赛庚啶对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对神经细胞凋亡的影响

目的:探讨赛庚啶(Cyproheptadine,CYP)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:利用Longa线栓法制作大鼠局灶性脑缺血3h再灌注3、6、24、48h模型,TTC染色观察脑梗死体积,图像分析系统测定脑梗死范围,紫外分光光度仪测定血清乳酸脱氢酶(LDH)含量,TUNEL法检测凋亡神经细胞,免疫组化法测定脑细胞Caspase-3的表达。结果:与模型组比较,CYPI、II组的脑梗死绝对容积及梗死百分比显著减小(P<0.01),由于缺血再灌注导致的血清LDH含量升高显著降低(P<0.01),凋亡神经细胞及Caspase-3阳性表达产物明显减少(P<0.01)。结论:CYP对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,抑制神经细胞凋亡过程,其机制与CYP抑制血清LDH升高及减少Caspase-3表达有关。     

微RNA-24对过氧化氢诱导的人脐静脉血管内皮细胞凋亡的影响及作用机制

目的探讨微RNA-24(miR-24)对H2O2诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)存活、迁移和凋亡的影响及作用机制。方法通过转染miR-24高表达、miR-24抑制物(anti-miR-24)及其阴性对照慢病毒质粒(miR-24 NC)构建稳转细胞,3种细胞用H2O2500μmol·L^-1处理12 h。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率,划痕实验检测细胞迁移率,Hoechst33258染色及流式细胞术检测细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-24,Bax,Bcl-2和胱天蛋白酶3 mRNA表达水平,Western印迹法和免疫细胞化学法检测Bax、Bcl-2和胱天蛋白酶3蛋白表达水平。结果与miR-24 NC组比,miR-24高表达组miR-24表达升高(P<0.05),而anti-miR-24组降低(P<0.05)。与正常对照组比,H2O2组细胞凋亡率增加(P<0.05)、细胞存活和迁移率降低(P<0.05),表明氧化损伤模型构建成功。与H2O2+miR-24 NC组比,H2O2+miR-24高表达组上述指标较H2O2+miR-24 NC组升高(P<0.05),促凋亡蛋白Bax和胱天蛋白酶3 mRNA与蛋白表达量增加,抑凋亡蛋白Bcl-2 mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05),而H2O2+anti-miR-24组可降低细胞凋亡率、增加细胞存活和迁移率,降低Bax和胱天蛋白酶3 mRNA与蛋白表达水平,增加Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论氧化应激状态下,miR-24可通过上调Bax、胱天蛋白3表达和下调Bcl-2蛋白表达,促进HUVEC凋亡和抑制其存活和迁移能力。     

锰对神经细胞凋亡和细胞周期的影响及硒的保护作用

随着三羟基甲基锰(methylcyclopentadieny manganese tricarbonyl，MMT)作为取代四乙基铅的燃料抗爆剂的广泛使用，人们在生活中大范围长期接触锰及其化合物的机会不断增多，由于MMT暴露在空气中遇光可以迅速分解为锰的混合物，使得环境中的锰含量增高。长期低浓度接触锰所引起的慢性蓄积性中毒日益突出，锰的毒作用日益受到人们的关注。     

丹参酮对原代大鼠神经细胞缺血性损伤的保护作用

目的探讨丹参酮对大鼠神经细胞脑缺血样损伤模型的保护作用及其机制。方法采用组织培养法,以原代大鼠大脑皮层神经细胞为材料,制备缺糖损伤、缺氧损伤、自由基损伤、咖啡因损伤、一氧化氮损伤及ＮＭＤＡ毒性损伤模型,细胞形态学观察神经细胞损伤变化,结晶紫活细胞染色后测定ＯＤ值。结果形态学检查发现丹参酮对６种脑缺血样损伤模型中的大鼠神经细胞具有明显保护作用,结晶紫染色也提示丹参酮可显著提高损伤模型中神经细胞的存活数,同等剂量条件下,丹参酮对自由基损伤、咖啡因损伤及ＮＭＤＡ毒性损伤的保护作用优于其余各组。结论丹参酮对上述６种大鼠神经细胞缺血损伤均有保护作用。     

