不同浓度8—MOP诱导的四膜虫rDNA链间交联的产生

本实验采用酶方法在核苷酸水平上检测了8—MOP(8—methoxypsoian)诱导的四膜虫rDNA键间交联的产生。将四膜虫用不同浓度的8—MOP与365nm紫外线照射联合处理,提取其rDNA,再用限制性核酸内切酶ClaI和BamHI消化,经凝胶电泳,Southern转印,分子杂交,自显影等过程,获得最终结果。放射自显影图片显示,当8—MOP浓度≥1μg时,四膜虫rDNA分子产生交联,且随着8—MOP浓度的增加,链间交联的的分子数目也增加,呈现明显的剂量依赖关系。     

血卟啉衍生物对γ线照射Eca109细胞的增敏效应

人食管癌上皮细胞体外经血卟啉(15μg/ml)与γ线(5Gy)处理后,癌细胞生长受抑,分裂指数明显降低,倍增时间显著延长,形态学观察,细胞重度空泡变性、胞浆凝固、大片坏死,超微结构示线粒体空化、退变,粗面内质网扩张,核糖体脱失,细胞膜破损。FCM分析细胞被阻滞在G_2M期,并杀伤细胞于此期。结果提示血卟啉衍生物具有放射增敏作用,在分子水平上表明了细胞生长受抑的机制。     

抗8-AG和HGPRT酶缺失的人早幼粒白血病细胞突变株(HL-60-AR)的建立(摘要)

利用N-甲基-N-硝基-亚硝基胍处理HL-60细胞,再用含8-AG的软琼脂集落形成的方法,成功地筛选出一株抗高浓度8-AG(20μg/ml)和HGPRT酶缺失的人早幼粒白血病细胞突变株,命名为HL-60-AR。经过该细胞对8-AG抗性鉴定等一系列实验,结果表明该株细胞具有抗8-AG和HGPRT酶缺失的下列特征:(1)在含20μg/ml 8-AG的培养液中生长旺盛,其生长曲线与在普通培液中的生长曲     

AHVAC-Ⅰ对人胃癌细胞株SGC-7901生长增殖的影响及作用机制

目的:探讨皖南蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ(AHVAC-Ⅰ)对人胃癌细胞株SGC-7901生长增殖的影响及作用机制。方法:AHVAC-Ⅰ处理SGC-7901细胞。CCK-8法检测其生长抑制作用,光镜观察细胞形态变化,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:AHVAC-Ⅰ抑制SGC-7901细胞的生长增殖,并呈浓度依赖性,半数抑制浓度(IC50)为58.197μg/ml;镜下可见SGC-7901细胞悬浮、胞核固缩等典型凋亡形态学变化;TUNEL法显示凋亡指数随浓度增加而增加。结论:AHVAC-Ⅰ对人胃癌细胞株SGC-7901具有生长抑制作用,诱导凋亡可能是其主要的作用机制之一。     

木黄酮对白血病K562细胞增殖的影响

目的:探讨木黄酮(genistein)抑制白血病K562细胞增殖的机制.方法:用噻唑蓝染色法检测genistein对K562细胞增殖的抑制作用;用流式细胞仪进行细胞周期解析,通过细胞形态学观察细胞分裂;应用RT-PCR方法检测白血病细胞WT1 mRNA表达.结果:Genistein浓度分别为2～30μg/ml作用K562细胞72 h,细胞增殖呈浓度依赖性受抑,与对照组相比差异显著(P＜0.01),IC50=11.4μg/ml;细胞周期解析发现,浓度为30μg/ml的genistein作用K562细胞12 h,引起了明显的G2/M期阻滞,24 h后G2/M期细胞增至93%;细胞分裂指数与对照组比没有明显差别;30μg/ml genistein作用K562细胞24 h,3 h起WT1 mRNA表达开始降低,24 h时降至对照的30%.结论:genistein抑制K562细胞增殖,诱导G2期或M早期阻滞及下调WT1的表达.     

