实验性精索静脉曲张对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的 :探讨大鼠精索静脉曲张对睾丸生精细胞凋亡的影响 ,阐明精索静脉曲张引起不育的病理机制。　方法 :选用雄性SD大鼠 32只 ,随机分为假手术组、4 5d模型组、6 0d模型组及 90d模型组。采用肾静脉缩窄法建立精索静脉曲张动物模型 ,流式细胞术分别检测各组大鼠睾丸凋亡细胞数及各级生精细胞数。　结果 :假手术组未出现明显的凋亡峰 ,各模型组均出现明显的凋亡峰 ,且随着造模时间的延长凋亡峰增高。　结论 :精索静脉曲张可引起睾丸生精细胞大量凋亡 ,各级生精细胞数减少 ,这可能是精索静脉曲张引起睾丸生精功能障碍从而导致不育的根本机制     

茶多酚对精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的:研究茶多酚对精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响,分析茶多酚对精索静脉曲张大鼠生精功能是否具有保护作用。方法:清洁级青春期Wistar大鼠32只随机分为4组,每组8只:假手术组(仅模拟手术过程,不结扎血管)、模型组(建立左精索静脉曲张模型)、茶多酚低剂量组[建立精索静脉曲张模型并给予10 mg/(kg·d)茶多酚干预]、茶多酚高剂量组[建立精索静脉曲张模型并给予40 mg/(kg·d)茶多酚干预]。建立左侧精索静脉曲张模型4周后,假手术组及模型组均给予生理盐水1 ml/100 g,茶多酚低剂量组及茶多酚高剂量组分别给予茶多酚10 mg/kg(用生理盐水配置成浓度为1 mg/ml)和40 mg/kg(用生理盐水配置成浓度为4 mg/ml),灌胃,1次/日,持续4周。4周后4组大鼠均处死并分别取左侧睾丸组织,检测低氧诱导因子-1(HIF-1)、Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cyt C)和caspase-3在睾丸组织中的表达及生精细胞的凋亡并计算凋亡指数(AI)。结果:茶多酚干预组大鼠Bcl-2表达高于模型组(110.03±3.07),低于假手术组(154.18±2.96);茶多酚低剂量组大鼠Bcl-2(127.67±1.28)表达低于茶多酚高剂量组(136.41±1.95),差异有统计学意义(P0.05)。茶多酚干预组大鼠HIF-1、Bax、Cyt C和caspase-3的表达低于模型组,高于假手术组;茶多酚低剂量组大鼠HIF-1、Bax、Cyt C和caspase-3的表达高于茶多酚高剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。假手术组AI最低,茶多酚干预组AI低于模型组,茶多酚高剂量组AI低于茶多酚低剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:茶多酚能显著降低精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞的凋亡。     

大鼠精索静脉曲张后附睾上皮细胞凋亡及管腔α-1,4-葡糖苷酶、唾液酸含量观察

目的:探讨大鼠左侧精索静脉曲张后同侧附睾上皮细胞凋亡与附睾管腔中-α1,4-葡糖苷酶和唾液酸含量改变的关系及意义。方法:16只雄性SD大鼠建立左侧精索静脉曲张模型,分为对照组和实验组,每组8只。缺口末端转移酶标记技术检测附睾上皮细胞凋亡;硝基酚法和5-甲基苯二酚法分别检测附睾管腔液-α1,4-葡糖苷酶和唾液酸含量。结果:大鼠左侧精索静脉曲张模型建立后的第7 d,实验组同侧附睾上皮细胞凋亡指数显著高于对照组(P<0.001);实验组附睾管腔液-α1,4-葡糖苷酶、唾液酸含量显著低于对照组(P<0.05,P<0.005)。结论:大鼠左侧精索静脉曲张可导致同侧附睾上皮细胞凋亡增加,进而影响该侧附睾上皮细胞的合成和分泌功能。     

精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡的实验研究

目的 :探讨外科所致的精索静脉曲张对大鼠生精细胞凋亡的影响。　方法 :采用成年雄性Wistar大鼠复制左精索静脉曲张模型 ;用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法 (TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡。　结果 :实验组的细胞凋亡率显著高于假手术对照组 (P <0 .0 5 )。　结论 :外科所致的精索静脉曲张大鼠睾丸生长减缓 ,生精细胞凋亡增加 ,这可能是其影响生育能力的机制之一。     

高压氧对精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡及其基因缺氧诱导因子-α、bcl-2及bax表达的影响

