RG50864对PDGF诱导的PASMC DNA含量及增殖细胞核抗原表达的影响

目的：研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂ＲＧ５０８６４对ＰＤＧＦ诱导的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）ＤＮＡ含量及增殖细胞核抗原表达的影响。方法：应用原代培养的小牛肺动脉平滑肌细胞,用流式细胞仪分析ＲＧ５０８６４对ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣＤＮＡ百分含量及增殖细胞核抗原的变化。结果：与对照组相比,ＲＧ５０８６４处理组可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ增殖细胞核抗原表达的荧光强度及荧光指数（Ｐ＜０．００１）,增加ＰＡＳＭＣ生长周期中的Ｇ０／Ｇ１期的ＤＮＡ百分含量,抑制Ｓ期及Ｇ２Ｍ期ＤＮＡ百分含量（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．００１）。结论：ＲＧ５０８６４可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ增殖细胞核抗原表达,抑制ＰＡＳＭＣ周期Ｓ期及Ｇ２Ｍ期ＤＮＡ百分含量,阻止ＰＡＳＭＣ周期由Ｇ０／Ｇ１向ＤＮＡ合成的Ｓ期及Ｇ２Ｍ期转化。     

RG50864对血小板衍生生长因子诱导的肺动脉平滑肌细胞DNA含量及增？…

为研究酷氨酸蛋白激酶抑制剂ＲＧ５０８６４对血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）诱导的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）ＤＮＡ含量及增殖细胞核抗原表达的影响,应用原代培养的小牛肺动脉平滑肌细胞,用流式细胞仪分析ＲＧ５０８６４对ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣＤＮＡ百分含量及增殖细胞核抗原的变化。结果表明：与对照组相比,ＲＧ５０８６４处理组可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ增殖细胞核抗原表达的荧光强度及荧光指数（〉     

骨髓增生异常综合征细胞增值活力的研究

用流式细胞仪（ＦＣＭ）ＤＮＡ单参数和ＤＮＡ／膜抗原双参数法对４１例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者和１０例良性血液病病人骨髓细胞的增殖活力进行了研究。ＭＤＳ骨髓细胞Ｇ０／Ｇ１期百分率明显高于对照组（Ｐ＜０．０５），（Ｓ＋Ｇ２）／Ｍ期百分率明显低于对照组（Ｐ＜０．０５），（Ｓ＋Ｇ２）／Ｍ期细胞中ＣＤ２＋细胞比例在原始细胞增多的难治性贫血（ＲＡＥＢ）较难治性贫血（ＲＡ）明显降低（Ｐ＜０．０５）。     

DDPH对缺氧内皮细胞条件培养液致肺动脉平滑肌细胞PDGF mRNA表达的影响

利用地高辛标记的ｃＤＮＡ探针，原位检测ＤＤＰＨ［１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙胺基）丙烷酸盐］对缺氧内皮细胞条件培养液致猪ＰＡＳＭＣＰＤＧＦ基因表达的影响。实验分６组：常氧、低氧无血清培养液组（Ｎ、Ｈ组），常氧、低氧内皮细胞条件培养液组（ＮＥＣＣＭ、ＨＥＣＣＭ组），ＮＥＣＣＭ＋ＤＤＰＨ、ＨＥＣＣＭ＋ＤＤＰＨ组。用自动图像分析仪检测各组细胞ＰＤＧＦ－Ａ和－Ｂ链杂交产物的平均光密度（ＯＤ）值。结果：ＨＥＣＣＭ组ＰＤＧＦ－Ａ和－Ｂ链ｍＲＮＡ表达量分别是ＮＥＣＣＭ组的１．４０、１．４９倍（Ｐ＜０．０１），分别是Ｎ组的１．８倍、１．７倍（Ｐ＜０．０１），ＨＥＣＣＭ＋ＤＤＰＨ组ＰＤＧＦ－Ａ、－Ｂ链ｍＲＮＡ表达量分别为ＨＥＣＣＭ的０．７３倍、０．６５倍（Ｐ＜０．０１），与ＮＥＣＣＭ组相比，均无显著差异。提示ＤＤＰＨ在ＰＤＧＦ基因转录水平抑制ＨＥＣＣＭ诱导的ＰＡＳＭＣ的增殖。     

曲尼司特大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的：为探讨曲尼司特预防再狭窄的可能性，研究了曲尼司特对培养的大鼠主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）增殖的影响。方法：以培养的大鼠ＡＳＭＣ为模型，应用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验观察ＡＳＭＣ增殖情况。结果：曲尼司特呈剂量信赖性无抑制基础、血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）和血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）诱导的ＡＳＭ ＤＮＡ合成，与相应对照组比较Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１。结论：曲尼司特能明显抑制ＡＳＭＣ增殖，对防治再狭窄     

