药物治疗矽肺血清Ⅰ型胶原水平的变化

报道了汉防己甲素（汉甲）、克矽平、抗矽一号（即磷酸羟基喹哌）和柠檬酸铝（柠铝）及其联合用药对矽肺大鼠和矽肺病人血清中Ⅰ型胶原含量的变化。在动物实验中，汉甲及克矽平对胶原代谢的作用较强且效果稳定。抗矽一号及柠铝对染尘时血清胶原含量上升也有抑制作用，但停药后有回升。临床观察也显示汉甲和抗矽一号联合用药可抑制矽肺进程中血清Ⅰ型胶原含量的升高     

矽肺及汉防己甲素治疗的大鼠肺中——Ⅲ型胶原的免疫荧光研究

本文采用间接免疫荧光技术研究了矽肺大鼠和汉防已甲素(简称汉甲素)治疗矽肺的大鼠肺中Ⅲ型胶原的变化。Ⅲ型胶原分布于肺泡间隔中,在发生矽肺纤维化时,肺泡间隔中Ⅲ型胶原含量高于正常肺泡间隔,但增长程度低于Ⅰ型胶原。Ⅲ型胶原是矽肺胶原纤维组分之一,在胶原纤维之间也有分布。汉甲素治疗后,矽肺纤维化受到抑制。大细胞由矽结节外周向矽结节中心浸润,并吞噬降解Ⅲ型胶原,证明汉甲素有促进胶原分解代谢的作用。     

汉防己甲素治疗的矽肺大鼠肺内酸溶性胶原的变化

本研究比较了正常大鼠、矽肺大鼠和汉防己甲素治疗矽肺大鼠肺内酸溶性胶原在含量、羧甲基纤维素柱层析和氨基酸组成等方面的差异。矽肺大鼠肺中总胶原和酸溶性胶原的含量都增高。在酸溶性胶原中出现了与α_1(Ⅰ)不同的α_1(Ⅰ)~b峰,它随肺纤维化的程度而增高。汉甲组的酸溶性胶原中含有大量被降解的胶原片段,包括α_1链的前体。对上述结果作了初步讨论,并试图解释汉甲抑制矽肺纤维化发生的原因。矽肺组织中胶原蛋白大量增加,但人们对其组成特点却了解甚少。不久前,久保等报道了矽肺组织中胶原蛋白的类型。我们对矽肺大鼠肺中胶原的组成也做了一些观察。本文报道对矽肺大鼠,经汉防己甲素(简称汉甲)治疗的矽肺大鼠和正常大鼠肺中酸溶性胶原的含量、类型、羧甲基纤维素柱层析行为及若干组份的氨基酸组成的研究结果。酸溶性胶原是组织中可为稀酸提取的胶原,其主要成份是Ⅰ型胶原[α_1(Ⅰ)]_2α_2,为两种α肽链组成的三链螺旋。期望此项工作能为阐明二氧化矽引起肺纤维化和汉甲抑制矽肺纤维化的机理提供线索。     

矽肺大鼠和病人肺组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原纤维的分布及相对含量的研究

免疫酶标法用于观察肺组织中胶原的分布。显微分光光度法用于研究大鼠与矽肺病人的纤维化组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原的相对含量。染色中应用大鼠及人的抗Ⅰ型与Ⅲ型胶原多克隆抗体。Ⅰ型胶原分布于正常肺泡间隔及间质中。Ⅲ型胶原也在相同的部位存在。在由石英所致的大鼠纤维化肺组织中,Ⅰ型与Ⅲ型胶原在极度扩展的间质中聚集。Ⅲ型胶原是早期纤维化肺中主要增生的胶原。Ⅰ型胶原是纤维化后期主要增生的胶原。在矽肺病人肺组织中也见到同样的现象。染电焊烟尘的大鼠肺,直至180天以前,Ⅲ型胶原为主要积聚的胶原,而在180天以后,Ⅰ型胶原的增加才占优势。     

药物治疗矽肺血清I型胶原水平的变化

报道了汉防已甲素（汉甲）、克砂平、抗砂一号（即磷酸羟基喹哌）和柠檬酸铝（柠钼）及春联合用药对砂肺大鼠和矽肺病人血 １型胶原含量的变化，在动物实验中，汉甲及克矽平对胶原代谢的作用较强县效果稳定，抗矽一号及柠铝对染尘时血清胶原含亘上升抑制作用，但停药后有回升。临床观察也显示汉甲和抗矽一号药可抑制矽肺进程中血清Ｉ型胶原含量的升高。     

