上海市闵行区首例人感染猪链球菌2型病例流行病及病原学调查

目的调查分析上海市闵行区1例猪链球菌2型感染病例的流行病学和病原学特征,为上海地区少见和输入性人畜共患急性传染病疫情预警和防控措施制定提供依据。方法通过询问患者病史、流行病学史以及现场环境调查,查找感染来源与感染途径,并对脑脊液进行病原培养分离猪链球菌、对分离的菌株进行Vitek2GP鉴定、PCR技术检测种属特异性基因、毒力基因。结果患者临床表现为高热伴头痛、恶心、呕吐、颈部僵直,血液检测显示C-反应蛋白显著增高、淋巴细胞百分比增高,血小板计数呈下降趋势,头部CT检查显示双侧筛窦、双侧上颌窦炎症,脑脊液白细胞计数、免疫球蛋白明显升高。患者分离株种属特异性16SrRNA基因、毒力因子cps-2J和ef均呈阳性。结论该病例为人感染猪链球菌2型脑膜炎病例;预后良好无后遗症与其及时的诊断治疗以及含毒力因子种类有关;医疗机构应尽早识别早期感染病例,明确诊断,及时治疗,避免发生重症和死亡病例;农业、卫生、市场管理等部门应完善动物疫情通报,建立主动哨点监测。     

云南省首例人感染猪链球菌病的病原学分析

目的 对猪链球菌菌株进行鉴定,了解其病原学特征.方法 对菌株进行了菌落形态、生化鉴定、血清凝集、PCR 检测、16S rRNA 细菌种属鉴定、PFGE 检测和MLST 分型.结果 菌落形态、生化鉴定、血清凝集、16S rRNA 细菌种属鉴定,证明此菌株为猪链球菌2 型;经PCR 检测16SrRNA 和毒力基因均为阳性;PFGE 检测结果表明此株菌同3 株参考菌株相似性很低;MLST 分型属于高致病性ST1 型.结论 此次分离到菌株的为云南省首例人感染的猪链球菌2 型,是强毒力株.     

广西人感染猪链球菌病的病原学及分子生物学鉴定分析

目的:用细菌分离培养和分子生物学方法鉴定猪链球菌,为确定疫情、及时治疗及控制提供依据.方法:疑似患者血液、脑脊液,死亡患者的肝、脾、肾等尸检组织进行分离培养、API 20 Strep生化鉴定、药敏试验及PCR检测.结果:从11份血液、4份脑脊液标本中分离出5株猪链球菌,API 20 Strep生化鉴定为猪链球菌Ⅱ型;经PCR检测5株菌均具有猪链球菌种特异性基因16St‘RNA(spe)基因、猪链球菌2型特异性荚膜多糖编码基因(cps2J)和猪链球菌溶菌酶释放相关蛋白编码基因(mrp),1例死亡患者尸检组织标本和2例患者(1例为死亡病例)的脑脊液标本,具有猪链球菌2型特异性荚膜多糖编码基因(cps2J),脾脏组织和1份脑脊液标本具有猪链球菌溶菌酶释放相关蛋白编码基因(mrp),全部确定为猪链球菌2型,并携带强毒力基因.药敏试验表明,猪链球菌2型对万古霉素、氯霉素、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢曲松、克林霉素敏感.结论:广西6起疫情均为人感染猪链球菌2型所致.     

玉林市人猪链球菌病1例报告

2006年11月13日,玉林市报告1例人猪链球菌病,经广西疾病预防控制中心检测鉴定,诊断为人感染猪链球菌Ⅱ型。1材料和方法对患者、患者家属及有关人员进行调查、现场考察、实验室检查和培养鉴定等。2结果2.1病历简介患者周某,男性,55岁,于11月5日自觉有发热、头痛、畏寒,服安乃,症     

一起人感染猪链球菌的病原学检测

2007年8月南京军区总医院接诊1例疑似人感染猪链球菌病例,病人症状主要为高热(最高体温达40.2℃),头痛、意识模糊,昏迷,脑膜刺激症阳性等,全身皮肤无瘀点瘀斑。为尽快查明病因,该院进行了致病微生物的分离及鉴定,并将疑似菌株送本中心检测,现将检测情况报告如下。1材料与方法1.     

