巨噬细胞瘤苗免疫调节作用的研究

目的 观察巨噬细胞肿瘤疫苗对细胞毒性T细胞（CTL）反应及Th1／Th2型细胞因子分泌的调节作用。方法 分别采用MTT法和比色法检测肿瘤细胞杀伤率和清液上乳酸脱氢酶（LDH）含量,采用Western印记法与ELISA法检测脾细胞内及分泌入培养上清的IL-2、IL-4、IL-10及IFN-γ等细胞因子。结果 巨噬细胞肿瘤疫苗接种组的淋巴细胞肿瘤细胞杀伤率与培养上清液LDH水平分别为（36．70±21．02）％和（0．29±0．15）U／ml,明显高于热灭活肿瘤细胞接种组、石蜡诱导的巨噬细胞接种组（P值均〈0．05）。肿瘤细胞冻融物刺激72h后,各组免疫小鼠的脾细胞内均可检测到IL-2、IL-4、IL-10及IFN-γ等细胞因子;同时巨噬细胞肿瘤疫苗接种组脾细胞培养上清中,IL-2、IL-4、IL-10及IFN-γ含量分别为（7．97±3．15）pg／ml、（0．44±0．11）pg／ml、（1．83±0．85）pg／ml和（9．16±4．64）pg／ml,IL-2、IFN-γ的水平均高于热灭活肿瘤细胞接种组和石蜡诱导的巨噬细胞接种组（P值均〈0．05）。结论 巨噬细胞肿瘤疫苗可诱导机体产生特异性抗肿瘤反应,能够促进Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ的分泌。     

细胞因子对血管内皮细胞作用的研究进展

近年研究表明,多种细胞因子对ECs的结构和功能有重要影响.IFN-α,β促进ECs表达MHC-I类抗原;IFN-γ诱导ECs表达MHC-Ⅱ类抗原;TNF,IL-1和IL-4诱导ECS表达多种细胞粘附分子,并改变ECs的结构形态,促进淋巴细胞等多种免疫细胞粘附ECs,以增强ECs在免疫反应和炎症反应中的作用.TNF,IL-1还抑制TM形成,打破ECs的血凝-抗血凝机制的平衡,利于血管内血栓形成;而IL-4则促进TM形成,对血栓的形成起抑制作用.还有一些细胞因子通过多种机制抑制内毒素引发的细胞因子介导的炎症反应,如IL-6,IL-8,TGF-β和GM-CSF等细胞因子,可能参与细胞因子介导的炎症反应的负反馈调节.     

TNF-α和IFN-γ逆转IL-4对LAK细胞的抑制作用

IL-2可诱导很多细胞因子,包括TNF-α、IFN-γ,IFN-αGM-CSF 的合成和分泌,它们在LAK 调节中起重要作用。IL-4是由激活的T 细胞分泌的一种20KD 的糖蛋白,它对B 细胞、T 细胞、NK 细胞、肥大细胞和单核细胞均有不同程度的影响。IL-4对IL-2刺激的人脾细胞、胸腺细胞和PBL产生的LAK 细胞有很强的抑制作用。本文证明IL-4能抑制PBMC 在IL-2诱导下产生TNF-α、IFN-γ,而外源性TNF-α、IFN-γ能部分逆转这种抑制作用。     

人类重组IL-1对IL-2诱导淋巴因子激活杀伤细胞活性的协同作用

业已证明IFN-γ对IL-2诱导淋巴因子激活杀伤细胞(LAK)具有协同作用,而IFN-γ能诱导单核细胞产生IL-1和TNF。为此,作者进一步探讨了IL-1与IL-2诱导LAK 活性之间的关系。常规分离健康人外周血单个核细胞和外     

T_(H1)和T_(H2)反应的诱导——是“自然”免疫反应的一个关键因素?

