面肩肱型肌营养不良症的基因诊断

目的 对中国人面肩肱型肌营养不良症进行基因诊断。方法 用EcoRI以及EcoRI/BlnI消化基因组DNA,0.6%琼脂糖凝胶电泳,P13E11探针进行Southern印迹杂交。结果 患者所得EcoRI BlnI/P13E11DNA片段长度在15-33kb之间,而正常对照在41kb以上,发现两个症状前患者。结论 以P13E11探针通过Southern印迹杂交探测EcoRi/BlnI双酶消化的基因组DNA可对中国人绝大部分面肩肱型肌营养不良症进行基因诊断,并可进行症状前诊断。     

面肩肱型肌营养不良症的分子遗传学研究进展

面肩肱型肌营养不良症（factoscapulohumeral muscular dystrophy,FSHD)呈常染色体显性遗传。大多数致病基因定位于4q35,存在遗传异质性。发现与FSHD相关的DNA重组,即4q35上3．3kb串联重复单位呈不同拷贝数缺失。以p13E-11为探针检测EcoR I/Bln I双重消化的DNA片段,FSHD患者的消化片段通常小于正常人,从而进行有效的分子诊断。由于FSHD基因尚未鉴定与分子,FSHD的确切发病机理仍未阐明,提出有位置效应变异假说等。目前有一候选基因FRG1。与FSHD相关的DNA重组片段的大小与FSHD临床表型之间显著相关,可较好地解释FSHD患者广泛的临床变异性。     

面肩肱型肌营养不良症基因诊断

目的 观察面肩肱型肌营养不良症(facioscapulohumeral muscular dystrophy，FSHD)患者p13E—11标记的4q35 EcoR Ⅰ／B1n Ⅰ片段分子量变化特点，对FSHD进行基因诊断。方法 提取基因组DNA，EcoR Ⅰ／B1n Ⅰ双酶切后进行脉冲凝胶电泳，用同位素标记的探针p13E—11进行Southern印迹，以小于38kb为诊断FSHD标准，观察4q35 EcoR Ⅰ／B1n Ⅰ片段分子量大小的分布。结果 FSHD组26例患者中，20例4q35 EcoR Ⅰ／B1n Ⅰ片段小于38kb，基因诊断阳性率为76．92％。FSHD亲属组12例，其中两例该片段小于38kb。对照组21人，该片段均大于38kb。结论 以小于38kb为诊断标准较满意，FSHD基因诊断阳性率与文献基本吻合。     

上海人群面肩肱型肌营养不良症相关位点的D4Z4多态性

目的 对上海人群4p35位点D4Z4重复序列进行研究，分析D4Z4的多态性。方法 191名正常上海人的基因组DNA经EooR I/Bln I双酶水解后，应用脉冲场凝胶电泳及Southem印迹测定其染色体4p35位点的D4Z4片段长度，并对短的D4Z4片段Kpn I酶进行部分酶切以计数其D4Z4串联重复序列数。结果 在191名正常上海人群中，有17人（占8.9％）携带短的D4Z4片段，其长度在22－34kb之间；其中16人携带的短D4Z4片段位于4q35位点，1人携带的短D4Z4片段为4q35→10q26。结论 面肩肱型肌营养不良症的发病虽与4q35位点D4Z4片段的串联重复序列数减少有关，但上海人群中携带4q35位点短的D4Z4片段个体的比例明显高于西方人群，提示其他因素可能也参与面肩肱型肌营养不良症的发病。     

面肩肱型肌营养不良症一例大家系20年随访报告

目的了解面肩肱型肌营养不良症一例大家系的发展形势,寻求防治方法。方法实际访查该家系所有成员,重绘家系谱图。结果该家系出现第Ⅶ代;现共418人:第Ⅵ代新发病3人:现存患者9人:因先天性疾病早死产15人。结论本病尚无法治疗,危害严重,应依据产前诊断和有效措施,终止本病的继续传递。     

