胃壁细胞H+-K+ATP酶mRNA基因表达的影响因素

促胃酸分泌因子、Hp感染及常用抑酸药物均可对H+-K+ATP酶mRNA基因表达产生影响;H+-K+ATP酶mRNA的改变继而可引起H+-K+ATP酶活性及壁细胞泌酸功能改变.     

重组减毒沙门菌尿素酶B亚单位和过氧化氢酶疫苗治疗幽门螺杆菌感染的实验研究

目的　利用人类幽门螺杆菌 (Hp)感染的小鼠模型研究重组减毒沙门菌尿素酶B亚单位和过氧化氢酶疫苗在治疗Hp感染中的作用。 方法　将 30只二级C5 7BL/ 6小鼠随机分成 3组 ,通过灌胃方法每只小鼠均用活力良好的Hp菌株隔日攻击 2次。在第二次Hp攻击后 4周 ,分别给予重组减毒沙门菌尿素酶B亚单位疫苗 (A组 )、过氧化氢酶疫苗 (B组 )和生理盐水 (C组 )灌胃 1次 ,4周后处死动物 ,取胃组织分别行尿素酶试验、改良Giemsa染色及定量细菌培养 ,观察Hp定植情况。行HE染色观察胃黏膜组织炎症情况。取脾组织行淋巴细胞增殖试验。结果　C组小鼠Hp定植密度为 1.92× 10 6CFU/g胃组织 ,A组和B组小鼠分别为 1.5 8× 10 5CFU/g和 4 .88× 10 5CFU/g胃组织 ,两个治疗组的定植密度明显降低 (P <0 .0 5 )。治疗组与对照组胃黏膜均无明显炎症反应。治疗组脾淋巴细胞增殖试验阳性。结论　重组减毒沙门菌尿素酶B亚单位疫苗和过氧化氢酶疫苗对Hp感染有治疗作用。     

马来酸伊索拉定联合三联疗法对幽门螺杆菌感染小鼠治疗作用的实验研究

目的观察马来酸伊索拉定(Irsogladine Maleate,IM)联合三联疗法对幽门螺杆菌(H.pylori)感染小鼠的根除作用其及对H.pylori所致胃黏膜炎症的修复作用。方法 60只KM小鼠随机分为6组,空白对照组、H.pylori感染模型组和4个药物治疗组。治疗组分别给予标准三联、铋剂四联、小剂量IM+标准三联及大剂量IM+标准三联药物灌胃治疗。快速尿素酶试验(RUT)联合组织病理学Giemsa染色判断H.pylori根除情况,HE染色判断胃黏膜炎症情况。结果标准三联组7例H.pylori根除成功,铋剂四联组、小剂量IM+标准三联组及大剂量IM+标准三联组均有8例根除成功,四组根除率两两比较,差异无统计学意义(P0.05)。大剂量IM+标准三联组对胃黏膜慢性炎性反应的修复作用与铋剂四联组相当,优于标准三联组,差异有统计学意义(P0.05)。结论大剂量或小剂量IM联合标准三联对H.pylori感染小鼠的H.pylori根除率与铋剂四联相当,略高于标准三联,IM联合标准三联可明显改善H.pylori感染根除后的胃黏膜慢性炎性反应,且具有剂量依赖性。     

单味中药治疗幽门螺杆菌的动物研究

目的研究单味中药治疗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的疗效。方法建立感染H.pyloriSS1株BALB/c小鼠感染模型,将小鼠随机分成7组,每组25只,生理盐水(对照组)和黄连、黄芩、大黄、玄胡、紫珠水煎剂组及阿莫西林组(实验组),分别服药2周,停药4周后用胃黏膜组织Giemsa染色法、快速尿素酶试验及H.pylori分离培养方法判断H.pylori是否定植在小鼠胃黏膜中,从而判定H.pylori是否根除,最终评价中西药根除H.pylori的疗效。结果对照组根除率为20%;而实验组小鼠中,黄连、黄芩、大黄组根除率分别为76%、64%、68%,而玄胡、紫珠分别为28%、36%,阿莫西林组H.pylori根除率为80%,黄连、黄芩、大黄组及阿莫西林组与生理盐水有明显差异(P0.05),而玄胡、紫珠组与生理盐水组无明显差异(P0.05)。结论黄连、黄芩、大黄及阿莫西林对根除H.pylori效果好,玄胡、紫珠根除H.pylori的疗效差。     

