一氧化氮合酶在不同年龄大鼠睾丸中的表达

目的研究一氧化氮合酶(NOS)在不同年龄大鼠睾丸中的表达情况，探讨NO在睾丸生殖功能中的作用。方法将健康雄性Wistar大鼠按月龄分为成年组和未成年组，4％多聚甲醛灌流固定，取大鼠睾丸，常规石蜡切片，免疫组化SABC法检测NOS在不同年龄大鼠睾丸中的表达。结果成年组大鼠睾丸间质细胞和间质血管中均有nNOS、iNOS和eNOS阳性物质表达，生精小管周围肌样细胞和腔面精子可见nNOS阳性物质；未成年组大鼠睾丸间质血管中偶见iNOS和eNOS阳性物质表达。结论3种NOS在睾丸中均有表达，但定位不同，且与年龄相关。     

一氧化氮合酶和鸟苷酸环化酶在人眼睫状体和小梁网中的表达

目的：研究神经元型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase , nNOS）,诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase , iNOS）,内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase , eNOS）及鸟苷酸环化酶（guanylyl cyclase , GC）在正常人眼睫状体小梁网和Schlemm’s管上的表达及其分布。 方法：收集12例角膜移植后残余的眼球组织（排除其它眼部异常）,10例眼球组织常规石蜡包埋切片,2例眼球取睫状体组织行Western blot分析。切片脱色素后以免疫组织化学EnVision/HRP二步法检测nNOS﹑iNOS﹑eNOS及GC在睫状体上皮细胞中的表达,以磷酸缓冲液代替上述各种一抗作为阴性对照。睫状体组织提取蛋白质后Western blot法检测nNOS﹑iNOS﹑eNOS及GC的表达。 结果：三种一氧化氮合酶及GC在睫状体上皮细胞、睫状肌、小梁网以及Schlemm’s管内皮细胞中均有表达。在睫状体上皮细胞中,nNOS主要表达在色素上皮和非色素上皮细胞胞浆的交界处。Western blot法证实nNOS﹑iNOS﹑eNOS及GC蛋白在睫状体中的表达。 结论：正常人眼睫状突上皮细胞、小梁网和Schlemm’s管内皮细胞中,三种NOS及GC均有表达,提示一氧化氮/环鸟苷酸（NO/cGMP）信号通路可能参与人眼房水生成和排出过程。     

转化生长因子 β1 在大鼠睾丸及附睾中的表达研究

目的 通过研究转化生长因子（TGFβ1）在大鼠睾丸、附睾中的表达特征,探讨其在男性生殖系统中的作用.方法 用免疫组化SP法检测TGFβ1蛋白在青春期SD大鼠睾丸、附睾中的表达与定位.结果 TGFβ1在大鼠睾丸和附睾中都有特征性表达.TGFβ1蛋白在睾丸内表达于生精细胞、精子细胞、支持细胞和间质细胞胞质及顶体;附睾中表达于主细胞胞质内,附睾上皮亮细胞、晕细胞和基细胞中均为阴性.结论 大鼠睾丸、附睾中TGFβ1蛋白的特征性表达提示,它们可由不同生精上皮细胞、间质细胞和附睾主细胞产生,可能以自分泌或旁分泌的形式作用于生殖细胞或间质细胞,直接或间接地影响精子的发生、发育和成熟过程,并与精子的活动和受精能力有关.     

NO／iNOS与炎性子宫内膜出血的研究进展

一氧化氮（NO）是一种高活性自由基，由一氧化氮合酶（NOS）催化精氨酸生成，参与体内多种生理和病理过程。NOS有3种亚型：神经型NOS（nNOS Ⅰ型）、诱导型NOS（iNOSⅡ型）和内皮型NOS（eNOSⅢ型）。子宫内膜组织主要表达eNOS和iNOS，它所产生的NO的量较eNOS所产生的NO量多且炎症时细胞因子大量分泌可诱导iNOS的表达。本论文主要对NO／iNOS对炎性子宫内膜出血的影响进行总结。     