免疫反应中辅助性T细胞(T_H)产生不同的细胞因子,对免疫反应的性质具有重要调节作用.在小鼠中发现,以产生IL-2和IFN-γ,很少或无IL-4和IL-5为特征的T_H1型反应主要参与负责杀伤胞内寄生虫的巨噬细胞的活化、迟发型超敏反应和IgG 2a的合成.T_H2型反应以IL-4和IL-5的生成为主,引起IgG1和IgE生成细胞及嗜酸性粒细胞增加.与小鼠T_H细胞有所不同,人CD4~+T细胞克隆产生细胞因子的模式既有T_H1型和T_H2型,亦有中间型T_HO型.     

IFN-γ诱导人单核细胞MICs分子表达

目的：研究IFN-γ对MHC—I类链相关分子（MICs）表达的调节作用。方法：采用密度梯离离心法分离人外周血单个核细胞（PBMC），以免疫磁珠法从PBMC中特异性分选单核细胞，以细胞因子IFN-γ、TNF-α或IFN—α刺激PBMC、纯化单核细胞或单核细胞系U937、THP-1后，以流式细胞术检测单核细胞表面MICs分子表达。结果：IFN-γ选择性上调人PBMC中单核细胞表面MICs表达；IFN-γ对人原代单核细胞及单核细胞系U937、THP-1细胞表面MICs分子表达均有诱导或上调作用，细胞因子TNF—α、IFN—α对单核细胞MICs分子表达无影响。IFN-γ诱导或上调表达的MICs分子不能被MICA或MICB特异性单克隆抗体（mAb）所识别，可能是一种新的MIC分子或MIC等位基因。结论：IFN-γ能诱导或上调人单核细胞表面MICs分子表达。     

云芝多糖对小鼠细胞因子的影响

目的：研究云芝多糖（CVPS）对小鼠T、B淋巴细胞及细胞因子IL-1、IL-2、IFN-γ和TNF功能的影响。方法：体外试验将指数生长小鼠淋巴细胞与不同浓度的CVPS共培养，用MTT法观察CVPS对小鼠T、B淋巴细胞的增殖作用；用胸腺细胞增殖法观察CVPS对细胞因子IL-1活性的影响；用脾细胞增殖法观察CVPS对IL-2活性的影响；用中性红染色法观察CVPS对细胞因子TNF活性的影响；体内实验给药组小鼠每天分别腹腔注射CVPS100、50和25mg／kg，连续注射5天，取出小鼠脾脏观察CVPS对小鼠T、B淋巴细胞的增殖作用；用IL-2依赖细胞株CTLL-2法检测IL-2活性，用细胞病变抑制法检测IFN-γ活性。结果：CVPS在体外给药浓度为31．25—500μg/ml时，可明显促进小鼠T、B淋巴细胞的增殖，明显增强TNF吞噬中性红的能力，明显提高细胞因子IL-1的活性。CVPS给药组小鼠IL-2、IFN-γ的活力值明显高于空白对照组，且呈良好剂量依赖关系。结论：云芝多糖对小鼠T、B淋巴细胞及细胞因子IL-1、IL-2、IFN-γ及TNF功能均有增强作用。     

猪苓多糖对巨噬细胞RAW264.7的双向免疫调节作用

目的观察猪苓多糖对γ干扰素(IFN-γ)诱导M1亚型巨噬细胞膜表面蛋白的影响及对相关细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-αm RNA的作用,探讨猪苓多糖对巨噬细胞的免疫调节作用。方法实验分为空白对照组、IFN-γ模型组、猪苓多糖组和IFN-γ加猪苓多糖组。IFN-γ诱导巨噬细胞极化为M1型后用猪苓多糖干预,采用流式细胞术检测膜蛋白CD14、TLR4、CD86、CD40、CD16/32的阳性表达率,ELISA法检测细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β、IL-17及IL-10的表达量,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β及IL-10 m RNA的相对表达量。结果 IFN-γ可单独诱导M1巨噬细胞模型,猪苓多糖作用于M1型巨噬细胞,分泌的因子增加,但是对膜蛋白影响不大;猪苓多糖单独作用于巨噬细胞,可以增加膜白蛋的表达量,分泌的因子和空白对照组比较有统计学差异。结论猪苓多糖可以极化巨噬细胞为M1型,可以增加由IFN-γ诱导的M1炎症因子的表达,同时也增加抑炎因子的表达,有着双向的调节作用。     