目的 观察高压氧(HBO)对精索静脉曲张(VC)SD大鼠生精细胞凋亡的影响,探讨精索静脉曲张导致男性不育的机制.方法 50只青春期雄性SD大鼠,随机抽出10只作为假手术对照组(A).A组只游离左肾静脉不予结扎,其余40只部分结扎左肾静脉建立VC模型,8周后,将建立了VC模型的40只随机分为VC模型组(B)和HBO干预的VC模型组(C),C组用HBO对VC模型进行干预.实验结束后各组大鼠切取双侧睾丸,采用原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠睾丸生精细胞凋亡,免疫组织化学检测低氧诱导因子(HIF)-α、bcl-2及bax的基因表达.结果 B组较A组生精细胞凋亡数明显增多,HIF-α、bax表达增强(P＜0.01),bcl-2表达减弱(P＜0.01),bcl-2/bax比值降低;C组大鼠较B组生精细胞凋亡数减少(P＜0.01),HIF-α表达减弱(P＜0.01)、bcl-2/bax比值上升,而与A组比较差异无统计学意义.结论 VC大鼠生精细胞凋亡率增加,HIF-α表达增强、bcl-2和bax基因表达失调为其凋亡机制之一;高压氧可能通过HIF-α、bcl-2和bax基因调控途径调节生精细胞凋亡,从而改善VC所致的生精功能障碍.     

通精灵对实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡及Bcl-2表达的影响

目的：探讨实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡状况及通精灵对精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能的保护作用。方法：成年清洁级雄性Wistar大鼠50只,按Sapyol法制作左精索静脉曲张大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、通精灵低剂量组、通精灵中剂量组、通精灵高剂量组各10只。造模1个月后,各组予以不同药物灌胃1次／d。2个月后处死,用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测睾丸生精细胞凋亡,免疫组化法检测睾丸组织Bcl-2表达。结果：模型组大鼠左睾丸凋亡指数明显高于假手术组及通精灵各组（P〈0．01）,通精灵各组左睾丸凋亡指数显著低于模型组（P〈0．05）。与假手术组比较,模型组大鼠睾丸组织Bcl-2蛋白表达下降（P〈0．05）,与模型组比较,通精灵中、高剂量组睾丸组织Bcl-2蛋白表达显著上升（P〈0．05）。结论：通精灵能降低实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡,减轻实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织的病理损害,上调凋亡抑制基因Bcl-2表达。     

实验性精索静脉曲张对大鼠同侧睾丸的影响

目的:利用大鼠动物模型来研究实验性精索静脉曲张(EV)对其同侧睾丸的影响。方法:EV模型的制作是通过在雄性SD大鼠左侧精索内静脉和肾上腺静脉内侧部分结扎左肾静脉。60只雄性青春期SD大鼠随机分为EV持续6、12、18周组(EV6、EV12、EV18组,每组12只)和相应的接受假手术的对照组(每组8只)。于6、12、18周,摘取成功复制成EV模型大鼠(分别为10,8,9只)以及各自接受假手术的对照组大鼠左侧睾丸,检测其Johnsen's评分、生精小管超微结构、睾丸组织睾酮浓度(ITC)和生精细胞的凋亡指数(AI)。结果:EV6、EV12、EV18组Johnsen's评分(6.92±0.52,4.83±0.41,2.95±0.26)和ITC(6.32±0.85,5.17±0.76,4.11±0.69)均显著低于各自对照组[(9.56±0.35,9.63±0.31,9.39±0.46)和(9.64±1.23,9.38±0.69,9.73±0.49)](P<0.05),并且随着精索静脉曲张持续时间的增加而逐渐降低;EV6、EV12、EV18组AI(5.32±1.23,15.21±0.97,21.13±1.12)显著高于各自对照组(3.21±1.15,3.43±1.21,3.61±1.15),并且随着精索静脉曲张持续时间的增加而逐渐升高;各EV组生精小管的超微结构损伤也随着精索静脉曲张持续时间的增加而逐渐严重。结论:EV导致同侧睾丸ITC下降、生精功能的进行性损害、生精细胞AI增加。     

实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡的周期时相性研究

精索静脉曲张(varicocele,VC)为泌尿外科常见疾病,其中约21%～41%系因不育而就诊,但截至目前精索静脉曲张导致不育的机制仍不十分清楚[1].由于生精细胞凋亡与不育关系密切,本研究应用流式细胞术(flow cytometry,FCM),分析实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡的周期时相性,从细胞分子生物学角度探讨精索静脉曲张所致不育的病理机制.     

