GDNF、GFAP和NGFRp75在成年大鼠和金黄地鼠嗅球成鞘细胞的免疫组织化学研究

目的　研究GDNF在成年大鼠和金黄地鼠嗅球成鞘细胞的表达 ,探索成鞘细胞在中枢神经再生中的作用。　方法　用免疫组织化学ABC法 ,显示GDNF在成年大鼠和金黄地鼠嗅球成鞘细胞的表达和分布 ,同时用NGFRp75和GFAP染色作为阳性对照。　结果　在成年大鼠和金黄地鼠嗅球的纤维层和小球层内均可见深棕色的GDNF免疫组织化学反应的成鞘细胞。在小球层与纤维层分界处和小球层与分子层分界处及嗅小球之间密集分布 ,在嗅小球之内较稀疏。同时在同一嗅球组织的另两组切片的相同部位 ,分别出现GFAP和NGFRp75免疫反应性细胞 ,间接说明GDNF免疫反应的结构是嗅球成鞘细胞。　结论　嗅球成鞘细胞含有胶质细胞源性神经营养因子     

血小板衍生生长因子受体α阳性细胞在成年大鼠脑中的分布规律

目的:研究少突胶质细胞前体细胞在成年大鼠脑中的分布规律。方法:成年Wistar大鼠脑组织血小板衍生生长因子受体α(PDGF-Rα)抗体免疫组化酶标染色。结果:PDGF-Rα免疫染色阳性物质在细胞核、细胞质和突起均有分布。阳性细胞主要分布在前脑和中脑的白质和灰质。嗅球、大脑皮质、海马、视交叉的分布密度高。阳性细胞胞体为长柱形。嗅球和海马的阳性细胞突起和分支较少。在基底节和嗅球见多突起,突起多分支的阳性细胞。结论:少突胶质细胞前体细胞在大鼠的大脑中非均匀分布。不同部位阳性细胞的形态差异主要在于突起的数量。突起的数量越多,突起的分级也就越多。     

大鼠前脑动脉的形态学研究

目的观察大鼠前脑动脉的分布、形态和结构,为进一步研究脑血管疾病提供依据。方法通过颈总动脉注射红色乳胶和多种染色方法对大鼠前脑动脉的大体形态和微细结构进行观察。结果大鼠脑基底动脉环完整,颈内动脉和基底动脉在前脑的主要分支有大脑前动脉、大脑中动脉和大脑后动脉。其中,大脑前动脉位于大脑纵裂底部,几何形态学指标稳定,镜下脑动脉管壁形态结构典型。结论大鼠前脑动脉大体形态学和微细结构与人端脑动脉相似,大脑前动脉由于其位置恒定和结构典型在研究脑血管改变方面具有一定价值。     

红藻氨酸癫痫大鼠前额叶皮层多巴胺D2受体的变化及意义

利用红藻氨酸颈部皮下注射 ,诱发大鼠癫痫发作 ,用免疫组化和原位杂交方法 ,观察前额叶皮层多巴胺 D2 受体蛋白和m RNA的变化。在诱发 4,5级癫痫发作后 4周 ,模型大鼠前额叶皮层 层细胞多巴胺 D2 受体免疫反应活性及其 m RNA明显下降 ,而在 、 层则有明显上升。多巴胺 D2 受体蛋白及其 m RNA在 层的下调可能导致该层锥体细胞的脱抑制 ,从而导致其往皮层下核团如尾壳核和伏隔核的谷氨酸能输入增加。而 层的上调则可能导致该层输出信息的障碍 ,引起皮层间信息联系的改变 ,这种变化对于探讨癫痫并发的认知障碍可能具有一定的意义。     

Alzheimer病患者和大鼠脑内早老蛋白-1的分布

用免疫组化方法和原位杂交观察散发性阿尔茨海默病 (Sporadic Alzheimer' s disease)病人和老年对照 ,以及成年大鼠脑组织内的早老蛋白 -1(Presenilin-1,PS1)分布。结果观察到 PS1在脑内广泛分布 ,其中小脑的 Purkinje细胞、皮层的第 、 层细胞、内嗅皮层的第 层、海马的锥体细胞层和颗粒细胞层、黑质等结构 PS1表达较高。在大鼠和正常对照人脑内大多数 PS1阳性神经元染色呈点状分布于胞浆内 ;而阿尔茨海默病人脑内有许多 PS1阳性神经元为均质染色并且其中有些呈神经原纤维缠结状 ,其次有大量各型 PS1阳性老年斑 ,和少量 PS1阳性胶质细胞。结果提示 PS1可能参与散发性阿尔茨海默病脑病理改变     

一氧化氮合成酶阳性神经元在大鼠前脑的分布

用NADPH—d组织化学方法观察一氧化氮合成酶阳性神经元在大鼠前脑结构的分布和形态,结果显示在大脑皮质、纹状体、嗅球、杏仁核、基底前脑和下丘脑有较多一氧化氮合成酶神经元分布,这些神经元大多显示了Golgi样染色外观,它们尚不能与任何已知的神经递质类型神经元单一相对应.皮质、嗅球、纹状体和Calleja氏岛分别含有中等密度和密集的一氧化氮合成酶阳性纤维,一氧化氮合成酶阳性纤维较细,带有小的或中等大小的膨体,相互编织成疏密不等的纤维网.     

