麻疹、腮腺炎、风疹和水痘联合减毒活疫苗的研制

目的 建立麻疹、腮腺炎、风疹和水痘(measles,mumps,rubella and varicella,MMRV)联合减毒活疫苗的生产工艺和检定方法.方法 采用麻疹病毒沪-191株、腮腺炎病毒S79株、风疹病毒BRDⅡ株、水痘-带状疱疹病毒北京84-7株,在原代鸡胚细胞或人胚肺二倍体细胞2BS株中制备高滴度疫苗病毒原液.观察4种原液按不同比例稀释配制后病毒的滴度变化和相互干扰现象,确定MMRV疫苗中4种原液的配制比例,并筛选适宜保护剂,建立最佳冻干工艺.同时,建立MMRV联合减毒活疫苗的检定方法.采用t检验对结果进行比较.结果 选择最佳配制比例、保护剂和冻干工艺制备出连续多批MMRV疫苗,按国家药典要求检定全部合格.其中连续3批疫苗经国家检定机构检定合格:麻疹病毒基础滴度和37℃放置7d后的滴度分别≥3.9和≥3.5 lg半数细胞培养感染量(50％ cell culture infective dose,CCID50)/ml,腮腺炎病毒≥5.0和≥4.7 lgCCID50/ml,风疹病毒≥5.0和≥4.8 lgCCID50/ml,水痘病毒≥4.5和≥4.4 lg噬斑形成单位/ml.用建立的方法检测MMRV疫苗,结果4种病毒滴度实测值与理论值之间的差异无统计学意义(t值为0.149～1.838,P值均＞0.05).结论 建立了稳定、可行的MMRV疫苗生产工艺和检定方法.     

麻疹、腮腺炎、风疹、水痘联合减毒活疫苗的生产工艺研究

目的  建立麻疹、腮腺炎、风疹、水痘联合减毒活疫苗（combined live attenuated measles，mumps，rubella and varicella vaccine，MMRV）的生产工艺。方法  根据现有疫苗病毒原液生产工艺，将麻疹病毒沪-191纯化株、腮腺炎病毒S79株、风疹病毒BRD-Ⅱ株和水痘-带状疱疹病毒Oka株在原代鸡胚成纤维细胞或人二倍体细胞MRC-5株中制备高滴度病毒原液，并超低温保存。筛选无明胶冻干稳定剂配方。按国外已上市同类产品的病毒配比，研究MMRV中4种病毒的原液配制滴度及成品配制比例，建立最佳冻干工艺。结果  用筛选出的适合于MMRV的无明胶冻干稳定剂配方进行试验，确定病毒原液的配制滴度为，麻疹4.6 lg半数细胞培养感染量（50% cell culture infective dose，CCID₅₀）/ml、腮腺炎5.8 lgCCID₅₀/ml、风疹4.3 lgCCID₅₀/ml、水痘4.8 lg噬斑形成单位（plaque forming unit，PFU）/ml。使成品中腮腺炎病毒滴度至少达到麻疹和风疹和水痘病毒的10倍，水痘病毒滴度高于现有单价水痘疫苗。连续制备3批MMRV，平均病毒滴度为，麻疹4.5 lgCCID₅₀/ml、腮腺炎5.1 lgCCID₅₀/ml、风疹4.3 lgCCID₅₀/ml、水痘4.6 lgPFU/ml；平均水分为1.2%。其他项目检定均合格。结论  建立了MMRV的生产工艺，可以稳定生产出达到国外同类产品质量标准并符合我国4种单价减毒活疫苗国家标准的产品。     

配制麻疹-腮腺炎-风疹-水痘联合减毒活疫苗的各病毒原液最适滴度研究

目的 研究配制麻疹-腮腺炎-风疹-水痘联合减毒活疫苗(measles-mumps-rubella-varicellacombined attenuated live vaccine,MMRV)的各病毒原液最适滴度.方法 将麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒原液分别冻干,检测各冻干单价疫苗的滴度和热稳定性,观察病毒滴度的下降幅度.将4种病毒原液按不同配比配制MMRV,检测配制前后的各病毒滴度,摸索配制MMRV的最佳配比.按确认的最佳配比配制MMRV并冻干,检测冻干MMRV的各病毒滴度和热稳定性,确定配制MMRV的各病毒原液最适滴度.结果 各病毒原液冻干后,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒滴度分别下降约0.6、0.6、0.4 lgCCID50/ml和0.5 lgPFU/ml;各冻干单价疫苗37℃放置1周后,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒的滴度分别下降约0.6、0.5、0.5 lgCCID50/ml和0.5 lgPFU/ml.在配制MMRV过程中,仅腮腺炎病毒可能在一定程度上受到其他病毒的干扰.按确认的最佳配比配制的MMRV冻干后,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒滴度分别下降约0.5、0.6、0.5 lgCCID50/ml和0.6 lgPFU/ml;冻干MMRV于37℃放置1周后,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒滴度分别下降约0.6、0.6、0.5 lgCCID50/ml和0.5 lgPFU/ml.结论 在按确认的最佳配比配制MMRV时,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒原液的滴度需分别≥6.0、≥6.5、≥6.0 lgCCID50/ml和≥5.3 lgPFU/ml.     

麻疹疫苗单次病毒收获液的稳定性观察

麻疹病毒稳定性较差,不易长期保存.我们尝试优化麻疹疫苗单次病毒收获液的生产工艺,提高收获液的病毒滴度和稳定性,使麻疹病毒能在低温条件下长期保存,便于在适当的时间进行稀释,配制原液和半成品,制备麻疹、风疹联合减毒活疫苗.     

