冠心病患者血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9与小而密低密度脂蛋白胆固醇的相关性研究

目的探讨冠心病患者血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与小而密低密度脂蛋白胆固醇(sd LDLC)的关系。方法收集2014年3月至2014年12月在山西医科大学第一医院住院且行冠状动脉造影术确诊为冠心病的患者100例作为冠心病组,同期健康体检者67例作为对照组。Lipoprint脂蛋白分析仪检测LDLC颗粒大小、sd LDLC颗粒数及sd LDLC所占LDLC的百分比(简称sd LDLC百分比);酶联免疫吸附法测定血清PCSK9。结果冠心病组LDLC颗粒大小低于对照组(264.07±6.78比267.37±5.15,P0.01),sd LDLC颗粒数多于对照组(5.0±9.5比4.0±5.0,P0.05),sd LDLC百分比大于对照组(5.95%±10.50%比3.70%±5.85%,P0.01)。冠心病组血清PCSK9显著高于对照组(15.48μg/L比14.95μg/L,U=-2.74,P=0.006)。冠心病组血清PCSK9与sd LDLC百分比、LDLC呈正相关(r=0.212,P=0.034;r=0.202,P=0.032)。结论冠心病患者血清PCSK9与sd LDLC百分比呈正相关,抑制PCSK9可以预防冠心病。     

前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂的临床研究及应用进展

前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂可通过抑制肝细胞表面低密度脂蛋白受体的降解对脂质代谢起到调节作用。目前已有多项临床研究证明,PCSK9抑制剂单一药物或与他汀类药物联合使用可显著降低低密度脂蛋白胆固醇水平。本文综述了当前PCSK9抑制剂的重要临床研究及应用进展,并简要总结了常见PCSK9抑制剂的安全性、有效性及临床应用现状。     

PCSK9抑制剂在血脂代谢中的研究进展

心血管疾病是全世界范围内引起死亡的主要原因。高胆固醇血症被认为是动脉粥样硬化性心血管疾病的独立危险因素。目前他汀类药物是降脂的首选药,但在临床工作中常见患者对他汀类药物不耐受或应用大剂量他汀类药物仍难以将低密度脂蛋白降至达标水平。前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂作为新型降脂药物受到广泛关注。现着重综述前蛋白转化酶枯草溶菌素9及其抑制剂的最新研究进展、突出争议领域和未来的方向。     

家族性高胆固醇血症相关基因研究进展

家族性高胆固醇血症(FH)是一种常染色体(共)显性遗传病.相关研究认为低密度脂蛋白受体(LDLR)、载脂蛋白-B(ApoB)、前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)、LDLR衔接蛋白1(LDLRAP1)等基因可能与FH发病有关,本文就FH相关基因研究进展作一综述.     

PCSK9在血脂调节中的研究进展

血脂异常是最重要的心血管疾病危险因素之一,降脂可减少动脉粥样硬化及其并发症的发生发展.他汀类药物能有效降脂,并已形成标准的治疗方案.然而,许多患者在最大耐受剂量的情况下血脂仍不能达标.人前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）基因与血脂代谢密切相关,它通过降解低密度脂蛋白受体（LDL-R）升高血胆固醇水平.     

前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂的研究进展

前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)是一种主要在肝细胞中表达的分泌型丝氨酸蛋白酶。PCSK9能够与低密度脂蛋白受体(LDLR)结合形成复合物,并通过溶酶体途径使LDLR降解,从而减少细胞表面LDLR的数量,最终导致血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平升高。近年来,PCSK9抑制剂成为一个治疗高胆固醇血症及动脉粥样硬化性心血管疾病(ASCVD)药物研发的新热点。目前全球上市了三款PCSK9抑制剂,包括依洛尤单抗(Evolocumab)、阿利珠单抗(Alirocumab)及小干扰RNA药物Inclisiran(Leqvio~?)。本文对PCSK9的结构、功能、抑制剂的研究进展进行了综述。     