含Calbindin-D28K mRNA的神经元在大鼠前脑中的分布—原位杂交组织化学法观察

本实验应用原位杂交组织化学技术,利用同位素标记的寡核苷酸探针,对大鼠前脑含Calbindin-D28 K mRNA的神经元的分布状况进行了详细的观察。结果发现在不同脑区或核团中,标记神经元的数量和标记强度各不相同。某些部位含许多强阳性神经元,如:前嗅核、大脑皮质、尾壳核、缰核、下丘脑、齿状回及中脑和杏仁复合体中的部分核团;然而,在另外一些脑区中,标记细胞呈中等阳性,如:嗅球的球旁细胞、盖带、梨状区内核、海马的CA1区中的锥体细胞层以及丘脑和杏仁核复合体中的部分核团。少数脑区中的标记细胞呈弱阳性,且数量较少,如;嗅结节、隔区、斜角带核等。这些结果表明含Calbindin-D28K mRNA的神经元在大鼠前脑中具有区域特异性分布特点,从而提示Calbindin-D28K在神经系统中的某些部位可能具有重要的作用。     

NMDA受体在正常大鼠颈动脉体的表达

应用免疫组织化学方法观察了离子型谷氨酸受体——NMDA受体的NR1及NR2A亚单位在正常成年雄性SD和Wistar大鼠颈动脉体的表达,并对阳性产物的表达强度进行了灰度分析及统计学处理。结果表明:正常成年SD大鼠及Wistar大鼠的颈动脉体内均存在NMDA NR1免疫反应阳性细胞,从阳性细胞的形态和分布特点判断这些阳性细胞为主细胞,两种大鼠之间无明显差异(P>0.05);而两种大鼠的颈动脉体内几乎不存在NMDA NR2A免疫反应阳性细胞。本实验的结果提示:在正常成年大鼠颈动脉体的主细胞上有NMDA受体的分布,并且该受体的二聚体构成不同于经典受体,这可能与谷氨酸在颈动脉体发挥的特殊功能有关。     

脑组织移植纠正脑缺失的研究Ⅱ.基底前脑脑组织移植纠正前…

破坏雌性成年ＳＤ大鼠前额叶皮层，建立条件性回避反应消退模型，再进行鼠胚基底前脑脑组织移植。移植５个月后，大鼠的条件性回避反应恢复，在尼氏染色切片上，可观察到植入的细胞团；免疫组织化学染色证明，移植物含胆硷能神经元，呈中等强度的ＣｈＡＴ阳性反应，提示移植物成活。     

Nogo-A在成年大鼠脑内神经元的分布

目的研究Nogo-A阳性神经元在正常成年大鼠脑内的分布. 方法免疫组织化学方法（ABC法）.结果Nogo-A在正常大鼠脑内的神经元和纤维有广泛的表达,出现在许多核团,主要在1.前脑的大脑皮质、嗅觉系统、海马、隔区、基底神经节、丘脑、下丘脑和视前区等部位;2.脑干的视听觉、体躯感觉、内脏觉核团、运动核团以及网状结构等;3.小脑Purkinje细胞和深核.阳性反应物主要见于神经元的胞浆和突起内,在脑室系统的嗅球室管膜、侧脑室和第三脑室部分室管膜细胞及其突起内也有表达.结论Nogo-A在脑内神经元的广泛存在提示其在正常状态下的脑功能中可能起重要作用.     