精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡与caspase-3蛋白的表达

目的:探讨caspase-3在精索静脉曲张大鼠生精细胞中的表达及其与生精细胞凋亡的关系。方法:雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组(SOG)、30 d术后组(PG1)、60 d术后组(PG2),每组8只。建立左精索静脉曲张模型,TUNEL法检测生精细胞凋亡,免疫组化SABC法检测caspase-3表达。结果:SOG、PG1、PG2大鼠左、右侧睾丸每生精小管截面caspase-3阳性细胞数分别为0.117 5±0.012 9、0.246 3±0.042 1、0.293 8±0.051 1及0.165 0±0.019 2、0.253 8±0.021 9、0.277 5±0.034 3。与SOG相比,PG1和PG2组大鼠双侧睾丸生精细胞caspase-3表达均增加,差异有显著性(P=0.011 5及P=0.014 4)。结论:精索静脉曲张可能是大鼠生精细胞caspase-3表达增加且生精细胞凋亡增多的机制之一。     

精浆中性α-葡糖苷酶含量测定对精索静脉曲张患者术后疗效的评价

<正>精索静脉曲张(varicocele,VC)是男科常见的疾病之一,也是男性不育的的主要病因[1],该病多见于青壮年,并且有很高的发病率,在其导致不育的患者中多为少弱精子症,严重者甚至为无精子症[2-5]。精液生化检测是临床实验室精液常规的检测手段之一,特别是精浆中性α-葡糖苷酶,与精子浓度、前向活力和精子受精能力呈正相关,通过对精浆中性α-葡糖苷酶检测,可间接反映男性不育症的原因,为男性不育患者提供简便实用的诊断方法,也是检验不     

精子凋亡和生精细胞凋亡检测与精索静脉曲张的关系

精索静脉曲张(varicocele,VC)常人发病率在8%～20%,在男性不育症患者可达39%.协和医院统计1310例男性不育症中VC为466例,占35.57%[1].柯明辉(2010)统计中日友好医院不育症2599例,有VC者703例,占27.05%.VC是慢性渐进性对睾丸生殖功能有损伤的疾病,每增长1岁精液异常危险性提高0.023倍(2.3/100倍),是非VC精液异常危险率的1.2倍[2].发生于左侧睾丸者约为70%～90%,虽然发生在单侧,但它是一种双侧睾丸损伤性疾病,还具有累积性损害的特征,长时间的VC会引起睾丸功能下降,出现睾丸生殖功能障碍[3].青少年患者应该尽早治疗[4].本文就VC精子形态学、精子和生精细胞凋亡检出率与VC的关系综述如下.     

精索静脉曲张对大鼠前列腺细胞因子的影响

精索静脉曲张(VC)是青壮年男性常见疾病.目前研究发现,VC、痔、前列腺静脉丛扩张具有解剖学卜的相关性,它们之间可能相互影响[1].     

精浆中性α-葡糖苷酶含量测定对精索静脉曲张思者术后疗效的评价

精索静脉曲张（varicocele,VC）是男科常见的疾病之一,也是男性不育的的主要病因[1],该病多见于青壮年,并且有很高的发病率,在其导致不育的患者中多为少弱精子症,严重者甚至为无精子症旧引。精液生化检测是临床实验室精液常规的检测手段之一,特别是精浆中性α-葡糖苷酶,与精子浓度、前向活力和精子受精能力呈正相关,通过对精浆中性α-葡糖苷酶检测,可间接反映男性不育症的原因,为男性不育患者提供简便实用的诊断方法,也是检验不育症治疗效果的手段之一[6]。精浆中性α-葡糖苷酶检测用于VC手术效果的评估鲜有报道,本文回顾性分析我院收住的108例VC不育症的临床资料,分析精浆中性α-葡糖苷酶水平在VC手术前后的变化,探讨精浆中性α-葡糖苷酶与VC不育症之间有无相关关系,评判精浆中性仅．葡糖苷酶在手术治疗VC术后疗效观察中的临床应用价值。     

大鼠精索静脉曲张模型的制作及变异分析

目的:观察大鼠睾丸-精索静脉脉管系统解剖及变异情况,探索大鼠精索静脉曲张(varicocele,VC)模型的制作。方法:采用左肾静脉部分结扎法制作80只SD大鼠的VC模型,对模型组及对照组大鼠的睾丸-精索静脉脉管系统进行解剖并绘制图谱。结果:64只成功制成左侧VC模型,平均静脉直径从术前的0.16mm增加到1.3mm。SD大鼠左侧精索静脉走行存在多种类型的变异情况。VC大鼠的睾丸血流由常规的经精索静脉流入下腔静脉变为经3～4个静脉侧枝经膀胱前列腺周围静脉丛流入髂静脉。结论:大鼠VC模型的制作需要考虑多种静脉变异情况,VC使得睾丸静脉血回流通路发生改变。     