IL-1及TNF促进胸腺细胞的增殖反应

活化的单核/巨噬细胞系能产生两种细胞因子,白细胞介素1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF),二者均有多种生物学作用。最近已经证明,IL-1及TNF 能够促进人成     

人类表皮细胞和表皮样癌细胞系可表达与释放IFNβ_2(B细胞分化因子)或杂交瘤生长因子(IL-6)(文摘)

IL-6即是已知的IFN-β_2。杂交瘤生长因子、肝细胞刺激因子及B细胞分化因子,能介导急性期应答,包括发热,淋巴细胞刺激功能及抗病毒活性。IL-6由单核细胞、纤维母细胞某些淋巴细胞及多种肿瘤细胞所产生。本文研究证明IL-6为多功能的细胞因子,也是由正常人类表皮细胞(EC)及人类上皮样癌细胞系(A_(431),KB)所释放。依据从新鲜分离的EC衍生的上清,长期角质细胞的培养物,A_(431),或KB细胞能刺激杂交瘤生长因子/IL-6依赖浆细胞瘤细胞系(B_9)的增殖。IL-6本质上为血清蛋白所产生,加上IL-1α、IL-1β或肿瘤促进物PMA有效地促进EC—衍生IL-6(EC-IL-3)的合成和释放。类似单核细胞或纤维母细胞衍化的IL-6,EC-IL-6表现Mr,在21与28KDa之间的微异源性。在Western印迹法实验中,一种直接抗人γIFN-β_2/IL-6抗血清检出不同的Mr形式的EC-IL-6。因此,该血清可     

低密度脂蛋白免疫复合物对单核细胞来源巨噬细胞胆固醇代谢和细胞因子分泌的影响

目的：探讨低密度脂蛋白免疫复合物（LDL-IC）对单核细胞来源巨噬细胞胆固醇代谢和细胞因子分泌的影响。 方法： 用胆固醇酶联法测定细胞内胆固醇含量，ELISA法检测培养上清TNFα和IL-1β水平。 结果： LDL-IC组细胞内胆固醇含量及上清TNFα、IL-1β水平均明显高于LDL、IgG-IC及阴性对照组。 结论： LDL-IC可以显著增加细胞内胆固醇含量与培养上清TNFα和IL-1β的水平，提示LDL-IC能通过干扰细胞脂质代谢及细胞因子分泌而在AS中起重要作用。     

低剂量γ射线辐照外周血单个核细胞对细胞因子表达的影响

目的:探讨低剂量辐射对外周血单个核细胞细胞因子表达的刺激效应.方法:人外周血单个核细胞采用1 Gyγ射线照射,吸收剂量率为17 Gy/min,并在培养过程中不同时间采用ELISA方法检测上清液中IL-2、TNFα及IFN-γ含量.结果:经γ射线照射24 h后培养上清中IL-2、TNFα及IFN-γ含量明显升高,与对照组比较有明显差异(P<0.05),并随培养时间延长,各细胞因子含量会进一步升高.结论:低剂量辐射对外周血单个核细胞中IL-2、TNFα及IFN-γ表达具有刺激效应.     

调节性T细胞能有效降低抗CD3单克隆抗体OKT3引起的人外周血单个核细胞细胞因子的释放

目的 探索细胞因子风暴因子体外模型的构建方法及调节性T细胞(Treg)的调节作用。方法 培养健康成人外周血单核细胞(PBMC),随机分为PBMC组、对照组(PBS处理)、 CD3单克隆抗体OKT3处理组、 OKT3联合Treg处理组。处理48 h后，收集上清液，采用ELISA检测血清转化生长因子β(TGF-β)、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)、 γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)、 IL-2、 IL-7和IL-6水平。结果 与对照组相比，OKT3能明显增加PBMC的TGF-β、 CTLA4、 IL-10、 IL-2、 IL-7、 IFN-γ和IL-6水平。Treg能有效减少OKT3引起的上述细胞因子释放。结论 成功构建了细胞因子风暴细胞模型，Treg能降低PBMC的细胞因子释放。     