胃壁细胞H^＋-K^＋ATP酶mRNA基因表达的影响因素

促胃酸分泌因子、Hp感染及常用抑酸药物均可对H^ -K^ ATP酶mRNA基因表达产生影响；H^ -K^ ATP酶mRNA的改变继而可引起H^ -K^ ATP酶活性及壁细胞泌酸功能改变。     

不同治疗方案根除幽门螺杆菌感染的疗效评价

目的 通过对两种不同方法 治疗幽门螺杆菌(Hp)感染患者的疗效进行观察,寻找根除Hp感染的最佳方案.方法 采用随机对照方法,将内科门诊就诊的120例Hp感染患者的资料随机分成两组,对照组60例使用传统四联疗法(雷贝拉唑+克拉霉素+甲硝唑+胶体次枸橼酸铋)治疗7 d;观察组60例给予四联疗法(雷贝拉唑+阿莫西林+左氧氟沙星+胶体次枸橼酸铋)治疗7 d.两组4周后均做13C尿素酶呼气试验,并做比较.结果 对照组Hp根除率为70.9%,观察组Hp根除率为92.9%,两组Hp根除率比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 四联疗法(雷贝拉唑+阿莫西林+左氧氟沙星+胶体次枸橼酸铋)能更有效地根除Hp.     

幽门螺杆菌诱导蒙古沙鼠胃上皮细胞凋亡可能涉及线粒体途径

目的建立幽门螺杆菌(Hp)感染蒙古沙鼠模型,探讨线粒体途径在Hp诱导胃上皮细胞凋亡中的作用。方法 48只雄性蒙古沙鼠均分为Hp感染组和对照组,每组分别于1、3和6个月3个时相点各处死8只动物,取胃黏膜行组织学检查:用Warthin-Starry银染、PCR和快速尿素酶法检测 Hp;通过H-E染色,光镜下观察胃黏膜病理变化;流式细胞仪测定细胞凋亡、线粒体膜电位及胞内游离 Ca2+含量。结果 Hp感染蒙古沙鼠后,胃黏膜出现慢性胃炎、肠化生及异型增生改变,而对照组胃黏膜基本正常,Hp感染组肠化生及异型增生发生率明显高于对照组(P<0．05)。Hp感染胃上皮细胞1、3、 6个月后的凋亡率分别为(16．71±3．30)％、(5．90±0．82)％、(5．69±0．70)％,而对照组的凋亡率分别为(4．20±0．94)％、(3．17±0．43)％、(4．70±0．55)％。其中Hp感染1个月后胃上皮细胞的凋亡率高于其他各组(P<0．05)。Hp感染胃上皮细胞1、3、6个月后的线粒体膜电位分别为43．10±17．62、 71．19±38．03、80．56±32．90,而对照组分别为84．70±23．50、84．39±37．51、79．54±30．24,其中Hp 感染1个月后胃上皮细胞的线粒体膜电位低于其他各组(P<0．05);Hp感染1、3、6个月后胃上皮细胞内游离Ca2+含量分别为18．60±9．32、5．18±2．06、4．94±3．25,而对照组分别为4．82±3．70、6．86 ±2．34、5．28±3．13,Hp感染1个月后胃上皮细胞内游离Ca2+含量高于其他各组(P<0．05)。结论 Hp诱导蒙古沙鼠胃上皮细胞凋亡主要发生在Hp感染早期;线粒体膜电位的下降和胞内游离Ca2+含量的升高参与了Hp诱发蒙古沙鼠胃上皮细胞凋亡的过程。     

