银杏叶提取物对6-OHDA诱导PC12细胞Bax和Bcl—2表达的影响

目的探讨银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract,GBE）对6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OH—DA）诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及其机制。方法经不同浓度GBE预处理体外培养的PC12细胞加入6-OHDA诱导多巴胺能神经元损伤模型,用4-甲基偶氮唑蓝（MTT）检测PC12细胞活力;流式细胞仪（FCM）测定PC12细胞凋亡百分比;采用免疫印迹法检测Bcl-2和Bax的表达水平。结果100μmolZL的6-OHDA处理PC12细胞24h,细胞活力较正常对照组明显降低（P〈0．01）;与模型组比较,GBE20,40μg/ml可明显减轻6-OHDA对PCI2细胞的毒性,GBE可使细胞活性增强,降低凋亡百分比。与正常对照组比较,模型组Bax表达升高,而Bcl-2表达降低（P〈0．05）。与模型组比较,GBE各剂量组Bax降低,而Bcl-2升高,且呈剂量依赖性（P〈0．05）。结论GBE对6-OHDA诱导的PC12细胞凋亡具有抑制作用,上调Bcl-2和下调Bax表达可能是其作用的机制之一。     

银杏叶提取物对6-OHDA致PC12细胞损伤的保护作用及机制

目的探讨6-羟基多巴胺（6-OHDA）对PC12细胞的损伤作用,观测银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract,GBE）对该损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法采用细胞培养的方法,建立PC12细胞的6-OHDA损伤模型。MTT比色试验检测细胞活性,Hoechst33342荧光染色观察细胞形态变化,ELISA法检测胞质多巴胺（DA）的含量,免疫印迹法检测caspase～3观察细胞凋亡。结果40mg／LGBE对100umol／L6～OHDA作用于PC12细胞24h具有一定的保护作用,GBE可明显升高6-OHDA诱导的PC12细胞DA的含量（与损伤组比较,P〈0．05）,GBE可减少6-OHDA诱导的PCI2细胞caspase-3过度表达。结论GBE可减轻6-OHDA诱导的PCI2细胞损伤和凋亡,其作用可能与抑制caspase-3蛋白酶的激活有关。     

Necrostatin-1对6-OHDA致PC12细胞氧化应激损伤的影响

目的研究Necrostatin-1(Nec-1)对帕金森病(Parkinson's disease,PD)细胞模型线粒体失能的影响,探讨Nec-1在帕金森病发病机制中的作用。方法经不同浓度Nec-1预处理的PC12细胞加入6-OHDA建立多巴胺能神经元损伤模型。用4-甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测PC12细胞活力,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,免疫印迹法检测Cathepsin B与Bcl-2蛋白表达。结果 100μmol/L的6-OHDA处理PC12细胞24h,细胞活力较正常对照组明显降低(P<0.05);与模型组比较,5、10、20、30、60μmol/L的Nec-1可明显减轻6-OHDA的毒性,90μmol/L的Nec-1可加重6-OHDA的毒性。Nec-1可阻抑线粒体膜电位下降。与正常对照组相比,模型组Cathepsin B表达明显增加而Bcl-2的表达显著降低(P<0.05)。与模型组相比,Nec-1与UTI可降低Cathepsin B表达并使Bcl-2的表达逐渐增加(P<0.05)。结论 Nec-1在一定的浓度范围内可提高PC12细胞存活力,通过稳定线粒体膜电位、抑制Cathepsin B的表达、上...     

神经节苷脂GM1对6-OHDA诱导的PC12细胞氧化应激的保护作用

目的：用6-羟基多巴胺（6-OHDA）作用PC12细胞建立帕金森病细胞模型,观察6-OHDA诱导PC12发生氧化应激以及神经节苷脂GM1对细胞氧化损伤的保护作用。方法：将细胞随机分为正常对照组和实验组,正常对照组于正常培养基生长,实验组以不同浓度6-OHDA、GM1和50μmol·L^-1PI3-K抑制剂LY294002处理。用MTT法检测细胞存活率,利用2＇7＇-二乙酰二氯荧光素检测细胞内活性氧（ROS）水平,测定细胞内脂质过氧化物（MDA）和钠钾ATP酶水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：GM1预处理组与单纯6-OHDA实验组相比,PC12细胞存活率升高,钠钾ATP酶活性恢复,ROS和MDA水平降低,凋亡率下降;以PI3-K抑制剂LY294002预处理阻断PI3-K信号后,GM1对氧化损伤的保护作用减弱。结论：GM1对6-OHDA引起的细胞氧化应激损伤有保护作用,这种保护作用可能是通过启动PI3-K信号通路产生的。     

