高迁移率族蛋白A在雄性小鼠生殖细胞株中的表达

目的:检测高迁移率族蛋白A(HMGA)在雄性小鼠生殖细胞株TM4、GC-1spg、GC-2spd(ts)中的表达,为深入探讨HMGA基因在小鼠精子发生过程中的作用机制奠定理论基础。方法:应用RT-PCR、Western印迹检测雄性小鼠生殖细胞株TM4、GC-1spg、GC-2spd(ts)中HMGA1、HMGA2基因的表达。结果:HMGA1mRNA、HMGA2mRNA在雄性小鼠生殖细胞株TM4、GC-1spg、GC-2spd(ts)中均有不同程度表达,Western印迹结果表明HMGA1与HMGA2蛋白在雄性小鼠生殖细胞株TM4、GC-1spg、GC-2spd(ts)中呈阳性表达,与RT-PCR的结果一致。结论:HMGA的表达可能参与了细胞株TM4、GC-1spg、GC-2spd(ts)的分裂、增殖,在雄性小鼠精子发生过程中可能发挥着重要作用。     

HMGA2通过Wnt/β-catenin信号通路促进结直肠癌上皮间质转化的研究

目的：研究高迁移率蛋白A2(HMGA2)通过Wnt/β-catenin信号通路促进结直肠癌上皮间质转化（EMT）的影响。方法：采用Real-time PCR法和Western blot法测定正常人结直肠上皮细胞和人结直肠癌HCT116细胞中HMGA2表达水平；将HCT166细胞转染GV144-HMGA2质粒过表达HMGA2后，测定过表达HMGA2对HCT166细胞活力、凋亡及迁移的影响；转染GV144-HMGA2质粒6 h后，加入重组转化生长因子（TGF）-β1蛋白继续培养48 h，测定EMT标志物和细胞周期蛋白（cyclin）D1表达水平。HCT166细胞中分别加入Wnt/β-catenin信号通路的激活剂（Li Cl）和抑制剂（XAV93920），并加入TGF-β1和过表达的HMGA2，检测EMT标志物和cyclin D1表达水平。结果：HCT166细胞中HMGA2表达水平显著高于FHC细胞（P<0.05）；过表达HMGA2可以显著增加HCT166的细胞活力和迁移，降低细胞凋亡（P<0.05）;HMGA2可以显著降低E-caderin表达水平，降低TGF-β1诱导的cy...     

高迁移率族蛋白A1在前列腺癌及癌旁组织中的差异表达

我们从mRNA水平和蛋白水平半定量检测高迁移率族蛋白A1(HMGA1)在前列腺癌组织及其相应的癌旁正常前列腺组织中的表达,探讨HMGA1的表达与前列腺癌发生、发展的相关性. 一、材料与方法1.材料:选取2004年7月至2007年12月期间在第四军医大学唐都医院泌尿外科行手术切除的40例前列腺癌组织标本,另取40例相应的癌旁正常前列腺组织标本作为对照,置-80℃超低温冰箱中保存备用.     

高迁移率族蛋白HMGA1在肝细胞癌及胆管细胞癌中的表达差异及临床意义

目的：探讨高迁移率族蛋白A1（HMGA1）在肝细胞癌（HCC）、肝内胆管细胞癌（IHC）中的表达差异和临床意义。 方法：采用免疫组化SABC法对60例HCC、42例胆管细胞癌及10例正常肝脏组织标本中HMGA1的表达情况进行检测,并分析其与临床病理特点之间的关系。 结果：HMG组A1在10例正常肝脏组织中无一例表达,在HCC组中表达率为3.3％（2/60）,在IHC组中表达率为66.7％（28/42）。IHC组与HCC组中HMGA1表达差异有统计学意义（P = 0.000）;IHC组HMGA1与p53的表达呈正相关（r = 0.673,P＜0.05）;1年内死亡患者的HMGA1表达水平（80.0％）较1年内存活患者的（33.3％）高,差异有统计学意义（P 〈 0.05）。 结论：HMGA1可作为鉴别肝细胞癌与肝内胆管细胞癌的一个潜在指标。HMGA1在肝内胆管细胞癌的生成中可能发挥了重要作用,HMGA1在肝内胆管细胞癌的高表达提示预后不良。     