脑组织移植纠正脑缺失的研究Ⅱ．基底前脑脑组织移植纠正前额叶皮层受损所致的条件性回避反应障碍

破坏雌性成年ＳＤ大鼠前额叶皮层，建立条件性回避反应消退模型。再进行鼠胚基底前脑脑组织移植。移植５个月后，大鼠的条件性回避反应恢复。在尼氏染色切片上，可观察到植入的细胞团；免疫组织化学染色证明，移植物含胆硷能神经元，呈中等强度的ＣｈＡＴ阳性反应，提示移植物成活。     

神经生长因子对体外培养大脑基底神经节神经元的保护作用

目的:研究神经生长因子(NGF)对谷氨酸造成的体外培养大脑基底神经节神经元损伤后的再生及防止神经元坏死的保护作用。方法:原代培养的胎鼠前脑基底神经节神经元,分为对照组、谷氨酸损伤组和谷氨酸损伤后NGF保护组。用倒置相差显微镜进行活细胞观察、采用RT-PCR技术检测前脑基底神经节神经元GAP-43和NF-L基因表达。结果:谷氨酸损伤神经元胞体回缩,突起消失或断裂。加入NGF后神经元绝大多数细胞胞体饱满,突起明显,细胞问的网络联系清晰可见,接近于对照组;NGF保护组大脑基底神经节GAP-43 mRNA和NF-L mRNA表达与损伤组比较具有显著性差异。结论:NGF可保护谷氨酸造成体外培养的大脑基底神经节损伤后的再生,并防止神经元坏死。     

N-甲基-D-天冬氨酸受体NR1亚基调控大脑皮层神经元放射状迁移

目的探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体在大脑皮层发育过程中参与调控皮层神经元放射状迁移的情况。方法通过在体子宫内胚胎电转基因和RNA干扰技术(RNAi),在发育的大鼠胚胎脑内干扰NMDA受体的NR1亚基表达,结合荧光免疫组织化学技术,追踪基因转染上的神经元在大脑发育过程中的迁移途径和特征。结果转染上对照质粒的皮层神经元能通过放射状迁移,在出生后第7天(P7)之前迁移到皮层的正确位置,即2～3层,而干扰NR1基因表达后的神经元则不能正常地放射状迁移至皮层的2～3层,P7时仍停留在皮层深层位置,甚至发生区。结论 NMDA受体在大脑皮层神经元放射状迁移过程中起关键性作用,有助于理解胚胎发育过程中迁移的机制并为预防控制神经元迁移异常提供依据。     

牛碘酸转运体的cDNA在大鼠脑内的分布

为了观察牛磺酸转运体的ｃＤＮＡ的大鼠脑内的分布，用＾３５Ｓ标记的ＴＡＵＴＤＮＡ探针，对大鼠全脑连续切片进行原位分子杂交，阳性反应广泛分布于脑灰质的不同区域，例如嗅球、梨状皮质，大脑皮质 、齿状回、海马和颗粒层细胞为阴性，而周围的胶质细胞为阳性，脑干的某些核，在灰质的神经元和社会胶质细胞观察到反应颗粒。     

7-硝基吲唑对大鼠大脑皮质离子型谷氨酸受体和GABAA受体的影响

目的　探讨一氧化氮 (NO)对大鼠脑皮质离子型谷氨酸受体 (NMDA、AMPA、KA受体 )和 GABA受体的影响。　方法　将 Wistar大鼠腹腔注射神经细胞结构型一氧化氮合酶抑制剂 7-硝基吲唑 ,以氚标配体分别标记 NMDA、AMPA、KA和 GABAA 受体 ,用图像分析仪对大鼠额区、顶区、后肢区、梨状区、压部后区和味觉区皮质内标记受体进行定量分析。　结果　实验组大鼠额区、后肢区和梨状区内 NMDA、AMPA、KA受体和 GABAA 受体含量均显著增加 ;顶区皮质内 NMDA、KA受体和 GABAA 受体增加显著 ;味觉区皮质内 KA受体增加显著。　结论　 NO可能参与大鼠脑皮质离子型谷氨酸受体和 GABA受体水平的调节     

白细胞介素6受体样免疫反应性细胞在大鼠脑内的分布

目的　研究白细胞介素６ 受体（ＩＬ－６Ｒ和ｇｐ１３０）免疫反应性细胞在大鼠脑内的分布。方法　采用ＡＢＣ免疫组织化学方法。结果　ＩＬ－６Ｒ免疫反应性细胞主要分布在下丘脑的视前区、腹内侧核、室旁核和弓状核;在海马,ＩＬ－６Ｒ阳性细胞呈强阳性,密集分布于齿状回颗粒细胞层和ＣＡ１ ～ＣＡ２ 锥体细胞层;在大脑皮层、嗅结节、丘脑腹内侧核、终纹床核等处也有ＩＬ－６Ｒ阳性细胞。ｇｐ１３０ 阳性细胞主要分布于下丘脑的室周核、室旁核的内侧小细胞部、弓状核及视上核,在大脑皮层也有ｇｐ１３０ 阳性大锥体细胞的分布。ｇｐ１３０ 阳性细胞亦见于尾壳核、杏仁核区、终纹床核,在海马结构内的ｇｐ１３０ 阳性细胞较ＩＬ－６Ｒ染色较浅。此外,ＩＬ－６ 两种受体亚单位的免疫反应性细胞也散在分布于小脑皮层、小脑外侧核以及延髓／脑干。结论　在大鼠脑内广泛分布着ＩＬ－６ 两种受体亚单位的免疫反应性细胞,提示ＩＬ－６ 及其受体可能具有重要的神经生物学意义。     