克矽平对矽肺大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA水平的影响

克矽平（Ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｐｙｒｉｄｉｎｅ－Ｎ－ｏｘｉｄｅ，ＰＶＮＯ）是一种较为有效的抗矽肺药物。作者采用编码人Ⅰ、Ⅲ型胶原α１（Ⅰ）及α１（Ⅲ）链的ｃＤＮＡ探针，使用ｃＤＮＡ－ｍＲＮＡ斑点杂交技术，观察了染尘２个月、４个月及经克矽平治疗１、３个月的矽肺大鼠肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ水平的改变情况。实验结果表明：大鼠染尘后２、４个月，肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ水平较正常鼠肺组织有明显上升（Ｐ＜０．０５），经克矽平治疗后，Ⅰ、Ⅲ型胶原的ｍＲＮＡ水平显著下降。提示：克矽平对矽肺进程中胶原基因表达的增强有抑制作用。     

汉防己甲素对矽肺大鼠肺中Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达的影响

使用Ｐｒｏα１（Ⅰ）、Ｐｒｏα１（Ⅲ）人胶原ｃＤＮＡ探针，采用ｃＤＮＡ－ｍＲＮＡ班点杂交技术，观察了染尘２个月、４个月的矽肺大鼠及汉防己甲素治疗１个月和３个月的矽肺大鼠肺组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原的ｍＲＮＡ水平的改变情况。实验结果表明，矽肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ的含量比正常肺组织明显增加（Ｐ＜０．０５），汉防己甲素治疗后Ⅰ、Ⅲ型胶原正常含量则较矽肺组织显著减少。因此，我们认为矽肺病变组织中胶原纤维的积聚是由石英粉尘引起胶原基因表达改变所致；汉防己甲素能直接或间接地抑制胶原基因的转录，从而抑制矽肺病变中胶原蛋白的合成。     

矽肺及汉防己甲素治疗的大鼠肺中Ⅰ型胶原的免疫荧光研究

本文采用间接免疫荧光技术研究了矽肺大鼠和汉防己甲素(简称汉甲素)治疗矽肺的大鼠肺中Ⅰ型胶原的变化。Ⅰ型胶原是肺间质的重要成分。在发生矽肺纤维化时,肺泡间隔中的Ⅰ型胶原含量明显地高于正常的肺泡间隔。在矽结节中,可见到发射绿色荧光的Ⅰ型胶原纤维束排列致密,表明Ⅰ型胶原参与了矽肺纤维化。用汉甲素治疗后,矽肺纤维化受到抑制,胶原纤维松解、断裂,互相缠绕,说明汉甲素可减低胶原纤维的聚合程度,并对胶原有一定的降解作用。汉甲素治疗的大鼠矽肺中存在大量大细胞,大细胞胞浆内可见发射绿色荧光的Ⅰ型胶原,可能为大细胞所吞噬从而加速胶原的分解。     

汉防己甲素对矽肺大鼠胶原代谢的作用

从胶原蛋白质水平和ｍＲＮＡ水平分析了汉防己甲素（汉甲）的抗纤维化作用。大鼠染石英尘后肺组织的全肺干重、全肺胶原含量以及血清中Ⅰ型胶原含量均上升，汉甲可以抑制以上各种指标的上升趋势。ｃＤＮＡ－ｍＲＮＡ原位杂交实验从转录水平上进一步证明，汉甲对胶原代谢的影响发生在胶原合成的起始阶段。以上结果对抗矽肺药物联合用药的配伍设计有理论意义     

汉防己甲素及克矽平对小鼠胶原mRNA的影响

汉防己甲素（汉甲）及克矽平（Ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｐｙｒｉｄｉｎｅ－Ｎ－Ｏｘｉｄｅ，ＰＶＮＯ）是目前较为有效的两种抗矽肺药物。使用Ⅰ型和Ⅲ型胶原ｃＤＮＡ探针，以原位杂交的方法从胶原ｍＲＮＡ定位和定量的角度，探讨了汉甲及克矽平对矽肺组织中腔原转录的作用。结果表明汉甲及克矽平可抑制由石英粉尘吸入所导致的胶原表达增强。     

矽肺大鼠和病人肺组织中Ⅰ型胶原的电镜观察

本实验是以电镜观察矽肺大鼠和煤矽肺病人肺坦织中Ⅰ型胶原纤维的结构,並各与其相对照的未纤维化肺中胶原纤维做比较,结果表明:正常鼠肺组织中Ⅰ型胶原分子的长度为270nm,矽肺大鼠结节中的Ⅰ型胶原分子的长度范围为240～270nm,后者与正常胶原分子比,有缩短的趋势。未纤维化的人肺中Ⅰ型胶原分子长度为280～300nm,而煤矽肺病人肺Ⅰ型胶原分子长度为230～280nm,这与在大鼠肺胶原中所见到的结果相类似。说明发生矽肺纤维化病变以后,Ⅰ型胶原在结构上发生了变化。     

