不明原因复发性流产患者蜕膜巨噬细胞活性变化及其细胞因子分泌

目的:探讨蜕膜巨噬细胞内活性氧(ROS)、吞噬活性、细胞因子IL-10和IFNγ的分泌,与原因不明复发性流产发病的关系。方法:应用磁珠细胞分选法从11例原因不明复发性流产患者和12例正常早孕妇女蜕膜中分离巨噬细胞,采用流式细胞技术检测蜕膜巨噬细胞内ROS水平,中性红实验检测巨噬细胞吞噬活性,应用ELISPOT法检测细胞因子IL-10和IFNγ分泌。结果:与正常早孕者相比,原因不明复发性流产患者蜕膜巨噬细胞内ROS水平升高(222.55±46.74vs170.75±17.51,P<0.01),其吞噬活性增强(0.37±0.14vs0.17±0.98,P<0.01),IL-10/IFNγ下降(1.37±0.88vs7.69±3.78,P<0.01)。结论:蜕膜巨噬细胞活性改变以及其分泌的细胞因子格局变化可能是导致原因不明复发性流产发病的机制之一。     

蜕膜巨噬细胞TSP-1 IL-10及IFN-γ的表达及其相互关系探讨

目的探讨蜕膜巨噬细胞凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)、白介素-10(IL-10)及干扰素-γ(IFN-γ)的表达。方法对2005年7月至2006年7月在上海交通大学附属仁济医院计划生育门诊要求人工流产的正常妊娠妇女20例(A组)和10例原因不明复发性流产(URSA)患者(B组)检测蜕膜TSP-1mRNA、蜕膜巨噬细胞表面TSP-1的表达及蜕膜巨噬细胞分泌IL-10和IFN-γ的量,并在培养液中加入相应刺激物,观察细胞因子分泌量的变化。结果与A组相比,B组蜕膜TSP-1mRNA表达明显降低(P<0·05)。蜕膜巨噬细胞TSP-1表达水平明显降低(P<0·01)。蜕膜巨噬细胞分泌IL-10的量显著降低(P<0·05);在培养液中加入各种干预因素对两组病例蜕膜巨噬细胞分泌IFN-γ无显著影响;加入TSP-1后,两组蜕膜巨噬细胞分泌IL-10的量均增加(P<0·05);加入抗TSP-1后A组蜕膜巨噬细胞分泌IL-10的量降低(P<0·05)。结论URSA患者蜕膜TSP-1表达下降,且蜕膜巨噬细胞分泌IL-10的量降低,可能是导致URSA发病的原因。TSP-1可能在调控蜕膜巨噬细胞分泌IL-10的过程中起重要作用。     

原因不明复发性流产的免疫因素研究进展

原因不明复发性流产（URSA）是近年来对自然流产研究的重点,免疫因素是导致自然流产反复发作的重要原因。在妊娠胚胎发育过程中．子宫蜕膜局部聚集了多种免疫活性细胞．其作用的变化直接影响到妊娠发展。免疫活性细胞产生的不同细胞因子有各自不同的作用,如果细胞因子问平衡关系被破坏也会导致流产的反复发生。自身免疫性疾病使妊娠妇女免疫机制亢进或同种免疫的保护性抗体缺乏,同样是流产的重要原因之一。     

原因不明复发性流产的免疫因素研究进展

原因不明复发性流产(URSA)是近年来对自然流产研究的重点.免疫因素是导致自然流产反复发作的重要原因.在妊娠胚胎发育过程中,子宫蜕膜局部聚集了多种免疫活性细胞,其作用的变化直接影响到妊娠发展.免疫活性细胞产生的不同细胞因子有各自不同的作用,如果细胞因子间平衡关系被破坏也会导致流产的反复发生.自身免疫性疾病使妊娠妇女免疫机制亢进或同种免疫的保护性抗体缺乏,同样是流产的重要原因之一.     

