不同HCV优势抗原嵌合基因在大肠杆菌中的表达及其产物的分析

目的：为满足丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＥＩＡ检测的需要，构建含优势抗原表位的ＨＣＶ嵌合重组抗原。方法：利用基因工程重组技术，获得了不同的ＨＣＶ嵌合抗原ＮＣ１和ＮＣ２。含嵌合基因的表达质粒在大肠杆菌中表达了目的抗原，其中包括结构区核壳蛋白Ｃ２２和不同长度的非结构区蛋白ＮＳ３；表达产物经离子交换和盐析纯化。结果：用针对Ｃ２２或ＮＳ３抗原表位特异性血清及系列血清进行了检测，表明ＮＣ１和ＮＣ２均同时具有Ｃ２２和ＮＳ３抗原的免疫反应性。以嵌合抗原制备的抗ＨＣＶＥＩＡ试剂检测中国药品生物制品检定所的第三代Ｐａｎｅｌ血清时，其阳性、阴性通过率都符合要求。结论：构建的嵌合抗原有多个优势抗原表位，可用于ＨＣＶＥＩＡ检测     

不同HCV优势抗原嵌合基因在大肠杆菌中的表达及其？…

目的：为满足丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＥＩＡ检测的需要，构建含优势抗原表位的ＨＣＶ嵌合重组抗原。方法：利用基因工程重组技术，获得了不同的ＨＣＶ嵌合抗原ＮＣ１和ＮＣ２。含嵌合基因的表达质粒在大肠杆菌中表达了目的抗原，其中包括结构区核壳蛋白Ｃ２２和不同长度的非结构区蛋白ＮＳ３；表达产物经离子交换和盐析纯化。结果：用针对Ｃ２２或ＮＳ３抗原表位特异 血清及系列血清进行了检测，表明ＮＣ１和ＮＣ２均同时具有Ｃ２２     

丙型,乙型肝炎病毒在人原发性肝内胆管细胞癌中分布的免疫组…

应用原位分子杂交及免疫组化方法，使用地高辛标记ＨＣＶ５＇非编码区探针及抗ＨＣＶＧ ＮＳ３区Ｃ３３ｃ单克隆抗体检测３５例人原发性肝内胆管细胞癌，癌旁肝组织内ＨＣＶ ＲＮＡ及其ＮＳ３抗原，发现ＨＣＶ ＲＮＡ在肝内胆管细胞癌中的阳性率为８３％。ＨＣＶ ＲＮＡ定位于肝细胞胞浆中，个别病例在淋巴细胞、肝窦内皮细胞和枯否细胞中发现阳性信号。ＨＣＶ ＮＳ３区Ｃ３３ｃ抗原在肝内胆管细胞癌中的阳性率为８９％，阳性反     

丙型肝炎病毒核心蛋白可溶性单链可变区抗体在大肠杆菌中的表达

利用分子生物学技术,构建表达丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白的人源单链可变区抗体（ＳｃＦｖ）的原核表达载体,并在大肠杆菌ＪＭ１０９中表达可溶性的ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ。以重组的ＨＣＶ核心蛋白为包被抗原,利用噬菌体抗体库的表面展示技术,筛选到含有ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ基因的噬菌体克隆。从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒,经ＮｃｏⅠ／Ｎｏｔ Ⅰ酶切鉴定,该ＳｃＦｖ基因由７５０ｂｐ组成。将其亚克隆到ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ表达载体中,转化大肠杆菌ＪＭ１０９,提取质粒进行ＤＮＡ序列测定,符合ＳｃＦｖ的重链可变区和轻链可变区基因结构特点。ＩＰＴＧ诱导转化的大肠杆菌ＪＭ１０９,在其培养上清中获得了可溶性ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ的表达。酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）证实表达的ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡ     

丙型、乙型肝炎病毒在人原发性肝内胆管细胞癌中分布的免疫组化研究

应用原位分子杂交及免疫组化方法，使用地高辛标记ＨＣＶ５＇非编码区探针及抗ＨＣＶＮＳ３区Ｃ３３ｃ单克隆抗体检测３５例人原发性肝内胆管细胞癌，癌旁肝组织内ＨＣＶＲＮＡ及其ＮＳ３抗原，发现ＨＣＶＲＮＡ在肝内胆管细胞癌中的阳性率为８３％。ＨＣＶＲＮＡ定位于肝细胞胞浆中，个别病例在淋巴细胞、肝窦内皮细胞和枯否细胞中发现阳性信号。ＨＣＶＮＳ３区Ｃ３３ｃ抗原在肝内胆管细胞癌中的阳性率为８９％，阳性反应主要位于癌细胞胞浆内或肝细胞胞浆内，阳性细胞在癌组织中以灶性分布为主，在癌旁肝组织以弥漫分布为主。ＨＢ－ｘＡｇ在本组病例的阳性率为７７％。本文结果提示，在肝内胆管细胞癌的发生中，除ＨＢＶ以外，ＨＣＶ感染与其发生也有密切关系，是其致病因素之一。     