汉防已甲素对矽肺大鼠胶原代谢的作用

从胶原蛋白质水平和ｍＲＮＡ水平分析了汉防已甲素（汉甲）的抗纤维化作用。大鼠染石英尘后肺组织的全肺干重，全肺胶原含是到及血清中Ｉ型胶原含量均上升，汉甲可以抑制以上各种指标的上升趋势。ｃＤＮＡ－ｍＲＮＡ原位杂交实验从转录水平上进一步证明，汉甲对胶原低谢的影响发生在胶原合成的起始阶段。以上结果对抗矽肺药物联合用药的配合设计有理论意义。     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对矽肺大鼠肺内P38信号转导通路蛋白表达的调节

目的观察N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠矽肺纤维化模型Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、转化生长因子-β1(TGF-β1)与P38分裂原活化蛋白酶(MAPK)蛋白表达的影响,探讨AcSDKP拮抗矽肺纤维化可能的作用机制。方法选用非暴露式气管灌注法制作大鼠矽肺模型,并给予AcSDKP。免疫组化法、Western-blot法检测肺组织内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β1、磷酸化P38 MAPK(phospho-P38 MAPK)、P38 MAPK蛋白的表达。结果与对照组相比,矽肺模型组大鼠肺组织内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β1、phospho-P38 MAPK蛋白表达均增加;与矽肺模型组相比,AcSDKP治疗后,大鼠肺组织内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β1、phospho-P38 MAPK蛋白表达均明显降低。而各组间比较,P38 MAPK蛋白表达无明显改变。结论AcSDKP可能通过抑制TGF-β1介导的P38 MAPK信号转导途径,从而发挥抗矽肺纤维化的作用。     

微量法及ELISA法测定矽肺大鼠血清铜蓝蛋白

使用铜蓝蛋白ELISA法测定了矽肺大鼠及汉防己甲素(汉甲)、克矽平、磷酸羟基喹哌(抗矽Ⅰ号)及柠檬酸铝(柠铝)治疗的矽肺大鼠血清铜蓝蛋白(Cp)含量,并与微量法测定结果进行了比较。两种方法测定结果十分相近。ELISA法对血清存放时间要求较宽,Cp的微量测定法简便准确,但要求血清存放时间短。     

抗纤维化短肽对矽肺大鼠肺内胶原合成与降解的调节作用

目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠肺内Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达以及基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9酶活力表达的调节在拮抗矽肺纤维化形成过程中的作用.方法 气管内灌注染尘法制作大鼠矽肺模型,实验动物被分为6组:矽肺模型对照1组、矽肺模型对照2组、矽肺模型1组、矽肺模型2组、抗纤雏化治疗组及预防治疗组.采用HE染色对矽肺纤维化病变进行形态学观察;采用Western blot法对肺内Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达进行检测;采用明胶酶谱法对肺内MMP-2和MMP-9酶活力表述进行检测.结果 抗纤维化治疗组I型胶原表达量分别是矽肺模型1组与2组的71.08%和58.13%,Ⅲ型胶原表达量分别是矽肺模型1组与2组的80.13%和70.70%;预防治疗组Ⅰ型与Ⅲ型胶原表达量分别是矽肺模型2组的40.13%和65.77%.而抗纤维化治疗组MMP-2的表达分别是矽肺模型1组与2组的1.02倍;MMP-9表达分别是矽肺模型1组与2组的1.02倍和1.03倍.预防治疗组MMP-2与MMP-9表达都是矽肺模型2组的1.01倍.结论 AcSDKP可以从抑制胶原合成与促进胶原降解的两个方面发挥拮抗矽肺纤维化的作用.     