五味子醇甲抑制6-羟基多巴胺诱导PC12细胞凋亡的研究

目的 研究五味子醇甲(Schizandrin，SCH)的神经保护作用并探索其作用机制。方法 以PC12细胞为模型细胞，采用四氮唑(MTT)比色法检测6-羟基多巴胺(6—0HDA)对PC12细胞活性的影响；采用放射免疫法测定PC12细胞对培养液中^3H—D，L-谷氨酸的摄取；采用高效液相色谱法(HPLC)测定细胞外液中谷氨酸的浓度。结果 6—OHDA能抑制PC12细胞摄取谷氨酸，提高胞外谷氨酸的浓度，降低细胞的存活率；SCH能增强PC12细胞对谷氨酸的摄取，降低胞外谷氨酸的浓度，并拮抗6-OHDA对PC12细胞摄取谷氨酸的抑制作用和对细胞存活率的影响。结论 SCH对PC12细胞有保护作用，其保护作用机制可能与增强谷氨酸转运体(Glutamate transporters，GluTs)的功能有关     

EGb对MPP^＋诱导的PC12细胞凋亡的影响

目的 观察EGb对MPP^ 诱导的PC12细胞凋亡的细胞。方法 MPP^ 诱导PC12细胞凋亡,AO／EB染色,荧光显微镜下观察凋亡细胞。结果 EGb50、100μg/ml在6h、12h、24h可抑制细胞凋亡,而EGb25μg/ml则无效。结论 EGb在6h、12h、24h时呈剂量依赖性降低细胞凋亡率,提示EGb有可能通过抑制DA能神经元凋亡而相对增加DA含量。     

银杏叶提取物对百草枯致PC12细胞损伤的保护作用及机制

目的探讨百草枯(PQ)对PC12细胞的损伤作用,观测银杏叶提取物(EGB761)对该损伤的保护作用并探讨其作用机制.方法MTT比色试验检测细胞活性;乳酸脱氢酶(LDH)测定细胞损伤程度;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;caspase-3免疫细胞化学染色观察细胞凋亡.结果40mg/L EGB761对300μmol/LPQ作用于PC12细胞24h,具有一定的保护作用;EGB761可明显抑制PQ诱导的PC12细胞LDH的释放(0.25±0.01)(与PQ组比较,P<0.05);EGB761可降低PC12细胞的凋亡百分率,PQ组凋亡百分率为66.7%,使用EGB761保护后凋亡百分率降为17.1%;并可减少PQ诱导的PC12细胞caspase-3过度表达.结论EGB761可减轻PQ诱导的PC12细胞损伤和凋亡,该作用可能与抑制caspase-3蛋白酶的激活有关.     

当归注射液对6-羟基多巴胺诱导PC12细胞帕金森病模型SIRT1表达及细胞凋亡的影响

目的:探讨当归注射液治疗对帕金森病的可能作用及作用机制.方法:采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)处理PC12细胞制作帕金森病体外模型.6-OHDA处理前2 h,将当归注射液加入PC12细胞培养液中,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,采用流式细胞仪检测凋亡率,并用免疫细胞化学SABC法和图像分析检测酪氨酸羟化酶...     

烷丙苯胺对6-羟基多巴胺致PC12细胞损伤的改善作用

目的:探讨烷丙苯胺(deprenyl)对多巴胺能神经元的保护作用及其可能机制.方法:将PC12细胞分别暴露于不同浓度的6-羟基多巴胺(6-OHDA)和deprenyl,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测其对细胞活力的影响;Western印迹法检测其对Caspase-3表达的影响;荧光法检测deprenyl对6-OHDA诱导的Caspase-3活性和谷胱甘肽(GSH)活性的影响.结果:1～100μmol/L浓度范围的6-OHDA均降低PC12细胞活力(F=23.612,P＜0.05),而1～100 μmol/L的deprenyl对细胞活力无明显影响(F=0.984,P＞0.05);提前加入1～50μmol/L的deprenyl后可以抵抗50μmol/L的6-OHDA对细胞活力的毒性作用(F=26.630,P＜0.05).与对照组相比,6-OHDA使Caspase-3活性片段释放增加,提前加入deprenyl可以部分拮抗此作用(F=22.151,P＜0.05);与对照组相比,6-OHDA降低了GSH的活性,而提前加入deprenyl的可以部分增加GSH的活性(F=8.453,P＜0.05).结论:6-OHDA对多巴胺神经元有神经毒性作用,而deprenyl可以部分拮抗6-OHDA的毒性作用,deprenyl的神经保护作用可能与抑制Caspase-3活性和提高GSH活性有关.     

