高水平氨基糖苷类耐药肠球菌体外耐药监测

目的了解肠球菌的分布和高水平氨基糖苷类耐药肠球菌（HLAR）的耐药现状,为临床合理用药提供依据。方法鉴定采用API鉴定系统,抗生素敏感试验采用Kirby—Bauer纸片扩散法。结果2005年1月至2007年9月检出肠球菌292株,43．1％来源于尿液标本;粪肠球菌占65．3％,屎肠球菌占30．1％,HLAR检出率占80．5％。粪肠球菌和屎肠球菌、HLAR和非HLAR的耐药性均不同。结论加强肠球菌的鉴定和HLAR的检测,有利于临床根据体外药敏试验结果选择用药。     

肠球菌氨基糖苷类高水平耐药基因的检测

目的调查肠球菌对高水平氨基糖苷类的耐药情况，并检测其耐药基因。方法琼脂稀释法筛选对氨基糖苷类高水平耐药的肠球菌，PCR扩增5种高耐药基因：双功能酶AAC(6′)-APH(2″)的编码基因aac(6′)-Ie—aph(2″)-Ia，磷酸转移酶APH(2″)-Id、APH(2″)-Ib的编码基因aph(2″)-Id、aph(2″)-Ib，核苷酸转移酶ANT(6-′)、ANT(3″)(9)的编码基因ant(6′)-Ia和ant(3″)(9)，并通过PCR产物的基因测序及寡核苷酸探针斑点杂交试验验证结果的可靠性。结果粪肠球菌对氨基糖苷类高水平耐药率达63％，屎肠球菌达84％。95％以上庆大霉素高耐肠球菌(HLGR)检测到aac(6′)-Ie—aph(2″)-Ia、3株HLGR肠球菌检测到aph(2″)-Id，99％以上HLSR肠球菌检测到ant(6′)-Ia。结论肠球菌对氨基糖苷类高水平耐药十分普遍，双功能酶AAC(6′)-APH(2″)、核苷转移酶ANT(6′)分别介导了大多数肠球菌对庆大霉素、链霉素的耐药。     

高水平氨基糖苷耐药肠球菌的监测

目的了解高水平氨基糖苷耐药(HLAR)肠球菌的分离率,探讨青霉素类或糖肽类与氨基糖苷类药物合用对院内感染肠球菌的协同杀菌作用,为临床治疗肠球菌感染提供参考与指导.方法采用VITEK-AMS仪器对分离自临床标本的101株肠球菌进行氨苄西林、青霉素、万古霉素耐药性和高水平庆大霉素耐药(HLGR)及高水平链霉素耐药(HLSR)测定.结果101株肠球菌中,粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、母鸡肠球菌和耐久肠球菌菌株分别为71、13、8、7和2株.药敏测试结果显示肠球菌对氨苄西林、青霉素、万古霉素耐药分别为21、34和0株;HLGR和HLSR分别为79株和46株. 结论院内感染肠球菌对抗菌药物存在严重耐药性,合理的抗菌药物治疗对高水平氨基糖苷耐药肠球菌感染患者的康复尤为重要.     

高水平氨基糖苷耐药肠球菌的监测

目的了解高水平氨基糖苷耐药(HLAR)肠球菌的分离率,探讨青霉素类或糖肽类与氨基糖苷类药物合用对院内感染肠球菌的协同杀菌作用,为临床治疗肠球菌感染提供参考与指导。方法采用VITEK-AMS仪器对分离自临床标本的101株肠球菌进行氨苄西林、青霉素、万古霉素耐药性和高水平庆大霉素耐药(HLGR)及高水平链霉素耐药(HLSR)测定。结果101株肠球菌中,粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、母鸡肠球菌和耐久肠球菌菌株分别为71、13、8、7和2株。药敏测试结果显示肠球菌对氨苄西林、青霉素、万古霉素耐药分别为21、34和0株;HLGR和HLSR分别为79株和46株。结论院内感染肠球菌对抗菌药物存在严重耐药性,合理的抗菌药物治疗对高水平氨基糖苷耐药肠球菌感染患者的康复尤为重要。     