幽门螺杆菌感染Balb/c 小鼠模型的建立及对N-甲基-N-亚硝基脲诱发胃癌的影响

目的建立一种稳定的造模周期短的幽门螺杆菌(Hp)感染模型,观察Hp对小鼠胃黏膜的损害程度,同时研究Hp感染是否促进亚硝基类化合物的致癌作用.方法 94只Balb/c小鼠分为4组.第1组单用N-甲基-N-亚硝基脲(MNU);第2、3组小鼠用灌胃法定植Hp,第3组小鼠加用MNU灌胃;第4组为正常对照.36周后处死全部小鼠,分别用尿素酶、Giemsa染色和微需氧细菌培养检测Hp定植;H-E染色进行鼠胃黏膜病理诊断.结果 Balb/c小鼠Hp定植率达93.9%.Hp单一处理组中度以上炎症占100.0%,其中萎缩性胃炎占20.0%;而Hp和MNU联合处理组中度以上炎症占100.0%,其中萎缩性胃炎占23.1%,不典型增生占42.3%和57.7%(胃体和胃窦),并发现2只小鼠有低分化腺癌,占7.1%.Hp处理组和Hp MNU联合处理组在炎症程度上与正常对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.01).结论本实验成功建立了Hp感染小鼠模型,验证了Hp和胃癌的发生有高度相关性,证实Hp在协同MNU致癌性中的作用,提示胃癌的发生并非Hp感染单一因素的结果,而和多因素共同作用有关.     

荆花胃康胶丸对小鼠体内H.pylori的根除作用及对胃黏膜上皮细胞形态的影响

[目的]观察荆花胃康胶丸对幽门螺杆菌(H.pylori)感染小鼠的体内杀菌作用及对胃黏膜上皮细胞超微形态的影响。[方法]55只SPF级KM小鼠采用短期免疫抑制联合经口感染方法建立H.pylori感染模型,随机分为空白对照组、模型对照组、荆花胃康组、三联组、联合给药组。荆花胃康组给予荆花胃康挥发油4周;三联组给予兰索拉唑、甲硝唑、克拉霉素1周;联合治疗组给予三联+荆花胃康1周后,单独继续给予荆花胃康3周;模型对照组给予灭菌注射用水;空白对照组不予干预。所有动物均于给药4周后处死,通过快速尿素酶试验、Warthin-Starry染色判断H.pylori根除率,扫描电镜下观察胃黏膜上皮细胞超微形态。[结果]荆花胃康组H.pylori根除率为4/10,三联组7/10,联合给药组8/10,差异无统计学意义;联合给药组胃黏膜上皮细胞形态最优,达到与空白对照组相当的水平,三联组次之,荆花胃康组效应最弱。[结论]荆花胃康胶丸具有小鼠体内根除H.pylori的作用,其与三联疗法联合可有效促进胃黏膜上皮细胞形态结构的恢复。     

慢性心房颤动患者心房肌浆网钙离子ATP酶及罗纳丹受体mRNA表达变化的研究

研究慢性心房颤动 (简称房颤 )患者Ca2 + 调节蛋白 肌浆网Ca2 + ATP酶及罗纳丹受体 (RyR)mRNA表达的改变 ,探讨房颤时心房肌细胞钙超载的原因及其在房颤发生和维持中的作用。选择 2 0例风湿性心脏病 (以二尖瓣狭窄为主 )接受瓣膜置换术者 ,于术中插管前取右心耳组织约 10 0mg ,采用逆转录 聚合酶链式反应技术 ,测定肌浆网Ca2 + ATP酶及RyR2 mRNA的变化。结果 :房颤者肌浆网Ca2 + ATP酶及RyR2 mRNA水平较窦性心律者明显下调 (分别为 0 .85 4± 0 .2 0 7vs 1.832± 0 .379,P <0 .0 0 1;1.4 12± 0 .319vs 2 .2 5 0± 0 .4 6 8,P <0 .0 5 ) ,且与临床血流动力学参数及性别、年龄无显著相关性。结论 :房颤患者肌浆网Ca2 + ATP酶及RyR2 mRNA表达水平下调 ,表明心房肌浆网钙离子调节蛋白可能参与房颤的发生或维持     