血浆免疫指标变化与糖尿病足部感染

目的:了解机体免疫功能在糖尿病足的变化,探讨糖尿病足的防治办法。方法:以健康志愿者(ＮＣ)和糖尿病(ＳＤＭ)患者为对照,动态观测糖尿病足(ＤＦ)治疗前及治疗过程中可溶性白介素－Ⅱ受体(ｓＩＬ－２Ｒ)、自然杀伤细胞活性(ＮＫＣＡ)、Ｔ淋巴细胞亚群(ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８)、免疫球蛋白(ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ)、补体(Ｃ３、Ｃ４、ＣＨ５０)及空腹血糖(ＦＰＧ)、餐后２ ｈ血糖(ＰＧ２ｈ)。结果:①ＤＦ和 ＳＤＭ组ｓＩＬ－２Ｒ显著高于 ＮＣ组(Ｐ＜０．０５),ＮＫＣＡ及 ＣＤ４/ＣＤ８显著低于ＮＣ组(Ｐ＜０．０５);同时ＤＦ患者ｓＩＬ－２Ｒ较ＳＤＭ患者显著增高(Ｐ＜０．０５),ＮＫＣＡ及 ＣＤ４/ＣＤ８ 较ＳＤＭ患者显著降低(Ｐ＜０．０５);在 ＤＦ组中溃疡及坏疽患者 ｓＩＬ－２Ｒ显著高于高危足患者,ＮＫＣＡ显著低于高危足患者(均 Ｐ＜０．０５);②２５例 ＤＦ患者治疗后,ｓＩＬ－２Ｒ逐渐下降,ＮＫＣＡ、ＣＤ４/ＣＤ８逐渐升高,至观察终点与治疗前比较,三者差异均有显著性(Ｐ＜０．０５);③在ＤＦ患者,ｓＩＬ－２Ｒ与病情严重性呈显著正相关(ｒ＝０．７３４,Ｐ＜０．０１),与治疗过程中ＰＧ２ｈ变化亦呈显著正相关(ｒ＝０．４６７,Ｐ＜０．０５),ＮＫＣＡ与ＦＰＧ,ＰＧ２ｈ呈显著负相关(ｒ＝     

安替可胶囊抗肿瘤作用的机理

目的：探讨安替可（Ａｎｔｉｋｅ）胶囊抗肿瘤的作用机理．方法：采用移植瘤模型、常规体液和细胞免疫测定、细胞毒结晶紫染色、比色及同位素参入等方法，观察Ａｎｔｉｋｅ及其组分蟾皮（ＳＴ）和当归（ＡＳＤ）的抗肿瘤作用、诱导ＴＮＦ、ＮＫＣ、ＩＬ－２活性、血中过氧化氢酶（ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）和组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量及脾和瘤细胞中３Ｈ－ＵＲ参入ｃｐｍ等指标．结果：①Ａｎｔｉｋｅ，ＳＴ和ＡＳＤ及５－Ｆｕ对Ｈ２２移植瘤的瘤重抑制率分别为４５．０５％，４３．９５％，２７．７９％，５５．７９％（Ｐ＜０．０１）；②Ａｎｔｉｋｅ和ＡＳＤ诱导ＭΦ释放ＴＮＦ分别为２５９．０±４０．８和２１４．８±４３．５Ｕ·μｌ－１（Ｐ＜０．０１），ＮＫＣ杀伤率为７３．３９％，６７．４７％（Ｐ＜０．０１），显著增强ＩＬ－２活性（Ｐ＜０．０１），提高ＣＡＴ，ＧＳＨ－Ｐｘ和移植瘤中ＳＯＤ含量（Ｐ＜０．０１），显著降低瘤细胞ｃｐｍ（Ｐ＜０．０１）；③ＳＴ诱导ＭΦ释放ＴＮＦ为１７７．１±４２．９Ｕ·μｌ－１（Ｐ＜０．０１），ＮＫＣ杀伤率６７．７４％（Ｐ＜０．０１），增强ＩＬ－２活性；但对荷瘤小鼠血中ＣＡＴ，ＧＳＨ－Ｐｘ，ＳＯＤ     

骨髓增生异常综合征细胞增殖活力的研究

用流式细胞仪ＤＮＡ单参数和ＤＮＡ／膜抗原参数法对４１例骨髓增生异常综合征患者和１０例良性血液病病人骨髓细胞的增殖活力进行了研究。ＭＤＳ骨髓细胞Ｇ０／Ｇ１期百分率明显高于对照组，（Ｓ＋Ｇ２）／Ｍ期百分主明显低于对照组，（Ｓ＋Ｇ２）／Ｍ期细胞中ＣＤ＾＋２细胞比例在原始细胞增多的难治性贫血较难治性贫血明显降低。     