前蛋白转化酶枯草溶菌素9在胆固醇代谢中作用的研究进展

<正>血浆LDL-C水平与动脉粥样硬化密切相关。清除血浆LDL-C主要通过肝脏低密度脂蛋白受体(LDLR)介导的内吞过程。家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)是常染色体显性遗传病.由于LDLR及LDLR配体(apolipoprotein B,ApoB100)的基因突变所致。2003年5月,Abifadel等发现前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein     

冠状动脉粥样硬化性心脏病的治疗新方向——PCSK9抑制剂

血脂异常,尤其是低密度脂蛋白胆固醇的升高,是冠状动脉粥样硬化性心脏病的主要危险因素之一.他汀类降脂药物因其多种副作用,不能完全满足临床的需要.前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂,通过抑制前蛋白转化酶枯草溶菌素9与低密度脂蛋白胆固醇受体的结合,降低血液中低密度脂蛋白胆固醇水平,从而有效地降低冠状动脉粥样硬化性心脏病事件的发生...     

急性心肌梗死患者血清LDL-C及血浆PCSK9浓度对临床不良心脑血管事件的预测价值

目的 研究急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血清低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和血浆前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin kexin ...     

前蛋白转化酶枯草溶菌素9基因多态性的106进展

前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)是近年来新发现的一种与调节胆固醇代谢密切相关蛋白,属前蛋白转化酶家族。PCSK9可通过调节低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平进而影响冠状动脉粥样硬化性心脏病、外周血管病、脑血管病、神经系统疾病及糖尿病等疾病的风险。近来研究表明,PCSK9基因多态性位点双向调节胆固醇水平。认识这些多态性位点,对于评估疾病严重性、预后或药物治疗反应有重要临床意义。本文就PCSK9基因多态性及其临床研究进展做一综述。     

瘦素促进人肝癌细胞Huh 7增殖活性的实验研究

目的观察瘦素对人肝癌细胞Huh7增殖活性的影响并初步探讨其可能的机制。方法在培养液中加入不同浓度的瘦素后，细胞计数并绘制生长曲线，MTT法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况，Western blot法观察Cyclin D1蛋白的表达。结果细胞计数发现处理组的细胞数明显高于对照组；MTT法检测细胞增殖显示瘦素可以促进Huh7细胞的增殖。有一定的时间和剂量依耐性；流式细胞仪检测结果显示瘦素能明显降低G0／G1期细胞比例并提高s期细胞比例，细胞凋亡率也有明显降低；Western blot法显示瘦素（100ng／ml）处理24h后，Cyclin D1蛋白的表达明显增高。结论瘦素可以明显的促进人肝癌细胞Huh7的增殖，可能是通过提高Cyclin D1蛋白的表达来实现其作用。     

Action of nucleotide phosphotransferase of Escherichia coli on nicotinamide riboside and nicotinamide mononucleotide.

The action of the nucleotide phosphotransferase of Escherichia coli on nicotinamide riboside and on its 5'-phosphate results in the addition of one phosphate moiety to each of the substrates. Although the proof is not conclusive, it is likely that the phosphate group is transferred to the 3'-hydroxyl of the ribose. This is in contrast to the behavior of the enzyme toward NAD in which only the adenylic acid portion is phosphorylated enzymically.     

Gli-1 siRNA induced apoptosis in Huh7 cells

AIM： To investigate the effects of Gli-1 small interference RNA （siRNA） on Huh7 cells, and the change of Bcl-2 expression in Huh7 cells. METHODS： Human hepatocellular carcinoma cells Huh7 were used. Cell viability was analyzed by 3-（4, 5-Dimethylthiazol-2-yl）-2, 5-diphenyl tetrazolium bromide （MTT） assay. The expressions of Gli-1 and Bcl-2 family members were detected by RT-PCR and Western blot. Apoptosis was detected by Flow cytometry using propidium iodide, measured by Hoechst 33258 staining using Advanced Fluorescence Microscopy and caspase-3 enzymatic assay. Cell growth was analyzed after treatment with Gli-1 siRNA and 5-fluorouracil （5-Fu）. RESULTS： Inhibition of Gli-1 mRNA in Huh7 cells through Gli-1 siRNA reduced cell viability. Gli-1 siRNA treatment also induced apoptosis by three criteria, increase in the sub-G1 cell cycle fraction, nuclear condensation, a morphologic change typical of apoptosis, and activation of caspase-3. Gli-1 siRNA was also able to down-regulate Bcl-2. However, Gli-1 siRNA resulted in no significant changes in Bcl-xl, Bax, Bad, and Bid. Furthermore, Gli-1 siRNA increased the cytotoxic effect of 5-Fu on Huh7 cell. CONCLUSION： Down-regulation of Bcl-2 plays an important role in apoptosis induced by Gli-1 siRNA in HCC cells. Combination Gli-1 siRNA with chemotherapeutic drug could represent a more promising strategy against HCC. The effects of the strategies need further investigation in vivo and may have potential clinical application.     