人参三醇对K562白血病细胞的抑制及增加化疗药敏感性的研究

目的 :探讨人参三醇 (GPT)对 K5 62白血病细胞生长的影响 ,及对化疗药敏感性的协同作用。方法 :在液体培养、半固体集落形成培养中 ,以不同浓度的 GPT处理 K5 62细胞 2 4、48、72小时 ,用细胞生长曲线和集落形成率来观察 GPT的增殖和抑制效应 ;用 MTT法检测 GPT对化疗药物的协同性。结果 :低浓度 (1 0μg/ml、2 0μg/ml)的 GPT能显著地刺激 K5 62细胞增殖 ,中浓度(5 0μg/ml)时使细胞增殖受抑 ,并呈时间—效应依赖性。 GPT分别与化疗药物高三尖杉酯硷(HHr)、阿糖胞苷 (Ara-c)联合应用能增加对 K5 62细胞的杀伤作用 ,抑制率为 (88.4± 2 .7) %和(73 .8± 8.8) % ,明显高于对照组的 (4 9.3± 9.3 ) %和 (3 0 .1± 7.5 ) % (P<0 .0 1 )。对低敏的足叶乙甙 (Vp-1 6)组也能使抑制率从原先的 <1 0 %提高到 >5 0 %。结论 :不同剂量的 GPT对 K5 62细胞具有刺激增殖和抑制生长的双相效应 ,并能增强 K5 62细胞对化疗药物的敏感性 ,是人参皂甙内抑制白血病细胞的有效成分 ,可为临床应用提供依据。     

基于JAK2/STAT3通路探讨阿奇霉素对脂多糖诱导肺泡上皮细胞的保护作用

目的 探究阿奇霉素(AZI)对脂多糖(LPS)诱导的人肺泡上皮细胞增殖生长、迁移的作用及相关机制。方法 体外培养人肺泡上皮细胞A549,分为对照组(不做干预)、LPS组(10μg/ml LPS处理24 h)、低/中/高剂量实验组(10μg/ml LPS+2、4、8μg/ml AZI)、AZI组(10μg/ml LPS+4μg/ml AZI)、抑制剂组(10μg/ml LPS+50μmol/L JAK2/STAT3通路抑制剂AG490)、AZI+抑制剂组(10μg/ml LPS+4μg/ml AZI+50μmol/L AG490)、AZI+激活剂组(10μg/ml LPS+4μg/ml AZI+0.5μmol/L JAK2/STAT3通路激活剂Colivelin)。干预24 h后,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、倒置显微镜、划痕法、蛋白免疫印迹(WB)法检测炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6表达水平、细胞生长、迁移率、上皮间质转化(EMT)及JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达水平。结果 LPS组细胞活力较对照组下降(P<0.05)。中/高剂量实验组细胞活力较LPS组上升(P<0.05)。因此选择有显著差异的较低浓度(4μg/ml AZI)作为AZI组进行后续实验。与对照组相比,LPS组细胞生长受抑制,TNF-α、IL-1β、IL-6、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达降低(P<0.05),细胞迁移率、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维粘连蛋白(FN)、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达升高(P<0.05)。与LPS组相比,AZI组和抑制剂组显著扭转了上述指标的变化(P<0.05)。与AZI组相比,AZI+抑制剂组细胞生长状态较好,E-cadherin蛋白表达进一步升高(P<0.05),细胞迁移率、TNF-α、IL-1β、IL-6、N-cadherin、Vimentin、FN、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达进一步降低(P<0.05),AZI+激活剂组则显著逆转了上述指标的变化(P<0.05)。结论 阿奇霉素能够通过抑制JAK2/STAT3信号通路减轻对A549细胞的炎症损伤,促进细胞生长,并抑制其迁移与上皮间质转化(EMT)进程。     

