HPLC法测定陈皮水提物中三种活性成分含量

目的:采用高效液相色谱(HPLC)法测定陈皮水提物中橙皮苷、川陈皮素和橘皮素含量。方法:采用HPLC法,以橙皮苷、川陈皮素和橘皮素为化学对照品,固定相:Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈和0.5%的醋酸水溶液,流速:1.0mL/min,检测波长:283nm和330nm,柱温:25℃。结果:橙皮苷、川陈皮素和橘皮素的保留时间在20.46~35.55min之间,平均回收率为97.5%~98.6%,RSD为2.1%~3.3%,精密度为0.97%~1.0%;同时测定了收集自不同产地和年份的10种陈皮的活性成分含量。结论:HPLC法适合陈皮中橙皮苷、川陈皮素和橘皮素含量的测定,该方法操作简便,具有较高的灵敏度和精密度。     

HPLC法同时测定不同产地广陈皮中5种活性黄酮成分

目的 建立HPLC法测定12批不同产地广陈皮中5种活性黄酮的量.方法 采用超声法提取药材,通过对提取工艺及色谱条件进行优化建立测定方法,同时测定不同产地广陈皮中橙皮苷(1)、川陈皮素(2)、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮(3)、橘皮素(4)和5-羟基-6,7,8,3',4'-五甲氧基黄酮(5)5种活性黄酮的量.结果 12批广陈皮中橙皮苷的量在38.021～70.735 mg/g,均符合药典标准(≥35 mg/g),其中,产于新会的广陈皮中橙皮苷的量低于广东其他两个产地(高要和龙门);另外,广陈皮中多甲氧基黄酮类成分的量以川陈皮素、橘皮素为高.结论 该方法简单、准确,其结果可为广陈皮质量标准的制定提供一定的依据.     

薄层扫描法同时测定广陈皮中三种黄酮化合物的含量

目的:采用薄层扫描法同时测定6种不同产地广陈皮中橙皮苷、川陈皮素、橘皮素的含量.方法:使用硅胶G高效薄层板,分别以乙酸乙酯-甲醇-水(100∶17∶13)、甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水(20∶10∶1∶1)的上层溶液为展开剂,二次展开;采用λS =265nm、λR =600nm双波长进行薄层扫描. 结果:橙皮苷、川陈皮素、橘皮素分别在1.0～5.1 μg、0.12～0.60 μg、0.1～0.5 μg范围内具有良好线性关系(r分别为0.9990、0.9991、0.9991);平均加样回收率分别为101.30%、96.03%、95.44%;RSD分别为3.81%、2.32%、1.75%. 结论:本方法简便、快速、准确, 可为广陈皮药材质量控制提供新的参考.     

陈皮、青皮中4种黄酮成分的比较研究

目的比较浙江、湖北、广东产陈皮、青皮药材中橙皮苷、柚皮苷、川陈皮素和橘皮素的量。方法用甲醇超声提取药材,HPLC法测定,采用Waters xbridge C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%醋酸水,梯度洗脱(0~20 min,10%~25%乙腈;20~35 min,25%~70%乙腈;35~38 min,70%~95%乙腈);体积流量1m L/min;柱温30℃;检测波长283 nm。结果陈皮、青皮药材中4种黄酮类成分均以橙皮苷含有量为最高,柚皮苷含有量最低;浙江和湖北产陈皮和青皮中橙皮苷的含有量均符合《中国药典》标准,但两地的青皮中川陈皮素和橘皮素的量要远大于陈皮。广东新会产陈皮和青皮中橙皮苷的含有量均偏低,但它们的川陈皮素和橘皮素的含有量相差不大。结论陈皮和青皮中黄酮类成分含有量的差异可用于解释它们功效之间的区别。     

HPLC测定不同产地陈皮橙皮苷的含量

目的:对8批不同产地陈皮药材中橙皮苷的含量进行测定,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Phenomenex C18色谱柱(250mm×4.60mm,5μm);流动相:甲醇-冰醋酸-水(35∶4∶61);检测波长为283nm;流速:1.0mL·min-1;柱温:室温;进样量:5μL.结果:橙皮苷在0.102～0.812mg·mL-1呈良好的线性关系,r=0.999 6,平均回收率为98.20%(n=6),RSD=1.22%.不同产地陈皮药材中橙皮苷含量存在差异.结论:该方法简便、快速、准确、重复性好,适用于不同产地陈皮的评价及橙皮苷的含量测定.     