宁波市首例人感染猪链球菌病的病原学分析

猪链球菌病是由猪链球菌引起的人-猪重症感染,病死率高.2005年7～8月份,四川省爆发了猪链球菌病,造成多人死亡,引起人类严重感染的疫情,对人类的生命健康造成了严重威胁.2007年5月,宁波市发现了首例猪链球菌引起化脓性肭膜炎的病例,我们对这一病例的病原菌进行了研究分析,现将检测结果报告如下.     

一起人感染猪链球菌疫情的调查与处理

2004年8月下旬姜堰市农村某自然村发生一起感染性疾病疫情,3例患者以发热、头痛、腰痛为主要症状,严重者出现颈强直,意识障碍、昏迷。经流行病学调查及对病人的血液、脑脊液标本进行检测,诊断为Ⅱ型猪链球菌感染。通过采取针对性措施,阻止了疫情的蔓延。现将结果报告如下。     

江苏省首例人感染ST1型猪链球菌的快速检测及分子特征分析

目的对2014年江苏省一起疑似人感染猪链球菌病的病原菌进行实验室快速检测并分析其分子特征。方法采用实时荧光PCR方法对病人标本中提取的DNA进行猪链球菌血清2型特异基因检测,运用PCR方法进行猪链球菌毒力基因鉴定及多位点序列分析。结果病人标本中检测到猪链球菌种特异基因(16srRNA)和血清2型荚膜多糖编码基因(cps-2J),5种毒力基因(mrp,sly,ef,gapdh,fbps)全部阳性,多位点序列分析结果为ST1型。结论该病例的病原菌为携带5种毒力基因的ST1型猪链球菌血清2型菌株,该型别在江苏省尚属首次报道。     

人感染猪链球菌脑膜炎临床表现及脑脊液变化特点

目的 探讨人感染猪链球菌脑膜炎患者临床表现及其治疗前后脑脊液变化特点。方法 分析8例人感染猪链球菌脑膜炎患者临床资料，并对其脑脊液白细胞计数及分类分别于治疗前、治疗后7～14d及15～28d进行监测。结果 8例患者潜伏期为3～7d，其临床特征除具其他脑膜炎特征外，易合并突发性耳聋、重听、口唇疱疹等症状；脑脊液治疗前白细胞分类均以多核细胞为主（0．82～0．98），治疗后7～14d4例、15～28d2例患者脑脊液白细胞计数未达正常，其分类均以单核细胞为主（0．55～0．98）。结论 人感染猪链球菌脑膜炎患者临床症状重，经抗菌治疗后脑脊液白细胞分类由多核细胞为主较快转为以单核细胞为主，此变化特点与常见化脓性脑膜炎不同。     

湖南省1例猪链球菌2型菌株的PCR检测

目的从分子水平鉴定湖南省一例疑似猪链球菌病病原菌的种、型及毒力基因,为流行病学和临床提供诊断分析依据。方法采用猪链球菌2型多重PCR快速诊断试剂盒以及另外合成的四对引物进行聚合酶链反应。结果用三重PCR试剂盒检出该菌携带cps2以及mrp基因,用合成的16srRNA、cps2j、mrp以及sly引物进行PCR扩增电泳后均显示阳性条带。结论2006年8月湖南省一例疑似猪链球菌病例确为猪链球菌2型感染,并且该菌携带多种毒力基因。     

