中药榄香烯与过继免疫联合治疗肿瘤的临床观察

笔者钭本院收治的原发或继发性肝癌和肺癌共５８例，随机分为单用榄香烯治疗组和榄香烯＋ＬＡＫ／ＩＬ－２联合治疗组进行疗效记录；以ＷＨＯ近期临床观察标准为依据进行综合疗效评价。结果组显效率（ＣＲ＋ＰＲ）分别为３５．５６％和４６．１５％。     

三氧化二砷、人参皂甙、β-榄香烯联合环磷酰胺对K562细胞株端粒-端粒酶系统的作用

本研究探索三氧化二砷、人参皂甙、B榄香烯单独及联合环磷酰胺应用对K562细胞株端粒长度和端粒酶活性的调节作用，探讨上述药物抗白血病的作用机制。用不同浓度的三氧化二砷、人参皂甙及B榄香烯单独及联合环磷酰胺与人类红白血病细胞株K562共培养，采用PCR-ELISA法检测端粒酶活性、Southern杂交法检测端粒长度。观察上述药物对K562细胞端粒酶活性及端粒长度的影响。结果表明：①经人参皂甙、三氧化二砷、B榄香烯及环磷酰胺作用后，K562细胞株端粒酶活性下降，下降程度呈浓度时间依赖性。当与环磷酰胺联合应用后，下降程度更明显。②三氧化二砷、人参皂甙、β-榄香烯作用后K562细胞的存活率下降，且抑制作用呈浓度、时间依赖性。当与环磷酰胺联合应用后，抑制作用更明显。③三氧化二砷、人参皂甙、β榄香烯及环磷酰胺作用于K562细胞株72小时后，端粒长度略有延长。结论：三氧化二砷、人参皂甙、β榄香烯及环磷酰胺均能抑制K562细胞株的生长及端粒酶活性，抑制端粒酶活性可能是其抗肿瘤作用的机制之一；三氧化二砷、人参皂甙、β榄香烯与环磷酰胺联合应用后抑制作用增强；联合环磷酰胺可望降低上述药物的给药浓度。抑制端粒酶活性后，K562细胞株的端粒长度略有延长，提示除了端粒酶以外，白血病细胞可能存在其他的端粒长度调节机制。     

β-榄香烯对脂质体瘤苗抗小鼠H22肝癌的免疫增强作用

目的：制备榄香烯脂质体瘤苗,观察对抗小鼠H22肝癌作用,寻找有效的抗肝癌生物疗法.方法：用改进的机械分散法制备β-榄香烯修饰脂质体瘤苗,使磷脂酰胆碱：胆固醇：十八烷氨：β-榄香烯摩尔比为4：4：1：1.5,并通过腹腔接种将脂质体包裹的H22抗原（LAg 组）及脂质体共包裹β-榄香烯与H22抗原的制剂（LEAg组）分别免疫荷瘤小鼠,观察小鼠的生存期,MTT法测定淋巴细胞对H22肝癌细胞的杀伤作用.结果：LEAg组的生存期和淋巴细胞毒活性均优于LAg组（P〈0.05）.结论：β-榄香烯可增强脂质体瘤苗的抗肝癌免疫效应.     

三氧化二砷、人参皂甙和β榄香烯对K562细胞株端粒-端粒酶系统作用机制的研究

本研究目的是探索三氧化二砷、人参皂甙及β榄香烯等几种药物在不同浓度作用时对K562细胞株端粒长度和端粒酶活性的调节及抑制作用，并研究上述药物抗白血病的作用机制，为寻求治疗急性白血病的新方法奠定基础。用3组不同浓度的三氧化二砷、人参皂甙及β榄香烯与人类红白血病细胞株K562共培养，采用PCR-ELISA法检测端粒酶活性，Southem blot法检测端粒长度。观察上述药物对K562细胞端粒酶活性及端粒长度的影响。结果表明：①经人参皂甙、三氧化二砷及β榄香烯作用后，K562细胞株端粒酶活性下降，下降程度呈浓度、时间依赖性，在一定浓度及作用时间后端粒酶呈阴性。②三氧化二砷、人参皂甙、β-榄香烯作用后K562细胞的存活率下降，且抑制作用呈浓度、时间依赖性。③三氧化二砷、人参皂甙及β-榄香烯作用于K562细胞72小时后，端粒长度略有延长。结论：①三氧化二砷、人参皂甙及β-榄香烯均能抑制K562细胞的端粒酶活性，抑制作用呈浓度、时间依赖性。抑制端粒酶活性可能是其抗肿瘤作用的机制之一。②三氧化二砷、人参皂甙及β-榄香烯均能抑制K562细胞的生长，抑制作用呈浓度、时间依赖性。③抑制端粒酶活性后，K562细胞的端粒长度略有延长。本研究结果提示除了端粒酶以外，白血病细胞可能存在其他的端粒长度调节机制。     