肺血管磁共振成像的对比研究

用１．０Ｔｅｓｌａ超导ＭＲ仪,体外圈技术,对４６例志愿者进行２ＤｔｕｒｂｏＦＬＡＳＨ和／或３ＤＦＩＳＰ肺释ＭＲＡ成像共１１３次,分４组进行分析统计。结果显示：Ｇｄ－ＤＴＰＡ增强后的２Ｄ和３Ｄ－ＴＯＦ ＭＲＡ信噪比明显高于未使用Ｃｄ－ＤＴ－ＰＡ的ＭＲＡ信噪比（Ｐ〈０．０１）;２Ｄ－ＴＯＦ ＭＲＡ增强后所显示的左、右肺动脉分支数量（险左叶舌段）明显多于增强前（Ｐ〈０．０５）;３Ｄ－ＴＯＰ ＭＲＡ增强后     

急性颅脑损伤患者脑脊液中髓鞘碱蛋白的变化及其意义

目的：为探讨急性颅脑损伤患者脑脊液（ＣＳＦ）中髓鞘碱蛋白（ＭＢＰ）的变化及意义。方法：用放射免疫分析法测定３４例急性颅脑损伤组患者ＣＳＦ中ＭＢＰ。结果：ＣＳＦ中ＭＢＰ在急性颅脑损伤组明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）,在ＡＤＣＩ患者明显高于ＡＬＣＩ患者（Ｐ＜０．０１）;ＡＤＣＩ患者入院时ＧＣＳ明显低于ＡＬＣＩ患者,而ＧＯＳ明显差于ＡＬＣＩ患者（Ｐ＜０．０１）;ＭＢＰ与ＧＣＳ和ＧＯＳ均呈明显负相关（ｒ＝－０．６１２,ｒ＝－０．５９８,Ｐ＜０．０１）。结论：急性颅脑损伤患者ＣＳＦ中ＭＢＰ升高,测定ＣＳＦ中ＭＢＰ有助于估计急性颅脑损伤患者病情轻重及预后;有助于ＡＤＣＩ的诊断。     

RG50864对PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的：研究酪氨酸蛋白激酶抑制荆RG50864对PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法：用原代培养的小牛肺动脉平滑肌细胞，采用细胞计数法、MTT比色法及Giemsa染色法对PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞进行分析。结果：与对照组相比，RG50864处理组能在24h、48h、72h显著抑制PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖，且呈剂量依赖性。结论：RG50864可显著抑制PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖。     

丹参酮Ⅱ-A硫酸钠对低氧诱导肺血管平滑肌细胞增殖的影响

应用免疫细胞化学、流式细胞术和核酸原位杂交技术观测丹参酮Ⅱ-A硫酸钠(DS201)对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响.结果发现DS201能明显地阻抑PASMC由G0/G1期进入S期(P<0.05);使PASMC增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及PDGF-A和B链mRNA的表达均显著降低(P<0.01).提示DS201可能通过下调PDGFmRNA基因表达而有效抑制HECCM诱导的PASMC增殖.     

The Effectof the Lyso PC-induced Endothelial Cell Conditioned Medi-um on Proliferating Cell Nuclear Antigen Expression of the Calf Tho-racic Aorta Smooth Muscle Cell

Proliferation of aorta smooth muscle cells(ASMCs) and move towards aortas intima layer isthe fundamental pathological change in atheroscle-rosis(AS) .Plasma low density lipoprotein(LDL)and especially the increased density of oxidized(Ox- LDL can speed up the formation of AS[1] . Inthe process of oxidation of LDL,phos-phatidylcholine (PC) is changed into Lysophos-phatidylcholine (Lyso PC) and constitutes the mainphosphatide ingredient of Ox- LDL[2 ] . Owing tothe real expression of a…     

Fasudil inhibits platelet-derived growth factor-induced human pulmonary artery smooth muscle cell proliferation by up-regulation of p27kip1 via the ERK signal pathway

Background  RhoA/ Rho kinase (ROCK) pathway is involved in pulmonary arterial hypertension (PAH) and pulmonary artery smooth muscle cell (PASMC) proliferation. Inhibition of ROCK has been proposed as a treatment for PAH. But the mechanism of RhoA/ROCK pathway and its downstream signaling in proliferation of human PASMCs is unclear. We investigated the effect of fasudil, a selective ROCK inhibitor, on platelet-derived growth factor (PDGF) induced human PASMC proliferation, and the possible association between RhoA/ROCK and extracellular signal-regulated kinase (ERK), p27^Kip1.