层粘连蛋白对肝癌细胞的趋化作用及其伪足形成的影响

采用微吸管实验技术将研究层粘连蛋白(Laminin,LN)(LN)作包被液预裱衬处理微吸管后,LN趋化液对了解探讨肝癌(HCC)细胞响应LN时的趋触效应趋化作用以及基质在对微吸管表面的粘附的作用对肝癌细胞(HCC)以及肿瘤细胞伪足形成的影响。研究不同浓度LN趋化液对HCC细胞与不同浓度LN的趋化作用。定量描述肝癌细胞(HCC)在层粘连蛋白LN(Laminin,LN)趋化作用下伪足的形成、生长的动态过程。结果显示,当微吸管未经LN预裱衬处理,而仅放置空白趋化液时未见有伪足形成;微吸管内壁经100μg/mlLN预裱衬后再加入空白趋化液时,仍未见伪足形成;对微吸管内表面与未经LN预裱衬处理或比较,微吸管中经加入50μg/ml LN趋化液预裱衬处理微管内加入50μg/ml LN趋化液时肝癌细胞所形成的伪足峰值长度的比较,在两种情况下,二者无显著性差异(P>0.05)。当LN趋化液浓度趋化剂LN浓度≤200μg/ml,HCC细胞伪足峰值的生长长度随浓度的增加而增大加;当LN浓度≥200μg/ml,伪足的生长呈现饱和性。提示微吸管内表面裱衬LN对肝癌细胞伪足形成的趋化作用可忽略。在HCC细胞响应LN趋化作用生成伪足具有一定范围的浓度依赖性和时间依赖性。LN在一定浓度范围内,对HCC细胞的趋化作用具有浓度依赖性。     

TJU103对小鼠同种异基因造血干细胞移植模型GVHD的预防作用

目的探讨TJU103对小鼠同种异基因造血干细胞移植模型移植物抗宿主病(GVHD)是否起预防作用。方法(1)用单向混合淋巴细胞培养方法检测TJU103对T淋巴细胞增殖的影响;(2)以BALB/c(H-2d)、CB6F1(H-2d/b)分别作为完全异基因移植和半相合基因移植的受鼠,给予9.0Gy全身照射后4h,单纯照射组经尾静脉注射0.3mlD-Hank's液,不进行细胞移植;对照组经尾静脉注射C57BL/6小鼠混合细胞悬液(4.5×106骨髓细胞 3.0×107脾细胞),但不进行其他治疗处理;实验组经尾静脉注射C57BL/6小鼠混合细胞悬液(4.5×106骨髓细胞 3.0×107脾细胞) TJU103(终浓度25μg/ml),此后腹腔注射TJU10350μg/d,共7d,然后观察其造血恢复、植入及GVHD的情况。结果(1)TJU103可以显著抑制T细胞活化增殖,其抑制作用呈剂量依赖性,在25μg/ml浓度时,可以抑制83%细胞增殖。(2)由于没有给予GVHD防治措施,对照组受鼠GVHD的发生率和死亡率分别为10/10和10/10;而完全异基因移植实验组小鼠GVHD发生率仅为2/10,30d生存率增加至8/10(P<0.01),中位生存期延长至30d以上(P<0.01);半相合基因移植实验组小鼠GVHD发生率为1/10,30d生存率增加至9/10(P<0.01),中位生存期延长至30d以上(P<0.01)。结论TJU103不仅可以显著抑制体外T淋巴细胞增殖效应,而且可显著降低小鼠同种异基因造血干细胞移植模型GVHD的发生率。     

开口箭皂甙抑制小鼠S-180肉瘤细胞增殖及实体瘤生长的实验研究

目的 研究开口箭皂甙(STCB)体内外抗S-180肉瘤活性的强度及其作用机制.方法 MTT法检测S-180细胞的增殖程度;制备昆明种小鼠S-180移植实体瘤模型,观察STCB的抑瘤作用;光镜和电镜下观察药物作用后S-180细胞形态及超微结构变化;以不同浓度STCB处理S-180细胞,经碘化丙啶染色后应用流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡情况.结果 STCB体外明显抑制S-180细胞增殖,IC50为34.64μg/ml.经灌胃给药,STCB对荷S-180实体瘤小鼠表现出良好的抑瘤作用,低剂量(0.5 g/kg体质量)时,抑瘤率已超过30%,高剂量(2 g/kg体质量)时,抑制率达到54.86%.电镜观察和FCM检测证明肿瘤细胞凋亡率随STCB浓度增加而增加.STCB的浓度为10和30μg/ml时,S期细胞百分率上升,G2/M期细胞百分率下降;当STCB的浓度达到60μg/ml,G0/G1期细胞百分率下降,G2/M期细胞百分率上升:提示低浓度STCB阻止S-180细胞从S期进入G2期;高浓度时,STCB还干扰S-180细胞的有丝分裂.结论 STCB在体内外对S-180肉瘤细胞均有抑制作用,其作用机制与诱导肿瘤细胞的凋亡和干扰细胞周期有关.     