β—胡萝卜素与消炎痛合用对小鼠Lewis肺癌的抑瘤及免 …

β－胡萝卜（β－Ｃ）腹腔注射给药对小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌有明显的抑制肿瘤生长的作用，并能明显促进小鼠脾淋巴细胞增殖的增强小鼠ＮＫ细胞活性：与消炎痛（ＩＮ）合用时增强效果更为明显。提示：β－Ｃ与ＩＮ合用抗肿瘤作用主要与增强小鼠免疫功能有关。     

榄香烯预防胃癌HGC－27裸鼠腹腔转移的研究

目的：研究榄香烯对胃癌HGC-27裸鼠腹膜种植转移的预防作用。方法：建立人胃癌HGC－27腹膜转移裸鼠模型,分别给与榄香烯、顺铂（DDP）及两者联合进行干预后,检测腹膜转移瘤腹膜肿瘤指数,并用免疫组织化学法检测转移瘤组织中增殖细胞核抗原Ki67、抗凋亡蛋白bcl－2的蛋白表达情况。结果：与对照组比较,榄香烯、DDP及榄香烯联合DDP干预组的腹膜转移瘤PCI指数均显著降低,其中以联合治疗组PCI指数降低最为显著（PCI指数为33,P〈0．01）。同时,上述3种干预组转移瘤组织中Ki67、bcl－2蛋白阳性表达率显著降低,其中以联合治疗组Ki67、bcl－2蛋白阳性表达率降低最为显著（57．14％和34．28％,均P〈0．05）。结论：榄香烯单独或者联合DDP应用对于人胃癌HGC－27裸鼠腹腔转移有显著的预防作用。     

榄香烯乳胸腔内注射治疗恶性胸腔积液的疗效观察

目的：探讨榄香烯乳和顺铂治疗恶性胸水的疗效、生存质量和不良反应。方法：治疗组（A组）25例用榄香烯乳300mg／m^2，对照组（B组）25例用顺铂50mg／m^2胸腔注射。结果：A组控制胸水有效率为88％。B组为60％（P〈0．05），A组和B组的生存质量好转率分别为72％和40％，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：榄香烯乳胸腔注射治疗恶性胸腔积液疗效确切，安全性高。     

榄香烯乳肝动脉灌注栓塞治疗中、晚期肝癌82例临床观察

目的：探讨榄香烯乳在肝癌介入治疗中的临床疗效和毒副反应。方法：82例患者，随机分为榄香烯乳＋栓塞治疗组（研究组）和5－FU＋DDP＋MMC＋栓塞治疗组（对照组），研究组40例和对照组42例。结果：研究组的毒副反应小于对照组；研究组与对照组一年后随访治疗疗效无明显差异；研究组患者的生存质量优于对照组。结论：榄香烯乳具有疗效优、毒副作用小的优点，在肝癌的介入治疗中值得推广应用。     

环孢霉素A对K562／DOX细胞药物积聚和外排的影响

目的：寻找克服肿瘤细胞多药耐药的方法。方法：以环孢霉素Ａ（ＣｓＡ）作为耐药逆转剂，用ＭＴＴ法体外药物敏感试验，观察ＣｓＡ对多药耐药白血病细胞株Ｋ５６２／ＤＯＸ的药物敏感性、细胞内药物的积聚和外排的影响。结果：ＣｓＡ可增强阿霉素（ＤＯＸ）对Ｋ５６２／ＤＯＸ的细胞毒作用，且存在剂量依赖关系。ＣｓＡ≥２μｇ／ｍｌ能较明显提高Ｋ５６２／ＤＯＸ对ＤＯＸ的敏感性。用２μｇ／ｍｌＣｓＡ处理后，Ｋ５６２／ＤＯＸ细胞内ＤＯＸ外排速度明显减慢，ＤＯＸ含量仅减少１２．３％，但对Ｋ５６２细胞内药物外排无影响。结论：ＣｓＡ能有效地减慢Ｋ５６２／ＤＯＸ细胞内ＤＯＸ外排速度，增加细胞内ＤＯＸ积聚。ＣｓＡ对Ｋ５６２细胞药物敏感性、细胞内药物外排和积聚均无影响。     

