型特异引物PCR法分析238株乙肝病毒基因型

目的:研究乙肝病毒(HBV)感染者HBV基因型分布状况,并建立一套HBV病毒株分型的简便可靠的分析法.方法:设计型特异引物,采用基因型特异引物聚合酶链反应(PCR)法分型.结果:238株HBV中218株得到分型.其中B型149例(男115例、女34例);C型63例(男47例、女16例);B C混合型6例(男4例、女2例).B型、C型和B C混合型检出率分别为68.3%(男69.3%、女65.3%)、28.9%(男28.3%、女30.8%)和2.8%(男2.4%、女3.8%).未检出A、D、E、F、G、H基因型.结论:HBV感染者以B基因型为主.基因型B检出率显著高于其它基因型,其差异具有统计学意义(P<0.0).HBV各基因型分布与性别无关(P>0.01).     

南京地区99例乙肝病毒基因型及慢性感染临床表型

目的:调查南京地区乙肝病毒的基因型分布,并分析基因型与临床表现之间的相关性.方法:分别用特异引物PCR法和基因型特异探针分析(试剂盒)法两种方法测定慢性乙肝病毒感染者病毒基因型.统计分析基因型与临床表型的相关性.结果:分型结果相同的95株乙肝病毒中,32株为B型,59株为C型,1株为D型,3株为BC混合型.基因型B和C在ASC中分别为7例(50%)和6例(42.86%),在CHB患者中分别为17(42.5%)和21(50%),在LC患者中分别为5(35.71%)和9(64.29%),在HCC患者中分别为3例(11.11%)和24例(88.89%).在HCC患者中,基因型B组患者的平均年龄比C型的小.结论:南京地区乙肝病毒有B、C、D、BC混合四种基因型,其中以C型和B型为主.与基因型B比较,基因型C乙肝病毒感染所致的肝病更严重.     

HBV基因型在海南岛黎族和汉族之间分布及临床意义的研究

目的 了解乙型肝炎病毒(HBV)基因型在海南省黎族和汉族之间的流行病学分布情况,探讨HBV基因型与临床表型之间的关系.方法 采用实时荧光聚合酶链反应检测技术对血清HBV阳性的83例汉族和67例黎族慢性乙型肝炎患者,进行HBV DNA定量分析和基因分型.结果 在67例黎族患者中,B型22例(32.83%),C型36例(53.74%),D型8例(11.94%),C/D混合感染1例(1.49%),未发现其他基因型.在83例汉族患者中,B型38例(45.78%),c型34例(40.96%),D型7例(8.44%),B/C混合感染4例(4.82%),未发现其它基因型.在HBeAg阴性的人群中,基因型C型在黎族患者中出现的更为频繁(P<0.05).在67例黎族受检者中,基因型C型患者血清中的HBV DNA平均水平(10g值)(5.63±1.07),显著高于B型患者.在83例汉族受检者中,基因型C型患者的HBV DNA平均水平(10g值)(5.61±1.20),显著高于B型患者.结论 海南地区HBV基因型主要为B型和C型;存在D型及C+D型HBV混合感染.C型感染者HBV复制的活跃程度可能较B型感染者更高(P<0.05).     

成都市HBV基因型分布特点及其临床意义

目的 了解成都市乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布特点,探讨HBV基因型与疾病临床表现的相关性.方法 随机选择成都市HBV感染者422例,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)鉴定HBV基因型.结果 HBV/B基因型366例占86.7%(366/422),HBV/C基因型53例占12.6%(53/422),HBV/D基因型3例占0.7%(3/422).B、C基因型感染者相比,HBeAg、抗-HBeAg阳性率及HBV DNA水平的差异均无统计学意义(P＞0.05),C基因型感染者更易发生肝硬化(P=0.004)及肝细胞癌(P=0.029).结论 成都市HBV感染者所携带的HBV存在B、C、D 3种基因型,以B型为主,其次c型,D型最少;C基因型感染者更易发生较严重的肝脏疾病,如肝硬化及肝细胞癌.     