富组蛋白1促进人成纤维细胞增殖和迁移

目的了解富组蛋白1(histatin1,Hst1)对人成纤维细胞增殖和迁移功能的影响。方法将人成纤维细胞按常规方法传代培养,分为空白对照组(DMEM+1%小牛血清)、A组(100μg/ml Hst1)、B组(30μg/ml Hst1)、C组(3μg/mlHst1),细胞计数法观察不同浓度Hst1(3～100μg/ml)在不同时相点(24、48、72 h)对人成纤维细胞增殖功能的影响;将已融合的人成纤维细胞分为丝裂霉素C处理组及丝裂霉素C未处理组,各组中再次分为空白对照组(DMEM+1%小牛血清)、Ⅰ组(30μg/ml Hst1)、Ⅱ组(10 ng/ml rhEGF)、Ⅲ组(30μg/ml Hst1+10 ng/ml rhEGF)、Ⅳ组(15μg/ml Hst1+5 ng/mlrhEGF)、Ⅴ组(15μg/ml Hst1+10 ng/ml rhEGF),通过体外细胞划痕实验考察Hst1对人成纤维细胞迁移功能的影响。结果①不同浓度的Hst1能够促进人成纤维细胞增殖,与浓度及时间无明显依赖关系,24 h时间点A、B组细胞数显著高于其余各组(P<0.01);②30μg/ml Hst1能促进细胞划痕创面愈合,8 h划痕愈合率约37.7%,与rhEGF联合应用时促划痕愈合率高于单独用药;利用丝裂霉素C排除细胞增殖作用后,30μg/ml Hst1较空白对照组无促进细胞迁移功能(P>0.05),划痕愈合率较丝裂霉素C未处理对应组下降,但无统计学意义,且与rhEGF联合应用时促划痕愈合率与单独用药无统计学差异(P>0.05)。结论 Hst1能够促进人成纤维细胞增殖,但促迁移功能不明显。Hst1联合rhEGF使用时对人成纤维细胞划痕创伤愈合具有协同促进作用。     

Antagonistic Effects of Tranilast on Proliferation and Collagen Synthesis Induced by TGF-β2 in Cultured Human Trabecular Meshwork Cells

Whether tranilast had antagonistic effect on proliferation inhibition and collagen synthesis promotion induced by TGF-β2 in cultured human trabecular meshwork cells was investigated. Suspension of 1 × 104 cultured human trabecular meshwork cells of 3-5 passage was distributed in each well of a 96-well disk and divided into control group and experimental group. After 24 h, 0 μg/ml (control), 12.5 μg/ml, 25 μg/ml, 50 μg/ml tranilast with 3.2 ng/ml TGF-β2 were added into the incubation medium. Another 24 h later, proliferation and collagen synthesis in cultured human trabecular meshwork cells were examined respectively by using tetrazolium-based semiautomated colormetric (MTT) assay and 3 H-proline incorporation with liquid scintillation technique. The results showed absorbance (A) values of the experimental groups were 0. 9036 ± 0. 3017, 1.1361 ±0.1352, 1.2457 ±0.1524 according to the different concentrations of tranilast, and 0. 8956 ±0. 1903 of the control group. In comparison with the control group, 25 μg/ml (q′= 3. 23, P＜0.05), 50 μg/ml (q=4.70, P＜0.01) tranilast significantly antagonized the decrease of the A values induced by TGF-β2 in the cultured human trabecular meshwork cells. In comparison with the control group [817.37±124.21 cpm/104 cells], 12.5 μg/ml (620.33±80.46 cpm/104 cells, q′=4.26, P＜0.05),25 μg/ml (594. 58±88.13 cpm/104 cells, q′=4. 81, P＜0.01), 50 μg/ml (418. 64±67.90 cpm/104 cells, q′=8.62, P＜0.01) tranilast significantly inhibited the incorporation of 3 H-proline into the cultured human trabecular meshwork cells promoted by TGF-β2 in a dose-dependent manner. It was concluded that tranilast had the antagonistic effect on the proliferation inhibition and collagen synthesis promotion induced by TGF-β2 in the cultured human trabecular meshwork cells.     