Effects of cagA+ and cagA- strains of Helicobacter pylori on the human gastric mucus layer thickness

BACKGROUND: Infection with cytotoxin-associated gene A (cagA) Helicobacter pylori is associated with severe gastric diseases, with contradictory views being expressed concerning the effect of H. pylori on the gastric mucus thickness. The aim of the present study was to differentiate between the effect of cagA+ and cagA- strains on gastric mucus thickness. METHODS: Ninety-nine patients without peptic ulcers who were not on medication were randomly recruited from consecutive endoscopy clinics: six biopsies (five antral, one body) were obtained from each patient. Cryostat sections (18 microm) were cut and stained using the modified periodic acid-Schiff/Alcian blue technique. Mucus thickness was measured using computer-assisted light microscopy. The H. pylori status was assessed by histology, Campylobacter-like organism (CLO)test and culture, and cagA+ status determined by polymerase chain reaction (PCR). RESULTS: There was no significant difference (P = 0.784) in mean mucus thickness between cagA+ (52.7 +/- 1.2 microm, n = 10), cagA- (46.6 +/- 1.1 microm, n = 18) or H. pylori-negative patients (51.3 +/- 1.1 microm, n = 30). In cagA- patients, mucus thickness was significantly reduced with increased H. pylori colonization density, Spearman (r(s)) = -0.805, P < 0.0001. In contrast, in cagA+ patients there was a weak positive, but not significant, association between mucus thickness and H. pylori colonization density, r(s) = 0.333, P = 0.381. CONCLUSIONS: The human gastric mucus thickness is not affected by infection with cagA+ or cagA- strains of H. pylori compared with uninfected. Although a trend of increased mucus thickness with cagA+ infection was observed.     

心绞痛患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞检测及意义

目的 探讨不稳定型心绞痛患者外周血CD+4CD+25Foxp3+T细胞的水平及意义.方法 采用流式细胞分析法,检测26例不稳定型心绞痛(观察组)和36例健康对照者(对照组)外周血CD+4CD+25Foxp3+T细胞比例.结果 观察组的CD+4CD+25T细胞与CD+4T细胞比例为(7.18±2.37)%显著低于对照组的(8.81 ±1.50)%(P<0.05);观察组的CD+4CD+25Foxp3+T细胞与CD+4T细胞比例为(1.43±0.55)%也显著低于对照组的(1.75 ±0.58)%(P<0.05).结论 CD+4CD+25Foxp3+调节性T细胞比例降低可能打破了外周免疫耐受,参与了不稳定型心绞痛患者动脉粥样硬化的发生发展.     