米帕明对大鼠皮层神经细胞缺血性损伤的保护作用

目的 :研究米帕明 (Imi)对培养大鼠神经细胞缺血和谷氨酸 (Glu)损伤的保护作用。方法 :分离培养 15～ 18d胎龄的大鼠神经细胞 ,用连二亚硫酸钠消除培养基中的氧 ,合并培养基缺糖模拟细胞缺血性损伤 ;加入Glu模拟兴奋毒性损伤 ,测定乳酸脱氢酶、一氧化氮、丙二醛和超氧化物歧化酶的含量变化 ,观察缺血和Glu对神经细胞的损伤及Imi的保护作用。结果 :缺血及Glu引起神经细胞明显损伤性变化 ,死亡率升高 ,培养上清液中乳酸脱氢酶、一氧化氮含量升高 ,细胞匀浆中丙二醛生成增加 ,超氧化物歧化酶含量明显减少。Imi 10 - 8～ 10 - 6mol·L- 1能不同程度地减轻上述损伤性变化。结论 :Imi对神经细胞缺血性损伤有保护作用 ,机制可能与抗脂质过氧化及钙拮抗作用有关。     

雌激素对脑创伤大鼠皮质神经细胞凋亡的影响

越来越多的证据表明,急性脑损伤(TBI)后不论是病理生理还是预后上都存在着性别差异.事实证明,当给予脑损伤的动物或人外源性雌激素替代后明显改善了脑缺血和脑创伤的预后.雌激素的脑保护作用公认为与其抗氧化效应有关.本研究旨在探讨脑创伤后雌激素脑保护作用的机制,为临床开发脑创伤治疗药物提供资料.     

纳洛酮对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响

目的：研究纳洛酮在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的保护机制。方法：腔内线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型。16只雄性Wistar大鼠随机分为缺血组及纳洛酮治疗组，采用TUNEL法检测各组大鼠脑组织于缺血再灌注各2．5h后神经细胞凋亡情况。结果：大鼠脑缺血再灌注2．5h后凋亡的神经细胞主要分布在梗死灶边缘，纳洛酮治疗组细胞凋亡数量低于缺血组(P＜0．05)。结论：纳洛酮具有减少大鼠脑组织缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的作用。纳洛酮具有抗脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

银杏叶提取物对神经细胞凋亡的保护作用

目的 研究银杏叶提取物（GbE)对神经细胞凋亡的影响。方法 对原代培养的大鼠脑皮质细胞进行细胞活力观察,并LDH释放量及琼脂糖凝胶电泳DNA结果。结果 GbE能够增强神经细胞活力,减少LDH释放,减轻细胞核形态的改变及DNA的断裂。结论 GbE对神经细胞凋亡有抑制作用 。     

赤芍总甙对原代培养大鼠神经细胞损伤模型的保护作用

目的 探讨赤芍总甙对大鼠神经细胞脑缺血样损伤模型的保护作用及其机制。方法 采用组织培养法,以原代大鼠大脑皮层神经细胞为材料,制备缺糖损伤、缺氧损伤、自由基损伤、咖啡因损伤、一氧化氮损伤及NMDA毒性损伤模型。结果 形态学检查发现赤芍总甙（total paeony glycoside,TPG)对6种脑缺血样损伤模型中的大鼠神经细胞具有明显保护作用,结晶紫染色也提示TPG可显提高损伤模型中神经细胞的存活数。结论 TPG对上述6种大鼠神经细胞缺血损伤均有显的保护作用。     

血清微小 RNA-181c、微小 RNA-146a对急性脑梗死病人神经功能缺损及预后的影响

目的 探究血清微小RNA(miR)-181c、miR-146a对急性脑梗死(ACI)病人神经功能缺损及预后的影响.方法 选取南阳市中医院2018年1月至2019年7月ACI病人135例作为研究对象,比较不同美国国立卫生院神经功能缺损评分(NIHSS)、不同预后病人血清miR-181c、miR-146a水平,采用Pearson相关性分析血清miR-181c、miR-146a与NIHSS评分相关性,logistic回归分析血清miR-181c、miR-146a与预后的关系,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-181c、miR-146a对预后的预测价值,并采用Kaplan-Meier曲线进行生存分析.结果 NIHSS评分≥16分病人血清miR-181c水平(1.63±0.14)高于5～15分(1.52±0.12)、<5分(1.38±0.09)病人,NIHSS评分≥16分病人miR-146a水平(0.54±0.08)低于5～15分(0.67±0.10)、<5分(0.86±0.13)病人(P<0.05);血清miR-181c与NIHSS评分呈正相关,miR-146a与NIHSS评分呈负相关(P<0.05);生存者入院时、入院第3天血清miR-181c水平[(1.45±0.20)、(1.20±0.19)]低于死亡者[(1.68±0.25)、(1.53±0.35)],miR-146a水平[(0.74±0.16)、(0.97±0.23)]高于死亡者[(0.60±0.13)、(0.76±0.15)](P<0.05);血清miR-181c、miR-146a与预后显著相关(P<0.05);预测预后的AUC:入院时第3天miR-146a>入院时第3天miR-181c>入院时miR-146a>入院时miR-181c(P<0.05);miR-181c高危与低危、miR-146a高危与低危者生存曲线比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 ACI病人神经功能缺损与血清miR-181c呈正相关,与血清miR-146a呈负相关,并是预后相关影响因素,均具有较高的预后预测价值.     

