皮下埋植左旋18甲基炔诺酮后SD鼠子宫内膜的形态改变

为了探讨皮下埋植左旋１８甲基炔诺酮（ＬＮＧ）避孕术后月经紊乱的原因，我们采用电镜及图像分析系统观察皮下埋植术前、术后不同时间ＳＤ鼠的子宫内膜形态改变。一、材料与方法１选择健康、性成熟的雌性ＳＤ鼠３０只，按雌性大鼠的性周期随机分为未埋植组（对照组）、...     

放置缓释炔诺酮IUD后子宫内膜细胞化学定量分析

观察２２例正常育龄妇女，在放置菱形缓释左旋１８甲基炔诺酮（１０．５μｇ·ｄ－１）宫内节育器（Ｌｅｖｏｎｅｒｇｅｓｔｒｅｌ－ＲｅｌｅａｓｉｎｇＩＵＤ，菱Ｒ－ＬＮＧＩＵＤ）前后，子宫内膜酸性磷酸酶（ＡＣＰ）的变化。结果显示，在放置后第６～９个顺序月，子宫内膜腺上皮细胞大部分呈扁平、薄、暗细胞增多，阳性溶酶体明显减少，着色较浅，大小不一，未见阳性高尔基体和内质网。通过电子计算机图象分析Ｐ＜０．０１，提示放置菱Ｒ－ＬＮＧＩＵＤ后子宫内膜腺上皮的ＡＣＰ活性明显下降。阳性溶酶体减少在月经减少中起着一定的作用。     

分泌期反复流产子宫内膜凝集素结合特性探讨

本文通过生物素分别标记的双花藕豆凝集素（ＤＢＡ）、大豆凝集素（ＳＢＡ）、麦胚凝集素（ＷＧＡ）及荆豆凝集素（ＵＥＡ－１）与子宫内膜的反应，应用Ｓ－Ｐ法研究２８例无明显原因反复流产的分泌期子宫内膜糖复合物的变化及与其组织形态学分期的相关性。结果：①宫内膜迟延发生率为３９．３％（１１／２８）；②四种凝集素中只有ＤＢＡ与子宫内膜的结合表现出阶段特异性。着床期，ＤＢＡ宫内膜结合率增强，且与宫内膜组织形态学分期呈有意义的直线正相关（ｒ＝０．４０４，Ｐ＜０．０５）。提示与ＤＢＡ特异结合的子宫内膜上的糖复合物与孕卵着床有关，这种特异结合可以作为评价分泌期子宫内膜分化成熟的一项指标     

Graves病患者甲状腺和外周静脉血中甲状腺特异性抗体的对比研究

本文对比研究１１例Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）和９例非ＧＤ患者甲状腺静脉血（ＴＶＢ）和外周静脉血（ＰＶＢ）中甲状腺刺激抗体（ＴＳＡｂ）、甲状腺球蛋白抗体（ＴＧＡｂ）和甲状腺过氧化物酶抗体（ＴＰＯＡｂ）的活性和Ｔ３、Ｔ４浓度。结果显示：（１）抗体阳性的ＧＤ患者，其ＴＶＢ中ＴＳＡｂ、ＴＧＡｂ和ＴＰＯＡｂ水平均显著高于ＰＶＥ的，ＰＶＢ和ＴＶＢ的ＴＳＡｂ活性呈显著正相关，这提示甲状腺本身是甲状腺特异性抗体产生的主要部位；（２）ＧＤ组和非ＧＤ组ＴＶＢ和ＰＶＢ的血清Ｔ３、Ｔ４不形成浓度梯度；（３）ＴＳＡｂ、ＴＧＡｂ和ＴＰＯＡｂ活性及其在ＴＶＢ和ＰＶＢ之间的活性梯度，与ＴＶＢ和ＰＶＢ中Ｔ３、Ｔ４浓度均无相关关系。     

Ang—Ⅱ对血缺氧性心肌胶原代谢的影响

目的：探讨缺血缺氧性心肌损伤过程中血管紧张素－Ⅱ（Ａｎｇ－Ⅱ）与心肌胶原代谢的关系。方法：是丙基肾上腺素（ＩＳＰ）注射大鼠、造成心肌缺血缺氧和心肌坏死模型,检测血清内ＧＯＴ、ＣＫ、ＬＤＨ、ＨＢＤＨ（羟丁酸脱氢酶）的活性,并检测心肌组织内血管紧张素－Ⅰ转换酶（ＡＣＥ）、血管紧张素－Ⅱ（Ａｎｇ－Ⅱ）和心肌胶原含量变化,观察细胞外间质效应细胞增殖情况。结果：注射ＩＳＰ后,血清ＧＯＴ、ＣＫ、ＬＤＨ、ＨＢＤ     