广西北部乙型肝炎病毒基因型流行分布的研究

目的了解广西北部桂林乙型肝炎病毒(HBV)基因型的流行分布情况.方法用套式PCR扩增检测41例桂林慢性无症状HBV携带者血清HBV DNA,阳性者用直接测序法进行HBV基因分型.结果19例HBV DNA阳性,阳性率为46.34%(19/41),其中15例为基因型B,占78.9%(15/19),4例为基因型C,占21.1%(4/19),未见到其它目前已知的HBV基因型A、D、E、F、G和H;另外,还发现HBV基因型C组HBeAg阳性率显著高于基因型B组(P＜0.05),提示HBV基因型C比HBV基因型B危害更大.结论广西北部桂林流行的HBV基因型有基因型B和C两种,以基因型B为主要流行的优势基因型.     

乙肝病毒基因分型检测芯片的构建及初步应用

目的:构建乙肝病毒(HBV)常见基因型的分型芯片,并应用分型芯片调查HBV基因型分布。方法:应用生物信息学软件针对乙肝病毒4种常见基因型的特征区域和保守区域分别设计分型探针和通用探针,在优化条件下通过重复杂交及分型测序检验芯片的重复性与可靠性后应用于临床,对150例不同类型的乙肝患者进行HBV基因分型。结果:分型探针和通用探针检测重现率分别为94.7%及100%,反馈的测序结果与芯片分型结果完全一致;经芯片分型发现辽宁省HBV基因型分别为C型占68.7%,B型占22.7%,B、C混合型占8.7%,未发现A、D型。结论:基因芯片技术为乙肝病毒基因分型提供了快速准确的检测方法,辽宁地区HBV基因型分布以B、C两型为主,C型占主要优势。     

乙肝病毒基因分型及其临床意义

目的　研究山东地区乙肝病毒基因型分布及临床意义。方法　随机选择HBV DNA阳性乙肝病毒感染者 2 10例 ,其中无症状病毒携带者 (ASC) 5 3例 ,慢性活动性肝炎 (CAH ,包括轻度、中度、重度 ) 87例 ,肝硬化(LC) 38例 ,重型肝炎 (FHF) 32例 ,采用型特异性引物巢式PCR方法检测HBV基因型。结果　B基因型 72例 (34.3% ) ,C基因型 10 2例 (4 8.6 % ) ,B +C混合基因型 36例 (17.1% )。ASC组以B基因型为主 ,而C基因型则在活动性肝病中占优势 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。在CH组 ,B基因型组中HBV DNA定量及ALT水平均较C基因型组和B +C基因型组为低 ,差异非常显著 (P <0 .0 1)。结论　山东地区存在乙肝病毒B基因型、C基因型和B +C混合基因型 ;C基因型为优势基因 ,与肝脏疾病活动性相关 ,B基因型则与慢性乙肝病毒携带有关。     

河南省乙型肝炎病毒基因型的分布

目的:研究河南省乙型肝炎病毒基因型的分布.方法:随机选择HBV表面抗原携带者76例,慢性乙型肝炎患者80例,应用PCR方法检测血清HBV DNA含量,采用微板核酸杂交-ELISA技术进行血清HBV基因分型.结果:HBV携带者76例中,43例HBV DNA定量阳性;慢性乙型肝炎患者80例,HBV DNA定量均为阳性.HBV DNA定量阳性的123例中,B型65例(52.85%),C型38例(30.89%),B、C混合型5例(4.07%),B、D混合型3例(2.44%),C、D混合型4例(3.25%),未分型者8例.结论:河南省乙型肝炎病毒基因型以B、C型为主.     

实时荧光PCR法分析浙江省乙型肝炎病毒基因型的分布

目的 研究浙江省各地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布状况.方法 采用实时荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)检测240例HBVDNA病毒含量＞105拷贝/毫升的浙江籍(杭州、湖州、金华、绍兴、台州、宁波各40例)HBV感染者的基因型.结果 240例HBV感染者中基因B型82例占34.17%,基因C型140例占58.33%,基因B,C混合型15例占6.25%,基因D型3例占1.25%,未捡出基因型A、E、F.结论 浙江地区HBV基因以B、C型为主,B、C混合型次之,D型基因偶见.各地区间基因型分布未见差异.     

