英毛细管柱,盐酸小檗碱的测定:以盐酸雷尼替丁为内标,运行缓冲液为0.2 mol/L磷酸二氢钠溶液-无水乙醇(1:1,pH 5.5),分离电压21 kV,重力进样10 S(高度15 cm),检测波长265 nm.其他6组分的测定:以对乙酰氨基酚为内标,运行缓冲液为8%甲醇(pH 9.42,含25 mmol/L 硼砂、25 mmol/LSDS和4mmol/L磺丁基-β-环糊精),分离电压14 kV,重力进样5 s(高度15 cm),检测波长254 nm.7种成分分别在2.6～13、2～20、l～10、1.6～16、1.2～12、7.2～72和l～10 μg/ml浓度范围内线性关系良好,回收率分别为100.3%、102.7%、101.8%、102.0%、99.0%、100.0%、98.2%,脚均小于3.09%.     

二甲双胍对胰腺癌BxPC-3细胞恶性表型的影响

目的:探索二甲双胍对胰腺癌BxPC-3细胞恶性表型的影响。方法:以Smad4基因天然缺失型人胰腺癌BxPC-3细胞为对象,采用CCK-8法和流式细胞术分别检测不同剂量二甲双胍(5、10、20 mmol/L)作用24 h后的细胞增殖和凋亡情况,并计算细胞存活率和凋亡率;采用Transwell迁移试验检测不同剂量二甲双胍(10、20 mmol/L)作用24 h后的细胞迁移情况,记录迁移细胞数;采用实时定量聚合酶链反应法和Western blotting法分别检测细胞中钙黏着蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、补体反应基因32(RGC-32)的mRNA及蛋白表达情况。结果:与对照组和5 mmol/L二甲双胍组比较,10、20 mmol/L二甲双胍组细胞的存活率均显著降低,凋亡率均显著升高,且20 mmol/L二甲双胍组细胞的凋亡率显著高于10 mmol/L二甲双胍组(P<0.05)。与对照组比较,10、20 mmol/L二甲双胍组迁移细胞数均显著减少,且20 mmol/L二甲双胍组显著少于10 mmol/L二甲双胍组(P<0.05);10、20 mmol/L二甲双胍组细胞中E-cadherin mRNA及其蛋白的相对表达量均显著升高,且20 mmol/L二甲双胍组E-cadherin mRNA的相对表达量显著高于10 mmol/L二甲双胍组;10 mmol/L二甲双胍组细胞中Vimentin mRNA,20 mmol/L二甲双胍组细胞中Vimentin mRNA及其蛋白以及10、20 mmol/L二甲双胍组细胞中RGC-32 mRNA及其蛋白的相对表达量均显著降低,且20 mmol/L二甲双胍组Vimentin mRNA及其蛋白、RGC-32 mRNA的相对表达量均显著低于10 mmol/L二甲双胍组(P<0.05或P<0.01)。结论:二甲双胍可剂量依赖性地通过Smad4非依赖性通路抑制BxPC-3细胞的增殖和迁移,促进其凋亡,这可能与胰腺癌细胞上皮间质转化过程以及RGC-32表达受到抑制有关。     

HPLC测定富马酸福莫特罗滴丸的含量

目的:建立HPLC法测定富马酸福莫特罗滴丸的含量。方法:采用KromasilODSC18柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-乙腈-50mmol/LNaH2PO4·2H2O(pH2.8)(34∶10∶56,含有6.0mmol/L庚烷磺酸钠)为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为214nm。结果:富马酸福莫特罗在1.0～3.0μg/ml的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),加样回收率为99.0%～101.2%,RSD为0.66%～1.62%(n=3)。结论:本方法简便,结果准确可靠。     

复方盐酸环丙沙星滴耳剂两组分的HPLC测定

建立了复方盐酸环丙沙星滴耳剂中盐酸环丙沙星与氢化可的松的HPLC测定法.采用ODS3柱,流动相为10mmol/L磷酸盐缓冲液(含5mmol/L庚烷磺酸钠,pH2.5)-甲醇(60:40),检测波长265nm.方法精密度及线性关系良好,盐酸环丙沙星和氢化可的松的平均回收率分别为100.5%(RSD 0.45%)和99.3%(RSD 0.31%).     