痢疾杆菌口服免疫小鼠肠道相关淋巴组织中CD45R^＋和CD45RB^＋…

为了解肠道相关淋巴细胞（ＧＡＬＴ）对痢疾杆菌口服免疫的应答状况，分离了Ｓｈｉｇｅｌｌａｆｌｅｘｅｒｉ四次免疫后Ｂａｌｂ／ｃ小鼠脾（ＳＰ），肠系膜淋巴结（ＭＬＮ），Ｐｅｙｅｒ’ｓ结（ＰＰ），固有膜（ＬＰ）和上皮内（ＩＥ）淋巴细胞，对末次免疫后１～３ｄ内免疫组与对照组ＧＡＬＴ中的ＣＤ４５Ｒ＾＋和ＣＤ４５ＲＢ＾＋细胞群作了ＦＣＳ分析，结果免疫后起动７ｄＩＥ和ＬＰＣＤ４５Ｒ＾＋细胞增加而ＭＬＮ和ＰＰＣＤ４     

Graves病患者治疗前、后血清甲状腺刺激抗体和TSH结合抑制免疫球蛋白活性的观察

本文研究了Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）患者在抗甲状腺药物（ＡＴＤ）治疗前、后血清甲状腺刺激抗体（ＴＳＡｂ）和ＴＳＨ结合抑制免疫球蛋白（ＴＢＩＩ）的变化，发现治疗前ＴＳＡｂ和ＴＢＩＩ的检出率分别为９１．７％和７９．２％，治疗后两抗体的活性及阳性率均显著下降，表明抗甲状腺药可改善ＧＤ患者的免疫异常。ＴＳＡｂ和ＴＢＩＩ活性不相关，提示ＴＳＨ受体抗体（ＴＲＡｂ）具有异质性。ＴＳＡｂ和ＴＢＩＩ活性与血清甲状腺激素水平无相关关系，说明体外测定的ＴＳＡｂ或／和ＴＢＩＩ活性并不能完全反映甲亢的严重程度。     

Graves病患者治疗前,后血清甲状腺激素抗体和TSH结合抑制免疫？…

本文研究了Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）患者在抗甲状腺药物（ＡＴＤ）治疗前、后血清甲状腺刺激抗体（ＴＳＡｂ）和ＴＳＨ结合抑制免疫球蛋白（ＴＢＩＩ）的变化，发现治疗前ＴＳＡｂ和ＴＢＩＩ的检出率分别为９１．７％和７９．２％，治疗后两抗体的活性及阳笥率均显著下降，表明抗甲状腺药可改善ＧＤ患者的免疫异常。ＴＳＡｂ和ＴＢＩＩ活性不相关，提示ＴＳＨ受体抗体（ＴＲＡｂ）具有异质性。ＴＳＡｂ和ＴＢＩＩ活性与血清甲状腺激素     

Graves病手术前后血清甲状腺刺激免疫球蛋白的检测

本文用细胞化学法进行甲状腺刺激免疫球蛋白（ＴＳＩ）的测定。将４３例受试者分为正常对照组（１５例）和甲亢组（２８例），甲亢组中的１５例于手术前后分别测定ＴＳＩ，阳性率：正常组２０％；甲亢组５３．６％；１５例手术病人术前５３．３％、术后６．７％。作者认为：ＧＤ患者体内存在ＴＳＩ，支持ＴＳＩ是ＧＤ甲亢发病的主要因素的主张。大多数经过内科治疗甲亢症状未控制的ＧＤ患者，血清ＴＳＩ可被检出，经过手术治疗的ＧＤ     