不同贮藏年限广陈皮黄酮类成分的变化规律研究

目的:研究不同贮藏年限广陈皮黄酮类成分的变化规律。方法:应用HPLC法对10批不同贮藏年限广陈皮药材中的橙皮苷(1)、川陈皮素(2)、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮(3)、橘皮素(4)和5-羟基-6,7,8,3′,4′-五甲氧基黄酮(5)5种黄酮类成分的变化规律进行了定量研究。结果:10批不同贮藏年限广陈皮药材中橙皮苷的含量均在35mg/g以上,符合药典标准(≧35mg/g);5种黄酮类成分的含量随贮藏年限的延长有一定增加趋势。结论:陈皮"陈久者良"这一说法有一定的科学依据,具体原因尚待进一步确证。     

黑曲霉对不同陈化年份广陈皮黄酮类成分的影响

目的:考察黑曲霉对不同陈化年份广陈皮黄酮类成分的影响。方法:将黑曲霉反接至无菌广陈皮,恒温恒湿培养,于不同时间点进行取样,采用超高效液相色谱法(UPLC)和紫外分光光度计法测定广陈皮黄酮类成分。结果:黑曲霉反接后,不同陈化年份广陈皮总黄酮、橙皮苷、川陈皮素及橘皮素含量均有提升,且UPLC指纹图谱显示有新成分增加。其中陈化2年黄酮类成分变化较大,除橘皮素含量变化不明显外,其总黄酮、橙皮苷和川陈皮素含量各增长了72.24%、69.93%和72.34%。结论:黑曲霉对不同陈化年份广陈皮的黄酮类成分均有一定影响,影响最大的是陈化2年广陈皮,其中具体的转化机制还有待深究。     

HPLC法测定不同产地陈皮药材中橙皮苷的含量

目的:对不同产地陈皮药材中橙皮苷的含量进行测定,为科学评价及有效控制其质量提供实验依据。方法:采用高效液相色谱法,以Kromasil C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱;流动相:甲醇-醋酸-水(35∶4∶61);检测波长:283nm;流速:1.0mL·min^-1。结果:橙皮苷在0.4～3.6μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9998,平均回收率为99.28%,RSD=1.09%(n=6)。含量测定结果表明,不同产地陈皮药材中橙皮苷含量存在差异。结论:该方法简便、快速、准确、重复性好,可用于陈皮药材的质量评价。     

陈皮中陈皮素和橙皮苷含量测定

目的:测定陈皮中陈皮素和橙皮苷的含量,为陈皮的有效利用提供科学依据。方法:用70%的乙醇回流提取,采用HPLC法测定陈皮素和橙皮苷的含量。橙皮苷采用甲醇-醋酸-水(35∶5∶60)流动相,检测波长为284nm,柱温为30℃,流速为0.8mL/min;陈皮素采用0.05%磷酸-乙腈(45∶55)为流动相,检测波长为335,柱温为35℃,流速为0.8mL/min。结果:橙皮苷线性方程为:Y1=2.95×106X1+3.46×104(r=0.999 9),线性范围为0.74~7.4μg/mL;陈皮素线性方程为:Y2=5.68×106X2-1.16×105(r=0.999),线性范围为:0.174~1.740μg/mL。测得的陈皮中橙皮苷、陈皮素含量分别为3.619g/100g药材、0.331g/100g药材。结论:此方法简便、快速、准确可靠,可作为陈皮药材的质量控制方法。     

