用抗牛胰岛素单克隆抗体鉴别不同种属胰岛素

竞争性结合抑制反应的结果表明,5种抗牛胰岛素单克隆抗体具有不同程度的种属特异性,因而可用于识别人、猪,牛,马,狗、兔和大鼠等哺乳动物胰岛素.单克隆抗体3E7不但能区分人和猪及人和牛胰岛素,而且可测定人-猪胰岛素混合物中猪胰岛素的含量。     

抗胰岛素的单克隆抗体

用猪胰岛素免疫的 BALB/C 小鼠脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞 NS-1融合,获得两株分泌抗猪胰岛素单克隆抗体的杂交瘤细胞,命名为4B9和3B2。其中,以4B9细胞的抗体分泌能力最强。其培液抗体的 ELISA 效价为10~(-2)～10~(-3);注入同系小鼠腹腔诱生的腹水抗体效价达10~(-6)～10~(-7)。其分泌抗体属 IgG_1亚类;对猪胰岛素的亲和常数(Ka)为5.86×10~9L/mole;与用 DNA 重组技术制备的人胰岛素,呈交叉反应。     

抗牛胰岛素McAb的特点及应用

作者在丹麦NOVO公司制备了5种抗牛胰岛素McAb,并对其特点及实际应用进行了初步研究。结果表明,腹水液抗体滴度为2×10~3～2×10~5,免疫球蛋白含量高达10～30mg/ml,除1种为IgG_(2α)外,其余均属IgG1。不同的McAb,其半最大结合~(125)碘-牛胰岛素时间及半离解时间常数相差悬殊,因而与牛胰岛素结合的亲和力也很不一样(Ka为1.8×10~8～3.1×10~9 L/M)。不同种属的胰岛素原、胰岛素及其碎片的置换反应结果表明,5种     

人胰岛素原C肽单克隆抗体的研究

半抗原人胰岛素原C肽(HCP)对小鼠的免疫原性,以蛔虫蛋白作为载体远比牛或小鼠清蛋白为高。将NS-1瘤细胞与HCP-蛔虫蛋白结合物免疫的BALB/c小鼠脾细胞融合,获得12种抗HCP McAb,对其中8种的Ig类和亚类,亲和力及特异性等进行了详细鉴定。不同的HCP片段置换反应结果表明,HCP McAb的抗原决定簇分别位于HCP分子的23～31.22～31及1～22氨基酸区。20例正常成人空腹血浆HCP测定值,用兔多克隆抗血清RIA(0.47±0.16pmol/ml)明显高于MCAb-1 RIA(0.29±0.13 pmol/ml).     

抗人胰岛素受体单克隆抗体对不同种属胰岛素受体的识别

对抗人体胰岛素受体的四种单克隆抗体（ＭＡ－５，ＭＡ－１０，ＭＡ－２０，ＭＡ－５ｌ）和一种多克隆抗体（ＡＲＳ－２）用于免疫沉淀多种动物的胰岛素受体。所有单克隆抗体均不能免疫沉淀大白鼠、小鼠、仓鼠、南美栗鼠的胰岛素受体。相反，多克隆抗体ＡＲＳ－２可免疫沉淀所有实验动物的此受体。ＭＡ－５ｌ和￣（１２５）Ⅰ标记胰岛素分别与豚鼠、家兔肝浆膜胰岛素受体结合，显示相似的结合方式。在分离的家兔脂肪细胞实验中，ＭＡ－５１也模仿胰岛素的作用，刺激脂生成和胰岛素受体β亚单位的自磷酸化作用。实验证明哺乳动物的胰岛素受体与人胰岛素受体共有被单克隆抗体ＭＡ－１０和ＭＡ－５１所识别的相同结合位点，而啮齿类动物则不同。     