某县204例乙型肝炎病毒基因型及其临床相关性分析

目的了解重庆垫江县地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布及其与临床的相关性。方法选取垫江县HBV-DNA阳性的HBV感染者204例,应用聚合酶链反应(PCR)和直接测序法检测HBV基因型并分析其与临床的相关性。结果 204例HBV-DNA阳性血清标本中,测序成功为146例。其中B型98例(67.12%),C型47例(32.19%),D型1例(0.69%),C基因型丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)指标高于B基因型(P<0.05);C基因型患肝硬化和肝细胞癌的比例高于B基因型(P<0.05)。结论 B型为本地区的优势基因型,并且C型HBV感染者易引起肝脏的严重损伤。     

Relation between hepatitis B virus genotypes and gene mutation of basic core promoter in Li nationality

Objective:To investigate the relation between hepatitis B virus(HBV) genotypes and the double mutation of A-to-T nucleotide(nt) 1762 and G-to-A nt 1764 in basic core promoter(BCP T1762/A1764) in patients of the Li nationality. Methods:Subjects were 125 HBV DNA positive patients that belong to the Li nationality on Hainan Island. HBV DNA genotype was determined by real time fluorimetry polymerase chain reaction. BCP T1762/A1764 mutation was performed using the direct sequencing method. Results:The prevalence rates of genotype B, genotype C, genotype D, genotype C and D mixed infection(genotype C＋D) and genotype B and D mixed infection (genotype B＋C) were 31.20%, 53.60%, 12.00%, 2.40% and 0.80% respectively. Mutation frequencies in patients infected with HBV genotype C(58.21%) were significantly higher than in those infected with other genotypes (P ＜0.01). The serum viral load of the patients with genotype C(5.74±1.21) was also higher than that of those with genotype B(P ＜0.01). Conclusion:The major genotypes in the Li nationality were genotype C and genotype B. The infection of genotype D and mixed infection also occurred in the Li nationality. Genotype C HBV has a higher replication rate, and the different degrees of pathogenecity among HBV genotypes may be related to BCP T1762/A1764 mutation frequency.     

不同基因型HBV感染的慢性乙型肝炎患者临床与病理改变研究

目的：探讨不同基因类型的慢性乙型肝炎（Chronic hepatitis B,CHB）患者在年龄、性别和民族方面的内在关联,比较不同HBV基因类型患者的肝组织病理损害程度、HBV-DNA载量及肝功能改变。方法：荧光定量PCR仪检测94例行肝活检的CHB患者的HBV-DNA,以限制性片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)方法进行HBV基因分型。结果：本组94例CHB患者B基因型占74.5%,C基因型占25.5%。HBV基因类型与年龄、性别无关;C基因型中壮族所占比例明显高于B基因型;C基因型患者HBeAg阳性率明显低于B基因型患者（P<0.05）。CHB患者肝组织病理损伤程度与B、C基因型相关,C基因型在肝组织炎症及纤维化程度较重组所占的比例高于B基因型（P<0.05）;肝组织病理损伤程度与肝功能指标相关（P<0.05）,但与HBV-DNA水平无关。结论：本组CHB患者HBV基因类型呈B、C 2型,人群分布以B型为主,C型次之,未见其他类型或混合型;汉族患者以B基因型为主,壮族则以C型为主;相对于B基因型,C型患者肝组织炎症及纤维化程度较重,容易出现严重的肝损害和肝癌等不良预后。     

宁夏地区乙肝病毒感染者HBV基因分型与临床意义

目的研究宁夏地区乙肝病毒（hepatitis B virus,HBV）感染者的HBV基因型的分布情况,探讨其与HBV感染者的性别、年龄、肝功能、HBV-DNA载量及血清标记物水平的关系。方法应用基因型特异性多对引物巢式PCR法对175例HBV感染者的血清标本进行HBV基因型检测,并针对不同的基因型进行性别、年龄、肝功能、HBV-DNA载量及血清标记物水平的相关性分析。结果宁夏地区175例HBV感染者的血清标本中（汉族136例,回族39例）有12例（6.9%）未检测出基因型。在已检测出基因型的163例样本中,B基因型84例（48%）,C基因型62例（35.4%）,B＋C混合基因型17例（9.7%）。B基因型在宁夏地区HBV感染者中占优势。HBV基因型与HBV感染者的ALT水平有关联（P〈0.05）,与年龄、性别、血清标记物水平等指标无关联性（P〉0.05）,C基因型在肝硬化和肝癌中所占的比例较B型和B＋C型差异有统计学意义（P均〈0.05）。结论宁夏地区HBV感染者的基因型包括B型、C型及B＋C混合基因型,其中以B基因型为主,其次为C基因型。HBV基因型与ALT水平有关联,与本研究中其他指标无相关性,C基因型较B型和B＋C型在肝硬化和原发性肝癌中所占比例增高。     