分泌抗HIVp24单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及其初步鉴定

以含人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）核心抗朱ｐ２４全部氨基酸序列的重组蛋白ｐＧ１免疫小鼠，用免疫脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，成功地建立了５株分泌抗ＨＩＶｐ２４单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株。经鉴定，这５株ＭｃＡｂ与乙肝核心抗原（ＨＢｃＡｇ），丙肝Ｃ区，ＮＳ－３区抗原不发生交叉反应，而与重组ｐ２４抗原产生特异反应，本组单抗的研制成功为建立检测ＨＩＶｐ２４抗原的方法奠定了基础。     

重组HCV NS5区抗原在丙型肝炎检测中的应用

重组ＨＣＶＮＳ５区抗原在丙型肝炎检测中的应用牛建章徐东刚＊孟宗达逯好英＊陈淑芬于秋丽河北省卫生防疫站保定０７１０００丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ５蛋白位于１９７３～３０１１氨基酸残基，含有ＧＤＤ序列，编码依赖ＲＮＡ的ＲＮＡ聚合酶，参与病毒的复制。因此检...     

抗原决定簇预测在HCV NS5区基因表达研究中的应用

目的：利用生物信息技术，对丙型肝炎病毒ＮＳ５区抗原决定簇进行预测分析，获得具有良好抗原的重组蛋白。方法 以Ｇｏｌｄｋｅｙ程序，通过综合亲水参数、可及性参数、柔韧性参数、抗原性参数，氨基酸序列的电荷分布和β折叠等多种指标，对ＨＣＶ ＮＳ５区抗原决定簇进行预测分析，克隆并表达部分ＮＳ５区基因。结果：发现７个可能性最大的抗原决定簇肽段，在此基础上表达的ＮＳ５反应融合蛋白可与丙型肝炎病人血清发生特异性反应     

NERVE DEFECT REPARATION BY VEIN BRIDGING WITH SCHWANN CELL IMPLANTATION

ＮＥＲＶＥＤＥＦＥＣＴＲＥＰＡＲＡＴＩＯＮＢＹＶＥＩＮＢＲＩＤＧＩＮＧＷＩＴＨＳＣＨＷＡＮＮＣＥＬＬＩＭＰＬＡＮＴＡＴＩＯＮＣＨＥＮＺｈｅｎｇ－ｒｏｎｇ（陈峥嵘），ＣＨＥＮＺｈｏｎｇ－ｗｅｉ（陈中伟），ＺＨＡＮＧＦｅｎｇ（张峰），ＣＨＥＮＧＧａｎｇ（...     

表达纯化的HCV NS3丝氨酸蛋白酶活性的体外分析

丙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ，ＨＣＶ）属于黄病毒科，是单链正股ＲＮＡ病毒。病毒基因组全长约９．３ｋｂ，只有一个开放阅读框，编码一条长约３０１０个氨基酸的前体蛋白。前体蛋白可加工成为Ｃ、Ｅ１、Ｅ２、ｐ７、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ５４Ａ、ＮＳ...     

HCV NS3丝氨酸蛋白酶分子间及与其辅助因子NS4A分子间相？…

丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）非结构蛋白ＮＳ３丝氨酸蛋白酶位于ＮＳ３Ｎ端，对病毒前体蛋白的加工和病毒成熟具有重要作用。目的：用近年来发展起来的检测蛋白分子间相互作用的酵母双杂交系统，证实ＮＳ３分子间及与其辅助因子ＮＳ４Ａ分子间存在相互作用。为进一步建立酵母三杂交系统，用以检测针对ＮＳ３的寡肽小分子对ＮＳ３丝氨酸蛋白酶活性的竞争抑     