抗人生长激素单克隆抗体的制备及特点分析

人生长激素(hGH)是垂体前叶分泌的重要激素,但有关其结构与功能的关系、抗原决定簇的数目及位置、受体结合位点以及不均一性的来源和意义等问题至今尚未解决。抗hGH单克隆抗体(McAb)不仅是研究上述问题的有用工具,而且还可用于建立更为快速、灵敏,特异和准确的GH新免疫分析法,以提高有关疾患的诊治水平。本实验用微量免疫法获得四种抗整分子hGH McAb,并对其特性进行了较详细的研究。     

影响体外检测抗恶性疟原虫单克隆抗体调理活性的某些因素

在实验条件基本一致的情况下,对McAb浓度、PEC与RBC比例、原虫感染率和作用时间等影响体外检测疟疾McAb调理活性的因素进行了观察。结果表明,20％McAb浓度、1:20的PEC与RBC比例时,Mφ吞噬疟原虫作用最强;原虫感染率与Mφ吞噬作用呈正相关;作用时间以45min较适宜。     

抗人胰岛素和绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的制备和初步应用

中国医学科学院内分泌中心采用不同的免疫方法及用不同分子量聚乙二醇作为融合剂、将人胰岛素(hI)和人绒毛膜促性激素(hCG)免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/O小鼠骨髓瘤细胞融合获得2株分泌     

抗人胰岛素样生长因子-1单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备稳定分泌抗人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞系,并对其分泌的mAb进行鉴定.方法:用纯化后的hIGF-1重组蛋白免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤细胞融合技术制备抗hIGF-1的mAb,用Western blot法鉴定mAb的特异性,用间接ELISA法检测mAb腹水效价及mAb的亲和力,杂交瘤细胞染色体分析,鉴定Ig亚类.结果:获得2株能稳定分泌抗hIGF-1的mAb杂交瘤细胞系,Western blot分析显示,该mAb能与具有生物学活性的成熟IGF-1蛋白结合.腹水mAb效价可达6×104.mAb相对亲和力为2.1×109/mol～7.8×109/mol.2株单抗属IgM亚类.染色体分析符合杂交瘤细胞特征.结论:成功制备出抗hIGF-1的2株mAb杂交瘤细胞,为进一步用于hIGF-1的临床检测和实验研究创造了条件.     

抗弓形虫单克隆抗体

浙江医学研究院寄生虫病研究所研究成功抗弓形虫单克隆抗体,并得到初步应用。弓形虫病是人畜共患的寄生虫病,呈世界性流行分布,动物和人感染都较普遍。我国也有不少省流行,不仅危害人体健康,而且引起大批猪种死亡,造成经济损失,影响对外贸易。目前,该病的病原诊断比较困难,也缺少有效的预防方法。该院寄生病研究所科技人员用弓形虫速殖子可溶性抗原免疫BALA/C小鼠,并将其免疫活性脾细胞与鼠骨髓瘤细胞NS-1进     

胰岛素单克隆抗体杂交瘤株的建立

自从kohler和Milstein建立杂交瘤技术从来,它在生物学各领域内得到广泛地研究和应用,在内分泌学方面也已经有十几项激素单克隆抗体代替经典抗血清的报道,本文对胰岛素单克隆抗体进行了研究,获得杂交瘤株,现报道如下。材料方法     

抗轮状病毒单克隆抗体简报

本研究用牛轮状病毒NCDV株为抗原,免疫2月龄Balb/c雌鼠,二个半月后取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP_2/o融合,共融合二次,融合率达100％。平行采用酶联免疫吸附试验和血凝抑制试验两种方法,从192个原始孔中初步筛选出12个阳性孔,其中11个孔为酶联免疫吸附试验阳性、1个孔为血凝抑制阳性。将其中几个孔进行三次有限稀释克隆化,得到3株抗轮状病毒单克隆抗体(2G_2、3F_4、4B_5)。在酶联免疫吸附试验中,2G_2株     

抗肺癌单克隆抗体的研制

采用新鲜肺癌组织制成的细胞悬液及肺腺癌细胞株做为免疫原,免疫Balb/c小鼠。取脾细胞与经活体增殖的无支原体污染的高活力SP2/O骨髓瘤细胞融合,联合应用酶联免疫吸附和多组织切片免疫组化染色法进行筛选,得到两株分泌对肺癌具高特异性的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。抗体与被检测的大多数人体正常组织无交叉反应,可初步用于肺癌病理鉴别诊断。     