小鼠神经干细胞中一氧化氮合酶的表达

目的：体外分离、培养和鉴定胎小鼠神经干细胞（NSC）并检测其一氧化氮合酶（NOS）的表达，为进一步阐明NOS在NSC中的作用奠定基础。方法：利用含EGF的条件培养基，从胚胎小鼠大脑皮层中分离并体外培养胎小鼠NSC，在含胎牛血清的培养基中诱导其分化；用充纯氮气的方法造成细胞缺氧，观察缺氧对NOS的诱导作用；免疫组织化学方法检测细胞中nestin,nNOS,eNOS和iNOS的表达。结果：原代培养的细胞具有连续增殖并形成克隆的能力，在含血清的培养基中能分化为神经元及神经胶质细胞样细胞；免疫组化nestin,nNOS和eNOS在一般培养条件下呈阳性表达，而iNOS呈阴性表达，经充氮气缺氧诱导后，iNOS呈阳性表达。结论：成功分离并培养小鼠NSC；发现不同亚型的NOS在NSC不同培养条件下有不同的表达。     

慢性鼻炎鼻黏膜中一氧化氮合酶的表达

目的 :比较正常鼻黏膜和慢性鼻炎鼻黏膜中一氧化氮合酶 (NOS)的分布 ,探讨NOS与慢性鼻炎的关系。方法 :应用还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸磷酸 -黄递酶 (NADPH -d)组织化学染色与免疫组织化学技术 ,测定内皮型NOS(eNOS)和诱导型NOS (iNOS)在正常组和慢性鼻炎组鼻黏膜中的分布和表达。结果 :eNOS免疫组化显示正常鼻黏膜和慢性鼻炎鼻黏膜NOS均呈阳性反应 ,主要分布于表层上皮细胞 ,血管内皮细胞胞浆 ;iNOS免疫组化则显示慢性鼻炎表层上皮细胞 ,血管内皮细胞胞浆NOS阳性 ,部分炎性细胞亦呈阳性反应 ;而正常鼻黏膜NOS呈阴性。酶组织化学染色显示 ,NOS有同样的分布部位。结论 :正常鼻黏膜存在NOS分布 ,慢性鼻炎鼻黏膜中iNOS活性明显高于正常 ,由iNOS产生的NO和慢性鼻炎的鼻分泌物增多和黏膜水肿有关     

一氧化氮合酶在糖尿病大鼠视网膜中表达模式的研究

目的 研究一氧化氮合酶(NOS)在8周糖尿病大鼠视网膜的表达,探讨其与一氧化氮在糖尿病视网膜病变(DR)中可能的分子作用机制.方法 采用限制片段差异显示PCR(RFDD-PCR)技术建立正常和8周糖尿病大鼠视网膜基因表达谱,经生物信息学分析两者差异,初步确定NOS三种亚型-eNOS、nNOS和iNOS为DR相关基因,并以半定量RT-PCR和免疫组化方法进行验证.结果 RFDD-PCR结果显示,糖尿病组eNOS和nNOS表达下调,iNOS表达上调.RT-PCR结果显示,糖尿病组eNOS和nNOS表达比正常组明显降低(eNOS:0.23±0.03,0.32±0.03,P＜0.05;0.25±0.02,0.36±0.02,P＜0.05),iNOS比正常组明显增高(0.27±0.02,0.20±0.03,P＜0.05).免疫组化结果显示,正常组eNOS、nNOS和iNOS阳性细胞均见于内核层(INL)和节细胞层(GCL),eNOS阳性细胞也分布于血管内皮层;糖尿病组eNOS和nNOS阳性细胞较正常组明显减少(eNOS:14.33±3.19,22.13±3.60,P＜0.05;nNOS:21.87±3.62,34.40±7.09,P＜0.05),iNOS较正常组明显增多(17.60±2.58,11.73±2.70,P＜0.05).结论 eNOS、nNOS和iNOS表达变化与DR发生发展有关.     

iNOS在大鼠性成熟期睾丸组织的表达变化及意义

目的：探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在雄性SD大鼠性成熟期睾丸中的表达变化情况及意义。方法：选取出生后5周、7周和10周的雄性SD大鼠各6只,左侧睾丸行石蜡切片,运用免疫组化ABC法观察iNOS在雄性SD大鼠性成熟期睾丸中的表达变化情况。结果：1出生后5周,iNOS睾丸间质细胞阴性表达。2出生后7周,绝大部分生精小管断面有精子发生,iNOS睾丸间质细胞弱阳性表达,精母细胞阳性表达。3出生后10周,iNOS睾丸间质细胞强阳性表达,精母细胞阳性表达。结论：在雄性SD大鼠的睾丸间质细胞中,随着性成熟发育iNOS的表达渐强。     