大鼠嗅球和鼻腔嗅粘膜成鞘细胞的形态学研究

目的：观察大鼠嗅神经成鞘细胞在嗅球和嗅粘膜的分布及其形态学结构特征，研究其与中枢神经再生的关系。方法：Luxol固蓝染色、Mallory染色和NGFRp75免疫组织化学染色结合透射电镜观察。结果：在嗅球纤维层的成鞘细胞随神经纤维呈纵向排列，在嗅小球层的成鞘细胞则围绕着嗅小球环行排列。在嗅粘膜的成鞘细胞位于柱状上皮深方，沿基底膜分布。成鞘细胞的胞体为细长梭形，有较长的突起，细胞核呈圆形或椭圆形。在嗅小球周围或嗅粘膜内的成鞘细胞呈NGFRp75免疫反应阳性。在电镜下，嗅球成鞘细胞的纵断面上可见其胞体呈长梭形，细胞核为不规则形，核仁清晰。在胞体的周围有大量的平行神经纤维纵向排列，在放大的横断面上，可见在1个成鞘细胞的细胞核周围有数根神经纤维被胞质包裹在一起。结论：嗅成鞘细胞是一种特殊的胶质细胞，分布于嗅球的纤维层、嗅小球层和嗅粘膜内。嗅神经成鞘细胞的胞体细长，有较长突起，其轴系膜紧密包裹成束的无髓神经纤维。     

新生大鼠嗅球纤维层组织移植促进受损视网膜节细胞存活和再生的研究

许多研究表明 ,改善局部微环境可促进受损中枢神经的再生。本研究对 SD大鼠进行眶内视神经切断术作为中枢神经损伤模型 ,将新生鼠嗅球纤维层组织植入视神经断端 ,动物术后分别存活 1、2、3、4周取眼球作水平冰冻切片 ,用 Nissl染色和生长相关蛋白 (GAP-4 3 )免疫组化方法观察视网膜节细胞的存活数量和蛋白的变化 ;并观察移植物中嗅成鞘细胞的存活状况。结果显示 :植入嗅组织后可见视网膜节细胞的存活数量和存活率明显增加 (P<0 .0 5 ) ;视网膜节细胞层 GAP-4 3持续表达 ;嗅成鞘细胞可以在视神经断端存活。本研究结果提示 ,移植嗅球纤维层有促进视网膜节细胞的存活和再生的作用。     

神经生长因子缓释微球移植对AD模型鼠基底前脑ChAT阳性神经元的保护作用

目的观察神经生长因子微球对AD模型鼠基底前脑ChAT阳性神经元的保护作用。方法采用双乳化技术制备神经生长因子缓释微球;切断SD大鼠左侧穹隆海马伞,基底前脑注射神经生长因子缓释微球;4周后,利用免疫组化法观察各组大鼠基底前脑ChAT阳性神经元变化。结果损伤组损伤侧的MS和VDB的ChAT阳性神经元大量减少,分别减少61.9%和51.4%;神经生长因子缓释微球治疗组损伤侧的ChAT阳性神经元得到明显的保护,MS和VDB细胞数分别下降20.60%和20.9%,明显高于损伤组损伤侧的ChAT阳性神经元存活数。结论神经生长因子缓释微球能够成功地将神经生长因子运载到脑内,神经生长因子缓释微球移植对AD模型鼠基底前脑ChAT阳性神经元有明显的保护作用。     

胰岛素样生长因子-1在大鼠脑内的分布及禁食对其表达的影响

目的：观察大鼠脑内胰岛素样生长闪子-1（IGF-1）的分布,探讨禁食对大鼠脑IGF-1表达的影响。方法：大鼠分为对照组、禁食24h组和禁食72h组,SABC法免疫组织化学染色显示IGF-1免疫反应细胞。结果：IGF-1免疫反应细胞广泛分布于嗅球、大脑、小脑、下丘脑、中脑、延髓等部位。禁食组大鼠乳头体外侧核、嗅内皮质IGF-1表达水平减弱,海马下托和枕皮质IGF-1表达增强。禁食24h组和禁食72h组,脑内IGF-1表达无明显差异。结论：IGF-1在脑内广泛分布,禁食可改变某些脑区IGF-1的表达水平。