胶束电动毛细管色谱法测定牡丹皮及六味地黄丸中丹皮酚的含量

目的用胶束电动毛细管色谱法分离测定中药材牡丹皮及中成药六味地黄丸中丹皮酚的含量。方法定量采用内标法 ,选取芦丁为内标。所用毛细管规格为 5 5cm(有效长度 5 0cm)× 75 μm,检测波长 2 74nm ,电压 1 5kV ,背景电解质分别为 30mmol/LSDS -30mmol/L硼砂 ,2 0mmol/LSDS -5 0mmol/L硼砂 ( pH 9 4 )。 结果线性分别为 6～ 4 2mg/L,1 8 2～ 91mg/L;相关系数分别为0 9995和 0 9997;RSD为 1 95 %和 3 6 %;加样回收率为 1 0 1 5 %～ 1 0 3 3%和 97 7%～1 0 1 9%。丹皮酚含量分别为 1 5 9%和 0 1 4 8%。结论胶束电动毛细管色谱法用于测定牡丹皮及六味地黄丸中丹皮酚的含量是可行的。     

HPLC法测定克拉霉素及其片剂含量

建立了高效液相色谱法测定克拉霉素及其片剂含量的方法。色谱条件 :C18柱 ,流动相为 67mmol/ L磷酸二氢钾∶乙腈 ( 55∶ 4 5) ,检测波长选择 2 10 nm,外标法定量。结果 :线性范围为 10 0～ 90 0 μg/ ml,日内 RSD为0 .15%。片剂平均回收率为 10 0 .6% ( RSD为 0 .13% )。     

小柴胡颗粒中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的毛细管电泳法测定

建立了毛细管电泳法测定小柴胡颗粒中的柴胡皂苷a和柴胡皂苷d.以苯甲酸为内标,采用未涂层弹性融硅石英毛细管柱,以20 mmol/L Tris+20 mmol/L磺丁基-β-环糊精+25 mmol/L β-环糊精(pH 9.93)为运行缓冲液,分离电压12 kV,重力进样10 s(高度15 cm),检测波长210 nm.柴胡皂苷a和柴胡皂苷d在10～100和8～80 μg/ml浓度范围内线性关系良好.平均回收率为97.1％和98.1％,RSD为1.57％和1.98％.     

毛细管电泳法同时测定清肺抑火丸中5种蒽醌类成分的含量

目的:建立同时测定清肺抑火丸中5种蒽醌类成分大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚含量的方法。方法:采用毛细管电泳法,以对乙酰氨基酚为内标。毛细管柱为未涂层弹性融硅石英毛细管柱,运行缓冲液为25 mmol/L硼砂溶液+20mmol/L十二烷基磺酸钠+4 mmol/L磺丁基醚-β-环糊精+2%甲醇(pH 10.01),分离电压为18 kV,进样方式为重力进样10 s(高度15 cm),检测波长为254 nm,温度为25Ⅴ,湿度为<70%。结果:大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚检测质量浓度分别在5.0⁴0.0、2.440.0、2.4¹9.2、3.619.2、3.6²8.8、11.228.8、11.2⁸9.9、2.589.9、2.5²0.0μg/ml范围内同各自峰面积与内标峰面积比值呈良好的线性关系(r=0.998 0、0.997 1、0.996 9、0.998 5、0.998 3);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤2.40%;平均加样回收率分别为96.6%、99.6%、99.2%、98.2%、98.6%,RSD分别为0.80%、1.32%、2.21%、1.63%、2.02%(n=6)。结论:该方法专属性强,结果准确、可靠,重复性好,可用于清肺抑火丸的质量控制。     

用自动化柱切换二维高效液相色谱建立人血浆中氯氮平测定方法

目的 用自动化柱切换二维高效液相色谱（HPLC）建立人血浆中氯氮平测定方法,用于氯氮平治疗药物监测或药代动力学研究. 方法 第一维色谱（LCI）萃取柱为FRO SCX（20×4.6 mm,5 μm,ANAX）,流动相为60 mmol/L醋酸铵：乙腈=50：50（V/V）,萃取泵流速为2.0 ml/min,ASP-2420C控制系统温度为40 ℃,LC2系统中分析色谱柱为Ultimate C18流动相为50 mmol/L,醋酸铵：乙腈=45：65（V/V）,流速为1.2 ml/min,转移辅助流速1.0 ml/min,溶液为10%乙腈溶液.检测波长为259 nm,＂中心切割＂窗口为1.7～2.3 min,定量环为200μl,样品用乙腈预处理. 结果 氯氮平在30.0～1200.0 μg/L线性关系良好,相关系数为0.999 92,最低定量浓度为21.5 μg/L.日内相对标准偏差（RSD）＜3%（n=6）,日间RSD均＜4%（n=18）,准确度在100.6%～104.4%. 结论 用自动化柱切换二维HPLC建立的人血浆中氯氮平测定方法人为干预步骤少、自动化程度高,准确性与精密度良好,适合于氯氮平血药浓度测定及动力学研究.     