DHA和NS-398联合对人胆管癌QBC939细胞的抑制作用

目的 研究二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂NS-398联合对人胆管癌细胞QBC939的抑制作用。 方法 体外培养人胆管癌QBC939细胞株,分别设立DHA浓度组、NS-398浓度组、二者联合组和空白对照组,即将0、15、30、45、60、75 μg/ml浓度的DHA和0、25、50、100、150、200 μmol/L浓度的NS-398分别联合作用于胆管癌QBC939细胞;应用CCK8法检测其分别对QBC939细胞生长的相对抑制率;采用流式细胞术检测QBC939细胞的凋亡情况;应用Transwell小室检测QBC939细胞的体外侵袭情况。 结果 DHA和NS-398在体外均能够单独抑制QBC939细胞生长,45 μg/ml的DHA联合100 μmol/L的NS-398经24 h作用后,细胞生长抑制率达到90%,实验组与DHA浓度组、NS-398浓度组和空白组差异均有统计学意义(P<0.05),继续增加2种药物浓度,细胞生长抑制率变化不明显;流式细胞术显示DHA和NS-398联合能明显促进QBC939细胞早期凋亡;15 μg/ml的DHA联合50 μmol/L的NS-398经24 h作用后,对胆管癌细胞生长无明显抑制作用,但QBC939的体外侵袭能力明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。 结论 DHA和NS-398联合能明显抑制胆管癌QBC939细胞生长,促进胆管癌细胞早期凋亡,抑制胆管癌细胞的侵袭,二者联合对胆管癌QBC939细胞生长的抑制作用可能是通过促进细胞早期凋亡实现的。      

地塞米松抑制聚肌胞苷酸诱导人气道上皮细胞趋化因子表达及机制的初步研究

目的 初步探讨地塞米松对聚肌胞苷酸刺激气道上皮细胞后趋化因子表达的影响及其机制.方法 将人气道上皮细胞16hBE给予不同浓度的聚肌胞苷酸(0.001、0.01、0.1、1 μg/ml)及地塞米松(0.1、1、10 μmol/L)处理,用RT-PCR检测刺激6h后IL-8、IP-10 mRNA的表达水平,用ELISA法检测刺激24 h后培养上清液中IL-8和IP-10蛋白含量,用免疫组化方法检测细胞NF-κB p65亚单位的表达强度.结果 0.001、0.01、0.1 μg/ml聚肌胞苷酸处理16hBE细胞后IL-8和IP-10mRNA表达水平和蛋白分泌量呈浓度依赖性升高,在0.01 μg/ml及0.1 μg/ml浓度时,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);但在聚肌胞苷酸浓度为1μg/ml时,IL-8和IP-10 mRNA表达水平和蛋白分泌量都出现了下降.地塞米松(1、10 μmol/L)预处理0.5h明显抑制聚肌胞苷酸诱导的IL-8和IP-10 mRNA表达及蛋白分泌(P＜0.05,P＜0.01).1 μmol/L地塞米松预处理明显抑制了聚肌胞苷酸诱导的NF-κB p65表达强度(P＜0.01).结论 糖皮质激素可抑制聚肌胞苷酸诱导的气道上皮细胞趋化因子的表达,其机制可能与NF-κB的活化有关.     

Lipopolysaccharide-enhanced early proliferation of insulin secreting NIT-1 cell is associated with nuclear factor-kappaB- mediated inhibition of caspase 3 cleavage

Background  Increased levels of plasma lipopolysaccharide (LPS) have been found in obesity and diabetes patients. This study was to investigate the effect of LPS on pancreatic beta-cell viability and the involvement of caspase 3 in NIT-1 cell line.

Methods  Mouse insulinoma NIT-1 cells were treated with LPS for the indicated time and dose. Cell viability was measured by cell counting kit-8 reagent. Toll-like receptor 4 (TLR4), caspase 3 and cleaved caspase 3 were detected by Western blotting. Insulin was determined by radioimmunoassay (RIA).

