自体骨髓干细胞移植治疗急性心肌梗死围手术期并发症分析

目的：分析自体骨髓干细胞经冠脉移植治疗急性心肌梗死患者围手术期并发症情况。方法：抽取2004—09／2006—12唐山工人医院收治的急性心肌梗死患者40例，均行经皮冠状动脉介入治疗＋标准药物治疗＋经冠脉注入自体骨髓单个核细胞治疗，实验方案经医院伦理委员会批准，并获得患者知情同意，术前及术后根据临床需要给予标准药物治疗。于患者双侧髂后上棘穿刺，抽取骨髓，滤筛去除脂肪颗粒及骨渣，共采集100-120mL，经密度梯度离心获得骨髓单个核细胞悬液12～15mL，室温下保存少于4h。两侧冠脉造影，左前降支植入支架后，将导丝放置于原病变远端，沿导丝将over the wire球囊置入支架内，将分离的骨髓单个核细胞悬液经over the wire球囊导管中心腔内注入梗死相关动脉血管远端，每次注射4．0～5．0mL，抽空球囊间歇2min后再次同法注射，反复共3次。结果：40例行骨髓单个核细胞冠脉移植的心肌梗死患者均进入结果分析。围手术期各种并发症共34例次，其中血管并发症发生率20％，胸痛17．5％，心律失常15％，低血压12．5％，心功能障碍10％，迷走神经反射7．5％，低血糖反应2．5％。结论：随着冠状动脉介入治疗技术的开展和操作的规范，手术成功率逐步提高，但仍然会在围手术期出现各种并发症及突发事件。提示应严密观察病情，有针对性地采取预防措施和正确的应急处置，从而减少干细胞移植手术的风险。     

骨髓单个核细胞移植后心肌梗死区的血管生成及细胞因子分泌

背景：干细胞移植为治疗心肌梗死带来新的希望,但研究结果不一致,存在争议。细胞移植能否长期持久地改善心脏功能、改善缺血心功能的机制这些问题均不明确。目的：观察经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植对急性心肌梗死犬心功能、血管生成和细胞因子分泌的影响。方法：杂种犬分为骨髓单个核细胞组（n=10）和生理盐水组（n=6）,前上嵴或髂后上棘穿刺分离得到骨髓单个核细胞,结扎冠状动脉前降支建立急性心肌梗死模型,于心肌梗死后2h分别经冠状动脉内移植骨髓单个核细胞和生理盐水,心肌梗死后2h及6周时分别测定超声心动图指标,骨髓单个核细胞移植后6周vWF免疫组化染色检测心肌组织的毛细血管密度,RT-PCR检测血管内皮生长因子（血管内皮生长因子188、血管内皮生长因子164）、碱性成纤维细胞生长因子、基质金属蛋白酶9mRNA的表达。结果与结论：经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植后6周,超声心动图显示,骨髓单个核细胞组射血分数和每搏输出量比生理盐水组显著升高;梗死边缘区新生血管数量明显高于生理盐水组。骨髓单个核细胞组梗死区血管内皮生长因子188、血管内皮生长因子164和碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达水平显著高于生理盐水组。骨髓单个核细胞组梗死区基质金属蛋白酶9mRNA表达水平显著低于生理盐水组。结果说明自体骨髓单个核细胞经冠状动脉内注射移植,改善急性心肌梗死后心功能,促进梗死边缘区血管生成,提高促血管生长因子血管内皮生长因子188、血管内皮生长因子164和碱性成纤维细胞生长因子的mRNA表达水平,减少基质金属蛋白酶9mRNA表达水平。     