慢性乙型肝炎患者HBV基因型及其临床意义

目的 了解广东地区慢性乙型肝炎患者HBV基因型特点及其临床意义。方法 用特异性引物扩增乙型肝炎病毒S基因区,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)基因分型方法,对该地区55例慢性活动性乙型肝炎(CAH)患者感染的HBV进行基因分型,并与其临床生化结果、病毒定量和肝组织病理进行相关性分析。结果 B基因型28例(51.0%),C基因型18例(32.7%),D基因型4例(7.3%),B+C型4例(7.3%),未分型1例(1.8%)。其中年龄大于30岁的26例患者B和C基因型的丙氨酸转氨酶水平分别为(190.9±270.3)IU和(141.0±83.0)IU(t=0.532,P>0.05),肝脏病理炎症分级的平均秩次为10.4和11.8(Z=0.561,P>0.05),肝脏病理纤维化分期的平均秩次为10.5和11.7(Z=0.483,P>0.05),HBVDNA含量分别为106.8±1.4和108.5±1.1(t=2.989,P<0.05),HBeAg阳性数分别为2/12和8/9(Fisher’s精确概率P=0.002)。结论 广东地区HBV基因型主要为B型和C型;两种基因型感染者丙氨酸转氨酶水平、病毒复制水平、HBeAg表达水平以及肝脏病理炎症和纤维化程度无显著性差异;然而在年龄大于30岁的CAH患者中,感染C基因型的HBV病毒复制水平和HBeAg表达水平比感染B基因型者显著增高。     

Genotyping of hepatitis B virus and its clinical significance in patients with chronic hepatitis B]

OBJECTIVE: To investigate the distribution of hepatitis B virus (HBV) genotypes in Guangdong and explore its clinical significance. METHODS: Fifty-five patients with chronic active hepatitis (CAH) from Guangdong province were included in this study. HBV surface gene amplified by PCR was analyzed by restriction fragments length polymorphism (RFLP) for HBV genotyping, and the relationship of HBV genotype with clinical, serological and histological data of the patients was analyzed. RESULTS: Twenty-eight out of 55 patients were infected with HBV strains of genotype B (51.0%), 18 with genotype C (32.7%), 4 with genotype D (7.3%), 4 with HBV classified as genotype B+C (7.3%), and 1 (1.8%) with HBV that did not conform to any of the genotypes from A to G. No significant differences in clinical, histological, or serological data of HBV DNA loading were detected between genotypes B and C. But in patients older than 30 years, the genotype C was accompanied by significantly higher HBV DNA loading and serum HBeAg level than genotype B (Fisher's exact test, P=0.002). CONCLUSIONS: HBV genotype B and C are the major genotypes prevalent in Guangdong Province. Genotype C is associated with the longer duration of HBeAg and higher HBV DNA level in patients older than 30 years, suggesting the higher risk of HBV genotype C infection to progress into chronic liver disease.     

阿德福韦酯耐药患者HBV基因型的相关分析

目的探讨慢性乙型肝炎、肝硬化患者阿德福韦酯治疗过程中出现耐药变异与HBV基因型的关系,为优化临床抗病毒治疗提供依据。方法对近年来山西地区122例慢性乙型肝炎、肝硬化患者阿德福韦酯抗病毒治疗过程中出现病毒学反弹患者,采用巢式PCR法检测血清HBV基因型;采用巢式PCR-DNA测序法检测患者血清标本HBVDNA位点,观察是否存在rtA181V/rtN236T变异,并分析其与基因型的关系。结果 122例患者中B基因型7例占5.74%;C基因型115例,占94.26%;在性别上,B、C基因型差异均无显著性意义（P〉0.05）;C型肝硬化率明显高于B基因型（P〈0.05）;均发生了rtA181V和/或rtN236T位点变异。结论 C基因型可能与阿德福韦酯耐药变异及肝硬化关系密切。     