胃癌中微血管密度及VEGF、NOS表达与肿瘤浸润、转移的相关性

目的:研究胃癌组织中微血管密度(MVD)的分布,血管内皮生长因子(VEGF),一氧化氮合酶(NOS)的表达及与肿瘤病理特征间的关系,探讨MVD、VEGF、NOS在胃癌浸润、转移中的意义及其间的相关性。方法:应用免疫组化SP法检测56例手术切除人胃癌组织石蜡包埋标本的VEGFi、NOS、eNOS、nNOS的蛋白表达,对肿瘤微血管以CD34抗体染色并检测MVD。结果:56例胃癌组织MVD值平均为36.25±6.32;VEGFi、NOS、eNOS、nNOS的阳性表达率分别为69.6%、75.0%、80.4%、83.9%;不同浸润深度、淋巴结转移程度及TNM分期的胃癌中MVD值的差异分别有统计学意义(P<0.01);VEGFi、NOS、eNOS、nNOS的表达随胃癌浸润深度的加深,淋巴结转移程度的提高而上调(分别为P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01);VEGFi、NOS阳性表达胃癌组织中的MVD值高于阴性表达者(分别为P<0.05,P<0.01);VEGF及iNOS表达均阳性者34例,VEGF表达阳性,iNOS表达阴性者5例,两者表达均阴性8例,iNOS的表达与VEGF表达有关(P<0.01)。结论:随着胃癌浸润,转移程度进展,肿瘤MVD值增高,VEGF、NOS的表达上调;胃癌中VEGF及iNOS的表达与肿瘤MVD有关,提示VEGF及iNOS在胃癌生长,浸润及转移中促进肿瘤新生血管形成;iNOS表达与VEGF表达有关,VEGF可能通过增加iNOS的表达促进肿瘤微血管形成。     

子宫内膜异位症中上皮型及诱生型一氧化氮合成酶的表达和意义

目的：检测上皮型一氧化氮合成酶（eNOS)及诱生型一氧化氮合成酶（iNOS)在异位子宫内膜腺上皮细胞中的表达,探讨NO／NOS卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌病中的作用。方法：应用免疫组织化学SP法检测异eNOS和iNOS71例异位子宫内膜和32例正常子宫内膜中的表达。结果：eNOS在子宫内膜腺上皮细胞的增生期表达较低,分泌期较高。iNOS在正常子宫内膜中的表达未见明显变化;异位子宫 内膜中的eNOS和iNOS的表达在增生期和分泌期均明显高于正常对照组;eNOS在子宫腺肌病组的表达高于卵巢子宫内膜异位位组,而iNOS的表达无差异;痛经组iNOS的表达明显高于无痛经组,而eNOS的表达无差异性。结论：eNOS和iNOS在异位子宫内膜中呈持续性过强表达,提示NO／NOS可能与卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌病的发病及进展有关。     

骨桥蛋白在雄性小鼠生殖系统中的表达及意义

目的:检测骨桥蛋白(OPN)在小鼠睾丸、附睾、精子中的表达,探讨其意义。方法:用免疫组织化学方法检测OPN在正常小鼠睾丸及附睾中的表达情况,免疫细胞荧光法检测OPN在小鼠精子中的表达情况,分析OPN与雄性小鼠生殖能力的关系。结果:OPN在小鼠睾丸、附睾组织及精子上均具有特征性表达。在睾丸中,OPN表达于Sertoli细胞、Leydig细胞以及各级生精细胞,尤其是精原细胞、精子细胞和精子的胞质中;附睾内,OPN的表达主要见于各段上皮主细胞胞质中,部分基细胞、亮细胞中也可见到免疫阳性反应。并且附睾头部的免疫阳性染色相对较弱;免疫荧光染色则将OPN定位于附睾尾精子的顶体帽区及鞭毛。结论:小鼠睾丸、附睾及精子中均存在OPN的特异性表达,OPN可能参与精子的发生及成熟过程,并与精子的活力和受精能力密切相关。     