心肌及冠状动脉内移植骨髓单个核细胞对猪缺血心肌侧支血管的生成

背景:目前有研究表明,心肌内直接注射骨髓单个核细胞可以使心肌梗死瘢痕区血管新生,改善缺血心肌血供。目的:观察心肌内及冠状动脉内移植自体骨髓单个核细胞对猪急性心肌梗死后缺血心肌侧支血管生成的作用。方法:22只小型猪制备急性心肌梗死模型后分为4组:心肌内移植组造模后即刻在缺血心肌内注射自体骨髓单个核细胞悬液;心肌内对照组同样方法即刻心肌内注射Hank’s平衡盐溶液;冠状动脉内移植组在造模后1周,左冠状动脉内注射自体骨髓单个核细胞悬液;冠状动脉对照组在造模后1周,同样方法左冠状动脉内注射Hank’s平衡盐溶液。结果与结论:心肌内及冠状动脉内移植骨髓单个核细胞后1周,血清碱性成纤维细胞生长因子及血管内皮细胞生长因子水平差异无显著性意义,但明显高于各自对照组(P<0.01);移植后4周,心肌内移植组与冠状动脉内移植组小血管密度差异无显著性意义,但明显高于各自对照组(P<0.01);左室舒张末压差异无显著性意义,但明显低于各组对照组(P<0.01)。提示心肌内及冠状动脉内移植骨髓单个核细胞均有助于促进猪缺血心肌血管新生及侧支循环形成。     

核素显像评价自体骨髓单个核细胞移植治疗心肌梗死后心力衰竭

目的 核素显像观察经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植治疗后心肌梗死心力衰竭患者的心肌血流灌注及心功能的变化,研究自体骨髓单个核细胞移植对于心肌修复和心功能的影响.方法 24例前壁心肌梗死合并心力衰竭的患者,非随机法(患者意愿)分为两组.细胞移植组(BM-MNCs组)10例,经冠状动脉骨髓细胞注射+介入治疗+标准药物治疗;对照组14人,介入治疗+标准药物治疗.所有患者分别于移植术前、术后12个月行超声心动、心肌灌注静息显像及平衡法门控心室显像.结果 术后12个月BM-MNCs组心肌血流灌注评分明显改善(46.67±3.44 vs 29.00±4.50,P=0.0015),对照组较术前无明显改变(46.33±2.80 vs 47.00±4.12,P>0.05),两组间差异具有统计学意义(29.00±4.50 vs 47.00±4.12,P=0.0157).BM-MNCs组心肌梗死区面积明显减少[(38.00±3.86)% vs (29.44±4.73)%,P=0.0009],对照组术后无显著变化[(32.70±5.02)% vs (30.30±4.92)%],两组间的变化无统计学意义.门控心血池显像结果示:移植组术后12个月LVEF值可见轻度升高,但是差异无统计学意义,结果与超声心动图一致.结论 核素心肌显像对心肌梗死后心力衰竭患者BM-MNCs移植后的疗效判断有重要价值,自体骨髓单个核细胞移植后,心肌梗死区域血流灌注得到了明显的改善,心功能得到一定的提高.     

脂肪干细胞和骨髓单个核细胞自体移植治疗心肌梗死作用的比较

背景：关于骨髓单个核细胞促使梗死心肌再生存在很大争议，早期研究均认为非常有效，甚至可以分化为心肌细胞，但最近的文献却基本否认了这种说法，认为单个核细胞仅可以有限的促进血管生成。目的：比较体外培养的脂肪干细胞和骨髓单个核细胞自体移植后对促进心肌细胞再生、血管新生及心肌梗死后心功能改善之间的差别。设计、时闻及地点：随机对照动物实验，于200401／2005-09在解放军总医院心内科实验室与沈阳军区总医院实验室完成。材料：清洁级4月龄雄性新西兰白兔55只，10只用于骨髓单个核细胞标记追踪，剩余兔随机分为脂肪干细胞组、骨髓单个核细胞组、空白对照组，15只/组。方法：各组兔均结扎冠状动脉前降支制作心肌梗死模型，造模同时取少量腹部脂肪组织分离培养脂肪干细胞，抽取髂骨骨髓分离培养骨髓单个核细胞，用于自体移植。3周后再次开胸，脂肪干细胞组、骨萌单个核细胞组分别于梗死心肌直接注射自体脂肪干细胞和骨髓单个核细胞，空白对照组注射磷酸盐缓冲液。继续培养5周，将专用于骨萌单个核细胞标记追踪的10只免行DAPI和BrdU标记，脂肪干细胞组的移植细胞行Brdu标记。主要观察指标：移植细胞标记情况。移植后心功能变化。苏木精．伊红染色和免疫组织化学检测结果。结果：脂肪干细胞组心肌梗死区可见大量移植细胞存在，可分化为心肌细胞、内皮细胞、参与新血管形成；骨髓单个核细胞组DAPI及BrdU标记后均未于梗死心肌组织发现单个核细胞存在。细胞移植前3组动物心功能基本相似；细胞移植后5周与空白对照组比较，脂肪干细胞组超声心动图及左心室压力曲线检测均显示心功能显著改善（P〈0.05），骨髓单个核细胞组仅等容收缩期左心室压力最大上升速率明显改善（P〈0.05）。脂肪干细胞组、骨萌单个核细胞组的血管密度均大于空白对照组（P〈0．01，P〈0.05），但前者于心肌梗死中心和边缘均可见大量血管，而后者仅在梗死区边缘血管密度增高。结论：脂肪干细胞移植可以促进心肌再生和新血管形成，进而改善心功能；而骨萌单个核细胞移植仅能促进血管新生，对心功能改善效果有限。     