Methods  Human PASMCs were cultured with the stimulation of 10 ng/ml PDGF, and different concentrations of fasudil were added before the addition of mitogen. Cell viability and cell cycle were determined with MTT and flow cytometry respectively. ROCK activity, ERK activity and protein expression of proliferating cell nuclear angigen (PCNA) and p27^Kip1 were measured by immunoblotting.

Results  By MTT assay, PDGF significantly increased the OD value that represented human PASMC proliferation, and pretreatment with fasudil significantly reversed this effect in a dose-dependent manner. After PDGF stimulation, the percentage of cells in S phase increased dramatically from 15.6% to 24.3%, while the percentage in G₀/G₁ phase was reduced from 80.6% to 59%. And pretreatment with fasudil reversed the cell cycle effect of PDGF significantly in a dose-dependent manner. PDGF markedly induced ROCK activity and ERK activity with a peak at 15 minutes, which were significantly inhibited by fasudil. In addition, fasudil significantly inhibited PDGF-induced PCNA expression and fasudil also upregulated p27^Kip1 expression in human PASMCs, which decreased after PDGF stimulation.

Conclusion  RhoA/ROCK is vital for PDFG-induced human PASMC proliferation, and fasudil effectively inhibited PDGF-induced human PASMC proliferation by up-regulation of p27^Kip1, which may be associated with inhibition of ERK activity.

     

益肾活血提取液对同型半胱氨酸所致的兔VSMCs增殖的抑制作用

目的：探讨益肾活血提取液（YSHXC）对同型半胱氨酸（HCY）诱导的兔主动脉平滑肌细胞（VSMCs）增殖的影响。方法：组织贴块法体外原代培养兔VSMCs,建立HCY诱导的VSMCs增殖模型并分组：正常组、HCY刺激组、HCY+YSHXC组、HCY+叶酸组。采用MTT法检测细胞的增殖活度,免疫组化技术检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达,并采用流式细胞术检测细胞周期。结果：YSHXC及叶酸均能降低PCNA的表达（P<0.01）,且中药组低于叶酸组（P<0.05）。细胞周期也有相应的变化,与HCY组相比,YSHXC组G0/G1期细胞比例显著升高,S期与G2/M期细胞显著降低（P<0.01）,基本接近正常对照组（P>0.05）。结论：YSHXC能抑制HCY诱导的VSMCs增殖,下调细胞内PCNA的表达,这可能与YSHXC推动细胞周期时相的改变有关。     

改良森田疗法辅助治疗抑郁症的临床疗效

目的 探讨改良森田疗法对抑郁症的辅助治疗效果.方法 60例门诊抑郁症患者按就诊顺序分组,研究组给予抗抑郁药物和森田疗法,对照组仅给予抗抑郁药物,在治疗前与治疗第12周末评定汉密顿抑郁量表(HAMD)和健康状况问卷(SF-36).结果 研究组与对照组之间性别、年龄、婚姻和文化程度等因素,以及治疗前HAMD和SF-36各项评分均差异无显著性(P>0.05).治疗后研究组和对照组HAMD评分均显著下降(P<0.01),SF-36各分量表评分均有显著提高(P<0.01),但研究组HAMD评分下降较对照组显著[研究组(7.60±5.76)分,对照组(13.70±8.46)分,P<0.01],健康状况的一般健康[研究组(68.13±15.77)分,对照组(59.00±17.12)分,P<0.05]、精力[研究组(68.83±18.67)分,对照组(47.17±18.18)分,P<0.01]、社会功能[研究组(86.23±18.67)分,对照组(77.03±12.28)分,P<0.01]、情感职能[研究组(74.44±35.76)分,对照组(51.12±41.74)分,P<0.05]和精神健康[研究组(75.47±16.16)分,对照组(61.73±15.75)分,P<0.01]等5个分量表评分提高较对照组明显.结论 改良森田疗法能增加抗抑郁剂疗效和改善疾病预后.     