不同运动负荷对大鼠心肌组织一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的 测定不同运动负荷对大鼠心肌组织NO含量、总 NOS和nNOS、eNOS、iNOS活性,探讨一氧化氮在运动中对机体的影响.方法 60只雄性SD大鼠分为3组,每组20只：即安静对照组,中等运动强度运动组、运动疲劳组.采用生化试剂盒测定心肌组织NO含量、总NOS和nNOS、eNOS、iNOS活性.结果 同安静对照组比较,进行中等强度运动和疲劳运动后,心肌中NO和NOS总含量有上升趋势.大鼠进行中等强度运劝后心肌组织的eNOS、nNOS活性水平较安静对照组比较稍升高,而疲劳运动后则稍下降.大鼠进行中等强度运动和疲劳运功后心肌组织的iNOS活性水平显著升高（P〈O.01）.结论 中等强度运动和疲劳运动后,大鼠心肌中NO和NOS总含量有上升趋势;中等强度运功后大鼠心肌组织的eNOS、nNOS活性稍升高,而疲劳运动后则稍下降.大鼠进行中等强度运动和疲劳运动后心肌组织的iNOS活性水平显著升高.     

外源性褪黑激素对小鼠睾丸和附睾一氧化氮合酶分布的影响

目的 观察外源性褪黑激素(MT)对睾丸和附睾一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法 HE染色，免疫组化SABC法测定三种NOS的分布情况。结果 三种NOS主要分布于Leydig细胞，其中NOS1阳性细胞最多，20～30d处理组的阳性细胞数总体多于30～40d处理组，但呈被MT抑制的趋势；30～40d处理组则相反。在MT注射组中附睾上皮出现三种NOS阳性细胞，间质微血管内皮出现NOS3阳性细胞。少数精母细胞呈NOS阳性。结论 褪黑激素性成熟前抑制NOS在Leyd追细胞中的功能表达，性成熟期则刺激NOS在睾丸和附睾中的功能表达；NOS与雄性激素的分泌和精子功能的成熟有关。     

一氧化氮合酶在人子宫内膜和蜕膜的表达

为探讨一氧化氮（NO）在子宫内膜功能性活动中所发挥的作用,应用免疫组织化学技术检测人增生期,分泌期子宫内膜及早孕期蜕膜内皮型一氧化氮合酶（eNOS)和诱导型一氧化氮合(iNOS)的表达模式,结果发现,（1）增生期：仅内膜血管内皮细胞表达eNOS,iNOS不表达于内膜的任何组份,（2）分泌期：两种NOS都表达了子宫内膜的腺上皮和腔上皮,子宫内膜间质细胞未检测到NOS,（3）蜕膜组织,蜕膜组织腺上皮和腔上皮eNOS和iNOS的表达显增强,并且蜕间质细胞表达iNOS。分泌期子宫内膜和蜕膜表达eNOS和iNOS增加,表明此时NO的产量增多,而O又可能通过其扩张血管,松驰平滑肌和促凋亡的作用参与胚胎着床的发生和月红的形成。     

香烟烟雾致睾丸氧化应激损伤与iNOS表达的关系

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在香烟烟雾致睾丸生殖细胞氧化应激损伤中的关系以及抗氧化治疗的作用。方法:21只8周龄健康雄性SD大鼠制作吸烟染毒模型,随机平均分为3组:对照组(A)、吸烟组(B)、抗氧化治疗组(C)。测定睾丸组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)及iNOS的含量。结果:吸烟组睾丸组织匀浆SOD、CAT活性增高,GSH-Px活性降低,MDA、NO含量增高,对照组与抗氧化组两者无差别。光镜下见吸烟组睾丸生精小管上皮细胞排列紊乱,生精细胞数量减少,小管腔内精子数量罕见,对照组与抗氧化组两者区别不大。免疫组织化学方法可见吸烟组大鼠睾丸的初、次级精母细胞中iNOS蛋白强阳性表达,在对照组与抗氧化组大鼠睾丸的初、次级精母细胞中iNOS蛋白呈弱阳性表达。结论:吸烟可导致大鼠睾丸氧化应激损伤;iNOS蛋白表达增加可能在吸烟引起睾丸生精上皮细胞氧化应激损伤中发挥重要作用;抗氧化治疗可减少iNOS蛋白在睾丸生精上皮细胞的表达,可减轻吸烟引起睾丸生精上皮细胞的氧化应激损伤。     