经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植治疗急性前壁心肌梗死:12个月疗效评价

目的:经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植有助于急性心肌梗死后左心室功能的恢复,但关于移植后远期疗效的临床报道较少.采用随机、对照、前瞻性的临床实验,随访12个月,评价经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植治疗急性前壁心肌梗死远期疗效.方法:实验于2005-05/2006-09在复旦大学附属华山医院心导管室完成.①实验分组:入选华山医院心内科26例ST段抬高的急性前壁心肌梗死住院患者,随机分组:骨髓单个核细胞移植组(n=14)行经皮冠状动脉介入治疗联合经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植,经皮冠状动脉介入术当天,选取左髂后上棘为穿刺点行骨髓单个核细胞的分离纯化:对照组(n=12)仅接受经皮冠状动脉介入治疗.患者对治疗知情同意,治疗经医院伦理委员会批准.②实验评估:术后6,12个月,应用超声心动图评价心脏收缩功能和几何构犁参数改变;应用电化学发光免疫学方法检测血清氮末端脑钠素前体水平,间接评价心功能的变化;明尼苏达心力衰竭问卷评价患者生活质量.结果:①超声心动图显示,经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植6个月后,骨髓单个核细胞移植组左室射血分数明显升高(P＜0.05),而随访至12个月时,移植组左事射血分数有进一步增加的趋势,但与6个月时比较则无统计学意义,心脏几何构型参数改变均无统计学意义.②骨髓单个核细胞移植术后6个月,骨髓单个核细胞移植组血清氮末端脑钠素前体水平明显降低(P=0.001):而术后6个月与12个月比较,血清氮末端脑钠素前体水平仍有进一步下降的趋势,但无统计学意义.③心力衰竭问卷评分提示,骨髓单个核细胞移植有利于急性前壁心肌梗死患者生活质量的改善.结论:经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植治疗急性前壁心肌梗死,可以改善患者临床症状,由于样本量较小,对心肌梗死后心力衰竭的远期疗效仍然尚不确定.     