广陈皮水提物的化学成分分析

目的:研究广陈皮水提物的活性成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱和制备高效液相色谱对广陈皮的水提物进行分离,通过理化常数和波谱分析鉴定化合物的结构。结果:从广陈皮水提物中分离鉴定出7个化合物的结构,包括1个黄酮碳苷,2个二氢黄酮苷,2个多甲氧基黄酮,1个楝烷型降四环三萜和1个二糖,其结构分别鉴定为6,8-Di-C-β-葡糖基芹菜苷(1),橙皮苷(2),芸香柚皮苷(3),川陈皮素(4),橘皮素(5),柠檬苦素(6)和麦芽糖(7)。结论:化合物1和7为首次从该植物中分离得到。     

HPLC测定不同基原陈皮药材中橙皮苷含量

目的:采用高效液相色谱法测定不同基原陈皮药材中橙皮苷含量,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法.方法:采用高效液相色谱法,Baseline C18色谱柱(4.60 mm x250 mm,5 μm),流动相甲醇-水(1％乙酸溶液)(50:50),检测波长283 nm,等度洗脱,流速1.0 mL·min -1,柱温室温,进样量20μL.结果:橙皮苷质量浓度在0.002 -0.040 g·L-1呈良好的线性关系(r =0.9999),平均回收率102.3％ (n =9),RSD 1.6％.含量测定结果表明,同一产地不同基原陈皮药材中橙皮苷含量存在显著差异.结论:该方法简单、可行,适用于不同基原陈皮药材中橙皮苷的含量测定以及质量评价.     

HPLC法同时测定陈皮中4个黄酮类成分的含量

目的:建立同时测定陈皮中橙皮苷、柚皮苷、川陈皮素、橘红素含量的反相高效液相色谱法。方法:采用C18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱:0→30min,比例5:95→25:75;30→55min,比例25:75→95:5;以95:5比例运行到60min;柱温30℃,检测波长:283nm,流速0.8ml/min。结果:橙皮苷、柚皮苷、川陈皮素、橘红素线性范围分别为0.4632～4.632μg(r=0.9999),0.5869～5.869μg(r=0.9998),0.4439～4.439μg(r=0.9998),0.4065～4.065μg(r=0.9997);平均回收率(n=6)分别为98.67%,98.33%,98.05%,98.49%,RSD分别为1.97%,1.85%,1.76%,2.05%。结论:本法快速、简便、准确,重复性好,可用于陈皮中橙皮苷、柚皮苷、川陈皮素、橘红素的定量分析和质量控制。     

HPLC法测定枳壳中川陈皮素

目的 建立HPLC测定枳壳中川陈皮素的方法.方法 选用色谱柱为Eclipse XDB-C18柱(150 mm×4.6mm,5 μm),流动相为甲醇-水(55:45),检测波长330 nm,体积流量为1.0 mL/min,柱温25℃.结果 川陈皮素进样量在61.4～614 ng与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 81,n=6);川陈皮素的加样回收率99.81%(RSD=2.38%).结论 该法简便、准确、可靠,可作为枳壳药材中川陈皮素测定的有效方法.     