HBV rtA181T突变对Huh7细胞自噬的影响

目的探讨HBV逆转录酶区A181T(rtA181T)位点突变对Huh7细胞自噬的影响。方法 Huh7细胞分别转染1.3mer HBV野生型质粒(WT组)、1.3mer HBV rtA181T突变型质粒(181T组)及1∶1共转WT和rtA181T突变型质粒(WT+181T组)。Western Blot、免疫荧光检测细胞内HBV表面蛋白(HBs)表达水平,ELISA检测细胞外HBs Ag表达水平;Western Blot分析内源性自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)及P62表达水平,Real-time PCR检测自噬相关基因Atg5 mRNA、Beclin1 mRNA的转录水平;同时转染绿色荧光蛋白LC3后,免疫荧光检测自噬颗粒。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果免疫荧光观察181T组、WT组及WT+181T组细胞内均有HBs表达,Western Blot结果显示181T组细胞内的HBs表达高于WT组和WT+181T组。ELISA检测3组细胞培养上清的HBs Ag水平差异有统计学意义(F=66.739,P0.001),其中181T组细胞外的HBs Ag水平(0.111±0.056)远远低于WT组(3.157±0.490)和WT+181T组(2.240±0.797)(P值均0.001);WT组、181T组和WT+181T组均可见LC3-Ⅱ自噬颗粒聚集,181T组LC3-Ⅱ表达水平高于WT组和WT+181T组,而P62水平低于WT组和WT+181T组,差异均有统计学意义(P值均0.05);181T组自噬相关基因Atg5 mRNA、Beclin1 mRNA转录水平均明显高于WT组和WT+181T组(P值均0.05)。结论 HBV rtA181T突变可导致HBs Ag分泌障碍,并增加Huh7细胞的自噬水平。     

二甲双胍对人肝细胞Huh7脂质蓄积的影响及作用机制

目的研究二甲双胍对肝细胞脂质蓄积的影响及作用机制。方法体外培养人源Huh7肝细胞,细胞随机分为空白对照组及5 mmol/L二甲双胍、10 mmol/L二甲双胍、15 mmol/L二甲双胍处理组,确定最佳浓度后,使用LDL荷脂,然后分为空白对照组、LDL处理组和LDL+15 mmol/L二甲双胍处理组。实验终点,采用细胞增殖及毒性检测试剂盒检测细胞存活率,油红O染色和BODIPY脂质探针检测细胞内脂质含量,Dil-LDL检测细胞脂质摄取能力,Western blot分析固醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2)、SREBP-1c、低密度脂蛋白受体(LDLR)和前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)蛋白的表达情况。结果二甲双胍可抑制LDL诱导的肝细胞脂质蓄积,降低SREBP-2、SREBP-1c、LDLR和PCSK9的蛋白表达。结论二甲双胍可能通过减少转录因子SREBP-2和SREBP-1c,下调LDLR表达,从而抑制细胞脂质蓄积。     

Effect of positively charged sphingomyelin liposomes on cholesterol metabolism of cells in culture