大鼠精索静脉曲张睾丸组织的蛋白质组学研究

目的精索静脉曲张是男性不育的首要病因,本课题利用蛋白组学技术筛选精索静脉曲张大鼠睾丸中表达变化显著蛋白,探索精索静脉曲张引起不育的可能分子机制。方法雄性Wistar大鼠16只,随机分为对照组和精索静脉曲张实验组。实验组大鼠施行左肾静脉部分结扎术来诱导产生精索静脉曲张,对照组行假手术作为阴性对照。30d后,收集全部大鼠的左侧睾丸。采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（Tunel）法检测两组大鼠生精细胞凋亡情况,进而比较两组生精细胞的凋亡指数。利用双向凝胶电泳技术（2-DE）寻找两组大鼠睾丸中表达有显著性差异的蛋白质点,然后进行基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱鉴定（MALDI-TOFMS）。结果双向凝胶电泳结果显示21个蛋白质点在两组间存在显著性差异。在精索静脉曲张大鼠睾丸中有8个蛋白质点表达上升、13个下降,这些蛋白功能涉及蛋白质合成、加工、降解,基因表达调控,信号转导,能量代谢,凋亡,自由基代谢等。Tunel证实实验组大鼠睾丸中生精细胞凋亡指数显著高于对照组,且本实验筛选出14—3—3e、hnRNPF以及LZTFL1三种蛋白与凋亡相关。结论蛋白组学筛选出精索静脉曲张大鼠睾丸差异表达蛋白,并进一步证实精索静脉曲张促进睾丸生精细胞凋亡,其中相关凋亡蛋白对揭示精索静脉曲张引起男性不育的分子机制提供了可能。     

生精冲剂对实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡状况的影响

目的:探讨实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡状况以及生精冲剂对其凋亡的影响。方法:将60只成年雄性W istar大鼠随机抽出20只为对照组,其余按石津和彦改良法制成左精索静脉曲张大鼠模型,再随机分为模型组20只,治疗组20只。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡。结果:模型组大鼠睾丸生精细胞凋亡指数明显高于对照组(P<0.01)和治疗组(P<0.01),治疗组与对照组比较有明显差异(P<0.01)。结论:实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡增加,这可能是影响生育力的机制之一;生精冲剂能够减少精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡,对睾丸生精功能具有保护作用,进而可提高睾丸的生殖能力。     

D-柠檬烯对精索静脉曲张大鼠生精功能的保护作用

目的:探讨D-柠檬烯对精索静脉曲张(VC)大鼠生精功能的保护作用。方法:雄性SD大鼠40只随机分为4组,假手术组(A组),假手术+D-柠檬烯组(B组),VC组(C组),VC+D柠檬烯组(D组)。C、D组行左肾静脉缩窄术建立VC大鼠模型,B、D组术后每日腹腔注射D-柠檬烯200 mg/kg,A、C组注射等量生理盐水,4周...     

精索静脉曲张大鼠模型复制的改进

2002年2月至2002年9月，我们改进精索静脉曲张动物模型复制方法，在左肾静脉缩窄基础上，分离结扎左精索内静脉与左髂总静脉间的分支，效果满意，现报告如下。     

精索静脉曲张大鼠睾丸自噬对生精细胞的影响

目的:研究精索静脉曲张(VC)大鼠模型中睾丸不同水平自噬对生精细胞凋亡的影响。方法:雄性SD大鼠54只随机分为6组:空白对照组、雷帕霉素对照组、氯喹对照组各6只,VC组、VC+雷帕霉素组、VC+氯喹组各12只。采用HE染色观察睾丸、附睾组织形态学变化,并对睾丸及附睾中精子形成情况进行评分,TUNEL染色检测生精细胞凋亡指数(AI),Western印迹检测LC3、p62、Bax、Bcl-2的表达。结果:空白对照组、雷帕霉素对照组、氯喹对照组大鼠睾丸及附睾组织均未发生明显形态学变化,精子形成情况评分及AI亦无显著差异(P>0.05);VC组大鼠睾丸及附睾组织发生明显病理损伤,精子形成情况评分显著降低(P<0.01),AI显著升高(P<0.01),但VC+雷帕霉素组较VC组明显改善,而VC+氯喹组较VC组轻度加重。此外,与空白对照组比较,VC组自噬相关蛋白LC3(包括LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值)和促凋亡蛋白Bax表达显著增加(P<0.01),抑凋亡蛋白Bcl-2表达则显著降低(P<0.01);且VC+雷帕霉素组LC3与Bcl-2表达显著高于VC组(P<0.01),p62和Bax表达则显著低于VC组(P<0.01);而VC+氯喹组LC3与Bcl-2表达显著低于VC组(P<0.01),p62和Bax的表达则显著高于VC组(P<0.01)。结论:VC可诱导大鼠睾丸自噬和生精细胞凋亡,上调自噬可抑制生精细胞凋亡,阻滞自噬则可促进生精细胞凋亡。