骨髓单个核细胞不同植入方式致大鼠心功能恢复结果的差异

目的：在结扎大鼠冠脉建立心肌梗死模型的基础上，通过4．6-联脒-2-苯基吲哚标记骨髓单个核细胞，初步观察外周静脉植入与局部注射植入骨髓单个核细胞对心脏功能恢复的疗效差异，及其在心肌梗死区域的分布情况。方法：实验于2002-01／2003-10在中南大学湘雅医学院生理学系血液生理研究室完成。选取清洁级近交系3月龄Wistar大鼠40只，随机分为正常对照组、心肌梗死对照组、静脉注射移植组、局部注射移植组，10只／组。除正常对照组外，其余组建立冠脉结扎心肌梗死模型。术后1周，心肌梗死对照组不给药，静脉注射移植组静脉注射骨髓单个核细胞，局部注射移植组局部注射骨髓单个核细胞。术后1个月通过心功能检测比较不同移植方式对整体心功能恢复的差异，镜下观察移植的4，6-联脒-2-苯基吲哚标记细胞在心肌梗死区的分布特征及病理形态学变化，采用图像分析系统评价各组左心室心肌梗死面积、心室壁厚度、新生血管的变化。结果：实验选用大鼠40只，全部进入结果分析。①骨髓单个核细胞静脉移植在心肌梗死大鼠体内的分布：大部分布在心肌梗死区及其周围，脾脏以及骨髓也有分布，而肺、肝、肾等组织器官中未发现标记细胞。②术后1个月心肌梗死区移植细胞的鉴定：静脉注射的骨髓单个核细胞细胞核呈蓝色，细胞数目少；局部注射的骨髓单个核细胞细胞核呈蓝色，细胞数目多。③术后1个月各组大鼠心肌组织切片的病理形态学观察：正常对照组心肌排列有序，未见坏死等改变；心肌梗死对照组心肌组织明显纤维化，心室壁明显变薄；静脉注射移植组心室壁变厚，恢复的心肌位于梗死区中心和／或周边；局部注射移植组新生和或恢复的心肌位于梗死区中心和／或周边，心室壁明显变厚。④术后1个月不同移植方式对心肌梗死大鼠血流动力学的影响：与正常对照组比较，心肌梗死对照组、静脉注射移植组、局部注射移植组动脉收缩压、动脉舒张压、左室收缩压、左室压力最大上升及下降速度均显著降低．左室舒张末压明显升高（P〈0．05）、局部注射移植组最为显著（P〈0．05）．⑤术后1个月不同移植方式对心肌梗死大鼠左心室心肌梗死面积、室壁厚度、心肌梗死区域毛细血管生成的影响：与正常对照组比较，局部注射移植组、静脉注射移植组左室心肌梗死面积均显著降低（P〈0．05）．左心室厚度均显著增厚（P〈0．05），梗死区新生的毛细血管均显著增多（P〈0．05），且局部注射移植组最为明显（P〈0．05）结论：静脉移植或局部注射植入的骨髓单个核细胞主要分布于心肌梗死大鼠体内的心肌梗死区域，采用局部注射梗死区细胞数目明显多于静脉移植。两种移植方式均能促进宿主心脏缺血等损伤病灶的血管增殖与血管新生，但局部注射修复心肌梗死的效果明显优于外周静脉移植。     

皮下隧道右贵要静脉穿刺置管用于危重病患者的护理观察

急性心肌梗死早期血运重建能减少梗死面积，却不能逆转心肌的坏死过程。心肌收缩单位的丢失最终导致心功能衰竭。所以心肌梗死的近期死亡率有降低，但远期死亡率未见明显改善。骨髓单个核细胞移植不存在免疫排斥和伦理问题，可以明显缩小心肌梗死面积，改善心功能。2003年3月～2004年7月，我院对33例患者实施了自体骨髓单个核细胞经冠状动脉内移植，     