伴腓肠肌假肥大的面肩肱型肌营养不良症一家系三例

先证者（Ⅱ4）女，31岁，因“自幼吹哨不能，双上肢无力16年伴双下肢无力10年”于2006年6月到我院门诊就诊。患者自幼不能吹口哨，6岁时发现鼓腮漏气，15岁左右发现双肩肌肉萎缩，随后胸大肌也逐渐出现萎缩，21岁左右发现双下肢萎缩，以近端明显，病情进展缓慢，目前自己梳头困难，能刷牙、行走。查体：神志清楚，心肺等内科检查未见异常。双侧额纹基本对称消失，双眼睑闭合无力，眼球各方向运动灵活、到位，口仑匝肌假性肥大而嘴唇微翘（猫脸），吹哨不能，鼓腮无力、漏气，鼻唇沟浅，表情运动无力、减少。双侧肩胛带肌、胸锁乳突肌、三角肌、肱二、三头肌、股四头肌和胫骨前肌萎缩，翼状肩胛，胸大肌上部萎缩，锁骨与第一肋骨突出，未见三角肌假性肥大，腓肠肌轻度假性肥大，未见弓形足、脊柱畸形。     

面肩肱型肌营养不良症的遗传早现现象三家系14例

家系１先证者（Ⅲ３），男，３２岁。因双上肢进行性无力，面部表情少１４年，伴双下肢无力１０年就诊。患者约１８岁时发现右肩肌肉少，随后发现鼓腮漏气，右上肢抬举无力，以后发展到左上肢，４～５年后双下肢也无力，上坡时明显，四肢近端肌肉萎缩，１０年后蹲下不能站...     

基于单细胞核转录组测序分析面肩肱型肌营养不良症中细胞间通讯模式

目的:通过单细胞核转录组测序分析面肩肱型肌营养不良症(FSHD)中细胞间通讯模式。方法:选取2例FSHD患者的双侧不对称病变的口轮匝肌组织和2例正常口轮匝肌组织,共6例样本,分为对照组、轻度组和重度组。对照组为2例健康人的正常肌肉组织,轻度组和重度组分别为FSHD患者相对正常和损伤较重的一侧肌肉组织。对3组样本的全部细胞进行单细胞核转录组测序,鉴定差异表达基因和富集通路,并通过细胞通讯分析主要细胞类型间的细胞间通讯模式以及关键信号通路。结果:FSHD患者双侧肌肉样本的差异基因表达分析共鉴定了不同细胞类型中与疾病相关的46个功能性差异表达基因,与细胞凋亡、氧化应激、免疫炎症和肌肉功能等相关。FSHD重度组的细胞间通讯普遍增加。纤维/脂肪祖细胞(FAPs)和巨噬细胞是FSHD异常肌肉微环境中的重要信号来源,与疾病进展密切相关。FSHD组中存在6条独有信号通路:骨形态发生蛋白(BMP)、转化生长因子-β(TGF-β)、CXC基序趋化因子配体(CXCL)、黏附G蛋白偶联受体E5(ADGRE5)、白细胞介素-16(IL-16)和无翅型MMTV整合位点家族(WNT)信号通路,这些信号通路主要涉及巨噬细胞、FAPs和脂肪细胞间的相互作用,可能参与调控病变肌肉的脂肪沉积和纤维化改变。结论:单细胞核转录组测序提供了FSHD关键细胞类型间较为全面的细胞间通讯模式,为理解FSHD肌肉微环境的细胞间调控机制提供参考。     

面肩肱型肌营养不良一家系26例

先证者(Ⅴ10)男，53岁。因双上肢进行性无力38年，伴双下肢无力23年就诊。患者15岁左右发现嘴唇逐渐增厚，吹口哨无力，鼓腮困难。18岁左右开始出现右肩胛带肌萎缩，右肩胛骨向后凸出，随后左肩胛带肌，胸大肌也逐渐出现萎缩。30岁左右出现双下肢近端肌肉萎缩，下蹲起立时困难。40岁开始不能承担较重体力劳动。目前行走尚无困难，但穿衣裤时上肢活动受限。查体：神清合作，智力正常，心肺未见异常。     