膀胱尿路上皮癌组织中HMGA2蛋白表达及其临床意义

目的 探讨高迁移率族蛋白A2(high mobility group protein A2,HMGA2)在膀胱癌组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征及复发的关系.方法 膀胱尿路上皮癌标本148例,正常膀胱组织标本30例,采用免疫组织化学方法检测2组标本组织中HMGA2蛋白的表达,并结合临床资料进行分析.结果 正常膀胱组织中无HMGA2蛋白表达,肿瘤组织中随病理分级和分期增加,HMGA2蛋白相对表达量逐渐增高.HMGA2蛋白在G1、G2、G3组织中表达阳性率分别为21.3%、60.3%、82.1%,差异有统计学意义(P＜0.001).非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌和肌层浸润性膀胱尿路上皮癌中HMGA2蛋白表达的阳性率分别为43.3%和72.7%,差异有统计学意义(P=0.003).随访2～95个月,复发64例,复发组与未复发组中HMGA2蛋白表达阳性率分别为54.7%和25.0%,差异有统计学意义(P=0.007).结论 HMGA2蛋白表达在膀胱癌组织中明显高于正常组织,HMGA2蛋白表达与膀胱癌的分级、分期、复发有关;与患者年龄、性别、肿瘤数目无相关性.检测HMGA2蛋白有助于膀胱癌的诊断及预后的评估.

Abstract：

Objective This study was to explore the expression and significance of HMA2 in bladder cancer , analyze its correlations to clinicopathologic and recurrence of bladder cancer. Methods The expression of HMGA2 protein in 148 specimens of bladder cancer and 30 specimens of normal bladder tissues was detected by immunohistochemtry, its correlations to clinicopathologic features was analyzed. Results There was no expression of HMGA2 protein in normal bladder tissues,while the expression level of HMGA2 protein was getting higher with the increase of tumor pathology grade and stage. The positive rate of HMGA2 protein was 21.3% in G1 bladder cancer, 60. 3% in G2 bladder cancer, 82.1% in G3 bladder cancer, its difference is significant (P＜0. 001). It was significantly lower in non-muscle invasive bladder cancer than in muscle invasive bladder cancer (43.3% vs 72. 7%, P=0. 003). The patients were followed up for 2～95 months, patients of recurrence was 64,HMGA2 protein expression was significantly higher in patients with recurrence than with non-recurrence (54.7% vs 25.0%, P=0. 007). Conclusions The expression of HMGA2 protein was highly in bladder cancer, the positive rate of HMGA2 protein expression was related with classification,TMN stage and recurrence, but not with sex, age, tumor number (P＞0. 05). The detection of the expression of HMGA2 protein is in favor of diagnosis and prognostic evaluation of bladder cancer.     

E钙粘蛋白、syndecan-1蛋白在肝细胞性肝癌中的表达与肝癌侵袭的关系

目的 探讨E钙粘蛋白与syndecan-1在肝细胞性肝癌中的表达及其与肝癌浸润侵袭之间的关系。方法 应用免疫组织化学ABC法研究了47例肝癌组织中E－钙粘蛋白一syndecan-1蛋白的表达，分析与肝癌浸润之间的关系。结果 肝癌中E－钙粘蛋白与syndecan-1蛋白表达，分别减低了55％，60％，直径大于3cm的肝癌E－钙粘蛋白与syndecan-1蛋白表达减低较小于3cm的肝癌更为显著（P＜0．05）。E－钙粘蛋白表达与肝癌的组织分级无相关性，而syndecan-1蛋白表达与肝癌的组织分级，癌栓有显著的相关性（P＜0．01）。结论 由E－钙粘蛋白与syndecan-1蛋白介导的细胞间粘附作用在肝癌发生发展过程中发挥重要作用，两者结合可以更准确判断肝吕的恶性程度及生物学行为。     