抗黑色素瘤单克隆抗体的制备

本文用鼠骨髓细胞系NS_1与用黑色素瘤细胞系Cal_1,Cal_(32),Cal_(52),免疫的鼠脾细胞融合制备抗黑色素瘤单克隆抗体。通过使用淋巴细胞分离液MSL和在脾被膜上扎孔,用注射器注入GKN溶液使脾细胞冲出的方法制取脾细胞,使杂交瘤细胞融合率明显提高,并获两株分泌抗黑色素瘤单克隆抗体IgG_1的SM_(167)和SM_(230)细胞株。     

抗HBs单克隆抗体的研究进展

抗-HBs单克隆抗体杂交瘤细胞系于1980年由Shih首先建株成功。国内于1982年也建立了两株。到目前为止,国内外已有近10篇报道。有的国家已制成商品生产,并对抗-HBs单克隆抗体的应用作了较广泛的探索性研究。     

胰岛素原治疗非胰岛素依赖性糖尿病

研究人员比较了胰岛素原即胰岛素前体分子与胰岛素本身的降低血糖作用。非胰岛素依赖性糖尿病(NIDD)病人于上午9点经皮下注射胰岛素原(每公斤体重0.2U),空腹血糖浓度(247±22mg/dl[±SEM])在6小时内变为正常,升高的肝糖生成率下降。这些病人对普通胰岛素(0.2U/kg)的反应程度与上述相似,但速度较快。胰岛素原对糖清除     

抗胰腺癌单克隆抗体的研究

用人新鲜胰腺癌组织免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0-Agl4融合,获得了分泌抗人胰腺癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本文重点报道以ABC免疫组织化学法检查YPC1单克隆抗体与人正常组织和肿瘤组织的反应性。结果表明YPC1单克隆抗体与16例被检测的胰腺癌组织发生反应。其中9例(56.3％)呈强阳性反应,与23种正常组织中的10种(43.5％)以及19种非胰腺肿瘤中的8种(42.1％)有不同程度的交叉反应,但多数反应较弱。本研究提示以新鲜人体肿瘤组织作为免疫原制备单克隆抗体是简便可行的,YPC1单克隆抗体可能有助于胰腺癌的诊断和治疗。     

抗ENA单克隆抗体的研制

目的：制备与分析抗可提取性核抗原（ＥＮＡ）单克隆抗体;方法：以ＥＮＡ为抗原,免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,取其脾细胞与小鼠Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合,经反复筛选和再克隆化,建立能稳定分泌抗ＥＮＡ单克隆抗体（ＭｃＡｂｓ）的杂交瘤细胞株;结果：共获得１１株能稳定分泌抗ＥＮＡ的杂交瘤细胞株。对其中的５种单克隆抗体（ＩＧ５,２Ｅ５,２Ｃ６,４Ｃ１０和４Ｅ６）进行了初步分析,结果如下：小鼠腹水抗体效价范围２×１０－５～３×１０－６;免疫球蛋白亚类鉴定,１株为ＩｇＧ２ａ,１株为ＩｇＧ２ｂ,其余３株均为ＩｇＧ１;结论：ＥＮＡ作为弱免疫原可用于制备单克隆抗体     

一组抗人纤维蛋白原及其碎片的单克隆抗体制备及特性研究

纤维蛋白(原)在血浆素的作用下降解成X、Y、D、E、D二聚体等碎片,统称为纤维蛋白(原)的降解产物(FDP)。测定纤维蛋白原和FDP含量对出、凝血疾病,特别是对DIC的诊治有重要意义。临床上常用抗血清测定纤维蛋白原和FDP,但多克隆抗体影响检测的特异性,而且FDP中一些特异位点不暴露在纤维蛋白(原)上。单克隆抗体(McAb)可以克服上述问题。本实验室研制出一组抗人纤维蛋白原及其碎片的McAb。