面肩肱型肌营养不良症71例的临床和遗传特点

面肩肱型肌营养不良症（ｆａｃｉｏｓｃａｐｕ－ｌｏｈｕｍｅｒａｌｍｕｓｃｕｌａｒｄｙｓｔｒ－ｏｐｈｙ，ＦＳＨＤ），由Ｌａｎｄｏｕｚｙ和Ｄｅｊｅｒｉｎｅ于１８８４年首先报道，临床以选择性侵犯面肌、肩带肌及上臂肌群为特征，国内报道较少，我院１９８０～１９９７年共收治７１例ＦＳＨＤ患者，现就其临床资料结合有关文献报告如下。１　临床资料１．１　一般资料　患者７１例，男５４例，女１７例，男∶女＝３∶１。发病年龄１～５３岁，平均１６．７岁；其中１～１０岁８例，１１～２０岁５２例，２１～３０岁８例，３１～４０岁…     

一例以智力低下为首发症状的面肩肱型肌营养不良患儿D4Z4区的变异分析

目的鉴定一例以智力障碍为首发症状的面肩肱型肌营养不良(facioscapulohumeral muscular dystrophy,FSHD)患儿4q35上D4Z4区域的致病变异。方法对患儿进行韦氏智力检测,并收集其临床资料进行综合分析。提取患儿及其父母的外周血DNA,先采用医学外显子组二代测序和拷贝数变异检测,之后应用分子梳法鉴定其D4Z4重复单元的缩短情况并鉴定其来源。结果患儿总体智商估计值为41,言语理解指数估计值为45,知觉推理指数估计值为520医学外显子组测序和拷贝数变异检测未发现患儿携带致病变异,分子梳检测结果表明患儿D4Z4区的长度为5.2kb,重复单元数为2,患儿的父母均未检测到相同的变异。结论D4Z4重复单元只有2个可能是患儿智力低下和FSHD的致病原因。分子梳检测能够鉴定此重复单元的数目和来源,有助于明确诊断。     

Genetic counselling in facioscapulohumeral muscular dystrophy.

Clinical data are presented from a survey of 41 families with dominantly inherited facioscapulohumeral muscular dystrophy (FSHD) in which over 500 family members were examined, including 168 affected subjects. New mutation could account for six isolated cases. Results suggest that 33% of heterozygotes over 40 years are mildly affected and a majority develop significant lower limb weakness; 19% over 40 years require wheelchairs. Presymptomatic testing of serum creatine kinase level (CK) is limited as a raised level occurs in only 80% of affected males under 40 years and 48% of affected women. Distribution of weakness, severity, age at onset, and CK varied between subjects, but provided no clinical evidence for genetic heterogeneity in a comparison between the 11 largest families. The conclusion of genetic homogeneity in FSHD, including subjects previously diagnosed as FSH type spinal muscular atrophy, is strongly supported by recent genetic linkage data.     

Molecular combing reveals complex 4q35 rearrangements in Facioscapulohumeral dystrophy

Facioscapulohumeral dystrophy (FSHD), one of the most common hereditary neuromuscular disorders, is associated with a complex combination of genetic variations at the subtelomeric 4q35 locus. As molecular diagnosis relying on Southern blot (SB) might be challenging in some cases, molecular combing (MC) was recently developed as an additional technique for FSHD diagnosis and exploration of the genomic organization of the 4q35 and 10q26 regions. In complement to the usual SB, we applied MC in a large cohort of 586 individuals with clinical FSHD. In 332 subjects, the two 4q alleles were normal in size, allowing exclusion of FSHD1 while we confirmed FSHD1 in 230 patients. In 14 patients from 10 families, we identified a recurrent complex heterozygous rearrangement at 4q35 consisting of a duplication of the D4Z4 array and a 4qA haplotype, irresolvable by the SB technique. In five families, we further identified variations in the SMCHD1 gene. Impact of the different mutations was tested using a minigene assay and we analyzed DNA methylation after sodium bisulfite modification and NGS sequencing. We discuss the involvement of this rearrangement in FSHD since all mutations in SMCHD1 are not associated with D4Z4 hypomethylation and do not always segregate with the disease.     

Linkage analysis of French families with facioscapulohumeral muscular dystrophy.

Linkage analysis was undertaken in seven French families with facioscapulohumeral muscular dystrophy (FSHD). Six polymorphic DNA probes were studied, including random DNA sequences, coding sequences, and a hypervariable marker. No evidence for linkage of these probes to the disease was detected, and the results exclude probable location of the FSHD gene from three chromosomal regions (16p, proximal 19q, and 21q).