江苏地区不同类型乙型肝炎患者HBV基因分型研究

目的:了解江苏地区乙型肝炎病毒基因型分布特征,探讨HBV各基因型与血清HBV DNA水平的关系.方法:采用荧光定量PCR结合Taqman MGB探针技术,对江苏地区176份乙型肝炎患者血清中的HBV DNA进行基因分型和定量检测.结果:176例血清中,C型117人(66.5%),B, C型40人(22.7%),B型9人(5.1%),D型1人(0.6%),A型1人(0.6%).C型与B, C混合型在HBV DNA水平上存在统计学差异(P＜0.05),B, C混合型的HBV DNA水平明显高于C型.C基因型在慢性乙型肝炎患者中的所占比例(71.4%)比在急性乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者中所占的比例较高,但差异无统计学意义.结论:江苏地区HBV基因型以C型为主, B, C混合型次之,B型较少,D型,A型极少;B, C混合型患者的HBV DNA数量水平高于C型.     

山西省地区乙型肝炎病毒基因分型及临床意义

目的了解山西省地区乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布特征,探讨HBV各基因型与血清HBV-DNA水平的关系以及各基因型与疾病的进展和转归的临床意义。方法法随机收集山西省HBV阳性病例128例,包括慢性乙型肝炎78例,肝硬化34例,急性肝炎8例,重型肝炎患者8例。取其外周静脉血,采用型特异性引物巢式PCR方法对血清中的HBV进行基因分型,并结合临床资料进行统计学分析结果山西省地区乙型肝炎患者HBV基因分型存在B型、B＋C混合型和C型,以C型和B＋C型为主;基因型C型的HBV-DNA载量的均值水平为2×108,显著高于其他型（p〈0.05）;C型HBeAg阳性率较B型和B＋C型高（p〈0.05）;混合型及C基因型与较严重的肝脏疾病有关,更易发生重症肝炎、肝硬化。结论山西省地区基因型以C型和B＋C型为主;基因型C的HBV-DNA载量水平均值显著高于其他型;混合型及C型与较严重的肝脏疾病有关。     

乙型肝炎病毒基因型B/C型患者血清和肝细胞内HBsAg表达水平的差异

目的 了解HBV基因型（B和C）对血清及肝内HBsAg表达的影响。方法 选择在广州南方医院感染内科住院的76例慢性乙型肝炎患者,具有同期对应的血清和肝组织切片。用PCR-RFLP方法行HBV基因分型;Abbott Architect法定量检测血清HBsAg;采用单克隆抗体或多克隆抗体对肝脏组织内的HBsAg和HBcAg分别进行免疫组织化学染色,计数阳性细胞数。并对6例基因型B和8例基因型C患者血清HBV HBsAg部分区段DNA进行序列测定。结果 共检测到4种基因型：B（47例）、C（21例）、D（3例）和B／C混合（5例）。血清HBsAg水平在基因型B和C之间无区别,但HBV基因C型患者肝内HBsAg的表达高于B型（P〈0．01）。在HBV基因B型患者中,HBsAg阳性肝细胞分布多为单个或散在几个（22／47）,C型中则多为广泛分布（8／21）（P〈0．01）。在基因B型的患者中,血清HBsAg和血清HBVDNA（r=0．674,P=0．000）,核心抗原核内（r=0．534,P0．000）以及细胞质表达水平（r=0．405,P=0．004）呈正相关关系;在基因c型的患者中,血清HBsAg仅与血清HBV DNA正相关（r=0．503,P=0．017）。肝内HBsAg水平仅在基因B型患者中与肝细胞质内HBcAg的表达水平呈正相关关系（r=0．318,P=0．029）,与血清HBsAg、HBV DNA、核心抗原核内表达水平无相关。序列分析显示基因型B和C表面抗原前20个氨基酸序列存在明显差异。结论 基因C型患者肝组织中HBsAg表达水平高于B型;而基因B型的血清HBsAg水平和病毒复制水平相关性明显。     

三江地区部分肝病患者血清中乙肝病毒基因型的检测

目的探究黑龙江省三江地区部分肝病患者血清中的乙肝病毒基因型。方法采用基因型特异引物的巢式聚合酶链式反应方法对29例乙肝携带者、9例急性肝炎、36例慢性肝炎、19例肝硬化和3例肝癌患者血清中HBV基因型进行分析。结果HBVB型31例（32．3％）、C型62例（64．6％）、有3例患者同时检出基因型B和C。结论三江地区存在HBVB和C型，而且C型为主要基因型，另外还有少数B、C型混合感染。