贵州省死亡病例1型猪链球菌的分离及分子生物学特征分析

目的 对来自贵州省1例疑似人感染猪链球菌患者的血液标本进行细菌分离鉴定,了解该菌株的分子生物学特征,为病例的快速确诊提供病原学依据。方法 采用血培养法对疑似感染猪链球菌患者的血液进行细菌分离培养,对分离菌株采用细菌16S rRNA 基因通用引物进行PCR扩增和DNA序列测定,将测序结果通过GenBank数据库的BLAST程序进行在线比对,再用猪链球菌种特异的16S rRNA 基因进行猪链球菌种的鉴定,进一步分别采用PCR检测常见强致病性血清型1、2、7和9型特异的cps 1j、cps 2j、cps 7h和cps9h基因以鉴定其血清型,并对菌株毒力基因gapdh、mrp、sly和ef进行检测。结果 血培养分离出1株链球菌可疑菌株,序列比对结果显示该分离菌株16S rRNA基因与猪链球菌的同源性最高,进一步的猪链球菌特异性PCR检测显示分离菌株16S rRNA基因为阳性,血清型特异PCR检测结果显示cps 1j基因为阳性,而cps 2j、cps 7h和cps 9h基因为阴性,毒力基因检测结果显示分离菌株gapdh,sly和ef毒力基因为阳性,而mrp为阴性。结论 本次从疑似感染猪链球菌死亡病例分离的菌株为猪链球菌1型,其毒力特征为gapdh、sly和ef基因阳性,mrp基因阴性,该病例为1型猪链球菌感染所致,且菌株毒力较强。     

Human case of Streptococcus suis serotype 16 infection

Streptococcus suis infection is an emerging zoonosis in Southeast Asia. We report a fatal case of S. suis serotype 16 infection in a Vietnamese man in 2001.     

猪链球菌2型溶血素sly基因的表达及其产物的纯化和活性研究

目的 克隆并表达猪链球菌2型(SS2)溶血素基因(sly),为筛选SS2疫苗保护性抗原奠定基础.方法 用PCR方法从SS2临床分离株05ZYH33的基因组DNA中扩增出溶血素基因片段,将目的 基因插入表达载体pET-30b(+)中,构建重组表达载体pET30b-sly.重组载体经限制性内切酶酶切和DNA测序鉴定后,转化大肠埃希菌(E.coli Rosetta).IPTG诱导表达,镍离子亲和层析纯化重组蛋白,鉴定目的 蛋白的免疫学活性以及溶血活性.结果　PCR扩增的sly基因长度约为1500 bp,经测序分析,插入载体的sly基因序列准确并保持了正确的读框.经IPTG诱导的目的 蛋白表达量约占总蛋白的30%,亲和层析纯化后,蛋白纯度达80%以上.Western blot检测证实该蛋白能与感染SS2的人血清发生特异性结合.溶血试验表明重组蛋白溶血素能使猪红细胞发生溶解,溶血价为256.结论 成功构建了表达载体pET30b-sly,该载体可在大肠埃希菌中表达,表达蛋白具有免疫反应原性及溶血活性.     

安徽省首例人感染猪链球菌病的流行病学调查

目的研究安徽省首例人感染猪链球菌病病例，为预防控制该病提供依据。方法运用流行病学方法进行个案调查并采集病人的早期血标本进行病原分离和病毒基因检测。结果病人急性起病，有高热、头痛等全身中毒症状，以中毒性休克为主要临床表现。患者感染的直接因素为宰杀、加工病死猪，感染途径为皮肤直接接触。结论该病例系由猪链球菌血清2型引起的人-猪链球菌感染，为安徽省首次报告的人感染猪链球菌病。     

宁波市首例人感染猪链球菌2型的实验室鉴定

目的:对首例人感染猪链球菌2型菌株进行鉴定,了解病原学及毒力。方法:将疑似猪链球菌感染患者血液、脑脊液进行增菌培养,对所分离的病原菌进行染色形态观察、APIStrep20生化鉴定;合成引物检测菌株的16SrRNA、cps2J、mrp、ef、sly、gapdh基因片段;制作cps2J、mrp、ef、sly长片段产物,进行基因序列测定。结果:从患者血液和脑脊液中分离的病原菌,经API20Strep生化鉴定编码为4641453,确认为猪链球菌2型,16SrRNA扩增结果进一步证实该菌为猪链球菌2型,基因测序结果与Genebank中注册05ZYH33的猪链球菌2型序列同源性在99%以上。结论:根据流行病学调查、临床表现和实验室鉴定结果,本起人感染猪链球菌的病原为猪链球菌2型,带有多种毒力基因其分子生物学特征典型。     