支气管哮喘大鼠CD4+CD25+T细胞的变化及地塞米松干预作用的研究

目的 研究支气管哮喘(简称哮喘)大鼠模型支气管肺泡灌洗液(BALF)、血液、脾脏CD4+CD25+T细胞的变化,及地塞米松对CD4+CD25+T细胞的影响.方法 50只SD大鼠随机分为5组,空白对照(A)组,哮喘(B)组,地塞米松1(C)组、地塞米松2(D)组,地塞米松3(E)组.A组第l天给予腹腔注射生理盐水l ml,第15～21天每天给予生理盐水雾化.B、C、D、E组用卵蛋白建立哮喘大鼠模型,第1天,每只大鼠腹腔注射抗原l ml(卵蛋白1 mg+灭活百日咳杆菌9×106个+氢氧化铝干粉100 mg)混悬液,第15～21天给予1%的卵蛋白雾化30 min,C、D、E组于雾化后分别给予腹腔注射地塞米松0.2 mg/kg、1 mg/kg、2 mg/kg.采用流式细胞仪检测的方法 ,观察大鼠体内BALF、外周血、脾脏CD4+CD25+T细胞的变化及使用不同剂量地塞米松后对其的影响.结果 B组BALF、外周血、脾脏CD4+CD25+T细胞表达占CD4+T细胞的百分比分别是(42.21±5.62)%、(12.69±2.70)%、(11.15±1.05)%,A组结果 分别是(18.76±5.85)%、(6.21±1.73)%、(7.85±2.13)%.B组与A组比较,差异均具有统计学意义(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05);C组、D组、E组BALF中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的百分比表达分别是(10.49±4.03)%、(13.28±5.12)%、(7.51±5.39)%,显著低于A组和B组,(P＜0.05,P＜0.01);外周血中,C组(6.03±1.43)%、D组(4.88±0.95)%与A组(6.21±1.73)%比较,差异无统计学意义,E组(3.49±0.62)%与C组、A组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).脾脏中,C组(7.25±1.82)%、D组(8.63±3.18)%与A组(7.85±2.13)%比较,差异无统计学意义,E组(3.38±1.37)%与C组、D组、A组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CD4+CD25+T细胞在哮喘大鼠体内有明显的优势表达,可能是哮喘发病的机制之一.地塞米松可以抑制CD4+CD25+T细胞的表达.BALF内CD4+CD25+T细胞的变化与外周血和脾脏的变化具有一致性,监测外周血或脾脏CD4+CD25+T细胞变化可了解肺部情况.     

CD4+CD25+T细胞与支气管哮喘

本文就CD4^＋CD25^＋T细胞的调节机制，CD4^＋CD25^＋T细胞与变态反应的关系，以及CD4^＋CD25^＋T细胞在支气管哮喘发病机制中的作用作一综述。     

Hepatic stellate cells express Ca2+ pump-ATPase and Ca2+-Mg2+-ATPase in plasma membrane of caveolae

Intracytoplasmic free calcium ions (Ca²⁺) are maintained at a very low concentration in mammalian tissue by the extrusion of Ca²⁺ across a steep extracellular Ca²⁺ gradient, mainly through the activity of plasma membrane Ca²⁺ pump-ATPase. The present study aimed to identify, by electron cytochemical and electron immunogold methods, the ultrastructural localizations of two types of plasma membrane Ca²⁺-ATPase; Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase and Ca²⁺ pump-ATPase, in hepatic stellate cells. Liver tissues and isolated hepatic stellate cells (HSCs) were studied. The ultrastructural localization of Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase activity was examined by the electron cytochemical method of Ando. The localization of Ca²⁺ pump-ATPase was identified by immunofluorescence. The ultrastructural localization of Ca²⁺ pump-ATPase was identified by the electron immunogold method. The cytochemical reaction products of Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase activity were localized on the outer (cavity) side of the plasma membrane of caveolae. Immunofluorescence of Ca²⁺ pump-ATPase was seen as small dots along the cell edge in HSCs. Immunogold particles indicating the presence of Ca²⁺ pump-ATPase were identified on the inner (cytoplasmic) side of the plasma membrane of caveolae. We localized Ca²⁺ pump-ATPase on the inner side of the plasma membrane caveolae and Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase on the outer leaflet of the caveolar plasma membrane in stellate cells, suggesting that Ca²⁺ pump-ATPase may play a key role in the Ca²⁺ reflux. Received: March 7, 2000 / Accepted: July 7, 2000     

CagA＋及VacA＋幽门螺杆菌对克拉霉素的耐药性突变分析

目的分析CagA＋及VacA＋的幽门螺杆菌（Hp）对克拉霉素耐药与23S rRNA基因点突变的关系。方法采集右江民族医学院附属医院2006~2008年确诊为Hp感染患者的胃窦部黏膜样本进行Hp分离培养和鉴定,PCR扩增CagA＋及VacA＋基因,E-test进行药敏实验,PCR方法扩增23S rRNA基因,基因测序检测克拉霉素耐药菌株的点突变。结果对克拉霉素耐药的CagA＋及VacA＋Hp菌株均存在23S rRNA基因v功能区第2144位和第2143位A-G突变,而敏感菌株没有发现该位点突变。结论Hp对克拉霉素耐药的23S rRNA基因A2143G、A2144G点发生突变,与基因分型无关。     