人源汉坦病毒H8205株S基因NP编码区的序列测定及其NP强抗原性的分子生物学分析

目的：确定人源汉坦病毒Ｈ８２０５株在汉坦病毒属中的分类地位及找出其核衣壳蛋白（ｎｕ－ｃｌｅｏｃａｐｓｉｄ,ＮＰ）强抗原性的分子生物学基础。方法：采用半套式ＲＴ－ＰＣＲ扩增Ｈ８２０５Ｓ基因核衣壳蛋白（ＮＰ）编码区,克隆于载体ｐＢＶ２２０中并进行序列测定,测序结果用ＰＣＧＥＮＥ分析。结果：Ｈ８２０５株Ｓ基因ＮＰ编码区为１２９０ｂｐ（含两端引物序列）,与７６－１１８株核苷酸的同源性为８３．０％,氨基酸的同源性为９６％;ＮＰ的亲水性结构图与７６－１１８株的相似,但３个最高峰不同,Ｈ８２０５株的ＮＰ在Ｎ端有一个高度亲水性结构中心,计算机分析预测此区为一个非常强的抗原决定簇。结论：本研究从分子生物学角度证实Ｈ８２０５为ＨＴＮ型,Ｈ８２０５株ＮＰ强抗原性和免疫原性可能与Ｎ端的高度亲水性结构中心有关     

AN EVALUATION OF PREOPERATIVE CT SCANNING FOR SELECT-ING ADAPTIVE NAILS IN 78 CASES OF SHAFT FRACTURE

ＡＮＥＶＡＬＵＡＴＩＯＮＯＦＰＲＥＯＰＥＲＡＴＩＶＥＣＴＳＣＡＮＮＩＮＧＦＯＲＳＥＬＥＣＴ┐ＩＮＧＡＤＡＰＴＩＶＥＮＡＩＬＳＩＮ７８ＣＡＳＥＳＯＦＳＨＡＦＴＦＲＡＣＴＵＲＥＣＡＩＲｕ－ｂｉｎ（蔡汝宾），ＬＩＬｉ－ｑｕｎ（李力群），ＤＥＮＧＬｅｉ（邓磊...     

阳江高本底地区居民中免疫水平与对病毒免疫反应的研究

探讨在天然高本底电离辐射作用下机体的免疫水平与对病毒的免疫反应。方法利用单克隆抗体ＡＰＡＡＰ法检测白细胞介素－２分泌细胞（ＩＬ－２ＳＣ）；利用间接免疫酶法检测抗ＥＢ病毒抗原抗体水平（ＶＣＡ／ＩｇＡ，ＶＣＡ／ＩｇＧ，ＥＡ／ＩｇＡ，ＥＡ／ＩｇＧ）；采用酶标免疫吸附沉淀法检测乙型肝炎（ＨＢＶ）表面抗原（ＨＢｓＡｇ），表面抗原抗体（ＨＢｓＡｂ）和核心抗体（ＨＢｃＡｂ）。结果高本底地区（ＨＢＲＡ）居民外周血淋巴细胞ＩＬ－２ＳＣ频数显著高于对照（ＣＡ）；ＶＣＡ／ＩｇＡ、ＶＣＡ／ＩｇＧ、ＥＡ／ＩｇＧ抗体水平均高于ＣＡ，但仅ＶＣＡ／ＩｇＧ抗体滴度水平存在差异显著性，两地区ＶＣＡ／ＩｇＡ≥１５阳性检出率均显著高于广东地区的平均水平；ＨＢＶ感染率与ＨＢｓＡｂ阳性率为ＨＢＲＡ高于ＣＡ（Ｐ＞０．０５）。结论提示长期低水平电离辐射作用机体免疫功能有增强的趋势。     

GANGLIOSIDE GM_1 POTENTIATES NERVE GROWTH FACTOR EFFECTS ON REGENERATION OF CRUSHED SCIATIC NERVE IN RATS

ＧＡＮＧＬＩＯＳＩＤＥＧＭ１ＰＯＴＥＮＴＩＡＴＥＳＮＥＲＶＥＧＲＯＷＴＨＦＡＣＴＯＲＥＦ┐ＦＥＣＴＳＯＮＲＥＧＥＮＥＲＡＴＩＯＮＯＦＣＲＵＳＨＥＤＳＣＩＡＴＩＣＮＥＲＶＥＩＮＲＡＴＳＷＡＮＧＭｉｎ－ｓｈｅｎｇ（王民生），ＣＨＥＮＺｈｏｎｇ－ｗｅｉ（陈...     