IFN-γ与TNF、IL-2联合应用能有效地阻止小鼠NK抵抗性肿瘤的肺转移

IFN-γ、TNF和IL-2均为抗癌淋巴因子,它们除本身具有抗肿瘤作用外,还可以通过其他机制如IFN-γ可激活巨噬细胞而发挥抗肿瘤作用,特别是IL-2与LAK细胞合用已经取得了较好的抗肿瘤效果,但因对淋巴因子的需要量大且有副作用,使临床应用受到限制。目前已知:TNF和IFN-γ对肿瘤细胞     

IFN-γ促进人单核细胞向不典型成熟DC分化

目的: 研究IFN-γ对人单核细胞表型及分化的影响.方法: 采用免疫磁珠法从健康志愿者外周血单个核细胞(PBMCs)中特异性分选单核细胞, 以细胞因子IFN-γ、 TNF-α、 IFN-α刺激单核细胞后, 观察单核细胞生长特性, 并以流式细胞术检测单核细胞表面CD1a、 CD14、 CD80、 CD83、 CD86、 HLA-DR等分子表达.结果: 细胞因子IFN-γ、 TNF-α、 IFN-α对单核细胞形态、生长及表型转化有不同影响.IFN-γ促进单核细胞黏附聚集形成"细胞小岛结构", 刺激单核细胞形态向梭形及多角形转化; IFN-γ上调单核细胞表达CD80、 CD83、 CD86及HLA-DR分子, 同时下调CD14分子表达.结论: IFN-γ促进单核细胞向不典型的成熟DC方向分化.     

TNF-α对小鼠腹腔渗出细胞抗真菌活性的影响

目的：研究TNF—α对小鼠腹腔渗出细胞的激活和杀菌活性的效应。方法：以IL-12、IL-18、IFN—γ、TNF-α及抗体诱导小鼠腹腔渗出细胞和巨噬细胞，应用ELISA法测定细胞因子变化，Griess反应法测定培养上清液中NO的含量，检测巨噬细胞内新型隐球菌菌落数。结果：IL-12和IL-18联合应用协同诱导腹腔渗出细胞产生TNF—α，且能被IFN—γ抗体所抑制。IFN—γ、TNF-α协同诱导巨噬细胞产生NO和增强其杀伤新型隐球菌活性。结论：TNF—α在细胞因子相互调节诱导增强巨噬细胞杀真菌活性中起重要作用。     

甘草甜素对C57BL/6小鼠脾脏中DC和巨噬细胞及其细胞因子分泌的影响

为探讨甘草甜素(glycyrrhizic acid,GA)对C57BL/6小鼠脾脏DC和巨噬细胞数量及其细胞因子分泌的影响,研究将小鼠分为对照组和GA组,后者连续4 d同一时间皮下注射GA,对照组给予等量生理盐水注射。8 d后处死两组小鼠并分离脾脏,制备单细胞悬液,FACS检测DC、巨噬细胞及其表型IFN-γ、IL-12、IL-10的百分比。结果显示,GA组小鼠脾脏中DC[(0.92±0.15)%]以及DC表达的细胞因子IL-12[(1.15±0.50)%]、IFN-γ[(1.84±1.25)%]与对照组[(1.06±0.14)%、(1.16±0.41)%、(2.12±1.03)%]相比均呈现出减少的趋势,但差异没有统计学意义(P 0.05);而DC表达的IL-10 [(0.40±0.07)%]与对照组[(0.20±0.04)%]相比明显升高(P0.01);脾脏中巨噬细胞[(2.35±0.48)%]较对照组[(1.43±0.06)%]明显升高(P0.01);巨噬细胞表达的细胞因子IFN-γ[(2.02±0.23)%]、IL-12 [(0.74±0.24)%]与对照组[(2.55±0.6)%、(1.31±0.20)%]相比均明显减少(P0.05),巨噬细胞表达的细胞因子IL-10[(0.50±0.05)%]较对照组[(0.35±0.05)%]明显升高(P0.05)。由此,文章认为C57BL/6小鼠给予GA后,可在一定程度上提高脾脏中巨噬细胞及其表达的IL-10水平和降低其表达的IFN-γ、IL-12水平,也可提高DC表达的细胞因子IL-10的水平,这提示GA在机体固有免疫反应中起一定的双向调节作用,其主要通过提高巨噬细胞百分比发挥免疫作用,以及通过抑制巨噬细胞的细胞因子IFN-γ、IL-12表达和提高其与DC表面负性因子IL-10的表达发挥负性调节作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对IFN-γ/LPS刺激的小鼠髓源性巨噬细胞极化的影响