克矽平时矽肺大鼠Ⅰ,Ⅱ型胶原mRNA水平的影响

克矽平是一种较为有效的抗矽肺药物。作者采用编码人ⅠⅡ型胶原α１（Ⅰ）及α（Ⅲ）链的ｃＤＮＡ探针，使用ｃＤＮＡ－ｍＲＮＡ斑点杂交技术，观察了染尘２个月、４个月及经克矽平治病１、３个月的矽肺大鼠肺组织中Ⅰ、Ⅱ型胶原ｍＲＮＡ水平的改变情况。     

汉防已甲素-N-2′-氧化物对大鼠实验性矽肺的疗效观察

<正> 1976年我们在筛选治疗矽肺药物中,发现汉防己甲素(简称汉甲素)(Tedrandrinc)对大鼠实验性矽肺具有明显的治疗效果,以后又发现汉甲素在大鼠及人体内可以代谢生成汉甲-N-2′-氧化物(简称汉甲—NO)。为了研究汉甲-NO对矽肺的治疗     

染矽尘大鼠血硅及尿硅含量与肺纤维化程度的关系

目的探讨染矽尘大鼠血、尿中硅含量与肺组织中羟脯氨酸、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原含量的关系。方法处理组采用气管灌注法注入矽尘混悬液建立大鼠矽肺模型,对照组采用同样处理但用生理盐水代替矽尘混悬液。两组取第28天大鼠的血液、尿液,经样品前处理后用原子吸收分光光度计检测;大鼠肺组织制作石蜡切片,采用天狼猩红染色法,用偏振光显微镜和图像分析系统对肺组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达进行分析;试剂盒检测肺组织羟脯氨酸含量。结果处理组大鼠血硅、尿硅、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原明显高于对照组(P<0.05),羟脯氨酸虽稍低于对照组,但无统计学意义(P>0.05);血硅、尿硅分别与Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原建立直线回归,有统计学意义(P<0.05),血硅、尿硅分别与羟脯氨酸建立直线回归,无统计学意义(P>0.05)。结论血硅、尿硅对早期矽肺纤维化程度可能有一定的指示意义。 更多还原     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸抗大鼠矽肺纤维化的实验研究

目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠矽肺纤维化的拈抗作用.方法 实验大鼠随机分为6组,每组10只.矽肺模型对照1组:支气管内灌注生理盐水1ml/只,4周后处死;矽肺模型对照2组:支气管内灌注生理盐水1ml/只,8周后处死;矽肺模型1组:支气管内灌注二氧化硅混悬液1ml/只(每ml含SiO250mg),4周后处死;矽肺模型2组:支气管内灌注二氧化硅混悬液1ml/只,8周后处死;矽肺抗纤维化治疗组:支气管内灌注二氧化硅混悬液1ml/只,4周后给予AcSDKP 800μg/(kg·d),并持续至第8周处死;矽肺纤维化防治组:给予AcSDKP 800 μg/(kg·d)48h后,支气管内灌注二氧化硅混悬液1ml/只,8周后处死.采用HE和VG染色对矽肺纤维化病变及其变化特点进行形态学观察.采用羟脯氨酸测定法和Western blot法对矽肺大鼠肺内胶原含量及其I型与Ⅲ型胶原的表达进行检测.结果 抗纤维化治疗组与矽肺模型1组及模型2组相比,矽结节面积下降到84.28%和67.93%,羟脯氨酸含量下降到70.89%和58.18%,Ⅰ型胶原表达量下降到71.08%和58.13%,Ⅲ型胶原表达量下降到80.13%和70.70%,差异均有统计学意义(P＜0.05);预防治疗组与矽肺模型2组相比,矽结节面积下降到61.13%,羟脯氨酸含量下降到60.27%,Ⅰ型与Ⅲ型胶原表达量分别下降到40.13%和65.77%,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 AcSDKP对二氧化硅刺激的大鼠矽肺纤维化有一定的拮抗作用.     

烟酸对染矽尘大鼠肺组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原形成的影响

目的 阐明饲料中添加烟酸对染矽尘大鼠早期Ⅰ型、Ⅲ型胶原形成的影响。方法 采用气管暴露法建立矽肺动物模型,高效液相色谱法测定血浆烟酸含量,天狼红染色法结合偏振光显微镜观察Ⅰ型、Ⅲ型胶原的形成,图像分析系统对胶原定量分析。结果 烟酸组不同时点血浆中烟酸含量明显升高,与对照组和矽尘组相比,差异均有显著性。染矽尘后第7天、第28天,与对照组比较,矽尘组大鼠肺组织Ⅰ型胶原阳性区域面积百分比显著增加,而烟酸组Ⅰ型胶原阳性区域面积百分比则明显低于矽尘组。染矽尘后第28天,Ⅲ型胶原阳性区域面积百分比显著高于对照组,而烟酸组Ⅲ型胶原阳性区域面积百分比则显著低于矽尘组。结论烟酸通过抑制Ⅰ型、Ⅲ型胶原的形成,而有效地阻断矽尘诱导的大鼠肺纤维化。