高效液相色谱法测定左旋多巴／苄丝肼分散片血药浓度及其药代动力学研究

目的建立左旋多巴血药浓度的测定方法并对其分散片的人体药代动力学进行研究。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Lichrospher100C     

反相离子对HPLC法测定细胞中蛋白激酶活性

建立一种用 ＨＰＬＣ测定细胞中蛋白激酶活性的方法。方法：μＲｏｎｄｏｐｋａ Ｃ１８柱;流动相：甲醇：磷酸盐缓冲液（２０：８０ｖ／ｖ,内含５ ｍｍｏｌ／Ｌ ＰｉＣＡ,ｐＨ ７．０）;检测波长为２５９ ｎｍ;柱温：室温;灵敏度：０．０１ ＡＵＦＳ;进样 ２０ μｌ。结果：酶蛋白用量 ０． ３ ｍｇ左右、反应时间为 １０ ｍｉｎ、Ｈｉｓｔｏｎｅ（ Ⅲ－Ｓ）用量 １ｍｇ／ｍｌ、 ＡＴＰ浓度 ５００ μｍｏｌ／Ｌ时,活性测定结果理想。ＡＴＰ回收率为９９．６３％,ＲＳＤ为１．１１％（ｎ＝６）。结论：该方法简便、准确,适合于蛋白激酶的活性测定。     

高效液相色谱法测定甲硫氨酸维B_1注射液的含量

目的建立5μm高效液相色谱法同时测定甲硫氨酸维B1注射液中两组分的含量。方法用KromasilC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为1mmol/L的己烷磺酸钠溶液(含0.2%三乙胺,用50%H3PO4溶液调节pH5.0)-甲醇(85∶15),流速为1.0ml/min,检测波长为228nm。结果甲硫氨酸和维生素B1分别在80~723μg/ml与8.4~75.6μg/ml的浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9998与0.9999),两者的平均回收率RSD分别为(99.3±0.5)%与(99.8±0.7)%(n=9)。结论此法快速简便,有较好的精密度和准确度。     

HPLC法测定人血浆中萘普生的浓度

目的建立高效液相色谱法测定萘普生血药浓度的方法。方法采用HPLC法测定普生缓释片中萘普生的血浆药物浓度。大连依利特Hypersil ODS（5μm，4．6mm×250mm）柱，柱温40℃；流动相为甲醇-磷酸二氢钠缓冲液（50mmoL／L磷酸二氢钠水溶液，含0．3％三乙胺，用磷酸调pH值为3．7）=68．9：31．1；流速1．0mL／min。紫外检测波长为230nm。结果萘普生在0．93～93．20μg／ml线性关系良好，r^2=0．9999，最低检测浓度为0．10μg／ml。结论本法快速、灵敏，适用于萘普生血药浓度的监测。     

离子色谱法定量测定硝酸异山梨酯片中硝酸盐的含量

目的:建立定量测定硝酸异山梨酯片中硝酸盐含量(以硝酸根计)的方法。方法:采用离子色谱法。分离柱为IonpacAS11-HC,淋洗液为氢氧化钾溶液(20 mmol/L),使用电导检测器联合阴离子抑制器进行检测。结果:硝酸根检测质量浓度线性范围为10¹10μg/m(lr=0.999 8),平均回收率为99.3%(RSD=0.9%,n=3),检测限和定量限分别为0.002 1、0.007μg/ml。结论:本方法操作简便、快速,结果准确,适用于硝酸异山梨酯片中硝酸盐的定量分析。     

反相离子对色谱法测定人血浆盐酸伪麻黄碱浓度

目的建立反相高效液相色谱法检测人血浆中盐酸伪麻黄碱浓度的方法。方法采用SupELCO discoveryC18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,乙腈-水为流动相,流速1.0ml/min,检测波长190nm,柱温25℃。结果盐酸伪麻黄碱浓度在10-1000μg/L范围内线性良好(r=0.9991),最低检测限为10μg/L。批内相对标准偏差(RSD)<10%,批间RSD<12%;提取回收率为84.85%。结论反相高效液相色谱法简便、快速、准确,可用于人体内伪麻黄碱的血药浓度测定及药动学研究。