原因不明复发性流产患者蜕膜Foxp3 mRNA及蛋白质的表达

目的:探讨原因不明复发性流产(URSA)患者蜕膜Foxp3 mRNA及蛋白的表达。方法:分别采用免疫组化S-P法、半定量和实时定量PCR法和W estern B lot法检测25例URSA患者蜕膜组织Foxp3 mRNA及蛋白的表达与分布,并以32例正常早孕妇女为对照。结果:(1)免疫组化S-P法显示Foxp3表达于胞浆,妊娠后的蜕膜组织有Foxp3的表达;URSA患者蜕膜Foxp3的表达显著低于正常妊娠妇女(P<0.01);(2)半定量和实时定量RT-PCR法分析均显示,URSA患者蜕膜组织Foxp3 mRNA的表达显著低于正常早孕妇女(P<0.05);(3)W estern B lot法分析显示,URSA患者蜕膜组织Foxp3蛋白的表达显著低于正常早孕妇女(P<0.05)。结论:Foxp3可能在维持早期妊娠中起重要作用,其表达水平降低可能与URSA的发病有关。     

CD4＋T细胞在原因不明复发性流产中的研究进展

正常妊娠有赖于母体对胚胎半同种抗原的免疫耐受,一旦免疫耐受失衡,将导致免疫排斥、免疫攻击从而导致自然流产,原因不明复发性流产被认为与母胎免疫耐受失衡有关.CD4＋T在同种异体急性排斥反应中发挥重要作用,根据所分泌的细胞因子不同,CD4＋T 细胞分为Th1、Th2、调节性T细胞（Treg）及新近发现的Th17细胞.早期研究发现母体外周血、母胎界面CD4＋T细胞增高与复发性流产密切相关.随免疫耐受机制研究的不断深入,母胎免疫耐受的研究历经Th1/Th2平衡到Treg的免疫负调控作用,再到Th17/Treg平衡.综述CD4＋T细胞在原因不明复发性流产中的研究进展.     

原因不明复发性流产患者蜕膜IL-27、IL-23的表达及其意义

目的 探讨原因不明复发性流产(URSA)患者蜕膜组织IL-27、IL-23基因和蛋白的表达。方法 采集青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院2010年8月至2011年8月就诊的15例URSA患者和30例正常妊娠早孕妇女的蜕膜,分别应用实时荧光定量RT-PCR方法和Western blotting方法检测蜕膜组织IL-27及IL-23基因和蛋白的表达水平。结果与正常早孕妇女相比,URSA患者蜕膜IL-27基因(0.09±0.02 vs.0.38±0.08,P<0.05)及蛋白(0.46±0.12 vs.0.89±0.19,P<0.05)表达明显降低,IL-23基因(0.26±0.09 vs.0.16±0.06,P<0.05)及蛋白(0.47±0.08 vs.0.19±0.05,P<0.05)表达明显增高。结论 IL-27、IL-23可能在早期妊娠中发挥重要的调控作用,其表达失调可能与URSA发病密切相关。     

主动免疫治疗对不明原因习惯性流产患者辅助T细胞因子水平的影响

目的　探讨主动免疫治疗对不明原因习惯性流产 (UHA)患者辅助T细胞 (Th) 1 /Th2型细胞因子水平的影响。方法　采用酶联免疫吸附法 ,检测 30例半年内接受过淋巴细胞主动免疫治疗的UHA患者 (治疗组 ) ,及 2 5例未经治疗的UHA患者 (未治疗组 ) ,外周血单个核细胞 (PBMC)经滋养细胞抗原刺激产生的Th1型细胞因子白细胞介素 (IL) 2、γ干扰素 (IFN γ)及Th2型细胞因子产生IL 4、IL 1 0水平。并选取 1 5例正常非妊娠妇女作为对照 (对照组 )。结果　 (1 )在最佳诱导时间内 ,治疗组IL 2、IFN γ的水平分别为 (1 0 8± 37)ng/L、(1 1 0± 52 )ng/L ,明显低于未治疗组的 (2 2 3± 85)ng/L、(32 6±92 )ng/L(P值均 <0 .0 5) ;IL 4、IL 1 0水平分别为 (50± 1 1 )ng/L、(1 4 0± 37)ng/L ,明显高于未治疗组的(2 3± 1 1 )ng/L、(52± 2 8)ng/L(P值均 <0 .0 5)。未治疗组IL 2、IFN γ水平明显高于对照组的 (92± 32 )ng/L、(1 0 2± 35)ng/L(P值均 <0 .0 5) ;IL 4、IL 1 0水平低于对照组的 (62± 2 1 )ng/L、(1 50± 42 )ng/L(P值均 <0 .0 5)。治疗组与对照组各细胞因子水平比较 ,差异均无显著性 (P值均 >0 .0 5)。 (2 )治疗组30例患者治疗后半年内妊娠 2 6例 ,其中 8例自然流产 ,IL 2、IFN γ水平明显高于 1 8例妊娠     