自体骨髓单个核细胞经冠状动脉移植对心肌梗死患者心脏整体功能及局部心肌运动的影响

目的：采用经冠状动脉途径进行自体骨髓单个核细胞移植治疗心肌梗死，通过组织多普勒多巴酚丁胺负荷超声心动图检查，观察移植前后患者整体及坏死局部心脏功能变化，以了解自体骨髓单个核细胞介入移植治疗心肌梗死的可行性及有效性。方法：①选择2003—09／2004—03在哈尔滨医科大学附属第二医院心内科住院的急性透壁性心肌梗死患者68例，随机选择其中10例进行自体骨髓单个核细胞经冠状动脉移植。均为男性，平均年龄（52&;#177;10）岁。术前签署知情同意书并同意术后随访。②骨髓单个核细胞的获取：介入手术当天，约于细胞注射前3h进行。选择髂后上棘行骨髓穿刺术，抽取骨髓60～80mL，离心后，取单个核细胞层配成骨髓单个核细胞悬液。所获取的骨髓单个核细胞平均为（7．67&;#177;1．34）&;#215;10%9L^-1，细菌和真菌培养均为阴性结果。⑨骨髓单个核细胞经冠状动脉移植：细胞移植于急性心肌梗死后后第7～14天进行。将直径2．5mm的01W球囊置于心肌梗死边界区（血管堵塞部位），10min内缓慢注入骨髓单个核细胞悬液10mL。④移植后心脏整体功能和局部功能评估；组织多普勒超声心动图检查：分别于单个核细胞移植术前及术后7，30，90及180d行组织多普勒多巴酚丁胺负荷超声心动图检查。整体心功能测定：左室长轴取二尖瓣水平M型，分别测左室舒张末期内径，左室收缩末期内径、二尖瓣侧环心肌舒张早期峰值运动速度与舒张晚期峰值运动速度比值；并计算出每搏输出量、左室短轴缩短率等。Simpson法测量左室射血分数。了解坏死局部心肌运动情况：采用组织多普勒小剂量多巴酚丁胺负荷试验测量坏死局部心肌运动，在10μg／（kg&;#183;min）时心肌运动改善最明显。于静息状态、各剂量输注3min后和终止多巴酚丁胺输注5min后，连续监测超声心动图，分别取心尖四腔心、心尖两腔心、心尖长轴切面，将每个切面分成3个节段（即基底部、中间段、心尖部），并于每个切面的瓣环水平取样，测量局部节段性心肌运动的最大位移（局部心肌最大位移的大小取决于存活心肌的数量，存活的心肌细胞多则局部心肌最大位移大）。⑤随访：患者于术后7，30，90和180d在本院行组织多普勒超声心动图及上述其他检查，并观察其安全性。⑥治疗前后的比较用配对t检验。结果：心肌梗死患者10例均进入结果分析，并完成随访。①心脏整体功能：骨髓单个核细胞移植前后左室舒张末期内径，左室收缩末期内径、二尖瓣侧环心肌舒张早期峰值运动速度／舒张晚期峰值运动速度、每搏输出量、左室短轴缩短率差异不明显（P〉0．05）。②心脏局部功能：骨髓单个核细胞移植后负荷状态下局部心肌运动明显改善[最大位移：基底段术前（49．58&;#177;10．18）mm，术后6个月（61．91&;#177;16．70）mm，t=1．82，P〈0.05；中间段术前（31.89&;#177;42）mm，术后6个月（41．55&;#177;9．94）mm，t=2．97，P〈0.05；心尖部术前（13．60&;#177;6．65）mm，术后6个月（22.28&;#177;8.31）mm，t=2．33，P〈0．051。③随访过程中有1例患者出现心律失常。结论：①采用组织多普勒小剂量多巴酚丁胺负荷超声心动图检查对患者局部心肌最大位移进行定量分析，可间接评估梗死区心肌的存活情况。②骨髓单个核细胞移植可以明显增加梗死区域存活的、有功能的心肌细胞的数量增加。但是，患者心脏的整体功能无明显改善，推测可能与所选患者梗死面积较小，且均得到及时血运重建治疗，致使患者的心脏功能在细胞移植术前得到了最大的保留有关。③经冠状动脉途径移植自体骨髓单个核细胞治疗心肌梗死足比较安全的。④骨髓细胞移植的最佳的时机很可能是心肌梗死发生后的7～14d。     

经冠状动脉移植自体骨髓单个核细胞修复犬梗死心肌

背景:细胞移植治疗心肌梗死为重建受损心肌带来希望,但移植后的细胞分化以及细胞移植能否长期持久地改善心脏功能等问题均不明确.目的:观察骨髓单个核细胞经冠状动脉移植入犬梗死心肌后,在心肌组织的分布、分化情况以及对心功能的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-07/2008-03在泰达国际心血管病医院完成.材料:成年杂种犬16只,随机分为细胞移植组10只、模型对照组6只.方法:细胞移植组于髂前上嵴或髂后上棘穿刺抽取骨髓,经Ficoll密度梯度离心法分离获取骨髓单个核细胞,行CM-Dil标记.两组犬均结扎冠状动脉前降支建立急性心肌梗死模型,于心肌梗死后2 h,细胞移植组向心肌梗死区注射骨髓单个核细胞悬液1 mL(3×107～1×108个细胞),模型对照组注射等量生理盐水.主要观察指标:血流动力学指标及超声心动图指标的变化,免疫荧光染色观察骨髓单个核细胞在心脏的迁移、分布及分化.结果:与模型对照组比较,细胞移植后6周细胞移植组血流动力学指标左室舒张末压显著降低(P<0.01),心排出量明显升高(P<0.05);超声心动图指标左室收缩末容积、左室舒张末容积均得到显著改善(P<0.01),射血分数、每搏输出量亦明显改善(P<0.05).自体骨髓单个核细胞经冠状动脉移植后,可分布于心肌梗死区及梗死周边区,并表达肌球蛋白重链、连接蛋白43.结论:自体骨鼬单个核细胞经冠状动脉移植后可分化为心肌样细胞,改善急性心肌梗死后的心功能.     