干扰素和白细胞介素2对恶性血液病患者NK细胞活性的体外调节研究

干扰素和白细胞介素２对恶性血液病患者ＮＫ细胞活性的体外调节研究刘少君，侯风喜，刘林湘，于吉峰，席雨人，孙慧自然杀伤细胞（ＮＫＣ）对多种肿瘤有迅速杀伤和溶解作用，目前对ＮＫＣ的抗癌作用已日益受到人们的重视。据研究，白血病、骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）及...     

温莪术提取物协同抗CD3-抗胶质瘤双特异性抗体抑制神经胶质瘤生长

目的：观察具有诱导癌细胞凋亡的作用，并作为免疫调节剂的温莪术提取物β-榄香烯是否可协同抗CD3-抗胶质瘤双特异性抗体免疫抑制胶质瘤生长。 方法：实验于2003—12／2005-08在苏州大学附属第二医院脑肿瘤研究室完成。①选用重度联合免疫缺陷SCID小鼠30只，雌雄不拘，鼠龄4—6周。温莪术提取物β-榄香烯由大连市医药科学研究所馈赠。采用化学偶联法将由解放军第二军医大学长海医院免疫室提供的CD3单抗和本室制备的SZ39抗人脑胶质瘤单抗制备为双特异性抗体。②取培养生长的人脑胶瘤体外细胞系SHG-44细胞3&;#215;10^8L^-1于人外周血单个核细胞转输后次日，直接注射于SCID鼠右腋皮下。将种瘤后SCID小鼠按随机抽签法分为5组：β-榄香烯＋抗体＋白细胞介素2＋单个核细胞组：每天腹腔注射β-榄香烯（1．5mg／只）和双特异性抗体200μg/只，每天尾静脉注射白细胞介素2（5&;#215;10^5U／只），接种肿瘤前1天及第14天尾静脉注射人外周血单个核细胞（3．16&;#215;10^10L^-1，0．5mL，取自苏州大学附属第二医院健康志愿者2名外周血）；抗体＋白细胞介素2＋单个核细胞组：注射3种物质剂量和方法同上组；白细胞介素2＋单个核细胞组：注射2种物质剂量和方法同上组；外周单个核细胞组：注射外周单个核细胞剂量和方法同上组；对照组：尾静脉注射培养液。⑧记录肿瘤增殖的潜伏期，即接种日至皮下扪及微结节的时间。接种肿瘤28d后，称肿瘤质量。荧光原位杂交法测算每克肿瘤人淋巴细胞数量。苏木精-伊红染色，Olympus光学显微镜（&;#215;200）下观察肿瘤组织病理学变化。 结果：SCID小鼠30只均进入结果分析。①神经胶质瘤组织病理学观察结果：β-榄香烯＋抗体＋白细胞介素2＋外周血单个核细胞组和抗体＋白细胞介素2＋外周单个核细胞组肿瘤细胞有部分坏死，并有淋巴细胞浸润，其余各组形态相近，淋巴细胞浸润相对较少。②肿瘤增殖潜伏期：β-榄香烯＋抗体＋白细胞介素2＋单个核细胞组明显长于其他4组（P〈0．05），抗体＋白细胞介素2＋单个核细胞组明显长于白细胞介素2＋单个核细胞组、外周单个核细胞组和对照组（P〈0．05），白细胞介素2＋单个核细胞组明显长于外周单个核细胞组和对照组（P〈0．05）。③肿瘤质量：β-榄香烯＋抗体组明显高于其他4组（P〈0．01）。④肿瘤中人淋巴细胞浸润数量：β-榄香烯＋抗体组明显多于其他4组（P〈0．01）。 结论：温莪术提取物可协同双特异性抗体抑制神经胶质瘤生长。     