环维黄杨星-D对6-羟基多巴胺诱导的PC12细胞死亡率的影响

目的:研究环维黄杨星-D (CVB-D)的神经保护作用,研究CBV-D对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的PC12细胞存活率的影响.方法:以PC12细胞为模型细胞,采用四氮唑(MTT)比色法检测6-OHDA对PC12细胞活性的影响;采用放射免疫法测定PC12细胞对培养液中[3H]-D,L-谷氨酸的摄取;采用HPLC法测定细胞外液中谷氨酸的浓度.结果:6-OHDA能抑制PC12细胞摄取谷氨酸,提高胞外谷氨酸的浓度,降低细胞的存活率;CVB-D能拮抗6-OHDA对PC12细胞摄取谷氨酸的抑制作用和对细胞存活率的影响.结论:CVB-D对PC12细胞有保护作用,其保护作用机制可能与增强谷氨酸转运体的功能有关.     

银杏叶提取物对HeLa炎症细胞模型应激作用的影响

目的探讨银杏叶提取物(Ginkgo biloba leaf extract,GbE)对细菌脂多糖(LPS)诱导人宫颈癌细胞(HeLa细胞)炎症应激作用的影响。方法将HeLa细胞分成LPS组、GbE+LPS干预组和对照组3组,通过细胞骨架染色了解细胞结构的稳定性;应用OLYMPUS-AU2700自动生化分析仪测定细胞上清液C反应蛋白(CRP)、前白蛋白(PA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量,了解细胞应激反应情况和细胞死亡情况。结果 GbE+LPS组培养48h后细胞骨架较松散,稳定性明显低于LPS组和对照组;GbE+LPS干预组培养8 h后细胞上清液CRP含量显著低于LPS组(tGbE+LPS=-3.649,P<0.05),而LDH含量高于LPS组,但差异无统计学意义(tGbE+LPS=-3.56,P>0.05);各组各时间段细胞上清液PA含量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 GbE具有介导HeLa炎症细胞凋亡及减轻细胞炎症反应的作用。     

银杏叶提取物对鱼藤酮和1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:观察银杏叶提取物(extract of Ginkgo biloba leaves,EGB)对PC12细胞损伤的保护作用.方法:采用细胞培养的方法,建立PC12细胞的鱼藤酮和1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP )损伤的模型.用倒置显微镜观察细胞形态,MTT法测定细胞存活率,ELISA法检测胞外多巴胺(DA)水平.结果:同毒物组比较,EGB在0.35、0.70、1.40 mg/ml浓度下能减轻MPP 引起的PC12细胞损伤,在1.40 mg/ml浓度下能减轻鱼藤酮引起的损伤,明显提高细胞的存活率, 增高胞外DA水平:2 mmol/L MPP 和10 μmol/L鱼藤酮作用下胞外DA分别为(6.875±0.201)和(5.321±0.167) ng/ml,而1.40 mg/ml EGB分别与2 mmol/L MPP 或10 μmol/L鱼藤酮共同作用,DA升高至(7.595±0.139) ng/ml(P<0.05)和(6.917±0.201) ng/ml(P<0.01).结论:EGB对鱼藤酮和MPP 体外诱导PC12 细胞的损伤具有明显的保护作用.     

银杏叶提取物对LPS诱导HeLa细胞凋亡的影响

目的研究银杏叶提取物(Ginkgo biloba leaf extract,GbE)对细菌脂多糖(LPS)诱导的人宫颈癌细胞HeLa细胞凋亡的影响。结论将HeLa细胞分成LPS组、GbE+LPS干预组和对照组,各组细胞加入相应药物干预8～72h。采用MTT法检测GbE对细胞的毒性作用;计算各组细胞不同时间段细胞数,测定各组细胞的增殖情况;通过细胞形态学检测(AO/EB染色)测定细胞凋亡发生情况。结果在72h内不同浓度GbE对HeLa细胞无明显细胞毒性作用,细胞存活率在90%～100%之间,差异无统计学意义(P>0.05);LPS组经LPS诱导8h后细胞在各时间段增殖均较其他两组活跃,细胞数明显高于其他两组(tGbE+LPS=6.423,P<0.001;t对照组=3.976,P<0.005);GbE+LPS组培养48h后细胞凋亡数明显高于LPS组和对照组。结论 GbE具有抑制LPS诱导的HeLa细胞增殖及促进细胞凋亡的作用。     