Results  LPS promoted NIT-1 cell proliferation at 1 µg/ml, peaked at 72 hours of incubation. A reduction in cleavage of caspase 3 was observed upon LPS treatment. Bay11-7082, a specific inhibitor of nuclear factor (NF)-κB, blunted LPS-induced inhibition of caspase 3 cleavage. Reduction in chronic insulin secretion was observed after treatment with LPS at 1 µg/ml for 48 and 72 hours, not for 24 hours. TLR4 protein was upregulated when NIT-1 cells were treated with LPS at 1 µg/ml for 24 hours.

Conclusions  LPS promotes early NIT-1 cell proliferation in association with NF-κB-mediated inhibition of caspase 3 cleavage. LPS exerts a time-dependent inhibitory effect on chronic insulin secretion from NIT-1 cells.

     

晚期糖基化终产物对大鼠血管平滑肌细胞分泌炎症性趋化因子的影响及机制

目的 观察晚期糖基化终产物(AGE)对血管平滑肌细胞(VSMC)分泌单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和白细胞介素8(IL-8)的影响并初步探讨可能的细胞内信号转导机制.方法 分离、培养原代大鼠VSMC并进行鉴定.采用糖基化血清白蛋白(GSA)模拟AGE,观察不同浓度GSA(10、100和500 μg/ml)对VSMC分泌MCP-1和IL-8的影响和时间曲线;并对其进行细胞增殖率校正以消除VSMC数量增加对测定的影响;p38MAPK抑制剂(SB203580)、ERK1/2抑制剂(PD98059)及NF-κB抑制剂(PDTC)、Proteasome抑制剂(MG132)预处理后观察GSA刺激VSMC分泌MCP-1和IL-8水平的改变.结果 与空白对照组相比,100 μg/ml GSA作用24 h VSMC分泌MCP-1(13.01ng/ml±0.12ng/ml比7.02 ng/ml±0.26 ng/ml,P＜0.05)和IL-8(12.6ng/ml±0.86 ng/ml比3.07 ng/ml±0.35ng/ml,P＜0.05)水平最高.经过细胞增殖校正后,GSA仍然能够促进VSMC表达MCP-1和IL-8.MAPK抑制剂和NF-κB抑制剂预处理后发现PDTC(10 μmol/L)、SB203580(5 μmol/L)以及MG132(10 μmol/L)可以抑制GSA刺激VSMC表达MCP-1和IL-8.结论 GSA可以促进VSMC分泌致炎性趋化因子MCP-1和IL-8,这种作用独立于细胞增殖,可能是通过激活细胞内p38MAPK信号转导通路,促进核因子NF-κB的活化而实现.

Abstract：

Objective To investigate the effects of advanced glycation end products (AGEs) on the secretion of monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) and interleukin-8 (IL-8) in vascular smooth muscle cells (VSMCs) and explore its possible intracellular signaling mechanism. Methods Primary rat VSMCs were isolated and identified. VSMCs were treated with glycation serum albumin (GSA), an important component of AGEs, in series of concentrations and time. The role of MAPK and NF-κB inhibitors was confirmed. The levels of MCP-1 and IL-8 were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results VSMCs were treated with GSA at the doses of 10 μg/ml, 100 μg/ml and 500 μg/ml respectively. In comparison with the control group, the levels of MCP-1 ( 13.01 ng/ml ± 0.12 ng/ml vs 7. 02 ng/ml ±0. 26 ng/ml, P＜0.05) and IL-8 (12. 6 ng/ml ±0. 86 ng/ml vs 3. 07 ng/ml ±0.35 ng/ml,P＜0.05) increased in the GSA-treated group, especially at the concentration of 100 μg/ml. After adjustment for cells proliferation, the levels of MCP-1 and IL-8 were still higher in the GSA-treated group.After a pretreatment of PDTC ( 10 μmol/L), SB203580 (5 μmol/L) and MG132 ( 10 μmol/L), the levels of MCP-1 and IL-8 decreased. However, it had no change when pretreated with PD98059 (20 μmol/L).Conclusion GSA promotes the secretion of MCP-1 and IL-8 in VSMCs. Such an effect is not dependent on cellular proliferation. It may be realized through an activation of NF-κB by p38MAPK-sensitive intracellular signaling pathway.     