麻疹、腮腺炎、风疹和水痘联合减毒活疫苗中水痘病毒滴度测定方法研究

目的 建立并验证麻疹、腮腺炎、风疹和水痘(measles,mumps,rubella and varicella,MMRV)联合减毒活疫苗中水痘病毒滴度的测定方法.方法 首先通过比较温度,确定中和条件;再根据抗麻疹、腮腺炎、风疹病毒血清对相应病毒的完全中和能力,确定每种抗血清的使用浓度.观察抗血清对2BS细胞生长的影响和对水痘病毒的干扰作用.采用t检验对结果进行比较.结果 与37℃1h相比,4℃1h的中和条件能准确反映MMRV疫苗中水痘病毒的滴度水平(t=6.7082,P＜0.01).3种抗血清(麻疹1∶80、腮腺炎1∶40、风疹1∶40)混合后对2BS细胞生长无影响,对不同滴度水痘病毒无干扰(高滴度t=0.4472,P＞0.05;中滴度t=0.9045,P＞0.05;低滴度t=0.3536,P＞0.05).使用建立的方法测定MMRV疫苗中水痘病毒滴度,实测值与理论值之间的差异无统计学意义(t=1.7533,P ＞0.05).结论 建立了MMRV联合减毒活疫苗中水痘病毒滴度的测定方法.     

不同类型麻疹、腮腺炎、风疹疫苗及初免年龄对抗体水平的影响

作者以加拿大魁北克省作为试验基地,用MMRⅡ和Trivirix两种不同配方的麻疹、腮腺炎、风疹（MMR）疫苗对468名12～24月龄儿童进行接种。其中241人接种MMRⅡ疫苗,其余接种Trivirix疫苗。此两种疫苗中,风疹疫苗均用RA27/3株制备,且含量相同〔1000半数组织培养感染量（TCID_(50)）〕,但在麻疹和腮腺炎病毒和含量上有所差别,MMRⅡ疫苗含Enders Edmonston麻疹病毒1000 TCID_(50),Teryl Lynn腮腺炎病毒5000TCID_(50),Trivirix疫苗含Schwarz麻疹病毒1000 TCID_(50),Urabe Am 9腮腺炎病毒20000TCID_(50)。初免后5～6年,取静脉血,分别用蚀斑减少中和（PRN）试验、酶免疫试验和血凝抑制（HI）试验检测麻疹、腮腺炎和风疹抗体。     

新的三价麻疹-腮腺炎-风疹疫苗在幼儿中的临床试验

本文报道1982年1月～6月在芬兰坦佩雷市用三价麻疹-腮腺炎-风疹疫苗对幼儿进行的一次临床试验.作者将174名14～24月龄无麻疹、腮腺炎和风疹病史的健康儿童,随机分成3组.在双盲情况下接种下述三种疫苗之一:(1)高滴度Pluserix疫苗:每瓶含麻疹病毒Schwarz株10~(3.9)TCID_(50)、腮腺炎病毒Urabe Am9株10~(4.92)TCID_(50)和风疹病毒RA27/3株10~(4.14)TCID_(50);(2)低滴度Pluserix疫苗:每瓶含麻疹病毒Schwarz株10~(3.25)TCID_(50)、腮腺炎病毒     

两种麻疹-腮腺炎-风疹疫苗诱导的免疫应答的安全性及特征

目前,世界上应用甚广的麻疹-腮腺炎-风疹(MMR)疫苗是由瑞士血清和疫苗研究所生产的Triviraten Berna疫苗及美国Merck药厂生产的MMR-Vax疫苗。前者含麻疹病毒Edmonston Zagreb 19株、风疹病毒RA27/3株、腮腺炎病毒Rubini株;后者含麻疹病毒Edmonston株、风疹病毒RA27/3株、腮腺炎病毒Jeryl Lynn株。作者在320名14～24月龄儿童中比较了两种疫苗初免后的安全性及免疫原性。     

MMR三联疫苗效价试验方法的改进

麻疹-腮腺炎-风疹三联疫苗(MMR)的效价测定采用免疫细胞化学灶试验。其中麻疹与腮腺炎的病毒滴定是在Vero细胞上进行,风疹病毒滴定使用RK13细胞。由于RK13细胞中腮腺炎病毒能抑制风疹病毒病变灶形成。其原因是腮腺炎病毒诱导了干扰素的作用,如果在接种物中加入适量抗腮腺炎病毒血清则可消除这种干扰。在直径为3.5cm的6孔细胞培养板上分别制备Vero和RK13单层细胞,MMR三联疫苗以含2%小牛血清的Eagle液连续5倍稀释,测定麻疹与腮腺炎时接种Vero细胞,每孔加0.1ml。置二氧化碳孵箱37℃培养7天。在RK13细胞上滴定风疹病毒时首     

腮腺炎疫苗与脑膜炎

Colville等报道了英国诺丁汉地区数例与麻疹、腮腺炎和风疹疫苗(MMR)相关的脑膜炎病例。自1989年以来,作者从接种MMR后腮腺炎和脑膜炎病例、无症状接种者以及与接种无关的腮腺炎病例分离腮腺炎病毒。用聚合酶链反应(PCR)和编码融合蛋白的病毒基因组的小区段作核苷酸序列分析,对上述分离株进行鉴定。作者对世界各地的80多株病毒作了鉴