When cultured human skin fibroblasts were incubated at 37 degrees C with sonically dispersed positively charged sphingomyelin liposomes, sphingomyelin accumulated within the cell. This resulted in stimulation of cholesterol synthesis by increasing 3-hydroxy-3-methylglutaryl Coenzyme A reductase activity. Activation was rapid and was not due to the efflux of cell cholesterol or to cell growth and proliferation. Neither low density lipoprotein cholesterol nor nonlipoprotein cholesterol could suppress the sphingomyelin-induced cholesterol synthesis or activate the acyl-CoA cholesterol acyltransferase, despite an increase in cell cholesterol content. In contrast, the response to 7-ketocholesterol or 26-hydroxycholesterol was not impaired. The effect of sphingomyelin on cholesterol synthesis was temporary and reversible. Twenty-four hours after removal of sphingomyelin, cholesterol synthesis returned to normal and could be suppressed by LDL. Accumulation of sphingomyelin in the cell decreased lysosomal cholesteryl ester hydrolase but had no effect on the microsomal cholesteryl ester hydrolase. These results suggest that accumulation of sphingomyelin in the cell markedly affects cellular cholesterol homeostasis. Resultant accumulation of cholesteryl esters in the presence of extracellular cholesterol could be relevant to atherogenesis.     

慢病毒介导的TSPY1对肝癌SMMC7721和Huh7细胞系增殖的影响

目的观察转染睾丸特异性蛋白1(TSPY1)慢病毒表达载体对肝癌细胞SMMC7721和Huh7细胞系增殖能力的影响。方法构建特异性的TSPY1慢病毒过表达载体稳定转染至SMMC7721和Huh7肝癌细胞系,采用荧光定量PCR和蛋白印迹技术检测TSPY1 mRNA和蛋白的表达情况,Cell Counting Kit-8(CCK-8)实验检测转染后细胞的增殖情况。结果在转染过表达TSPY1慢病毒的SMMC7721和Huh7细胞中,TSPY1 mRNA和蛋白的表达均明显上调(P0.01)。CCK-8细胞增殖实验发现,过表达TSPY1组SMMC7721和Huh7细胞的增殖能力比对照组增强。结论 TSPY1慢病毒表达载体可明显上调TSPY1 mRNA和蛋白表达,并能够促进肝癌SMMC7721和Huh7细胞的增殖。     

干扰素联合利巴韦林治疗对Huh7细胞微RNA122表达的影响

目的 探讨IFNβ联合利巴韦林(RBV)治疗对肝癌细胞株Huh7的微RNA122表达的影响.方法 Huh7细胞分别经过单用不同剂量RBV处理3 d、单用不同剂量IFNβ处理4 h,以及IFNβ联合RBV处理后,采用噻唑蓝(MTT)法检测其生长曲线,RT-PCR法检测IFN诱导基因54(ISG54)的表达,然后分别以小核核糖核酸6(U6)和单位细胞数为内参照,茎环结构实时PCR检测微RNA122表达变化.数据比较采用单因素方差分析,两两比较采用q检验.结果 MTT结果显示,RBV能以剂量依赖方式抑制Huh7细胞增殖,而IFNβ仅能轻微地且不能以剂量依赖方式抑制Huh7细胞增殖.RT-PCR结果显示,IFNβ能以剂量依赖方式诱导Huh7细胞ISG54 mRNA表达,而RBV单用和联合IFNβ均不能以剂量依赖方式诱导ISG54 mRNA表达.以U6为内参照,在RBV终浓度为3.125 mg/L时,联合lFN8 100 U/mL和1000 U/mL,微RNA122相对表达量分别为0.770±0.082和0.720±0.045,与单用IFNβ组相比,差异有统计学意义(q=4.623,q=5.112;均P<0.05).提示存在协同效果,而在RBV终浓度为6.25 mg/L和12.5 mg/L时无协同效果.以细胞数为内参照,RBV单用和联合IFNβ均能下调细胞微RNA122表达,以RBV终浓度为3.125 mg/L明显,联合IFNβ 10 U/mL、100 U/mL和1000 U/mL时,微RNA122相对表达量分别为0.680±0.055、0.560±0.084和0.610±0.030,与单用IFNβ组相比,差异有统计学意义(F=4.121,P<0.05),亦提示存在协同效果.结论 RBV在终浓度为3.125 mg/L时,能协同IFNβ下调Huh7细胞微RNA122表达,这可能为临床上RBV提高IFN抗HCV疗效的一个新的分子机制.