抗抑郁药奥氮平对大鼠海马神经细胞凋亡和细胞周期的影响

目的：探讨抗抑郁药物奥氮平对谷氨酸（Glu）损伤的大鼠海马神经元凋亡、坏死和细胞周期的影响,阐明奥氮平神经保护作用的机制。方法：采用体外原代培养的大鼠海马神经元,复制Glu损伤模型,细胞分为正常对照组、Glu损伤组和奥氮平+Glu损伤组,在体外通过流式细胞术测定各组神经元细胞凋亡率、坏死率和细胞周期的改变。结果：与正常对照组比较,其他组细胞凋亡率增加 (P<0.01);与Glu损伤组比较,10.0 μmol/L奥氮平+Glu损伤组细胞凋亡率降低（P<0.01 )。与正常对照组比较,Glu损伤组神经元坏死率升高2.9倍 (P<0.05);与Glu损伤组比较,100.0和200.0 μmol/L奥氮平+Glu损伤组神经元坏死率降低(P<0.05或P<0.01)。与正常对照组比较,Glu损伤组G0/G1期细胞百分数增加 (P<0.01）,S期细胞百分数下降（P<0.01）,G2 + M期变化不明显;而与Glu损伤组比较,
50.0和100.0 μmol?L-1奥氮平+Glu损伤组G0/G1期细胞比例下降为Glu损伤组的79.9%和62.6% (P<0.05或P<0.01);S期细胞比例上升为Glu损伤组的2.5和3.8倍 (P<0.05或P<0.01)。结论：奥氮平能够抵抗Glu诱导的神经元凋亡和坏死,改变细胞周期进程。     

ERK/AP-1途径在蛋白酶激活受体2促进肝癌细胞增殖中的作用

目的 探讨胰蛋白酶和蛋白酶激活受体2(PAR-2)激动剂SLIGKV-NH_2对肝癌细胞增殖的影响及其细胞内信号转导机制.方法 免疫荧光及逆转录(RT)-PCR法检测HepG2细胞PAR-2蛋白及mRNA的表达;用SLIGKV-NH_2、胰蛋白酶、反PAR-2激动肽VKGILS-NH_2及PD98059干预细胞生长.用流式细胞术检测细胞周期改变情况;噻唑蓝(MTT)法检测对细胞增殖能力的影响;RT-PCR法检测PAR-2、c-fos及增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA表达变化;Western印迹检测c-fos和PCNA蛋白表达变化.结果 肝癌HepG2细胞存在PAR-2蛋白和mRNA的表达.50μmol/LSLIGKV-NH_2、25 nmol/L胰蛋白酶处理细胞后,PAR-2 mRNA表达量(PAR-2/β-肌动蛋白)分别为0.70±0.04,0.99±0.05,高于对照组(0.35±0.05,F=135.534,P<0.01).胰蛋白酶、SLIGKV-NH_2组G_0/G_1期比例均明显低于对照组[(56.11±0.85)%、(57.85±0.46)%比(79.12±0.67)%,均P<0.01],S期、G_2/M期细胞比例和细胞增殖指数(PI)则明显高于对照组(均P<0.01).胰蛋白酶、SLIGKV-NH_2可以诱导肝癌HepG2细胞增殖(F=319.287,P<0.01),上调c-fos、PCNA mRNA和蛋白的表达(均P<0.01),且这些作用可被ERK激活性蛋白激酶(MEK)抑制剂PD98059抑制(均P<0.01);反PAR-2激动肽VKGILS-NH_2对HepG2细胞增殖能力的影响不明显,与对照组相比差异无统计学意义(均P>0.05).结论 肝癌HepG2细胞表达PAR-2.胰蛋白酶、SLIGKV-NH_2可以通过激活PAR-2诱导HepG2细胞的增殖活性,且该过程部分由ERK/AP-1信号通路所介导.     

C-myc反义核酸对内皮素诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖抑制作用的研究

应用不同浓度的Ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸处理体外培养的经１０－８ｍｏｌ／Ｌ内皮素－１（ＥＴ－１）诱导的人肺动脉平滑肌细胞,通过细胞计数和３Ｈ－ＴｄＲ掺入值观察该反义核酸对细胞增殖及ＤＮＡ合成的抑制作用,应用斑点杂交法检测平滑肌细胞Ｃ－ｆｏｓ和Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ的表达水平。结果表明,１０、２０、５０μｇ／ｍｌ反义寡核苷酸对细胞计数和３Ｈ－ＴｄＲ掺入值与对照组相比抑制率分别为１１．９％和１２．３％（Ｐ＜０．０５）,２１．６％和１４．７％（Ｐ＜０．０１）,３６．３％和２７．２％（Ｐ＜０．０１）;对Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达抑制率分别为７１．３％（Ｐ＜０．０５）,８０．７％（Ｐ＜０．０５）,９２．５％（Ｐ＜０．０１）;５０μｇ／ｍｌ反义核酸对Ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达抑制率是７９．７％,１０、２０μｇ／ｍｌ组无抑制作用。Ｃ－ｍｙｃ反义核酸能显著抑制内皮素诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖,其作用系依赖反义核酸的序列特异性和剂量依赖。