前列腺癌组织中HMGA2的表达及其意义

目的探讨高迁移率族蛋白HMGA2在前列腺癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化法及RT—PCR法检测40例前列腺癌组织及良性前列腺增生组织中HMGA2的表达情况。结果RT-PCR法检测示良性前列腺增生组织中HMGA2少量表达;恶性组织中,随着病理分级增加,HMGA2mRNA相对表达量逐渐增高,免疫组化法显示前列腺癌组织中,有75．0％（30／40）HMGA2呈阳性表达。良性前列腺增生组织与前列腺癌组织两组间差异显著（t=3．32,P〈0．001）。结论HMGA2在前列腺癌中呈过度表达,并与前列腺癌病理分级有关,可能成为前列腺癌诊断与良恶性鉴别诊断的指标之一。     

Sirtl在肝癌及癌旁组织中的表达差异研究

目的：研究肝癌组织与癌旁组织的基因表达谱差异。方法：应用包含44000条人类全长基因的寡聚核苷酸芯片检测肝癌组织与癌旁组织的基因表达谱,并比较两者之间存在明显上、下调的表达差异基因,随后用RT—PCR和Western blot方法进行验证分析。结果：基因芯片筛选出存在差异表达的基因,其中沉默信息调节因子1（Sirtl）在肝癌组织与癌旁组织中的表达差异明显,在肝癌组织中明显升高,经RT—PCR和Western blot证实与基因芯片结果一致。结论：Sirtl基因的表达可能与肝癌的发生发展密切相关。     

p27kip1及相关分子skp2在人肝癌组织中的表达变化

目的探讨细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白27（p27^kip1）和细胞S相激酶相关蛋白2（skp2）表达与人肝癌发生的关系。方法用免疫组织化学SP法检测62例肝癌组织中p27^kip1、skp2蛋白的表达，并与22例癌旁正常肝组织作对比。结果p27^kip1蛋白阳性表达率在肝癌中为46．77％，而癌旁肝组织中为95．45％（P〈0．01）。skp2蛋白阳性表达率在肝癌中为32．26％，而癌旁正常肝组织中为13．64％（P〈0．05）。p27^kip1、skp2蛋白在肝癌中的表达呈负相关（P〈0．01）。结论p27^kip1、skp2蛋白检测有助于肝癌的临床诊断及判断预后。     

X盒结合蛋白1、免疫球蛋白结合蛋白在肝癌组织中的表达及意义

目的 检测X盒结合蛋白1( XBP1)、免疫球蛋白结合蛋白(Bip)在肝癌组织中的表达,探讨其在肝癌生长中的作用机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测术中所取的42例肝癌标本、15例同个体癌旁1.0 cm肝组织和15例正常肝组织中XBP1、Bip的mRNA表达.应用Western blot法验证57例肝癌组织和正常肝组织标本中XBP1、Bip在蛋白水平的表达.结果 肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中XBP1 mRNA相对表达量分别为0.4396±0.0241、0.4152±0.0252、0.4095±0.0149,XBP1 mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05);肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中Bip mRNA相对表达量分别为0.4772±0.0401、0.4332±0.0488、0.4301±0.0398,Bip mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05).实验对肝癌组织和正常肝组织中XBP1和Bip的蛋白表达进行了定性验证:在肝癌组织和正常肝组织中均有两种蛋白的表达,但肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织.结论 在肝癌的生长过程中存在未折叠蛋白反应(UPR)的激活.在肝癌组织中XBP1、Bip mRNA和蛋白的表达一致,均呈高表达.这些基因和蛋白表达的改变可能与肝癌的发生、生长及转移密切相关.     

前列腺癌组织中TRIB1基因和蛋白异常表达与患者不良预后的相关性

目的研究Tribbles同源蛋白1(TRIB1)在良性前列腺增生和前列腺癌中的表达,并分析其表达水平与患者临床特征及预后的关系。方法在公共基因芯片数据库(GEO)中下载前列腺样本中的相关基因芯片数据,分析TRIB1在前列腺样本中mRNA的表达水平。收集临床手术切除或者穿刺活检的前列腺癌和前列腺增生组织,通过免疫组化检测前列腺癌、前列腺增生组织中TRIB1蛋白的表达。分析TRIB1蛋白和基因的表达水平与患者临床特征及预后的关系。结果前列腺癌患者组织中TRIB1蛋白表达显著上调(P0.01),TRIB1蛋白表达上调与前列腺癌Gleason评分(P0.01)、病理分期(P=0.02)相关,基因芯片数据提示TRIB1基因表达上调与前列腺癌Gleason评分(P=0.02)、病理分期(P=0.01)、无生化复发生存率(BCR-free survival)(P=0.047)相关。结论 TRIB1在前列腺癌组织中表达上调,前列腺组织中检测TRIB1可能有助于判断前列腺癌分化程度并评估预后。     