不明原因复发性流产免疫学发病机制的研究进展

复发性流产发生率为1%~5%,其中40%~60%原因不明,称为不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)。近年研究表明,URSA的发生与免疫失衡关系密切,又称为同种免疫型复发性流产。本文论述URSA免疫学的发病机制、诊断、治疗的最新研究进展,重点论述了发病机制中免疫失衡方面的研究进展。     

主动免疫治疗对原因不明复发性流产患者外周血淋巴细胞Fas表达的影响

目的:探讨经主动免疫治疗后对原因不明复发性流产(URSA)患者外周血淋巴细胞Fas表达的影响。方法:收集来我院就诊URSA患者30例,采用荧光标记流式细胞分析技术,检测经淋巴细胞主动免疫治疗前、一疗程结束后3周的外周血淋巴细胞Fas表达。同时选择同期正常育龄妇女20例,作为正常对照组,比较两组Fas表达情况。结果:①CD4+ T淋巴细胞的Fas表达,正常对照组与URSA组治疗前、后的比较中,差异无统计学意义(P>0.05);②URSA组治疗前的CD8+ T淋巴细胞和NK细胞的Fas表达均比正常对照组明显升高(P<0.05);③URSA组治疗后的CD8+ T淋巴细胞和NK细胞的Fas表达均较治疗前降低(P<0.05)。结论:URSA患者存在CD8+ T淋巴细胞和NK细胞的异常激活,主动免疫治疗可以降低Fas在淋巴细胞上的表达,从而有利于胚胎的发育。     

原因不明复发性流产与蜕膜CD4~+ CD25~+ T调节细胞和CD8~+ CD28~- T细胞的关系

目的:探讨原因不明复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)与蜕膜CD4+ CD25+ T细胞和CD8+ CD28-T细胞的关系。方法:采用流式细胞四色荧光法,检测原因不明复发性流产17例(URSA组)和正常早孕人流20例(对照组)的蜕膜CD4+ CD25+ T细胞及其FoxP3(+)表达,CD8+ CD28- T细胞及其表面CD95、CD95L表达。结果:两组蜕膜中CD4+ CD25+ T细胞比例无明显差异(P>0.05),URSA组蜕膜CD4+ CD25+ T细胞中FoxP3阳性率明显低于对照组(P<0.0001)。两组蜕膜CD8+ CD28- T细胞比例及其细胞表面CD95和CD95L的阳性表达率均无明显差异(P>0.05);结论:蜕膜CD4+ CD25+ FoxP3(+)T调节细胞明显减少,是导致URSA患者母胎界面免疫耐受异常的重要原因。     

Foxp3在子宫内膜、正常早孕和原因不明复发性流产患者蜕膜上的表达

目的:探讨Foxp3在增生期、分泌期内膜和正常早孕、原因不明复发性流产(URSA)患者蜕膜的表达。方法:用免疫组化法观察15例增生期子宫内膜, 12例分泌期子宫内膜, 32例正常早孕和25例URSA患者蜕膜组织Foxp3的表达与分布。结果:增生期子宫内膜无Foxp3表达,分泌期内膜和蜕膜组织均有表达;分泌期内膜Foxp3的表达显著低于正常早孕组(P<0 .01)和URSA组(P<0. 05);URSA患者蜕膜Foxp3的表达显著低于正常早孕组(P<0 .01);Foxp3表达于胞浆,正常早孕组和分泌期内膜主要表达在腺上皮细胞,URSA患者主要表达在间质细胞。结论:Foxp3在分泌期子宫内膜和蜕膜组织的表达可能在胚泡植入和早期妊娠的维持中起重要作用,其表达水平降低可能与URSA的发生有关。     