2型猪链球菌菌毛蛋白编码基因SSU0474生物学特性分析

目的 构建2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33菌毛蛋白编码基因SSU0474缺失突变株,并对其生物学特性进行分析。方法 利用同源重组原理构建SSU0474缺失突变株,PCR及RT-PCR对筛选的突变株进行验证,革兰染色和电镜比较突变株SSU0474与野毒株之间的差异,小鼠实验进一步比较突变株的毒力变化。结果 引物特异性PCR证实SSU0474基因缺失突变株构建成功;革兰染色结果显示突变株和野毒株染色特性差异无统计学意义,SSU0474基因的缺失未明显影响细菌的生长速率;电镜结果表明突变株SSU0474细胞壁明显变薄,细菌菌毛样附属结构缺失;小鼠毒力实验结果提示突变株SSU0474的毒力明显下降。结论 本研究成功获得菌毛蛋白编码基因SSU0474缺失突变株,并对该基因的生物学特性进行了初步探讨,为系统研究2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33菌毛的生物学功能提供依据。     

人感染2型猪链球菌快速多重PCR检测方法的建立

目的：用多重PCR从临床标本中同时检测猪链2型特异性及5个毒力相关基因，建立SS2实验室快速诊断及应急检测的核酸鉴定方法。方法：根据已报告的引物序列设计并合成8对引物（含1对内对照引物），经过PCR反应条件的优化与组合，采用同一PCR反应条件与循环程序，直接从临床标本或培养物中同时一次性扩增属特异性（tuf）、种特异性（16S rRNA）、荚膜多糖（cps2J）、溶菌酶释放蛋白（mrp）、细胞外蛋白因子（ef）、溶血素（sly）和甘油醛-3-磷酸脱氢酶（gapdh）等基因；并对方法的特异性和敏感性进行评估。结果：运用所建立的方法可直接从临床疑似猪链感染患者的脑脊液、血液、双相培养液和血培养物中一次性扩增出上述8对引物的目的基因，并经基因序列分析、细菌分离培养和生化鉴定进一步证实。其敏感性为78cfu（克隆形成单位）。结论：所建立的方法具有敏感、特异、快速、简便的特点，可应用于SS2感染应急检测、流行病学监测和实验室快速诊断。     

猪链球菌2型反应调控因子RevS突变株的构建

目的构建猪链球菌2型强毒株05ZYH33反应调控因子ReυS基因敲除突变体，研究基因敲除后对细菌基本生物学性状及对小鼠和猪的致病性的影响。方法构建中间为壮观霉素抗性基因，两侧为ReυS编码基因上、下游同源序列的基因敲除载体，通过同源重组和PCR法鉴定，获得ReυS编码基因完全被壮观霉素抗性基因替代的突变株。体外观察基因敲除后细菌的稳定性、生长曲线、菌落形态、溶血性、染色情况、镜下形态及蛋白表达等基本生物学性状有无发生明显改变。以10^8CFU野毒株和缺失株分别感染BALB／c小鼠和20日龄仔猪，观察致病性有无明显区别。结果PCR分析显示ReυS编码基因完全被壮观霉素抗性基因替代，基因敲除后细菌的基本生物学性状无明显改变。动物感染实验显示，RevS缺失株对小鼠的致病性显著减弱，但对其主要宿主猪的致病性未见显著改变。结论成功构建了猪链球菌2型强毒株05ZYH33反应调控因子ReυS基因敲除突变株，基因敲除后未明显影响细菌的基本生物学性状，但对小鼠和猪的致病性有所减弱。     

湖南省首例人猪链球菌感染病例的流行病学调查及预防控制

目的查明人-猪链球菌感染病例的传染源及传播途径,为预防控制疫情提供依据。方法采用现场流行病学方法,调查患者及其工友等,查阅临床资料及进行相关实验室检测等。结果2006年8月,湖南省报告1例人-猪链球菌感染病例,患者经过15d的治疗痊愈出院。病例所染之猪链球菌来源于病猪,系通过受伤的皮肤感染,无人传人现象。结论控制牲猪疫情,正确处理病死牲猪,做好屠宰、加工、销售人员个人防护是防止本病蔓延的有效措施。