肠球菌属产氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的：了解肠球菌耐氨基糖苷类药物的耐药机制和耐药基因流行状况。方法：对22株肠球菌进行了氨基糖苷类修饰酶aac(6’)／aph(2”)、aph(3’)-Ⅲ和ant(6)-Ⅰ基因的研究。结果：22株肠球菌中9株为高浓度庆大霉素耐药，14株为高浓度链霉素耐药；aac(6’)／aph(2”)、nph(3’)-Ⅲ和ant(6)-Ⅰ基因阳性分别为15株(68．2％)、13株(59．1％)和10株(45．5％)。对2株粪肠球菌和2株屎肠球菌进行3种基因的聚合酶链反应阳性产物测序。测得序列与GenBank已登录的序列作比较结果一致。本研究测得序列并已登录GenBank(登录号分别为AY602207、AY602208、AY602210、AY602211、AY602212、AY602213、AY626918、AY626919、AY626921、AY626922、AY626923)。结论：提示国内肠球菌产氨基糖苷类修饰酶的比率已较高。     

氨基糖苷类高水平耐药肠球菌的耐药及分子机制的研究

目的分析氨基糖苷类高水平耐药（HighLevelAminoglyeosideResistant,HLAR）肠球菌的耐药性与耐药基因,并研究其耐药分子机制。方法采用VITEK-2全自动鉴定仪法测定53株氨基糖苷类高水平耐药肠球菌对11种抗菌药物的最小抑菌浓度,用聚合酶链反应（PCR）检测肠球菌转座子Tn917和Tnl546／Tn916、红霉素耐药基因er—mB、毒力岛基因mefA、I类整合酶Intll、氯霉素耐药基cat、表面蛋白基因esp,并对万古霉素耐药肠球菌（Vancomy—cin—resistantEnterococc,VRE）进行基因分型（vanA、vanB、vanC）。结果53株肠球菌检出含ermB26株,占49．0％;含mefA9株,占17．0％;含Tnl546／Tn91619株,占35．8％;含Tn91711株,占20．8％;含Intll26株,占49．1％;含esp15株,占28．3％;未检出cat。53株肠球菌对复方新诺明全部耐药,对红霉素耐药高达94．3％,对高水平庆大霉素、高水平链霉素、环丙沙星、四环素和氨苄西林的耐药率分别为75．5％、73．6％、75．5％、66．0％、62．3％;对利奈唑胺和替考拉宁的敏感率高达98．1％;1株耐万古霉素,其基因和表型均为VanA。结论HLAR肠球菌可携带多种耐药基因,耐药基因与肠球菌耐药性密切相关,可能在多重耐药机制中起重要作用。     

肠球菌属细菌高水平庆大霉素耐药及其转座子的检测

目的研究2006—2009年北京地区临床分离高水平庆大霉素耐药(HLGR)肠球菌属细菌的双功能修饰酶基因转座子结构。方法采用脑心肉汤微稀释法测定北京地区169株临床分离粪肠球菌和21株屎肠球菌的高水平庆大霉素耐药性,应用菌落PCR扩增方法检测HLGR菌株中双功能修饰酶基因及两端插入序列(IS256),分析转座子结构。结果 169株粪肠球菌中,111株(65.7%)为HLGR株,HLGR菌中97.3%含有双功能修饰酶基因,其中10.2%含有完整结构的转座子(双功能修饰酶基因两端均含有IS256插入序列),89.8%含有截断结构的转座子(缺失一端或两端的插入序列)。21株屎肠球菌中,15株(71.4%)为HLGR株,所有HLGR菌株均含有双功能修饰酶基因,其中13.3%含有完整结构的转座子,86.7%含有截断结构的转座子。结论 2006—2009年北京地区临床分离肠球菌HLGR率高,并且绝大多数HLGR株含双功能修饰酶基因,通常形成截断结构的转座子。     