藤梨根正丁醇提取物对人食管癌细胞生长作用的实验研究

目的:探讨藤梨根正丁醇提取物对培养的人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用。方法:MTT比色法检测藤梨根正丁醇提取物在不同浓度(1μg/m l、10μg/m l、100μg/m l)及不同时间(24 h、48 h、72 h)对Eca-109细胞生长抑制作用,TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应。结果:①藤梨根正丁醇提取物对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强。②提取物对瘤细胞有明显的凋亡效应。结论:藤梨根正丁醇提取物能有效抑制人食管癌Eca-109细胞生长。     

α和β-熊果苷对共培养小鼠黑素细胞黑素生成的影响研究

目的 比较观察熊果苷分子苯环侧链上的糖苷基团α和β-构象对共培养小鼠黑素细胞酪氨酸酶活性和黑素含量的影响.方法 体外melan-a小鼠黑素细胞(MC)与SP-1小鼠角质形成细胞(KC)共培养体系,两种细胞的初始接种比例为1:5.共培养细胞分别用含有0.04、0.2、1 mg/ml的α-熊果苷、β-熊果苷、烟酰胺及10、50、100 μmol/L的甲氧沙林(8-MOP)新鲜培养基换液,药物处理共4 d.用相差倒置显微镜观察细胞表型的改变;用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法测定细胞增殖率;用放射性核素L-[14C]-酪氨酸底物标记法测定酪氨酸羟化酶与多巴氧化酶活性;用分光光度计法测定细胞总黑素含量.结果 除8-MOP能明显促进共培养细胞(主要是MC)发生增殖外,其他3种化合物对细胞增殖率均无影响.两种熊果苷均能剂量依赖地抑制酪氨酸酶活性和黑素含量.1 ms/mlα-熊果苷对酪氨酸酶活性的抑制作用比同等浓度的β-熊果苷强(酪氨酸酶活性:37%±4%vs54%±9%,P=0.034).经两种熊果苷(1 mg/ml)处理的MC树状突延长纤细,黑素产生较对照组明显减少,以α-熊果苷更为明显.相反,100 μmol/L 8-MOP处理组的MC数目较对照组显著增加,树状突增加,胞质与树状突内有大量黑褐色黑素堆积.结论 α-熊果苷能明显抑制共培养小鼠黑素细胞的黑素生成,其临床应用价值有待体内实验进一步确认.     

牛蒡根化学成分对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察牛蒡根化学成分牛蒡低聚果糖和山奈素对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖的影响,探讨牛蒡根对勃起功能障碍治疗作用的可能机制。方法：利用MTT体外药物筛选法测试受试样品对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞体外增殖活性的影响。结果：牛蒡低聚果糖100、50μg/ml能够明显促进细胞的增殖,且有时间依赖性;山奈素100、50μg/ml对细胞的增殖有抑制作用;25、12.5μg/ml能够明显促进细胞的增殖,且有时间依赖性。结论：牛蒡根化学成分对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞有增殖作用。     

汉防己碱对白血病K562细胞生长的促进耐药作用

目的考察汉防己碱(Tet)对白血病K562细胞生长的影响。方法采用体外细胞培养,即在37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养,培养液为含10%热灭活NBS的完全RPMI1640细胞培养基。待K562细胞与药物作用48 h后,收集并处理细胞,结合MTT和Western blot法研究Tet对K562细胞生长的作用特点。结果 Tet在0.33～1.00μg/ml仅使K562及K562/ADM细胞的存活率降低至75%～80%,低浓度Tet(0.33μg/ml)使阿霉素(ADM)和顺铂(cDDP)对K562细胞生长的IC50增加(P<0.01),1.0μg/ml Tet则降低IC50,使ADM对K562/ADM细胞的IC50增加,cDDP的IC50无明显变化。0.33μg/ml Tet有提升2种细胞的P-gp和MRP1表达的作用(P<0.05)。Tet各浓度对LRP表达无明显影响。结论 Tet对K562及K562/ADM细胞生长抑制作用具浓度依耐性,低浓度具加速耐药的作用,其促进耐药细胞发展的机制至少与提升P-gp和MRP1表达有关。