BDNF、NGF对AD模型鼠脑移植区胚胆碱能神经元发育生长的调控

目的探讨脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）、神经生长因子（ＮＧＦ）对ＡＤ模型鼠脑植入胚基底前脑后行为改善和移植区胚胆碱能神经元发育生长的影响。方法用使君子酸损毁ＳＤ大鼠基底大细胞核制成ＡＤ模型,分成ＢＤＮＦ、ＮＧＦ、ＢＤＮＦ＋ＮＧＦ及单纯移植对照４组。在额、顶叶皮质植入同种胚基底前脑细胞悬液,前３组含相应神经营养因子,移植后每２ｄ向侧脑室灌注相应神经营养因子共７次。移植后１、２．５和４个月时行避暗回避试验和跳台试验,最后脑切片经ＡＣｈＥ组织化学、ＣｈＡＴ和ＬＮＧＦＲ免疫组织化学等染色,对移植区中的神经元及纤维作定量分析和图像处理。结果移植后应用神经营养因子的动物较对照组行为改善明显迅速,ＢＤＮＦ＋ＮＧＦ组行为改善又较ＢＤＮＦ组或ＮＧＦ组明显。形态学证实,应用神经营养因子动物移植区中ＡＣｈＥ阳性神经元数、１６９００μｍ２网格中ＡＣｈＥ阳性纤维交点数及ＡＣｈＥ阳性神经元面积均优于对照组,ＢＤＮＦ＋ＮＧＦ组的结果又好于ＢＤＮＦ组或ＮＧＦ组。结论ＢＤＮＦ与ＮＧＦ一样能促进植入胚基底前脑的ＡＤ模型鼠行为改善和移植区胚胆碱能神经元的发育生长,ＢＤＮＦ和ＮＧＦ联合使用比单独使用一种因子更为有效。     

Y-27632抑制缓激肽选择开放血肿瘤屏障的研究

目的研究Rho associated kinase（ROcK）特异性抑制剂Y-27632是否抑制缓激肽开放血肿瘤屏障。方法应用EVOM测定仪测定跨内皮阻抗值，分析血肿瘤屏障的通透性；应用辣根过氧化物酶渗漏实验分析血肿瘤屏障的通透性；应用免疫荧光方法观察原代大鼠脑微血管内皮细胞丝状肌动蛋白结构和分布的改变。结果BK作用15min时，跨内皮阻抗值最低，辣根过氧化物酶流量最高，血肿瘤屏障通透性最高；此时大鼠脑微血管内皮细胞边界的丝状肌动蛋白分布不连续，应力纤维形成增加。ROCK的特异性抑制剂Y-27632显著抑制了由缓激肽引起的血肿瘤屏障通透性升高和应力纤维的增加。结论Y-27632抑制缓激肽引起的血肿瘤屏障通透性升高，可能与丝状肌动蛋白结构和分布的改变和应力纤维的增加相关。     

蛋白激酶C在内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性中的作用

目的 探索信号分子蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ(endothelial monocyte activating polypeptide-Ⅱ,EMAP-Ⅱ)增强血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB)通透性中的作用。方法 荷瘤大鼠被随机分成3组C每组8只):对照组、EMAP-Ⅱ组、H7+EMAP-Ⅱ组。采用伊文思蓝(Evans blue,EB)渗透性实验评估实验各组BTB通透性的变化;Western Blot法、免疫组织化学法及免疫荧光法检测脑微血管内皮细胞上紧密连接相关蛋白occludin表达水平的变化。结果 与对照组和H7+EMAP-Ⅱ组相比较,EMAP-Ⅱ组BTB通透性显著增高,紧密连接相关蛋白occludin的表达水平显著降低,EMAP-Ⅱ的作用受到PKC抑制剂H7预处理的显著抑制。结论 信号分子PKC在EMAP-Ⅱ增强BTB通透性中发挥着重要的作用。     

左旋18-甲基炔诺酮对大鼠下丘脑GnRH神经元的影响

目的：观察孕激素类避孕药—左旋18-甲基炔诺酮(LNG)对大鼠下丘脑GnRH神经元的影响。方法：正常雌性大鼠分为长期给药组(灌服LNG90d)和停药组(停药后正常喂养20d)。免疫组织化学方法显示下丘脑GnRH阳性神经元。结果：长期给药组与对照组相比斜角带(db)、视前区(MPA)内GnRH阳性神经元构成比发生改变,棘型神经元减少,阳性神经元光密度减低,阳性纤维膨体密度降低,正中隆起(ME)处阳性纤维密度增加。停药后基本恢复正常。结论：从形态学上证实LNG作用于下丘脑水平;停药后GnRH阳性神经元形态学变化可恢复正常,表明LNG具有高效安全性。     