原因不明复发性流产患者细胞毒性T淋巴细胞抗原4基因第一外显子49位点A/G基因多态性研究

目的探讨细胞毒性T淋巴细胞抗原4（CTLA-4）基因第一外显子49位点A／G基因多态性与原因不明复发性流产（URSA）发病的相关性。方法采用PCR限制性片断长度多态性方法（PCR-RFLP）,检测168例URSA患者（URSA组）和117例有正常生育史的妇女（对照组）CTLA-4基因第一外显子49位点A／G多态性,并比较等位基因G／A、基因型AA／AG／GG、表型A＋（AA＋AG）／G＋（GG＋AG）分布频率的差异。结果URSA组等位基因G的出现频率为68．4％（230／336）,对照组为59．4％（139／234）,两组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;基因型GG的出现频率URSA组为48．8％（82／168）,对照组为33．3％（39／117）,两组比较,差异也有统计学意义（P〈0．05）;URSA组基因型AG、基因表型A＋（AA＋AG）的频率分别为39．3％（66／168）、51．2％（86／168）,对照组分别为52．1％（61／117）、66．7％（78／117）,两组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论CTLA-4基因第一外显子49位点A／G多态性与URSA的发生存在相关性,并可能参与流产发生的免疫病理过程。     

抗原递呈细胞表面共刺激分子CD80/CD86表达与自然流产的关系

目的 :探讨共刺激分子CD80 /CD86与自然流产的关系。方法 :采用双标记流式细胞分析技术检测自然流产小鼠模型CBA/J×DBA/ 2脾脏及肠系膜淋巴结内 (MLN)抗原递呈细胞MΦ表面CD80 /CD86的表达情况 (n =10 ) ,以正常妊娠小鼠模型CBA/J×BALB /c为对照 (n =5 )。结果 :1、自然流产模型组脾脏内表达CD80MΦ含量为 1.82±0 .4 1% ,与正常妊娠模型组的 1.64%± 0 .61%差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,而表达CD86MΦ含量在自然流产模型组中为 2 .34%± 0 .67% ,明显低于正常妊娠模型组的 5 .98%±2 .4 3% (P <0 .0 5 ) ;2、自然流产模型组MLN内表达CD80MΦ含量为 10 .2 0 %± 5 .4 2 % ,明显高于正常妊娠模型组 1.5 8%± 0 .70 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,而表达CD86MΦ含量在自然流产模型组中为 1.4 6%± 0 .5 7% ,明显低于正常妊娠模型组 3.96%± 0 .39% (P <0 .0 0 1)。结论 :抗原递呈细胞表面共刺激分子CD80 /CD86的表达异常在自然流产的发病中起重要作用     