短暂性脑缺血发作对后继脑梗死神经保护的临床研究

目的探讨短暂性脑缺血发作(TIA)对后继脑梗死是否具有神经保护作用。方法根据脑梗死患者梗死前有无TIA史分为脑梗死Ⅰ组(梗死前无TIA)和脑梗死Ⅱ组(梗死前有TIA),分别从TIA持续时间、与脑梗死间隔时间及发作频次与梗死前无TIA患者比较,应用日常生活活动(ADL)评分评定患者预后情况。结果梗死前患者TIA持续时间≤10min、与梗死时间间隔≤7d及发作频次2～3次与梗死前无TIA者相比差异有统计学意义(P<0.05),其Ⅰ级预后较好。结论脑梗死前已发作TIA可能使大脑产生缺血耐受,对后继脑梗死有神经保护作用,且与TIA持续时间、脑梗死间隔时间及发作频次有关。     

L-硝基精氨酸对大鼠局灶性脑缺血后神经元凋亡的影响

目的观察非选择性一氧化氮合酶抑制剂L-硝基精氨酸(L-NA)对大鼠局灶性脑缺血诱导的神经元凋亡的影响,探讨L-NA对脑缺血的保护作用及其机制.方法健康雄性SD大鼠,体重250～300 g,随机分为假手术组(SH组)、缺血组(IS组)、L-NA治疗组(L-NA组).IS和L-NA组按缺血后时间分为三个亚组:2 h、6 h、12 h.每组6只大鼠.L-NA组每次按20mg/kg,ip给药,每日2次,连续3 d.IS组给等容量的生理盐水.插线法制备大鼠大脑中动脉阻断模型.采用流式细胞仪(FCM)检测脑组织细胞凋亡率,Western blot法和免疫组化法检测Caspase-3蛋白的表达,FCM和免疫组化法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果大鼠脑缺血后,细胞凋亡率、Caspase-3和Bax蛋白表达明显升高,Bcl-2蛋白表达差异无显著性,Bcl-2/Bax降低,缺血12 h治疗3 d时,L-NA组中细胞凋亡率、Caspase-3和Bax蛋白表达显著低于相应的IS组,Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax高于IS组,缺血2、6 h治疗3 d L-NA组中细胞凋亡率、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达和Bcl-2/Bax与IS组比,差异无显著性.结论缺血后期应用L-NA对脑缺血有治疗作用,可能与降低Caspase-3、增加Bcl-2表达、降低Bax蛋白表达、调节Bcl-2/Bax蛋白平衡有关.     

依达拉奉治疗急性脑梗死42例疗效分析

目的观察依达拉奉治疗急性脑梗死（ACI）的临床疗效及安全性。方法采用随机对照试验,选择发病72h内的ACI患者83例,分为依达拉奉治疗组42例和对照组41例,按两组治疗前后神经功能缺损（CSS）评分及日常生活能力量表（ADL）记分的变化为主要疗效判断标准进行对比分析。结果治疗第14天和第60天CSS评分、ADL评分治疗组和对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）,各组治疗前、治疗第14天和第60天CSS评分、ADL评分差异有统计学意义（P〈0．01）,治疗组无明显不良反应。结论依达拉奉治疗急性脑梗死疗效确切,安全可靠。     

大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的动态变化

目的观察大鼠脑缺血再灌注后大脑皮质和纹状体神经细胞凋亡的动态变化。方法采用大鼠脑缺血2h,再灌注1h,6h,12h,24h和48h的脑缺血再灌注模型。用HE染色体和TUNEL标记的方法,观察大鼠大脑皮层和纹状体神经细胞凋亡的变化。结果在脑缺血再灌注早期有部分神经细胞发生凋亡,随再灌注时间的延长,凋亡细胞数目逐渐增多。24～48h达高峰。结论在脑缺血再灌注损伤时神经细胞凋亡起着重要作用。     