RhoA在内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性中的作用

目的探索信号分子RhoA在内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ(endothelial monocyte activating polypeptide-Ⅱ,EMAP-H)增强血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB)通透性中的作用。方法采集出生3~5d的Wistar胎鼠的大脑皮质,应用酶消化法及葡聚糖离心法获得脑微血管段后,接种于培养皿中进行脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs)原代培养;将BMECs与C6脑胶质瘤细胞共培养,构建体外BTB模型;共培养后的BMECs随机分成3组(每组6例):对照组、EMAP-Ⅱ组和C3 exoenzyme+EMAP-Ⅱ组。测定跨内皮阻抗值和辣根过氧化物酶流量评估各组BTB通透性变化情况;Western blot法检测BMECs上紧密连接相关蛋白ZO-1的表达水平;免疫荧光法检测ZO-1和细胞骨架蛋白F-actin在BMECs上的分布与表达。结果与对照组相比较,EMAP-Ⅱ组BTB通透性显著增高,ZO-1和F-actin在BMECs上的表达水平显著降低,应力纤维形成明显增多;EMAP-Ⅱ的上述作用受到RhoA抑制剂C3 exoenzyme预处理的显著抑制。结论信号分子RhoA在EMAP-Ⅱ增强BTB通透性中发挥着重要的作用。     

ROCK介导缓激肽开放SD大鼠血肿瘤屏障

目的利用ROCK的特异性抑制剂Y-27632,研究ROCK是否介导缓激肽开放血肿瘤屏障。方法应用ROCK的特异性抑制剂Y-27632预处理大鼠原代脑微血管内皮细胞后,用缓激肽诱导血肿瘤屏障开放,测量跨内皮阻抗值(TEER),辣根过氧化物酶(HRP)渗漏量,分析血肿瘤屏障的通透性的改变;应用Western-blot法检测紧密连接相关蛋白ZO-1的表达;应用免疫荧光方法观察原代大鼠脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白ZO-1和丝状肌动蛋白结构和分布的改变。结果 Y-27632显著抑制缓激肽诱导TEER值的降低,HRP的升高;Y-27632显著抑制ZO-1的表达;Y-27632抑制ZO-1由内皮细胞的边缘向细胞质转移,抑制丝状肌动蛋白由细胞膜边缘向细胞中央区分布,应力纤维形成明显减少。结论 ROCK介导缓激肽开放血肿瘤屏障。     

大鼠心肌组织中网状纤维组织学构筑及增龄变化

目的 观察大鼠心肌组织发育过程中网状纤维的组织学构筑特点和增龄变化,为探讨心肌组织重构特点奠定基础. 方法 利用石蜡切片、Gomori银染,光镜下观察胎鼠(孕约19d)、新生(9d)、青年(8个月)、老年(14个月)SD大鼠心肌组织网状纤维的组织学构筑特点,Western blotting检测Ⅲ型胶原蛋白随年龄变化的表达差异.利用图像分析系统对心室肌组织内网状纤维进行定量分析. 结果 网状纤维分为粗、细纤维,围绕在心肌细胞周围.胎鼠心肌细胞周围网状纤维呈细小线状或缺如,新生鼠的心肌细胞周围网状纤维逐渐增多,形成连续的网状纤维膜,相邻肌细胞之间出现间隙,随年龄而增宽,网状纤维近平行分支填充于间隙内.网状纤维所占面积百分比随年龄增加发生改变.Ⅲ型胶原(网状纤维)表达量随年龄增加发生改变,新生鼠到青年鼠是急剧增加阶段.结论大鼠心肌组织中网状纤维构成肌细胞周围的粗、细纤维鞘成分,并发出分支充填于心肌细胞之间和心肌细胞与间质之问的间隙内,Ⅲ型胶原蛋白量随年龄的变化发生改变.     

Orthogonal experimental preparation of Sanguis Draconis- Polyvinylpyrrolidone microfibers by electrospinning