自体骨髓单个核细胞移植治疗心肌梗死患者的护理

目的探讨骨髓单个核细胞移植治疗心肌梗死患者的护理。方法总结自体骨髓单个核细胞移植治疗缺血性心脏病患者22例的护理经验。结果22例患者手术成功,心功能得到改善。结论术前完善的准备、心理护理以及术后严密的观察、细致的护理保障了骨髓单个核细胞移植患者的良好康复。     

冠状动脉旁路移植同期桥血管内移植骨髓单个核细胞的可行性

背景:目前细胞移植治疗缺血性心脏病的大部分临床试验是针对急性心肌梗死患者梗死相关冠状动脉再通后骨髓单个核细胞的移植,结合外科手术同期予以细胞移植治疗陈旧性心肌梗死的报道相对较少.目的:探讨冠状动脉旁路移植术中骨髓单个核细胞经桥血管进行移植的可行性及安全性.设计:自身前后对照,病例分析.对象:2004-11/2005-06阜外心血管病医院收治的冠状动脉旁路移植手术患者10例,既往有陈旧性心肌梗死,需要进行冠状动脉旁路移植,术前左心室射血分数低于40%.方法:患者进行手术的同时,抽取自体骨髓血,采用Ficoll密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞.在桥血管远端吻合口完成后,将骨髓单个核细胞悬液10 mL注射到前降支,其他桥血管经近心端将骨髓单个核细胞悬液10 mL分别注射到回旋支和右冠状动脉内.主要观察指标:术后通过心脏超声、磁共振评价心功能.结果:10例患者术后均恢复顺利,术中采集骨髓血45～60 mL,分离骨髓单个核细胞数量平均为4.1×10~7个,锥虫蓝排斥试验测定细胞活性>95%.心脏超声检查结果显示,与术前比较,术后1周及1,3个月患者左心室射血分数明显提高;术后心肌酶、肌钙蛋白T未见异常增高,心电图未发现围手术期心肌梗死改变.磁共振扫描结果显示,与术前比较,术后3个月左心室射血分数明显增加(P<0.01);左室舒张末期直径、左室收缩末期直径均明显缩小(P<0.05).手术过程中及术后均未见与骨髓血采集以及细胞经冠状动脉桥血管内移植的相关并发症发生.结论:作为一种辅助性治疗手段,骨髓单个核细胞通过桥血管进行心肌内移植是安全可行的.     

同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死

背景：多项研究表明,骨髓间充质干细胞移植可在梗死心肌存活,改善心功能。目的：观察同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死后心力衰竭的效果。方法：经Percol 密度梯度离心培养大鼠骨髓间充质干细胞,将39只雌性Wistar大鼠采用结扎左前降支的方法复制急性心肌梗死模型,随机分为DMEM对照组（n=12）、骨髓间充质干细胞治疗组（n=15）和骨髓单个核细胞治疗组（n=12）。8周后行血流动力学、组织病理学及免疫组化等检测。结果与结论：两个治疗组左室舒张末压显著降低,左室内压最大上升和下降速率、左室内压最大下降速率与左室收缩压的比值显著升高;术后体质量显著增加,左室相对质量显著减轻;梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原容积分数显著降低;梗死区血管数目显著增加。两个治疗组之间比较,除骨髓单个核细胞治疗组室间隔厚度减小、梗死边缘区血管数目增加外,其余指标差异均无显著性意义。免疫组化示骨髓间充质干细胞治疗组梗死区内有BrdU阳性细胞,而在骨髓单个核细胞治疗组梗死区内则基本没有BrdU阳性细胞;两个治疗组在心肌梗死区可见较多desmin阳性和cTnT阳性细胞或细胞团存在。结果提示骨髓单个核细胞、骨髓间充质干细胞均能促进梗死区血管新生,降低局部胶原沉积,改善心肌梗死后心室重构,显著改善心脏功能。     