银杏叶提取物对紫外线所致兔晶状体氧化损伤的保护作用

目的研究银杏叶提取物（EGB）对紫外线所致体外培养兔晶状体氧化损伤的保护作用。方法将体外培养兔晶状体分为正常培养组,紫外线照射对照组（波长260～365 nm,强度400 W/cm2,时间30 min）,照射前EGB保护组,照射中EGB保护组,照射后EGB保护组。照射前后各培养24 h,观察各组晶状体混浊情况,并测定晶状体中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、活性氧物质（ROS）以及丙二醛（MDA）的含量。结果紫外线照射组晶状体全部混浊,SOD、GSH-Px、CAT酶活性降低,ROS及MDA含量升高。照射前及照射后EGB保护组晶体混浊率较对照组明显降低（P〈0.05）。各EGB保护组抗氧化酶活性均较对照组升高,ROS及MDA含量降低,其中照射前及照射后EGB保护组与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论紫外线照射引起兔晶状体氧化损伤,EGB可作为一种抗氧化剂减轻这种氧化损伤。     

银杏叶提取物对辐射损伤小鼠脾脏氧化应激和蛋白激酶C活性的影响

目的：探讨银杏叶提取物（GBE）对辐射小鼠脾脏细胞氧化损伤相关蛋白表达的影响,阐明其作用机制。方法：将60只ICR小鼠随机分为空白对照（NC）组、辐射对照（IC）组（4.0 Gyγ线照射）、低剂量GBE （IC+GBEL）组（4.0 Gyγ线+5.0mg·kg^-1 GBE）、中剂量GBE （IC+GBEM）组（4.0 Gyγ线+10.0mg·kg^-1GBE）和高剂量GBE （IC+GBEH）组（4.0 Gyγ线+20.0mg·kg^-1GBE）,每组12只。各剂量GBE组小鼠连续给予相应剂量GBE共14 d,第15天除NC组小鼠外均给予总剂量为4.0 Gy的γ射线全身照射。于照射后24 h采用生化方法检测各组小鼠脾组织中丙二醛（MDA）水平,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）活性;免疫组织化学法观察各组小鼠脾脏细胞中8-羟基脱氧鸟嘌呤（8-OHdG）表达水平,ELISA法检测各组小鼠脾组织中蛋白激酶C （PKC）活性。结果：与NC组比较,IC组和各剂量GBE组小鼠脾组织中MDA水平和8-OHdG表达水平明显升高（P<0.05）,SOD、CAT、GSH-px和PKC活性明显降低（P<0.05）;与IC组比较,各剂量GBE组小鼠脾组织中MDA水平和8-OHdG表达水平明显降低（P<0.05）,SOD、CAT、GSH-px和PKC活性明显升高（P<0.05）。结论：GBE可以抑制辐射损伤小鼠脾脏内的氧化应激,调节恢复脾脏PKC活性,从而发挥其对辐射损伤的保护作用。     

银杏叶提取物对环孢素A慢性肾毒性的拮抗作用

目的 探讨银杏叶提取物(EGb)对环孢素A(CsA)所致慢性肾毒性的拮抗作用及其机制.方法 将无特定病原体动物(SPF级)的雄性大鼠随机分为对照组、小剂量CsA组(皮下注射CsA25 mg·kg-1·d-1)、大剂量CsA组(皮下注射CsA 50 mg·kg-1·d-1)、小剂量CsA+EGb治疗组(皮下注射CsA 25 mg·kg-1·d-1,EGb 300 mg·kg-1·d-1灌胃)、大剂量CsA+EGb治疗组(皮下注射CsA50 mg·kg-1·d-1,EGb 300 mg·kg-1·d-1灌胃).给药4周后测定各组大鼠的体重、尿量、24 h尿蛋白定量、肾功能,并行肾脏病理检查,肾组织匀浆测定丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC),过氧化氢酶(CAT),还原型谷胱甘肽(GSH).结果 4个实验组的尿量、24 h尿蛋白定量、肾间质纤维化评分,MDA水平均显著高于对照组(P值均<0.05),内生肌酐清除率(Ccr)、T-AOC、CAT和GSH水平均显著低于对照组(P值均<0.05).与小剂量CsA组相比,大剂量CsA组的MDA水平显著增高(P<0.05),T-AOC水平显著降低(P<0.05).与大剂量CsA组相比,大剂量GsA+EGb治疗组的24 h尿蛋白定量、肾间质纤维化评分、MDA水平显著降低(P值均<0.05),Ccr、T-AOC、CAT和GSH水平显著升高(P值均<0.05).与小剂量CsA组相比,小剂量GsA+EGb治疗组的24 h尿蛋白定量、肾问质纤维化评分显著降低(P值均<0.05),Ccr、T-AOC、CAT和GSH水平显著升高(P值均<0.05).结论 氧化应激是导致CsA肾毒性的主要原因之一,EGb能拮抗氧化应激反应,从而降低CsA肾毒性.     

银杏叶提取物的研究进展与应用前景

银杏是我国特有的一种中药材,具有活血、化淤、通络的功效,一般用于心脑血管疾病的防治。本文对银杏叶提取物的药理作用、服用剂量、制备工艺及应用前景等进行了总结与描述。