发酵三七中的皂苷成分研究

微生物发酵中药将成为中药研究的新内容[1]。微生物与中药相结合,通过微生物发酵传统中药,使微生物中丰富的酶系与中药中复杂的化学成分反应,可能会产生一些中药中不具有的成分或改变一些成分含量的变化,从而可能为活性化合物的筛选提供一种新的途径。三七皂苷是三七的主要活性成分,具有多方面的药理作用,本实验用枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis(Ehrenberg)Cohn对三七须根进行发酵,对发酵后三七中的皂苷成分进行分离得到5个化合物,其中化合物人参皂苷Rh4在三七中未见报道,也未在三七原料药中检测到该化合物,说明该化合物是通过发酵产生的。…     

体外一氧化氮对马尔尼菲青霉菌生长的影响

马尔尼菲青霉菌现已被确认国是人类最重要的致命性真菌之一，能引真情的播散性系统性感染，机体细胞免疫是重要的防御机制，一氧化氮（ＮＯ）被认为是细胞免疫中的效应剂，在体外酸性介质中（ｐＨ４，ｐＨ５）由亚硝酸钠（ＮａＮＯ２）产生的ＮＯ大大抑制了马尔尼菲青霉菌的生长。相反，在中性介质中（ｐＨ７．４）没有ＮＯ产生，未发一上述抑制现象。     

几种防腐剂对青霉菌抑菌效果的观察

目的：观察几种防腐剂对青霉菌抑菌的效果。方法：采用正交试验，以严重霉变的奶油制品分离出的青霉菌为菌种，接种于不同配方防腐剂制作的察氏培养基，不加防腐剂的培养基为空白对照，于２８℃培养５天。根据空白及样品菌落直径换算出抑菌率为指标进行统计处理。结果：０．００３％维生素Ｋ３、０．０３％山梨酸和０．０３％苯甲酸对青霉菌的抑菌效果最好。结论：复合配方防腐剂对青霉菌的抑菌效果优于单一使用。维生素Ｋ３优于苯甲酸和山梨酸。     

4种方法对马尔尼菲青霉菌染色效果比较

目的：探讨马尔尼菲青霉菌适宜、简便的染色方法,以达到在基层实验室推广的目的。方法：通过4种染色方法对马尔尼菲青霉菌4种形态,特别是腊肠形有横隔的孢子和典型的帚状枝染色效果对比及实验室适用可行性对比,寻找不同形态时的最适宜染色方法。结果：标本涂片用PAS染色及Gram染色较易找到椭圆形和腊肠形有横隔的孢子,35℃培养的培养物用Gram染色容易发现孢子;25~C培养的培养物用乳酸酚棉蓝染色易见清晰的帚状枝和细长的分隔菌丝及孢子。结论：马尔尼菲青霉菌染色适宜、简便的方法为Gram氏染色法和乳酸酚棉蓝染色法。     

43例马尔尼菲青霉菌的培养体会

目的：总结马尔尼菲青霉菌的培养方法与体会,以提高获得性免疫缺陷综合征合并马尔尼菲青霉菌感染的诊断准确率。方法：选取本院2005年6月-2009年12月期间收治的HIV初筛为阳性的43例患者的血液样本进行培养,培养仪器为Bact/ALERT 3D全自动血培养仪,培养后转种于血平板与沙保罗琼脂平板上,于25℃与37℃对马尔尼菲青霉菌的菌落特征与镜下形态进行观察。结果：马尔尼菲青霉菌为双相型真菌,25℃条件下培养为霉菌相,培养48-72h后可见菌落周围出现水溶性玫瑰红色素。37℃条件下培养为酵母样菌落,镜下为圆形、卵圆形、腊肠样孢子,无色素。结论：艾滋病患者容易感染马尔尼菲青霉菌。对于艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染的患者,从其体内能分离出马尔尼菲青霉菌是诊断疾病的黄金标准。     

三七提取物抗谷氨酸损伤PC12细胞的活性筛选及成分分析

目的 研究三七提取物抗谷氨酸损伤PC12细胞的活性筛选,并分析活性部位的化学成分.方法 以谷氨酸损伤PC12细胞为模型,实验分为对照组、模型组、石油醚提取物和超临界CO2萃取物组(6.25、12.50、25、50、100、200 μg/mL).采用MTT比色法对三七石油醚提取和超临界CO2萃取部位进行活性筛选,并利用气质联用技术(GC-MS)对三七石油醚提取物和超临界CO2萃取物进行化学成分鉴定分析.结果 与对照组比较,25 mmol/L谷氨酸作用PC12细胞24 h,细胞生长抑制率接近50%.不同浓度石油醚提取物组与模型组的细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05),25、50、100 μg/mL石油醚提取物组间的细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05).不同浓度超临界CO2萃取物组与模型组的细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05),25、50、100 μg/mL超临界CO2萃取物组间的细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05).50、100 μg/mL超临界CO2萃取物组与石油醚提取物组的细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05).经GC-MS技术分析得出,超临界CO2萃取物中主要的脂溶性成分人参炔醇含量(13.09%)高于石油醚提取物(4.10%).结论 石油醚提取物与超临CO2萃取物对PC12细胞均有保护作用,但超临界CO2萃取物具有较好的细胞保护作用.     