骨髓间充质干细胞在急性心肌梗死后心室重构中的应用

背景：动物实验和初期的临床研究表明,干细胞移植可以取代坏死心肌细胞、增加有功能心肌细胞的数量,改善心功能,从而为心肌梗死的治疗开辟了一条崭新的途径。目的：观察心肌梗死后自体骨髓间充质干细胞移植及骨髓动员对心功能的影响。方法：经猪髂前上棘抽取骨髓30mL,培养得到骨髓间充质干细胞。15只猪分为3组,模型组仅建立心肌梗死模型,干细胞移植组在造模3h后经冠状动脉注射骨髓间充质干细胞,干细胞动员组在造模3h后连续5d注射粒细胞集落刺激因子150μg/（kgd）。结果与结论：心肌梗死后8周,干细胞动员组、干细胞移植组左心室收缩、舒张末期内径都明显减小,射血分数较心肌梗死前提高,但差异无显著性意义（P〉0.05）;干细胞动员组及干细胞移植组血清血管内皮生长因子水平较心肌梗死前有上升趋势（P〈0.05）;干细胞动员组和干细胞移植组梗死交界区的毛细血管密度均大于模型组（P〈0.05）。提示心肌梗死后行自体骨髓间充质干细胞移植及骨髓动员均能明显改善心功能,但具体效果仍需进一步大样本实验研究。     

磁共振活体示踪经冠状动脉骨髓间充质干细胞移植:验证其与病理组织学结果的一致性

背景:目前动物实验及临床研究证明经冠状动脉移植骨髓间充质干细胞可改善心肌梗死后的心脏功能,但骨髓间充质干细胞经冠状动脉移植后能否到达心肌梗死部位仍存在争议.目的:磁共振活体示踪经冠状动脉注射的骨髓间充质干细胞能否到达心肌梗死部位.方法:全骨髓法分离培养猪骨髓间充质干细胞,超顺磁性氧化铁标记后胰酶消化,调整细胞浓度为10~(10)L~(-1).10只猪均建立心肌梗死模型,造模后1周通过OTW球囊导管经冠状动脉将标记好的骨髓间充质干细胞悬液定向移植至梗死区.普鲁士蓝染色评价细胞标记效率,采用快速梯度回波序列完成长轴位四腔心和二腔心扫描,在以长轴位四腔心和二腔心为定位相,垂直于室间隔获得左心室短轴位图像.结果与结论:超顺磁性氧化铁可安全有效标记骨髓间充质干细胞,经冠状动脉注射的骨髓间充质干细胞能到达心肌梗死区及交界区,磁共振能示踪到超顺磁性氧化铁标记的骨髓间充质干细胞,示踪结果与病理组织学检查一致,且磁共振示踪时间可长达5周.     

人工脑膜复合大鼠骨髓间充质干细胞修复心肌梗死

背景：干细胞移植治疗心肌梗死拥有广泛的应用前景,寻求理想的细胞类型和有效的移植方式是提高干细胞治疗效果的关键因素。目的：探讨人工脑膜复合骨髓间充质干细胞修复心肌梗死的安全性及作用。方法：采用全骨髓贴壁筛选法分离培养骨髓间充质干细胞,取培养良好的第3代骨髓间充质干细胞经DAPI标记后接种于人工脑膜制备细胞人工脑膜复合物。构建SD大鼠心肌梗死模型,60只大鼠随机数字表法均分为假手术组、心肌梗死组、人工脑膜组、细胞脑膜复合物组。移植4周后检测心功能参数,Westernblot检测心肌组织缝隙连接蛋白43的表达,计算心肌梗死后生存率。结果与结论：构建心肌梗死模型并移植后4周,细胞脑膜复合物组心脏组织冰冻切片于荧光显微镜下可观察到心肌内少量核蓝染的细胞,表明骨髓间充质干细胞得以存活;细胞脑膜复合物组与心肌梗死组和人工脑膜组相比,左心室功能明显改善,Cx43蛋白的表达上调,生存率增加（P〈0．05）。说明人工脑膜复合骨髓间充质干细胞移植可提高心肌梗死大鼠心脏功能及生存率。     