肺炎克雷伯菌多重耐药性及氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的探讨KPN多重耐药性及AMEs基因携带状况，为临床治疗及控制医院感染提供依据。方法采用K-B纸片法进行药敏试验，筛选多重耐药KPN，三维试验检测ESBLs和AmpC酶，再用PCR检测AMEs基因并序列分析，结果61株多重耐药KPN对IMP无耐药，氨基糖苷类抗菌药物耐药率为60.7-100％，其他抗菌药物耐药率为44.3-100％；产ESBLs、AmpC酶、同时产ESBLs和AmpC酶检出率分别为31.1％、14.8％、45.9％，有8.2％均未检出；AMEs基因阳性检出率86.9％，其中aac（3）-I、aac（3）-Ⅱ、aac（6′）-I b、aac（6′）-Ⅱ、ant（3″）-I和ant（2″）-I阳性检出率分别为13.1％、60.7％、55.7％、11.5％、6.6％和26.2％，结论KPN多重耐药严重，临床可选择的药物有限，产ESBLs、AmpC酶和携带AMEs基因较高，临床应根据药敏试验结果，合理选用抗菌药物，以便减少耐药菌株传播流行。     

肺炎克雷伯菌多重耐药性及氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的探讨KPN多重耐药性及AMEs基因携带状况，为临床治疗及控制医院感染提供依据。方法采用K-B纸片法进行药敏试验，筛选多重耐药KPN，三维试验检测ESBLs和AmpC酶，再用PCR检测AMEs基因并序列分析，结果61株多重耐药KPN对IMP无耐药，氨基糖苷类抗菌药物耐药率为60.7-100％，其他抗菌药物耐药率为44.3-100％；产ESBLs、AmpC酶、同时产ESBLs和AmpC酶检出率分别为31.1％、14.8％、45.9％，有8.2％均未检出；AMEs基因阳性检出率86.9％，其中aac（3）-I、aac（3）-Ⅱ、aac（6′）-I b、aac（6′）-Ⅱ、ant（3″）-I和ant（2″）-I阳性检出率分别为13.1％、60.7％、55.7％、11.5％、6.6％和26.2％，结论KPN多重耐药严重，临床可选择的药物有限，产ESBLs、AmpC酶和携带AMEs基因较高，临床应根据药敏试验结果，合理选用抗菌药物，以便减少耐药菌株传播流行。     

屎肠球菌高水平庆大霉素耐药基因研究

目的研究我国临床分离高水平庆大霉素耐药屎肠球菌中庆大霉素耐药基因分类及其水平传递情况。方法采用PCR法检测庆大霉素耐药基因aac（6’）-Ie-aph（2″）-Ia、aph（2″）-Ib、aph（2″）-Ic、aph（2″）-Id和aph（3″）-Ⅲa，采用质粒酶切图谱分析耐药菌同源性，采用液体传递和固体传递法研究庆大霉素耐药基因水平传递情况。结果105株临床分离屎肠球菌中，76．2％（80／105）为高水平庆大霉素耐药，其中aac（6′）-Ie-aph（2″）-Ia基因阳性率为95．0％（76／80），aph（3″）-Ⅲa基因阳性率为78．8％（63／80），aph（2″）-Ib、aph（2″）-Ic、aph（2″）-Id基因皆阴性。这些高水平庆大霉素耐药屎肠球菌间大多无明显同源性。21．1％（16／76）菌株携带的aac（6’）-Ie-aph（2″）-Ia基因在屎肠球菌间固体传递，13．2％（10／76）菌株携带的aac（6’）-Ie-aph（2″）-Ia基因在屎肠球菌间液体环境中水平传递。结论本次研究中屎肠球菌中高水平庆大霉素耐药主要由aac（6’）-Ie—aph（2″）-Ia和aph（3″）-Ⅲa基因介导，这些菌株间没有明显同源性，且该基因可在屎肠球菌间水平传递。     

屎肠球菌高耐庆大霉素转座子Tn5281的检测

目的　研究高耐庆大霉素 (HLGR)屎肠球菌耐药性与转座子的关系。方法　用聚合酶链反应 (PCR)检测 48株HLGR屎肠球菌Tn5 2 81转座子 ,扩增产物用斑点杂交和测序法验证。结果　 48株HLGR屎肠球菌中 ,13株含有完整的Tn5 2 81,2 6株含有缺少右侧插入序列IS2 5 6的Tn5 2 81缺失型 ,9株不含Tn5 2 81,总阳性率为 81. 3 %。结论　Tn5 2 81在屎肠球菌高耐庆大霉素中起着重要作用。     