基于指纹图谱和UPLC-MS/MS定量测定对不同产地陈皮的质量评价研究

目的 采用HPLC指纹图谱与化学计量学相结合、UPLC-MS/MS测定多黄酮成分含量的方法,测定不同产地陈皮质量,为其鉴别和质量控制提供依据。方法 采用HPLC-DAD指纹图谱检测并结合“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）”建立6个产区,49个不同批次陈皮药材（S1～S49）指纹图谱,并进行相似度评价和共有峰确认,结合聚类分析（hierarchical clustering analysis,HCA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least-squares discrimination analysis,OPLS-DA）等化学计量学综合分析。采用UPLC-MS/MS法建立了8个黄酮类成分柚皮素、柚皮苷、木犀草苷、川陈皮素、橙皮素、橙皮苷、橘皮素和芸香柚皮苷的含量测定方法对60批7个产地陈皮药材进行评价。结果 建立了49批不同产地陈皮药材的指纹图谱,相似度为0.864～0.999,共标定了11个共有峰,HCA分析49批陈皮明显分为4类;PCA得到5个主成分的累积方差贡献率为92.748%;OPLS-DA表明8、7、10和11号峰可能是影响陈皮药材质量的差异标志物;含量测定结果表明不同产地陈皮中黄酮类含量存在显著差异,广东新会以川陈皮素和橘皮素为主要标志成分,四川荷花池以木犀草苷为差异性成分,江西樟树以柚皮素和柚皮苷为差异性成分,广西玉林则以橙皮素、橙皮苷和芸香柚皮苷为主,重庆云阳以川陈皮素和橙皮苷为主。结论 建立了稳定性强的不同产地陈皮HPLC指纹图谱和8个黄酮类UPLC-MS/MS定量测定方法,结合化学计量学可用于陈皮药材综合评价和质量控制。     

复方新会陈皮含片中橙皮苷、川陈皮素、橘皮素的含量测定

目的:建立复方新会陈皮含片中新会陈皮指标性成分的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,以Inertsil ODS-SP柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,橙皮苷的检测波长为283 nm,川陈皮素、橘皮素的检测波长为330nm,流速为1 m L·min~(-1),柱温30℃。结果:橙皮苷、川陈皮素、橘皮素与峰面积积分值呈良好的线性关系;回归方程分别为y=427363x-38147 (r=0.9999),y=155126x-13930 (r=0.9999),y=86681x-19198 (r=0.9997);平均加样回收率分别为96.72%(RSD=0.6%),98.93%(RSD=0.6%),99.14%(RSD=0.6%)。结论:建立的新会陈皮指标性成分的含量测定方法简便,重复性好,可用于复方新会陈皮含片的质量控制。     

“一测多评”法测定陈皮中3种黄酮类成分

目的:建立陈皮中橙皮苷、川陈皮素、桔皮素"一测多评"的方法,并验证该方法的准确度及可行性。方法:以橙皮苷为指标,计算川陈皮素、桔皮素与橙皮苷的相对校正因子。采用外标法测定陈皮中橙皮苷、川陈皮素、桔皮素的含量,并利用相对校正因子计算川陈皮素和桔皮素的含量,比较外标法与"一测多评"的结果,以验证"一测多评"法的准确度及可行性。结果:"一测多评"法与外标法共测定22批样品,川陈皮素与桔皮素测定结果 RSD均<2.9%,结果无显著差异。结论:"一测多评"法测定陈皮中的橙皮苷、川陈皮素、桔皮素是准确可行的。     

陈皮姜中橙皮苷、川陈皮素和6-姜酚的药物动力学分析

目的:建立一个简单、灵敏、快速的高效液相色谱法测定陈皮姜中橙皮苷、川陈皮素和6-姜酚在大鼠体内的血药浓度,并研究其药物动力学。方法:HPLC定量检测血浆中待测药物浓度,使用C18色谱柱,以甲醇-1%冰醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长:283 nm,328 nm;流速为1.0 ml/min;柱温30℃。结果:内源性杂质在出峰时间对样品和内标测定无干扰。橙皮苷在0.2~3.2μg/ml,川陈皮素在0.2~3.2μg/ml,6-姜酚在0.1~1.6μg/ml线性关系良好。日内、日间精密度(RSD)均小于15%,样品的24 h稳定性、长期稳定性和反复冻融稳定性良好。方法学考察均符合生物样品分析的要求。橙皮苷、川陈皮素和6-姜酚的t1/2(β)值分别是11.55±2.11,15.07±2.94,15.40±2.14;Cmax值是:1.88±0.37,2.55±0.42,0.98±0.26;AUC0→∞值是:16.59±2.20,16.90±3.91,3.56±0.96。结论:所建立的方法简便、灵敏、重复性好、分析速度快,可用于血浆样品中橙皮苷、川陈皮素和6-姜酚的血药浓度测定和大鼠体内药物动力学研究。     