同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗急性心肌梗死的实验研究

目的 观察同种异体骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对急性心肌梗死(acute myocardial infarefion AMI)后心肌修复和心功能的影响.方法 结扎大鼠的左冠状动脉前降支制做急性心肌梗死模型,共90只大白鼠随机分为相同数量的细胞移植组和对照组,细胞移植组45只分别为:注射后2周组、4周组及12周组,对照组再次分组同细胞移植组.细胞移植组大白鼠以前壁部分心肌颜色变暗,心电图前壁ST段抬高为制模成功.用离心的方法分离出大鼠的股骨骨髓,淋巴细胞分离液分离单个核细胞,经冲洗后,培养、传代,得到第三代骨髓间充质干细胞,用4,6二乙酰基-2-苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole DAPI)标记.一周后将动物模型再次开胸,把干细胞悬液以点注射的方式局部注射入梗死灶的周边区,对照组注射培养基.术前、移植后2周、移植后4周及移植后12周行超声检测心功能,HE常规染色观察心肌切片,免疫荧光检查干细胞向心肌细胞的分化.数据用SPSS 10.0统计软件统计分析(成组t检验和γ2检验).以P<0.05表示差异具有统计学意义.结果 标记的骨髓干细胞在梗死心肌内存留并且分化为心肌样细胞.MSCs移植后12周超声检查发现左窒内径为(0.58±0.09)mm(P<0.05),梗死区心肌厚度为(0.25±0.01)mm(P<0.05),射血分数为(67.52±0.61)(P<0.05),左室短轴缩短率为(39.86±3.00)(P<0.05).细胞移植组梗死区心肌组织标本中均可见DAPI标记的蓝色荧光供体细胞核,心肌细胞胞浆呈绿色荧光.HE常规染色显示细胞移植组瘢痕组织较少,出现核浆比例较大、类似胎心或新生心窒细胞的细胞.结论 同种异体骨髓间充质干细胞移植可修复梗死心肌并改善梗死后心脏功能.     

Cardiomyoplasty with autological mononuclear cells of the bone marrow in patients with acute myocardial infarction

AIM: To study efficacy and safety of transplantation of bone marrow autologous mononuclear cells (BMAMC) in patients with acute myocardial infarction; to examine BMAMC distribution in the human body after intracoronary introduction. MATERIAL AND METHODS: The open controlled trial investigated 26 AMI patients (16 entered the study group and 10 were controls). Cell cardiomyoplasty with BMAMC was performed by intracoronary injection of the cells after stenting the coronary artery supplying blood to the infarction zone on AMI day 7-21. BMAMC were isolated by gradient centrifugation. Distribution of mononuclear cells was studied with radionuclear indication of the cells 99m-Tc-HMPAO. All the patients were examined with Tl-199 perfusion scintigraphy of the heart 2 weeks and 6 months after the treatment, echocardiography, 24-h ECG monitoring, 6-min walk test. RESULTS: All the patients were followed up for 6 months. Two patients (one in each group) developed recurrent myocardial infarction 3 months after the first. Radionuclide investigations revealed fixation of labelled mononuclear cells in the heart both in initial hours after the treatment and 24 hours after it. As shown by myocardial scintigraphy, intracoronary administration of the cells with short-term arterial occlusion was followed by much greater number of labeled cells. By follow-up month 6, in the study group, left ventricular ejection fraction increased more: 12.7 +/- 3.2% versus 10.4 +/- 2.5% in the control group (p = 0.09); moreover, a stable defect of myocardial perfusion reduced more (by 29 +/- 24% against 20 +/- 18%, respectively, p = 0.1). Malignant arrhythmia, complications during and after bone marrow aspiration, intracoronary administration of cell suspension were not registered. CONCLUSION: Intracoronary administration of BMAMC in AMI patients is safe and provides their transfer and fixation in the myocardium. BMAMC transplantation has a positive effect on recovery of perfusion and contractile function of left ventricular myocardium in AMI patients.