CD3AK细胞对耐药白血病细胞的体外杀伤作用

肿瘤生物治疗是近年来肿瘤治疗中的重要进展之一 ,其中采用免疫效应细胞 ,如ＬＡＫ细胞、ＴＩＬ、ＣＤ3 ＡＫ、ＣＩＫ、ＣＴＬ等进行的过继免疫治疗在某些肿瘤的治疗中取得了一定疗效。ＣＤ3 ＡＫ细胞是由抗ＣＤ3 单抗联合小剂量ＩＬ 2激活的Ｔ细胞 ,增殖能力和杀伤力较强。我们在实验中观察了ＣＤ3 ＡＫ细胞对耐药的白血病细胞株及慢性髓系白血病 (ＣＭＬ)急变患者原代肿瘤细胞的体外杀伤作用。材料和方法1　材料　正常人外周血由健康男性提供 ;ＣＭＬ急变患者骨髓由附属医院血液科提供。Ｋ5 6 2、ＨＬ 6 0、Ｋ5 6 2 ＶＣＲ细胞系由上海血…     

香菇多糖、榄香烯乳治疗肺癌恶性胸水疗效对比探讨

目的：比较香菇多糖（治疗组）与榄香烯乳（对照组）治疗肺癌恶性胸水的疗效及毒性。方法：治疗组16例胸腔内注射香菇多糖6 mg,（对照组）16例注射榄香烯乳400 mg,每周2次,连用2周。结果：治疗组有效率（CR＋PR）81.3%,对照组有效率75%,两组有效率差异无统计学意义,治疗组几乎未见任何不良反应,对照组不良反应较明显。结论：香菇多糖和榄香烯乳胸腔注射治疗肺癌恶性胸腔积液疗效确切,安全可靠,改善生活质量。     

丹参及丹参素对内毒素刺激下肝巨噬细胞分泌细胞因子影响的动态观察

采用大鼠肝巨噬细胞（ＫＣ）分离与培养技术，动态观察丹参及其有效成分丹参素对内毒素（ＬＰＳ）刺激下ＫＣ分泌白细胞介素１（ＩＬ１）、白细胞介毒６（ＩＬ６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的影响。为探讨中药的作用机制并对ＫＣ分泌的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）和前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）进行了测定。结果表明：ＬＰＳ具有明显的刺激ＫＣ活化作用，在一定ＬＰＳ浓度范围内，ＫＣ分泌的细胞因子与ＬＰＳ刺激浓度呈平行关系。ＩＬ６升高最早，活性最强。丹参和丹参素对ＬＰＳ刺激下ＫＣ分泌的多种细胞因子有明显的抑制作用，这种抑制作用呈剂量依赖性。其抑制机制包括促进活化的ＫＣ分泌免疫抑制物质ＰＧＥ２和抑制ＧＭＣＳＦ的分泌     

白细胞介素2基因和白细胞介素3基因共转染白血病瘤苗的抗白血病作用的实验研究

目的：研究白细胞介素２（ＩＬ－２）和白细胞介素３（ＩＬ－３）基因共转染的白血病细胞瘤苗对白血病小鼠的治疗效果。方法：用ＩＬ－２重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－２）和（或）ＩＬ－３重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－３）转染红白血病细胞株ＦＢＬ－３，６０Ｃｏ照射后制备成瘤苗对实验性白血病小鼠进行治疗，观察肿瘤生长，小鼠生存期及治疗后小鼠腹腔巨噬细胞、ＮＫ细胞、诱导杀伤性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）杀伤活性，并与低剂量环磷酰胺（ＣＴＸ）合用，观察其抗肿瘤作用。结果：用ＩＬ－２或ＩＬ－３基因转染瘤苗治疗的白血病小鼠肿瘤生长明显减缓，生存期显著延长（Ｐ＜０．０５），用联合转染ＩＬ－２和ＩＬ－３基因的瘤苗治疗较单独转染ＩＬ－２或ＩＬ－３基因的瘤苗治疗效果更佳，与低剂量ＣＴＸ合用后抗肿瘤效果最佳。治疗后小鼠腹腔巨噬细胞、ＮＫ细胞、ＣＴＬ细胞杀伤活性显著增强。结论：ＩＬ－２、ＩＬ－３基因转染的瘤苗能够有效地通过诱导机体抗肿瘤免疫功能而发挥抗肿瘤作用，与低剂量ＣＴＸ合用后，抗肿瘤效果更佳。     