指纹图谱结合一测多评法评价酸橙枳实质量的研究

目的通过对枳实进行多成分定性、定量分析,为不同产地酸橙枳实药材的质量控制提供依据。方法结合指纹图谱和一测多评(QAMS)模式,采用Waters X-Brige C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动性,梯度洗脱,检测波长为283 nm和330 nm,体积流量1 m L/min,柱温30℃,进样量10μL。结果建立了不同产地酸橙枳实药材的HPLC-UV指纹图谱,确定了21个共有峰,鉴别出了芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素、橙皮素、甜橙黄酮、川陈皮素、桔皮素9种成分,且23批次枳实样品的相似度均大于0.9,聚类分析(CA)及主成分(PCA)分析结果显示的分类情况与该药材的产地分布情况相一致,以新橙皮苷为参照物的QAMS法测定结果均显示一定的差异性。结论从成分的角度来看,不同产地间药材质量存在一定差异,实验所建的QAMS法准确、高效、可行,与标准曲线法和外标法相比具有明显的优势,可应用于酸橙枳实的质量评价,为不同产地酸橙枳实药材的质量控制奠定实验基础。     

基于指纹图谱结合多元统计分析的不同贮藏年限对广陈皮成分影响研究＊

目的 建立广陈皮HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法，并结合多元统计分析，研究不同贮藏年限对广陈皮成分的影响。方法 色谱条件：采用Syncronis C₁₈色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）-0.05%磷酸（B），梯度洗脱；流速1.0 mL·min^-1；柱温30℃；进样量5 μL；检测波长330 nm。采用HPLC法建立10批次不同贮藏年限广陈皮药材的指纹图谱，标定其共有峰，进行相似度评价；运用聚类、主成分分析等多元统计方法，综合评价10批广陈皮药材成分变化差异；进一步对《中国药典》指标成分与差异色谱峰中的橙皮苷、甜橙黄酮、川陈皮素、橘红素与5-去甲川陈皮素等5种成分进行含量测定。结果 10批广陈皮药材指纹图谱相似度均大于0.990，共标定了19个色谱峰，说明不同贮藏年限广陈皮整体质量相对稳定；聚类分析将10批广陈皮分3类，主成分分析提取4个主成分，累积方差贡献率在89.760%，且通过对照品指认确定了其中4个差异色谱峰。含量测定橙皮苷、甜橙黄酮、川陈皮素、橘红素与5-去甲川陈皮素等成分含量范围分别为20.940-34.780 mg·g^-1、0.344-0.517 mg·g^-1、4.667-7.456 mg·g^-1、3.592-5.879 mg·g^-1、0.391-0.710 mg·g^-1。结论 建立的广陈皮指纹图谱和多成分含量测定方法简单、准确，具有良好的稳定性和重复性，可采用聚类分析与主成分分析等多元统计分析方法对不同贮藏年限广陈皮药材的成分变化及质量进行评价，为其质量控制和临床应用提供了参考。     

HPLC测定开胃消食口服液中橙皮苷和川陈皮素的含量

目的：建立开胃消食口服液中橙皮苷和川陈皮素的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱（HPLC）法,色谱柱为ZORBAX Extend-C18(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相为乙腈（A）和0.1%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱（0～12 min,A20%;12～18 min,A20%～45%;18～30 min,A45%～60%;30～35 min,A60%）;流速1.0 ml/min,检测波长209 nm,柱温30℃,进样量10μl。结果：橙皮苷在6.34～317.20μg/ml浓度内,与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为96.95%,相对标准偏差（RSD）为1.8%(n=6);川陈皮素在1.94～97.21μg/ml浓度内,与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 6）,平均回收率为100.07%,RSD为1.3%(n=6)。10批样品总黄酮含量以橙皮苷及川陈皮素计,平均含量为0.27 mg/ml。结论：改进后的方法重现性好,能更好地控制产品质量。