三七抗2型糖尿病的活性成分和作用机制的网络药理学分析

目的:利用网络药理学方法分析三七抗2型糖尿病的活性成分和作用机制.方法:通过TCMSP数据库筛选三七的活性成分及其药理靶标,GeneCard和OMIM数据库检索2型糖尿病的病理靶点,取其药物-疾病交集靶点进行PPI蛋白互作网络分析及获取关键靶点,并进行通路富集分析.结果:经筛选检索,共发现8个三七活性成分,157个药理...     

马尔尼菲青霉菌素的制备和应用

目的探讨马尔尼菲青霉菌素的制备方法,并评价以马尔尼菲青霉菌素皮肤试验来诊断播散性马尔尼菲青霉菌病的价值。方法将新西兰大白兔随机分为对照组、马尔尼菲青霉菌组和白色念珠菌组,每组20只。马尔尼菲青霉菌组感染马尔尼菲青霉菌,白色念珠菌组感染白色念珠菌,对照组不作任何处理。按真菌抗原提取法制备马尔尼菲青霉菌素并进行部分改良,用Lowry法测定马尔尼菲青霉菌素中纯蛋白衍生物的含量;将马尔尼菲青霉菌素皮内注射于3组新西兰大白兔耳部内侧皮肤,并于注射后24、48、60h观察皮肤红肿反应。结果获得的马尔尼菲青霉菌素原液纯度高,特异性好;抗原效价测定结果显示马尔尼菲青霉菌素中纯蛋白衍生物含量为68mg·L-1,且具有良好的安全性。马尔尼菲青霉菌组和白色念珠菌组各时间点皮肤红肿反应平均直径比较,差别有统计学意义(P<0.001)。对照组未出现皮肤反应。注射后24h,马尔尼菲青霉菌组皮肤红肿反应全部为阳性,白色念珠菌组有2只为阳性。马尔尼菲青霉菌素皮肤试验方法对马尔尼菲青霉菌病进行早期诊断的敏感性为100.0%,特异性为90.0%,阳性预测值为90.9%,阴性预测值为100.0%。结论对真菌抗原提取法进行部分改良可获得具有良好安全性的马尔尼菲青霉菌素;马尔尼菲青霉菌素皮肤试验方法简便,结果稳定,可用于马尔尼菲青霉菌病的辅助诊断。     

三七主要成分及其免疫调节作用的研究进展

<正>三七又名田七、参三七,主产于云南、广西及四川等地,多为栽培品,是临床常用的活血化瘀中药。其味甘、微苦,性温,主归肝、胃、大肠经,具有止血、散瘀、消肿、止痛、补虚等功效,主治咯血、衄血、外伤出血及跌打肿痛等。三七及其主要成分的制剂多年来常用于治疗冠心病、糖尿病等心脑血管疾病并取得了较好的疗效。近年来三七在免疫性疾病的研究逐渐增多,并显示了良好的应用前景。现着重三七的主要成分及其在免疫调节方面研究进展作一     

三七总皂苷抑制HSC-T6增殖的实验研究

目的研究三七总皂苷对HSC-T6细胞增殖的影响。方法将复苏后处于对数生长期的HSC-T6单细胞悬液稀释成浓度为2.0×10^5个/ml,并以0.1ml/孔接种,置于37℃、5%CO2培养箱内培养,24h后将不同稀释度的三七总皂苷按0.1ml/孔加入培养孔。实验另设培养液空白对照组和细胞对照组。每24h观察细胞形态及其生长状况,实验第4天取细胞上清液,所余细胞以MTT法用酶标仪测定OD值,计算出药物对细胞增殖的抑制率。结果三七总皂苷1/1、1/2、1/4、1/8、1/16、1/32、1/64、1/128倍比稀释浓度时的抑制率分别为83.9%、82%、83%、80.4%、85.3%、79.8%、70.7%、58.9%。1/128以下浓度组的抑制率逐渐降低。结论三七总皂苷对HSC-T6细胞的增殖有明显抑制作用,且有明显的浓度依赖,在128倍稀释浓度时仍有较高抑制率且细胞破坏较轻。     

Comparative study on effect of panax notoginseng and ticlid in treating early diabetes nephropathy

Ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ（ＤＮ）ｉｓａｃｏｍｍｏｎｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ．Ｔｈｅｐａｔｈｏ ｇｅｎｅｓｉｓｏｆＤＮ ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｈｅｍｏｄｙｎａｍｉｃｓａｎｄｋｉｎｉｎ ｐｒｏｓｇｌａｎｄｉｎ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｄｉｓｔｕｒｂａｎｃｅｉｓｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄ．Ｗｅａｄｏｐｔｅｄｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｃｏｎ ｔｒｏｌｌｅｄｍｅｔｈｏｄｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｉｃａｃｙｏｆＴｉｃｌｉｄａｎｄＸｕｅｓｈｕａｎｔｏｎｇ（血栓通,Ｐａｎ…     

三七总皂苷与特利加压素联合治疗肝硬化腹水的效果观察

目的探讨肝硬化腹水患者采用三七总皂苷联合特利加压素进行治疗的临床效果。方法研究对象为来我院就诊的84例肝硬化腹水患者,按治疗方法不同分为对照组和观察组,分别给予综合治疗方法、三七总皂苷联合特利加压素共同治疗。对两组患者临床治疗效果、症状及体征、肝肾功能及各项肝纤维化观察指标进行比较。结果观察组患者的总有效率与对照组比较明显较高（P〈0．05）;观察组治疗8周后更好的改善了腹胀、腹水及肝区痛等临床症状体征,与对照组比较差异具有显著的统计学意义（P〈0．05）。两组患者治疗6～8周后,肝纤维化各项指标均明显降低,但观察组下降幅度更为明显（P〈0．05）。结论肝硬化腹水患者采用三七总皂苷联合特利加压素进行治疗能够使患者的临床症状得到显著的改善,效果较为满意,可以在临床推广应用。     

三七总皂甙对大鼠胆管上皮细胞缺血再灌注损伤的保护

目的 探讨胆管上皮细胞缺血再灌注损伤的机制及三七总皂甙在大鼠胆管细胞I/R损伤中的作用.方法 采用大鼠原位部分肝缺血再灌注模型.分4组观察在不同条件下胆管细胞及肝细胞的病理形态及超微结构变化及三七总皂甙对此缺血再灌注损伤的影响.结果 缺血再灌注组胆管细胞损伤更重,氧自由基生成更多,三七总皂甙预处理保护组胆管损伤明显减轻.结论 缺血再灌注损伤对胆管细胞的损伤较肝细胞更重,三七总皂甙预处理可减轻该损伤,其机制可能为抑制氧自由基生成.     

三七总皂甙对单侧输尿管梗阻后大鼠肾间质纤维化的作用及机制研究

目的观察三七总皂甙对单侧输尿管梗阻（UU0）大鼠肾间质纤维化的影响。方法将雄性SD大鼠80只随机分为4组：UUO组（UUU,n=20）、假手术组（SOR,n=20）、三七总皂甙组（PNS,50rag／（kg·d）,n=20）和氯沙坦组（ARB,20mg／（kg·d）,n=20）。从术后24小时开始,治疗组分别予PNS及ARB治疗,连续14天。于术后3、7、14天分别随机处死各组大鼠。行Masson染色观察肾间质病理学改变;化学比色法测定肾组织匀浆中羟脯氨酸的含量;采用Western蛋白印迹从蛋白水平观察金属蛋白酶1组织抑制剂（Tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP-1）的表达情况。荧光定量PCR（Real—time PCR）从mRNA水平观察胶原I（CollagenI,Col—I）和纤维粘连蛋白（Fibroneetin,FN）的表达。结果UUO组肾脏呈进行性肾间质纤维化及肾间质胶原沉积的改变（P〈0．05）。PNS组与UUU组比较均不同程度地减轻了胶原在肾间质的沉积,改善了肾脏病理损害,抑制了TIMP-1的表达（P〈0．05）。结论PNS对UU0所致的大鼠肾脏纤维化的形成有明显的抑制作用,其机制可能与抑制TIMP-1的表达有关。     

三七总皂甙对大鼠肝脏缺血再灌注损伤中肝细胞线粒体的保护作用

目的　观察三七总皂甙(PNS)对大鼠肝脏缺血再灌注(IR)损伤中对线粒体的保护作用。方法　制作IR模型,阻断血运前将PNS经直接通道注入并保留于肝脏组织,并提取肝细胞线粒体,测定线粒体成分的超氧化物歧化酶(SOD)总活力、丙二醛(MDA)含量;观察电镜下的组织学改变;动态性对比观察再灌注早期上述指标的变化。结果　在再灌注90 min时实验组的SOD总活力明显低于相对应的对照组(P<0 .0 1) ,MDA含量明显低于相对应的对照组(P<0 .0 1) ,电镜观察表明实验组在再灌注90 m in时线粒体等超微结构的破坏明显比对照组轻。结论　PNS在大鼠肝脏IR早期主要通过直接清除自由基及提高线粒体SOD活力而减轻和预防大鼠IR肝细胞线粒体的损伤。     