How to improve the bioavailability of the Sanguis Draconis (SD) is an important problem in the potential clinical applications. The aim of this study was to develop a drug delivery system to achieve high bioavailability of SD, a drug with poor water solubility. It will promote the research about new formulations of the SD and the other insoluble drugs. In this study, a highly biocompatible hydrophilic polymer, polyvinylpyrrolidone (PVP), was selected as a carrier, mixed with different proportions of SD to produce SD-PVP microfibers by solution electrospinning. By orthogonal experiments, the optimal spinning conditions of the preparation of SD-PVP fibers were investigated. The morphology of different proportions of SD-PVP microfibers was observed by scanning electron microscopy, and the phase characteristics were characterized by Fourier transform infrared spectrometry, X-ray diffraction, and differential scanning calorimetry. The hydrophilic properties of SD-PVP fiber membranes with different SD content were analyzed by the water contact angle assay. In vitro dissolution experiments were carried out to observe the dissolution of drugs in SD-PVP fiber membranes. The results showed that the diameter of SD-PVP fibers increased with the enlargement of SD content. A eutectic mixture was formed after blending PVP and SD, and the hydrogen bonds were formed between the SD and PVP with no chemical reaction occurred. The dispersion of SD in the fiber decreased with the increase of SD content. The higher the content of SD in the fiber, the more hydrophobic the fiber membrane. In vitro dissolution studies revealed that the dissolution content of SD from SD-PVP microfibers was significantly higher than that of the pure or original drug SD. However, as the SD content increased from 15% to 30%, the dissolution of the drug in the SD-PVP fibers decreased. The SD-PVP fiber prepared in this study showed much higher solubility than the original drug in vitro, which has great significance for the development of new dosage forms for the clinical application of SD, and it has a useful reference for the study of similar bioavailability of poorly soluble drugs.     

内皮-单核细胞激活多肽酶Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性的机制

目的研究内皮-单核细胞激活多肽II(endothelial monocyte activating polypeptide-II,EMAP-II)选择性开放血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB)的作用机制。方法荷瘤大鼠被随机分成4组(每组12只):对照组,EMAP-II组,寡霉素组和寡霉素+EMAP-II组。采用伊文思蓝(Evans blue,EB)渗透性实验评估各组BTB通透性变化情况;Western Blot法检测脑微血管内皮细胞上紧密连接相关蛋白ZO-1的表达水平变化;双重免疫荧光法检测EMAP-II和α-ATP合成酶在脑微血管内皮细胞上的分布。结果 EMAP-II组BTB通透性显著高于对照组和寡霉素组(<0.01),紧密连接相关蛋白ZO-1的表达水平显著降低(<0.01),其作用受到ATP合成酶抑制剂寡霉素(Oligomycin)的显著抑制(<0.05);EMAP-II与α-ATP合成酶在胶质瘤微血管内皮细胞上共定位。结论 EMAP-II可能通过开放紧密连接增强BTB的通透性,脑微血管内皮细胞上的α-ATP合成酶是其可能的作用位点。     

低频超声辐照联合小剂量缓激肽选择性开放大鼠血肿瘤屏障及其可能机制

目的研究应用低频超声辐照和小剂量缓激肽颈内动脉灌注非侵袭性、可逆性、靶向最大限度开放血肿瘤屏障的可行性。方法应用伊文氏兰检测血肿瘤屏障通透性,透射电镜观察吞饮小泡数量,Westernblot法检测质膜微囊结构蛋白caveolin-1和caveolin-2的蛋白表达,RT-PCR法检测caveolin-1和caveolin-2的mRNA表达。结果低频超声辐照联合应用小剂量缓激肽后伊文氏兰检测血肿瘤屏障通透性显著增加(P<0.01),透射电镜示吞饮小泡数量显著增加(P<0.01),RT-PCR法、S-P免疫免疫组织化学法、Westernblot法检测质膜微囊结构蛋白caveolin-1和caveolin-2的mRNA和蛋白表达表达显著增加(P<0.01)。结论低频超声辐照联合应用小剂量缓激肽通过增加胞吞饮转运显著增加血肿瘤屏障通透性。     

缓激肽对脑胶质瘤大鼠紧密连接影响的形态学观察

目的研究缓激肽(BK)对脑胶质瘤大鼠血肿瘤屏障紧密连接的影响。方法采用伊文氏兰(EB)法检测缓激肽作用后血肿瘤屏障(BTB)通透性的变化;应用透射电镜(TEM)观察BK作用后内皮细胞间紧密连接的变化,同时应用硝酸镧[La(NO3)3]和辣根过氧化物酶(HRP)作示踪剂,检测缓激肽作用后,小分子和大分子示踪剂通过紧密连接的情况。结果缓激肽可使血肿瘤屏障对伊文氏兰的通透性增加,在15min时达到高峰,以后逐渐下降。透射电镜显示缓激肽作用15min时,肿瘤组织毛细血管内皮细胞间紧密连接的完整性明显破坏,缝隙指数显著增加,同时可见硝酸镧和辣根过氧化物酶在紧密连接处沉积。结论缓激肽能够通过开放紧密连接选择性增加血肿瘤屏障的通透性。