凋亡抑制基因x-相关细胞凋亡抑制蛋白基因在肝癌细胞中的表达及临床意义

目的探讨x-相关细胞凋亡抑制蛋白基因（XIAP）mRNA及蛋白在肝癌组织和癌旁组织中的表达情况，及其与肝癌发生的关系。方法肝癌患者手术切除标本10例，应用半定量逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测肝癌组织和癌旁组织细胞XIAP mRNA基因的相对表达量，并通过免疫组织化学SP法检测10例肝癌组织和癌旁组织标本XIAP蛋白的表达情况。结果（1）半定量RT-PCR显示：XIAP基因在肝癌组织中均呈高表达，相对表达量为3．211±2．43，而在对应的癌旁组织中呈低表达或无表达，相对表达量为1．947±1．890，两组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）免疫组织化学及图像分析结果显示：在肝癌组织和癌旁组织中XIAP蛋白平均灰度扫描值分别为161．800±29．470和144．240±26．290，两组之间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论XIAP在肝癌中的表达明显增高，可能在肝癌的发生、发展过程中发挥重要作用。     

p73蛋白在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的　探讨p73蛋白在肝细胞性肝癌中的表达及其临床病理意义。方法　采用免疫组 织化学SABC法检测p73蛋白在肝癌和癌旁组织中的表达水平,并分析其与肝癌临床病理特征的关 系。结果　38例肝癌组织中有22例p73蛋白呈阳性表达,阳性表达率为57.9%,而癌旁组织无1例 呈阳性表达,低分化、有转移的肝癌组织中p73蛋白水平明显高于高分化、无转移的肝癌组织。结论 p73蛋白在肝癌组织中表达上调,可能在肝癌的发生、发展过程中起着重要的作用。     

凋亡抑制蛋白Survivin在肝癌中的表达和意义

目的 检测肝细胞癌中凋亡抑制蛋白Survivin的表达，并探讨其在肝细胞癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组织化学技术和蛋白印迹技术，研究38例肝癌标本和10例肝硬化标本中Survivin蛋白的表达。结果 38例肝癌标本中23例表达Survivin蛋白，其中16例高，中分化肝癌，9例表达Survivin,22例低分化肝癌组织14例表达Survivin蛋白，而在癌周非癌组织和肝硬化组织中未检测到Survivin的表达。结论 Survivin在肝癌中高度表达可能与肝癌的发生发展有关，与预后的关系有待进一步的研究。     

MicroRNA-224在肝癌HepG2细胞中的表达及其靶基因的预测分析

目的 应用基因芯片技术研究microRNA-224在肝癌HepG2细胞中的表达,通过生物信息学预测其下游靶基因,并初步揭示其在肝癌发生过程中的作用.方法 利用基因芯片技术筛选得到和正常肝上皮LO2细胞比较差异表达的基因,通过生物信息学预测表达上调的microRNA-224的靶基凶,并对其靶基因进行功能注释.结果 与LO2细胞比较,microRNA-224在肝癌HepG2细胞中旱高表达.MicroRNA-224预测靶基因有264个,其多个基因涉及细胞周期、信号转导、细胞增殖、细胞分化和细胞凋亡等众多生物学过程.结论 MicroRNA-224在肝癌HepG2细胞中呈现高表达,可能间接或直接地调控其下游靶基因表达,在肝癌发生过程中起着重要的作用.     