铜绿假单胞菌氨基糖苷类药物修饰酶基因研究

目的调查铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药特性及氨基糖苷类药物修饰酶基因表达。方法用Phoen ixTM-100系统鉴定细菌和药敏试验。用琼脂扩散法检测20株多重耐药铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素和奈替米星4种药物的敏感性。采用聚合酶链反应(PCR)扩增4种氨基糖苷类药物修饰酶基因,并使用DNA测序加以证实。结果190株铜绿假单胞菌对氯霉素、四环素、复方磺胺耐药率最高,均为98.9%;对亚胺培南、美洛培南的耐药率分别为15.3%和6.8%。从20株菌中检出aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ和ant(2″)-Ⅰ3种修饰酶基因,阳性率分别为10%、60%和65%,未发现ant(3″)-Ⅰ基因。20株菌对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素和奈替米星的耐药率分别为35.0%、90.0%、70.0%、60.0%。结论本地区铜绿假单胞菌对氨基糖苷类药物的耐药与修饰酶基因的传播表达有关。     

2015年重庆市粪肠球菌和屎肠球菌耐药性监测结果分析

目的 统计分析2015年重庆市细菌耐药监测网成员单位提交的粪肠球菌和屎肠球菌耐药性监测数据,为该市有效应用抗菌药物提供依据和参考.方法 各成员单位根据全国细菌耐药监测网技术方案要求,对目标细菌进行鉴定和药敏试验,并依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2015版标准进行结果判读,使用WHONET5.6软件对药敏数据进行统计分析,耐药性差异采用SPSS21.0软件进行分析.结果 共分离到非重复粪肠球菌和屎肠球菌分别为1 811株和1 601株,共占所有阳性菌株的13.1%,两者对万古霉素的耐药性分别为0.5%和1.8%,对利奈唑胺的耐药率分别为2.5%和0.5%,均未发现对替加环素耐药的菌株.粪肠球菌对奎奴普丁/达福普汀的耐药性最高,为90.1%,对四环素的耐药率也高达78.8%,对高浓度庆大霉素的耐药率为43.0%,对青霉素、氨苄西林、呋喃妥因的耐药率均低于7.0%.除奎奴普丁/达福普汀和四环素外,屎肠球菌对其他药物的耐药率高于粪肠球菌(P<0.05).儿童和成人患者,以及重症监护病房(ICU)和非ICU患者分离株对部分药物的耐药率比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 该市肠球菌感染主要病原菌是屎肠球菌和粪肠球菌,两者耐药性不同.做好耐药性监测有助于指导临床医生规范、有效使用抗菌药物.     

肠球菌的耐药基因研究

目的了解肠球菌属的耐药性趋势和耐药基因分布,为临床合理用药提供依据。方法采用VITEK2COMPACT全自动微生物鉴定系统对2008年1月至2012年5月间临床送检标本中分离的319株肠球菌进行鉴定和药敏试验,采用PCR方法对ermB、mef、gyrA耐药基因进行研究。结果319株肠球菌中以屎肠球菌最多205株（64．26％）,其次为粪肠球菌63株（19．75％）,其他种类肠球菌51株（15．99％）。肠球菌常用抗生素药敏结果显示屎肠球菌和粪肠球菌耐药率最低的是万古霉素（1．0％．1．6％）,其次是利茶唑胺和替考拉宁（3．9％,3．2％）,耐药率最高的是红霉素（94．6％,79．4％）。肠球菌中ermB基因阳性率为73．4％（234／319）,gyrA基因阳性率为67．1％（214／319）,reef基因均为阴性。结论肠球菌获得gyrA基因和ermB基因是肠球菌对氟喹诺酮类药物和红霉素类药物耐药的主要原因。     