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对IFN-γ/LPS刺激的小鼠髓源性巨噬细胞促炎细胞因子表达的影响。方法:取6~8周龄C57BL/6小鼠骨髓细胞,经100 ng/ml巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)体外诱导分化为骨髓巨噬细胞(BMDM),加入50 ng/ml干扰素γ(IFN-γ)和1μg/ml细菌脂多糖(LPS)刺激,并同时暴露于12.5~50μmol/L EGCG处理48 h,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测巨噬细胞促炎细胞因子IL-1β、TNF-α和i NOS的mRNA表达水平和蛋白含量。结果:IFN-γ和LPS处理可刺激巨噬细胞IL-1β、TNF-α和i NOS表达显著上调,而EGCG则能抑制IFN-γ和LPS刺激的IL-1β、TNF-α和i NOS表达,且存在剂量依赖性。结论:EGCG能够减弱IFN-γ和LPS刺激的髓源性巨噬细胞的促炎作用。     

托法替尼对人外周血T细胞和单核细胞细胞因子分泌的不同免疫调节作用的体外研究

目的观察托法替尼(tofacitinib)对人外周血中单个核细胞(PBMCs)和纯化CD14+单核细胞分泌细胞因子的作用。方法本研究采集健康志愿者或幼年特发性关节炎患儿肝素抗凝静脉血,Ficoll密度梯度离心法分离PBMCs并纯化CD14+单核细胞,应用抗CD3抗体联合CD28抗体、LPS或CPG进行刺激,加或不加入托法替尼培养,检测IFN-γ、IL-1β和IL-6的产生。结果在健康志愿者和幼年特发性关节炎患儿中,托法替尼都可以抑制PBMCs产生IFN-γ,但促进PBMCs产生IL-1β和IL-6;进一步研究的结果表明托法替尼促进纯化CD14+单核细胞分泌IL-1β和IL-6。结论托法替尼抑制T细胞IFN-γ的产生,但促进单核细胞IL-1β和IL-6的分泌,提示托法替尼对T细胞和单核细胞细胞因子分泌存在相反作用。不同类型JIA的发病机制涉及不同的免疫细胞,因此,需要进一步研究托法替尼对各型JIA的疗效是否存在差异,以期为托法替尼的临床应用提供参考。     

IFN-γ上调的单核细胞表面MHC-I类链相关分子促进NK细胞活化

目的:研究IFN-γ诱导上调表达的单核细胞MHC-I类链相关分子(MICs)分子对NK细胞的活化作用.方法:采用密度梯离离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC),以免疫磁珠法从PBMC中特异性分选单核细胞及NK细胞,以细胞因子IFN-γ、TNF-α刺激单核细胞后,再将单核细胞与NK细胞共培养,以流式细胞术(FCM)检测NK细胞表面CD69分子及胞内IFN-γ表达,以51Cr释放试验检测NK细胞对K562细胞的杀伤效应.结果:IFN-γ上调人单核细胞表面MICs表达;IFN-γ刺激的单核细胞能促进异体NK细胞CD69及胞内IFN-γ表达,能增强NK细胞对K562细胞的杀伤效应;单核细胞的这种效应至少部分依赖于IFN-γ上调的MICs分子,因为用抗MIC抗体封闭或用细胞小室阻断细胞接触,可以明显地抑制NK细胞的活化.结论:IFN-γ上调人单核细胞表面MICs分子介导了NK细胞的活化.