Rb基因产物与原发性肝癌的生物学特性及预后关系的研究

为探讨Rb蛋白与原发性肝癌生物学特性及预后的关系 ,笔者应用免疫组化SABC法检测Rb蛋白在原发性肝癌及肝硬化组织中的表达。结果显示Rb蛋白在原发性肝癌组织中的表达明显低于肝脏良性病变组 (P <0 .0 1) ,有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组 ,与TNM分期有关 (P <0 .0 5 )。提示Rb基因蛋白的表达异常可能在原发性肝癌发生发展过程中具有重要作用 ,检测Rb蛋白表达 ,有助于对原发性肝癌的生物学行为及预后的评价。     

NF-κB在肝细胞癌组织中的表达及意义

目的：探讨NF-κB基因在肝细胞癌组织中的表达及生物学意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western-blot免疫组织化学技术检测32例肝癌组织及癌旁肝组织中的NF-κB基因的mRNA和蛋白表达水平及蛋白定位。结果：NF-κB基因在肝癌组织中的表达较癌旁肝组织显著性增高(P<0.05)。免疫组化结果显示，NF-κB蛋白在肝癌细胞胞浆和胞核中均有表达，而在癌旁肝细胞中仅在胞浆中有表达。结论：NF-κB基因在肝癌组织中呈显著高表达，提示其可能参与了肝癌的发生发展。NF-κB表达定位在癌细胞和癌旁肝细胞中的差异，提示NF-κB活化后，进入胞核，通过调节下游基因的转录，促进肝癌的发生。     

Pin1在肝硬化和肝癌组织中的表达及其与乙型肝炎病毒X蛋白的关系

目的通过检测Pin1在肝硬化组织和肝癌原发灶及门静脉癌栓中的表达,了解Pin1在肝癌发生、发展的不同阶段的表达情况,同时验证其与乙型肝炎病毒X蛋白的关系。方法用免疫组织化学染色法检测20例肝硬化组织,21例肝癌原发灶及门静脉中Pin1的表达,同时检测21例肝癌原发灶中乙型肝炎病毒X蛋白的表达情况,并用SPSS10.0软件进行相关性分析。结果肝硬化组织和大部分门静脉癌栓中Pin1的表达较肝癌原发灶中Pin1的表达强(P<0.05)。在肝癌组织中Pin1的表达与HBx的表达呈显著正相关(P<0.05)。结论Pin1在肝癌发生、发展的不同阶段表达不同,同时Pin1可以通过直接或间接作用稳定HBx的表达,为阐明其在肝癌发生、发展中的作用提供了新的思路。     

乳腺癌ER、c—erbB2及HMGA2的表达及其意义

目的探讨乳腺癌ER、c—erbB2、HMGA2的表达及其临床意义。方法应用免疫组化方法，检测150例乳腺癌ER、c—erbB2、HMGA2表达。结果ER、c—erbB2、HMGA2在乳腺癌的表达率分别为54．2％、45．8％、42．8％；c—erbB2、HMGA2的表达随着组织学分级升高而增加，ER的表达随着组织学分级升高而降低；ER表达与生存期亦未见明确的关系，而c—erbB2、HMGA2阳性表达率与生存期呈负相关。结论ER、c—erbB2、HMGA2对判断乳腺癌分化程度、预后具有价值的指标。     

X-盒结合蛋白1、血管内皮生长因子C在肝癌中的表达及意义

目的 检测X-盒结合蛋白1(XBP1),血管内皮生长因子C(VEGF-C)在肝癌组织中的表达,探讨在肝癌发生发展过程中存在未折叠蛋白反应(UPR)的激活.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测术中取的新鲜42例肝癌标本、15例同个体癌旁1.0cm肝组织和15例正常肝组织中XBP1 、VEGF-C的mRNA表达,应用Western blot法检测57例肝癌组织和正常肝组织标本中XBP1、VEGF-C在蛋白水平的表达.结果 肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中XBP1 mRNA相对表达量分别为0.4396±0.0241、0.4152±0.0252、0.4095±0.0149,XBP1 mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05);肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中VEGF-C mRNA相对表达量分别为0.4447±0.0335、0.4195 ±0.0334、0.4019±0.0259,VEGF-C mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05). 在肝癌组织和正常肝组织中均有两种蛋白的表达,但肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织.结论 肝癌组织中XBP1、VEGF-C mRNA和蛋白的表达一致,均为高表达.