271株肠球菌属细菌的分布和耐药性分析

目的了解内蒙古鄂尔多斯市中心医院临床分离的肠球菌属细菌的分布情况及对各类抗菌药物的耐药性。方法使用VITEK 2 compact全自动细菌检测分析系统对2010年1月至2013年6月从临床标本中分离的271株肠球菌属细菌进行菌种鉴定和药敏试验,并用WHONET5．6软件对结果进行统计分析。结果271株肠球菌属细菌中,屎肠球菌137株（50．6％）,粪肠球菌80株（29．5％）,其他肠球菌54株（19．9％）。肠球菌属细菌主要分离自尿液69株（25．5％）、脓液40株（14．8o,4）、伤口等分泌物34株（12．5％）。粪肠球菌对万古霉素和利奈唑胺的耐药率分别为1．3％和1．5％;未检出呋喃妥因耐药株;对青霉素和氨苄西林的耐药率较低,分别为11．8％和2．6％;对高浓度庆大霉素和高浓度链霉素的耐药率分别为31．0％和22．9％。屎肠球菌的耐药率明显高于粪肠球菌,对万古霉素的耐药率为4．4％,未检出利奈唑胺耐药株,对呋喃妥因的耐药率为19．1％;对高浓度庆大霉素和高浓度链霉素的耐药率分别为44．8％和26．4％;但对四环素和奎奴普丁一达福普汀的耐药率低于粪肠球菌,分别为58．3％和0。结论屎肠球菌对抗菌药物的耐药率较粪肠球菌高;并已出现对万古霉素耐药株;其耐药性存在地区和菌种间差异,临床治疗应根据细菌药敏结果合理选用抗菌药物。     

多重耐药绿脓假单胞菌β内酰胺类氨基糖苷类耐药相关基因研究

目的明确广州地区临床分离的耐药绿脓假单胞菌各种β内酰胺酶编码基因、外膜通道蛋白oprD2基因、氨基糖苷类修饰酶基因存在状况。方法采用MicroScan微生物鉴定系统微量肉汤法测定临床分离的18株绿脓假单胞菌对12种抗菌药物的敏感性，采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析β内酰胺酶基因型、氨基糖苷类修饰酶基因型及外膜通道蛋白oprD2基因。结果该18株菌呈现多重耐药，对氨基糖苷类抗生素的耐药率在50．0％-72．2％之间，对其他抗绿脓假单胞菌药物耐药率在16．7％-83．3％之间；14株（77．8％）检出氨基糖苷类修饰酶基因，aac（6），-Ⅱ、aac（3）-Ⅱ、ant（3”）．Ⅰ、aac（60＇）Ⅰ、ant（2”）-Ⅰ、aac（3）-Ⅰ、aac（3）-Ⅲ、aph（3’）-Ⅵ和aac（3）-Ⅳ基因的阳性率分别为50．0％、38．9％、38．9％、33．3％、27．8％、11．1％、5．6％、5．6％和0；13株（72．2％）检出β内酰胺酶编码基因，TEM、DHA、IMP和OXA基因阳性率分别为55．6％、27．8％、22．2％和11．1％，SHV、PER、VER、GES和VIM基因阴性，3株外膜通道蛋白oprD2基因缺失。结论广州地区临床分离的绿脓假单胞菌多重耐药严重，氨基糖苷类修饰酶基因和β内酰胺酶编码基因携带率很高。     

Detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus with high-level resistance to mupirocin

Staphylococcus aureus with high-level mupirocin resistance has rarely been isolated in Japan. We detected methicillin-resistant S. aureus (MRSA) with high-level mupirocin resistance (HLMR-MRSA; MIC ≥1,024 μg/ml) in a surveillance program of invasive MRSA infection in the Minami Ibaraki Area of Japan. The other 177 strains surveyed in the program showed susceptibility or low-level resistance to mupirocin. The HLMR-MRSA strain, named 115, was isolated from the blood of a patient with peripheral venous catheter-associated infection. The patient had not received administration of mupirocin before the isolation of strain 115. Another HLMR-MRSA strain, named 257, was recovered from the patient’s sputum obtained 1 year after the infection. Close relatedness between genotypes of strains 115 and 257 indicated persistent colonization of strain 115 on the patient. In contrast, no HLMR-MRSA was detected in materials submitted from other inpatients treated in the same wards during the same period, demonstrating that horizontal transmission of HLMR-MRSA did not occur.     

对高浓度氨基糖甙类耐药菌株肠球菌的调查

为了解肠球菌的抗药情况，应用含单－高浓度抗生素肉汤试管法和琼脂平皿法以及高含量纸片扩散法，检测临床标本中分离的８６珠肠球菌对庆大霉素和链霉素的高度耐药菌株（ＭＩＣｓ≥２０００μｇ／ｍｌ）。结果表明，抗庆大霉素高度耐药菌株５９株（６９％），抗链霉素高度耐药菌株５２株。全部试验菌株对万古霉素敏感。提示临床应慎用抗生素，要选择敏感药物进行有效地治疗。