原因不明复发性流产患者调节性T淋巴细胞对树突状细胞的调控作用

目的 探讨原因不明复发性流产(URSA)患者外周血和蜕膜组织中CD+4CD+25调节性T淋巴细胞(Tr细胞)对树突状细胞(DC)的调控作用.方法 采集4例URSA患者(流产组)和4例正常早孕妇女(对照组)的外周血和蜕膜组织,密度梯度离心法、免疫磁珠分离法分选出Tr细胞和DC,培养6 d,培养方法分为DC单独培养和Tr细胞与Dc混合培养.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两种方法培养的细胞培养上清液中辅助性T淋巴细胞(Th)1型细胞因子--γ干扰素(IFN-γ)的Th2型细胞因子--白细胞介素10(IL-10)的蛋白含量.结果 (1)外周血:流产组细胞混合培养和单独培养后,细胞培养上清液中IFN-γ蛋白含量为(22.5±3.0)、(23.2±0.7)ng/L,两者比较,差异无统计学意义(P>0.05);IL-10蛋白含量分别为(35±4)、(37±7)ng/L,两者比较,差异也无统计学意义(P>0.05).对照组细胞混合培养和单独培养后,IFN-γ蛋白含量为(36±1.1)、(30.5±4.0)ns/L,两者比较,差异无统计学意义(P>0.05);IL-10蛋白含量分别为(36±9)、(54±20)ng/L,两者比较,差异有统计学意义(P<0.01).(2)蜕膜组织:流产组细胞混合培养和单独培养后,IFN-γ蛋白含量分别为(24.4±2.5)、(23.4±2.6)ng/L,两者比较,差异无统计学意义(P>0.05);IL-10蛋白含量分别为(25±5)、(28±7)ng/L,两者比较,差异也无统计学意义(P>0.05);对照组细胞混合培养后,IFN-γ蛋白含量为(22.6±3.8)ng/L,明显低于单独培养后的(30.7±4.6)ng/L,差异有统计学意义(P<0.01);对照组细胞混合培养后,IL-10蛋白含量为(31±9)ng/L,明显高于单独培养后的(27±6)ng/L,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 URSA患者Tr细胞抑制性免疫功能下降,从而导致对DC调控失常,Th1/Th2平衡失调和母胎免疫耐受异常.     

C型凝集素受体和Toll样受体在原因不明复发性流产患者蜕膜中的表达

目的:研究原因不明复发性流产(URSA)患者蜕膜中树突细胞(DC)特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子(DC-SIGN)和甘露糖受体(MR)及Toll样受体2(TLR-2)和TLR-4的表达情况。方法:采集URSA患者及正常妊娠人工流产妇女(对照组)的新鲜蜕膜。采用免疫组化和Western blot法检测蜕膜中DC-SIGN、MR、TLR-2和TLR-4蛋白表达,RT-PCR检测蜕膜中DC-SIGN、MR、TLR-2和TLR-4 mRNA表达;流式细胞检测蜕膜中DC表面表达DC-SIGN、MR、TLR-2和TLR-4的水平。结果:与对照组比较,URSA组蜕膜中及DC表面的TLR-2和TLR-4表达水平明显升高(P0.05,P0.01),DCSIGN表达水平明显降低(P0.01)。两组的MR表达水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:相对于正常妊娠妇女,URSA患者蜕膜中及树突细胞表面的C型凝集素受体(CLRs)弱势表达,而TLRs优势表达。CLRs与TLRs之间的免疫平衡失调可能是URSA发病机制中的重要因素之一。     

原因不明复发性流产的诊治

复发性流产严重威胁人类的生殖健康,约50%患者病因不明,基于循证医学的诊断和治疗策略相对匮乏,是生殖医学中最困难的领域之一。文章重点阐述原因不明复发性流产的病因学和治疗研究现状及进展。     

调节性T细胞和Notch1信号通路在原因不明复发性自然流产中的作用

目的探讨调节性T细胞(Treg)和Notch1信号通路在原因不明复发性自然流产(URSA)中的作用。方法流式细胞仪检测URSA患者(URSA组)及正常妊娠妇女(对照组)蜕膜CD4~+CD25~+T细胞Treg表达比例,real time RT-PCR及Western blotting检测蜕膜中CD4~+T细胞中Notch1信号通路和叉头转录因子家族3(Foxp3)表达情况。结果 URSA组CD4~+CD25~+T细胞/淋巴细胞、CD4~+Foxp3~+T细胞/淋巴细胞和CD4~+Foxp3~+T细胞/CD4~+T细胞比例均低于对照组(P0.05)。URSA组CD4~+T细胞中Notch1-Ic、RBPJκ、Foxp3 m RNA及蛋白表达均低于对照组。结论 URSA患者蜕膜CD4~+T细胞中Notch1信号通路和Foxp3表达下调,CD4~+CD25~+T细胞表达比例下降,提示URSA患者Notch1信号通路和Foxp3表达下调可能阻碍CD4~+T细胞转化为CD4~+CD25~+T细胞,进而诱发免疫排斥,诱导流产。