三七总皂苷注射液治疗急性期脑出血的系统评价

目的通过已发表文献系统评价三七总皂苷注射液治疗脑出血的有效性及安全性。方法搜集三七总皂苷治疗脑出血随机和半随机对照实验,筛选合格研究,进行质量评价和Meta-分析。结果有21个研究符合纳入标准。Meta-分析结果显示,与常规治疗对照组比较,病死率[Peto OR0.41,95%CI(0.19,0.90)],总有效率[RR 1.20,95%CI(1.14,1.26)],神经功能缺损评分[WMD-5.30,95%CI(-6.03,-4.58)],脑血肿体积[WMD-6.04,95%CI(-7.82,-4.27)],脑水肿体积[WMD-11.49,95%CI(-14.72,-8.26)],日常生活活动Barthel指数[WMD 11.55,95%CI(8.96,14.13)]均优于常规治疗组。敏感性分析显示Meta-分析结果稳定、可靠。结论三七总皂苷注射液治疗脑出血优于常规治疗,但缺乏远期生存质量的终点指标;不良反应情况报道较少。期待更多的大样本、高质量临床随机对照试验,以获得更可靠证据。     

三七总皂苷对大鼠肾小管上皮间充质转化过程的影响

目的研究三七总皂苷(PNS)对大鼠肾小管上皮间充质转化及肾间质纤维化的作用。方法建立大鼠肾纤维化的动物模型,将30只SD大鼠随机分为正常对照组、梗阻组和梗阻+PNS组,各10只。分别进行相应的处理后,观察其肾组织的间质纤维化情况,进行波形蛋白、小鼠抗大鼠细胞角蛋白(CK)、小鼠抗大鼠-平滑肌肌动蛋白(-SMA)和小鼠抗大鼠转化生长因子-1(TGF-1)的检测,并进行Gremlin检测。结果梗阻组和梗阻+PNS组大鼠肾组织均出现间质纤维化,但梗阻组的程度比梗阻+PNS组要明显。梗阻组、梗阻+PNS组中细胞角蛋白表达低于正常对照组,波形蛋白、-SMA和TGF-1以及Gremlin的表达显著高于正常对照组;而梗阻组中细胞角蛋白表达低于梗阻+PNS组,波形蛋白、-SMA和TGF-1以及Gremlin的表达则高于梗阻+PNS组,差异均有统计学意义(均<0.05)。结论三七总皂苷可能通过下调TGF-1、Gremlin等的表达,抑制肾小管上皮间充质转化,阻断了肾间质纤维化。     

三七有机磷农药残留的气相分析

目的:建立12种有机磷农药残留量的测定方法,分析不同产地的三七样品,比较产地与植株不同部位的有机磷农药残留量。方法:参照《中国药典》2010年版一部附录中农药残留量测定,采用GC-FPD检测有机磷农药残留量,并进行比较。结果:通过检测云南文山与红河泸西、弥勒产的三七样品,结果表明:样品中检测出二嗪农、对硫磷、马拉硫磷3种农药残留。在泸西和弥勒的茎叶中检测出二嗪农,残留量为0.13mg/kg;在文山大根中检测出马拉硫磷,残留量为0.03mg/kg;在文山和泸西的三七中均有检出对硫磷,且泸西茎叶的残留量高达0.58mg/kg。结论:三七有机磷农药残留量多种类同时测定方法操作简便、稳定,不仅适宜中药材农药残留的分析,也可用于农作物及其产品的有机磷农药残留量检测。     

小鼠自身免疫性心肌炎心肌ICAM-1的表达变化及三七总皂甙的干预作用

目的:探讨自身免疫性心肌炎小鼠心肌组织细胞问黏附分子-1(ICAM-1)的表达变化以及三七总皂甙对其的影响.方法:BALB/C雄性小鼠72只,随机均分为对照组(C组)、自身免疫性心肌炎组(A组)和三七总皂甙组(P组).A组和P组复制自身免疫性心肌炎模型.P组腹腔注射三七总皂甙进行干预.于第14、第21和第30天随机处死各组小鼠8只,留取心脏标本.电镜观察心肌组织超微结构改变,免疫组化法检测心肌组织ICAM-1蛋白表达.结果:A组心肌组织的超微结构损伤严重,P组较A组损伤程度明显减轻;C组心肌组织ICAM-1蛋白表达量极少,A组ICAM-1蛋白表达明显增加,呈动态变化,P组心肌细胞ICAM-1蛋白表达显著低于A组(P＜0.05或P＜0.01).结论:自身免疫性心肌炎可诱导心肌组织ICAM-1蛋白的表达,三七总皂甙可能通过下调心肌组织ICAM-1蛋白的表达而减轻心肌损伤.