榄香烯联合化疗治疗胃癌晚期腹水的研究

目的探讨榄香烯联合化疗药物对胃癌晚期腹水的治疗影响。方法对我院40例晚期胃癌患者采用随机分组方法分为两组，治疗组采用5-Fu与榄香烯联合用药进行腹腔灌注化疗，对照组采用5-Fu单药进行腹腔灌注化疗，每周两次应用两周，观察四周评价疗效。结果榄香烯联合化疗治疗组总缓解率（CR＋PR）85％，治疗组与对照组两组比较统计学意义显著（P〈0．01）。结论采用榄香烯联合腹腔灌注化疗治疗胃癌晚期腹水效果好，而且副反应轻，是一种控制胃癌晚期腹水切实有效的治疗方法。     

榄香烯胸腔内注射的观察与护理16例

榄香烯注射液（elemene injectione）胸腔内注射治疗癌性胸水，是治疗原发性和转移性肺癌的手段之一。但在临床应用中，部分患者用药后可有发热、局部疼痛、过敏反应、消化道反应等，尤其是发热和局部疼痛的副反应尤为突出。为更好地发挥榄香烯注射液胸腔内注射的疗效，更好地降低药物副反应，减轻患者痛苦，提高晚期肿瘤患者的生存质量，2004年1—12月，我院呼吸科应用榄香烯胸腔内注射治疗恶性胸腔内积液患者16例，取得了一定的疗效，现将观察与护理措施报道如下。     

肝素增强血小板生成素刺激巨核细胞生成

目的　探索肝素能否增强血小板生成素（ Ｔｐｏ） 刺激巨核细胞生成。方法　以巨核细胞白血病细胞株 Ｍ０７ｅ ,人脐带血 Ｃ Ｄ３ ４ ＋ 细胞和 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠为研究对象,用［３ Ｈ］ Ｔｄ Ｒ 掺入试验,巨核细胞集落（ Ｃ Ｆ Ｕ Ｍ Ｋ） 血浆半固体培养和小鼠体内实验等方法研究肝素或（ 和） Ｔｐｏ 对巨核细胞生成的作用。结果　肝素能增强 Ｔｐｏ 刺激白血病细胞株 Ｍ０７ｅ 增殖、人脐带血 Ｃ Ｄ３ ４ ＋ 细胞衍生的 Ｃ Ｆ Ｕ Ｍ Ｋ 生长和小鼠体内巨核细胞生成。结论　肝素通过增强 Ｔｐｏ 的促巨核细胞生成参与巨核细胞生成的正调控。     

恒定强磁场联合平阳霉素对口腔颌面部癌细胞体外培养的影响

采用噻唑兰（ＭＴＴ）方法观察０．２５Ｔ的恒定强磁场对４种口腔颌面部癌细胞体外培养的影响。发现磁场对这４种癌细胞均有不同程度的抑制作用，其中腺癌细胞比鳞癌细胞对磁场更为敏感，并且随着磁场作用时间加长，这种抑制作用更明显。平阳霉素对体外培养的人粘液表皮样癌ＭＥＣ－１系细胞生长有较强的抑制作用，而与０．２５Ｔ恒定强磁场联合应用后，抑制作用明显增强，两者有相加作用。     

应用Cell-IQ筛选榄香烯诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡的初步研究

目的应用全自动活细胞观测分析系统(Cell-IQ)及流式细胞仪观察榄香烯诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡的影响。方法应用不同浓度的榄香烯作用于人胃癌BGC-823细胞,使用Cell-IQ筛选抑制增殖的最佳浓度,并根据最佳作用浓度,应用流式细胞仪观察分析榄香烯对人胃癌BGC-823细胞凋亡的影响。结果榄香烯对人胃癌BGC-823细胞的抑制作用随其浓度增加而逐渐增强,以150μg/mL为最佳,之后榄香烯浓度再增高,其抑制肿瘤细胞增殖作用不再增强;150μg/mL的榄香烯作用于胃癌BGC-823细胞24 h后,主要表现为诱导早期凋亡为主,细胞凋亡率为(36.9±3.23)%,较对照组有明显差异(P<0.01)。结论 Cell-IQ能够进行细胞毒性、活性和增殖的检测和筛选;榄香烯对于人胃癌BGC-823细胞有明确抑制作用,最佳浓度为150μg/mL;榄香烯抑制人胃癌BGC-823细胞增殖作用的主要机制可能为诱导细胞凋亡,而非细胞毒作用。