黄芩苷对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的探讨黄芩苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法Wistar大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组、黄芩苷组(50,100和200 mg.kg-1),以及尼莫地平0.4 mg.kg-1组。利用大鼠大脑中动脉内栓线阻断法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型,通过HE染色、流式细胞术、免疫组化及RT-PCR等方法,观察黄芩苷对缺血再灌注大鼠脑组织形态学改变、神经细胞凋亡率及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3表达的影响。结果黄芩苷50,100和200 mg.kg-1iv均可明显改善缺血再灌注损伤所致的大鼠脑组织病理形态学改变,神经细胞凋亡率从模型组的(20.6±5.4)%分别降至(14.5±3.1)%,(11.12±4.2)%及(10.2±2.6)%,促凋亡基因caspase-3 mRNA表达比模型组分别降低23.2%,36.5%及41.0%,其蛋白表达比模型组分别降低25.6%,41.2%及49.3%。结论黄芩苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与黄芩苷抑制caspase-3表达有关。     

赤芍总苷对大鼠缺血损伤心肌细胞凋亡的保护作用

目的研究赤芍总苷(TPG)对异丙基肾上腺素(ISO)诱导的心肌缺血损伤大鼠细胞凋亡的保护作用及其机制。方法Rona法复制大鼠心肌缺血损伤模型,检测和对比分析正常对照组、ISO损伤组、TPG防治组、TPG治疗组和心得安阳性对照组的心肌细胞早期凋亡率、心肌组织凋亡相关基因Bax、Bcl-2及其蛋白的相对表达量。结果与ISO损伤组比较,TPG防治组和治疗组各项指标均有不同程度的改善,表现为大鼠早期心肌细胞凋亡率和促凋亡基因Bax及其蛋白的表达量明显降低,而抑凋亡基因Bcl-2及其蛋白的表达量有所增高,Bcl-2/Bax蛋白比值明显高于ISO损伤组。结论TPG对ISO诱导的大鼠心肌缺血损伤时的细胞凋亡具有保护作用,药用机制可能与激活Bcl-2基因及其蛋白表达,抑制Bax基因及其蛋白表达,提高Bcl-2/Bax蛋白比值,从而有效抑制心肌细胞凋亡有关。     

疏血通注射液对脑缺血大鼠细胞凋亡的影响

目的:研究疏血通对脑缺血大鼠细胞凋亡的影响。方法:雄性Wistar大鼠72只,随机分成脑缺血组、脑缺血+疏血通治疗组、假手术对照组,每组24只,采用大脑中动脉栓塞方法,制作脑缺血模型,疏血通组腹腔注射疏血通注射液0.2ml/kg,脑缺血组及假手术对照组腹腔注射等体积生理盐水。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测脑组织中神经细胞凋亡。结果:脑缺血组TUNEL染色阳性细胞数显著增多,并随时间的延长而加重,第3天达高峰。脑缺血+疏血通治疗组各时间点与脑缺血组比较TUNEL染色阳性细胞数明显减少(P<0.01)。结论:疏血通能够明显抑制脑缺血大鼠神经细胞凋亡。     

静脉滴注尼莫地平治疗急性缺血性脑梗死

发病７２ｈ内的急性缺血性脑梗死６０例，分为２组。尼莫地平组３０例（男性２１例，女性９例；年龄５９±ｓ１０ａ）．ｗｋ１，２给支持疗法（脱水剂、维生素Ｃ等）和尼莫地平２ｍｇ／ｄ于５％葡萄糖液５００ｍＬ内静脉滴注，ｗｋ３，４改用扩容、改善微循环、细胞活性药，ｗｋ１－４口服尼莫地平６０ｍｇ，ｑｎ。对照组３０例（男性２３例，女性７例；年龄５８±９ａ），不给尼莫地平，其余同上。４ｗｋ后，前组神经功能缺损积分值较后组下降显著（Ｐ＜０．０１），与病情轻重、病灶大小、治疗早晚无关。＊Ｐ＜０．０１。讨论作者采用临床对照研究，静滴尼莫地平治疗发病７２ｈ内的缺血性脑梗死，无论病情分级或总体疗效，治疗前后的神经功能缺损的积分差，与对照组比较，差别均有非常显著意义（Ｐ＜０．０１），提示尼莫地平对急性缺血性脑梗死的近期疗效肯定。但是深部小梗死灶引起的中、重型患者，２组疗效差别无显著意义，可能与小梗死灶病理变化轻，不能充分发挥尼莫地平的阻止钙内流和细胞膜崩解、保护半暗带等作用有关［４］。动物模型局灶性脑缺血３０ｍｉｎ后开始用尼莫地平治疗即不能增加局部脑血流量［５］。用不同剂量的尼莫地平治疗发病４８ｈ内的急性脑梗死１０６４例，发现只有１２０?