L─ARGININE IMPROVES THE SPLANCHNIC VASODILATATION AND INTESTINAL BLOOD FLOW IN ENDOTOXEMIA

Ｌ┐ＡＲＧＩＮＩＮＥＩＭＰＲＯＶＥＳＴＨＥＳＰＬＡＮＣＨＮＩＣＶＡＳＯＤＩＬＡＴＡＴＩＯＮＡＮＤＩＮＴＥＳＴＩＮＡＬＢＬＯＯＤＦＬＯＷＩＮＥＮＤＯＴＯＸＥＭＩＡＸＩＡＯＮａｎ（肖南），ＣＨＥＮＨｕｉ－ｓｕｎ（陈惠孙），ＨＵＤｅ－ｙａｏ（胡德耀）ＬＵＳ...     

Clinical Significance of Acute Phase Hyperglycemia in Patients with Severe Head Injury

ＣＬＩＮＩＣＡＬＳＩＧＮＩＦＩＣＡＮＣＥＯＦＡＣＵＴＥＰＨＡＳＥＨＹＰＥＲＧＬＹＣＥＭＩＡＩＮＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨＳＥＶＥＲＥＨＥＡＤＩＮＪＵＲＹＺＨＡＮＧＳａｉ（张赛），ＹＡＮＧＳｈｕ－ｙｕａｎ（杨树源），ＷＡＮＧＭｉｎｇ－ｌｕ（王明璐）Ｏｂｊ...     

Evaluation of Two Kinds of Spinal Internal Fixation in Clinical Results and Biomechanics

ＥＶＡＬＵＡＴＩＯＮＯＦＴＷＯＫＩＮＤＳＯＦＳＰＩＮＡＬＩＮＴＥＲＮＡＬＦＩＸＡＴＩＯＮＩＮＣＬＩＮＩＣＡＬＲＥＳＵＬＴＳＡＮＤＢＩＯＭＥＣＨＡＮＩＣＳＳＨＥＮＧｅｎ－ｂｉａｏ（沈根标），ＬＵＯＺｈｕｏ－ｊｉｎｇ（罗卓荆），ＣＵＩＨａｉ－ｘｉａｎｇ（...     

人工合成HDV抗原27肽的应用—血清抗HDV的检测

采用自行设计、选择含天然ＨＤＡｇ部分片段的人工合成２７肽建立ＥＩＡ检测抗ＨＤＶ方法，在国内８家医院检测各类人员中血清抗ＨＤＶ状况。ＨＤＶ抗原合成肽由中国科学院上海生物化学研究所合成。结果：献血员（３１５例），甲型肝炎（１１３例）和非乙型肝炎（１５４例）中２例阳性；在ＨＢＶ感染者中共检出抗ＨＤｖ（＋）为２ｌ５／１４８２（１４．５１％）。其中ＡｓＣ为１４／４１４（３．３８％）、ＡＨ为１１／７６（１４．４７％），ＣＰＨ为５／２８（１７．８６％）、ＣＡＨ为３２／１８１（１７．６８％）ＳＨ为１７／８６（１９．７７％），ＬＣ为５２／１４２（３６．６２％），ＰＨＣ为３０／１３０（２３．０８％），另５４／４２５（１２．７１％）未分型。同一单位抗ＨＤＶ的检出与已往用市售试剂结果基本一致，与Ａｂｂｏｔｔ试剂符合率为９４．９％（７４／７８）。提示本ＨＤＶ抗原２７肽具有ＨＤＶ抗原活性，能特异地为天然抗ＨＤＶ识别，可作为检测抗ＨＤＶ诊断试剂。     

PERIPHERAL NERVE REPAIR IN RATS USING VASCULARIZED FROZEN IN-SITU MUSCLE AUTOGRAFT

ＰＥＲＩＰＨＥＲＡＬＮＥＲＶＥＲＥＰＡＩＲＩＮＲＡＴＳＵＳＩＮＧＶＡＳＣＵＬＡＲＩＺＥＤＦＲＯＺＥＮＩＮ┐ＳＩＴＵＭＵＳＣＬＥＡＵＴＯＧＲＡＦＴＷＡＮＧＹａｎ（王岩）１，ＺＨＵＳｈｅｎｇ－ｘｉｕ（朱盛修）１，ＨＵＮＧＬＫ２，ＬＥＵＮＧＰＣ２１．Ｄｅｐ...