CD4+ CD25+ 调节性T细胞与自身免疫性甲状腺疾病

CD4+ CD25+ 调节性T细胞为新近发现的一群功能成熟的T细胞亚群.其特征性表达叉头盒蛋白3(Foxp3)分子,专职免疫无能和免疫抑制,在维持外周免疫耐受,防止自身免疫性疾病发病中起着极为关键的作用.CD4+ CD25+ 调节性T细胞在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)发病中的作用引起了人们的关注.动物实验发现CD4+ CD25+ 调节性T细胞存在与否决定了实验动物是否发生实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)和Graves病.人体研究发现CD4+ CD25+ 调节性T细胞数目和功能异常与人AITD发生密切相关.这些研究结果提示,CD4+ CD25+ 调节性T细胞可能在AITD发病中起重要作用.     

CD4+CXCR5+ T cells activate CD27+IgG+ B cells via IL-21 in patients with hepatitis C virus infection

BACKGROUND: Chronic hepatitis C virus (HCV) infection causes the skewing and activation of B cell subsets, but the characteristics of IgG+ B cells in patients with chronic hepa-titis C (CHC) infection have not been thoroughly elucidated. CD4+CXCR5+ follicularhelperT(Tfh)cells,viainterleukin (IL)-21 secretion, activate B cells. However, the role of CD4+CXCR5+T cellsintheactivationof IgG+ BcellsinCHCpatientsis not clear.
METHODS: The frequency of IgG+ B cells, including CD27?IgG+B and CD27+IgG+ B cells,the expression of the activation markers (CD86 and CD95) in IgG+ B cells, and the percentage of circu-lating CD4+CXCR5+ T cells were detected by flow cytometry in CHC patients (n=70) and healthy controls (n=25). The con-centrations of serum IL-21 were analyzed using ELISA. The role of CD4+CXCR5+ T cells in the activation of IgG+ B cells was investigated using a co-culture system.
RESULTS: A significantly lower proportion of CD27+IgG+ B cells with increased expression of CD86 and CD95 was observed in CHC patients.The expression of CD95 was negatively correlated with the percentage of CD27+IgG+ B cells, and it contributed to CD27+IgG+ B cell apoptosis. Circulating CD4+CXCR5+ T cells and serum IL-21 were significantly increased in CHC patients. Moreover, circulating CD4+CXCR5+ T cells from CHC patients induced higher expressions of CD86 and CD95 in CD27+IgG+B cells in a co-culture system; the blockade of the IL-21 decreased the expression levels of CD86 and CD95 in CD27+IgG+ B cells.
CONCLUSIONS: HCV infection increased the frequency of CD4+CXCR5+ T cells and decreased the frequency of CD27+IgG+B cells. CD4+CXCR5+ T cells activated CD27+IgG+ B cells via the secretion of IL-21.     

自身免疫性甲状腺疾病和CD4~+CD25~+调节性T细胞

自身免疫性甲状腺疾病(AITD)的发生及发展与CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg细胞)的数量和功能密切相关.动物实验证明Treg细胞可抑制AITD的发生.如果清除动物体内的该类细胞,可导致AITD发病或使原有的甲状腺疾病加重,Treg细胞通过抑制效应性T细胞的激活而发挥对AITD的影响作用.无论是胸腺还是外周,不同诱导体系来源的Treg细胞均对AITD有影响作用.     

自身免疫性甲状腺疾病和CD4~+CD25~+调节性T细胞

自身免疫性甲状腺疾病(AITD)的发生及发展与CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg细胞)的数量和功能密切相关.动物实验证明Treg细胞可抑制AITD的发生.如果清除动物体内的该类细胞,可导致AITD发病或使原有的甲状腺疾病加重,Treg细胞通过抑制效应性T细胞的激活而发挥对AITD的影响作用.无论是胸腺还是外周,不同诱导体系来源的Treg细胞均对AITD有影响作用.