一氧化氮合酶与脑缺血亚急性期神经损伤的关系

目的 探讨大鼠脑缺血亚急性期脑力内三型一氧化氮合酶（NOS）的表达及其与经济损伤的关系。方法 采用大鼠大脑中动脉缺血模型，用免疫组织化学方法检测局灶性脑缺血24h三型NOS在脑内的表达。结果 局灶性脑缺血24h，缺血中心区及部分边缘区内可见大量诱导型一氧化氮合酶（iNOS）阳性的胶质细胞浸润。表达神经元型一氧化氮合酶（nNOS）及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的神经细胞数减少。结论 脑缺血亚急性期胶质细胞iNOS表达上调与迟发性神经元损伤有密切关系。在此期给予选择性iNOS抑制剂可以减少缺血性损害。     

复合辅酶对大鼠单侧睾丸扭转复位后健侧睾丸生精功能的影响

目的：探讨复合辅酶对大鼠单侧睾丸扭转复位后健侧睾丸的组织学以及附睾精子生成的影响.方法：将30只健康雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组（A组）、睾丸扭转复位组（B组）、复合辅酶处理组（C组）,B、C组大鼠按Turner法制作睾丸扭转模型,A组将睾丸游离后不扭转睾丸;C组于睾丸扭转复位前60 min腹腔注射复合辅酶（10 u/kg）,同时在术后注射复合辅酶10 u/（kg＆#183;d）3 d;各组喂养至术后4周时处死,取健侧睾丸标本行组织病理学观察,同时取健侧附睾尾部行精子计数及活动率检测,检测睾丸组织超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）水平.结果：B组、C组与A组相比生精细胞结构有破坏,精子计数以及精子活率降低,SOD、NOS、MDA水平升高;C组与B组相比,生精上皮层数增多,平均曲细精管直径（MSTD）增大,同时附睾精子计数与活动率明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）,且C组大鼠睾丸组织SOD水平升高,NOS、MDA水平降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：复合辅酶能够减轻大鼠单侧睾丸扭转复位后健侧睾丸组织损害,使附睾精子生成显著增多,其机制可能与减少大鼠睾丸组织内自由基生成,提高其抗自由基能力有关.     

脑缺血/再灌注前后一氧化氮合酶在脑皮质中的表达

目的观察小鼠脑缺血/再灌注(CIR)前后一氧化氮合酶(NOS)的3个亚型:神经元型(nNOS)、诱导型(iNOS)和内皮型(eNOS)在小鼠脑皮质中的变化,探讨NOS在CIR损伤后的不同作用。方法健康雄性ICR小鼠32只,随机分为假手术组(n=16)和短暂性大脑中动脉闭塞再灌注(tMCAO)模型组(n=16)。tMCAO模型组采用改良的线栓法制作,再灌注24 h后应用氯化三苯四氮唑(TTC)染色测量梗死体积,应用免疫组织化学法观察各组小鼠脑皮质中nNOS、iNOS和eNOS的表达。结果假手术组nNOS、iNOS和eNOS在脑皮质中少量表达,与假手术组比较,tMCAO组小鼠脑梗死体积明显增加;脑皮质区nNOS、iNOS和eNOS阳性细胞数均显著增多(P<0.05)。结论小鼠CIR损伤后,nNOS和iNOS表达的增加可以引起神经损伤,而eNOS表达的增加,可能发挥神经保护作用。     

不同运动强度影响大鼠脑缺血后神经功能修复机制的研究

目的探讨不同运动强度影响大鼠局灶性脑缺血后神经功能修复的机制。方法应用线栓法建立局灶性脑缺血SD大鼠模型,随机分为有氧运动组、疲劳运动组和对照组,每组8只,共24只;实施不同运动强度后评估每组大鼠神经功能缺失,透视电镜观察缺血神经细胞超微结构;测定缺血区域一氧化氮（NO）的含量和一氧化氮合酶（NOS）的活性;RT-PCR半定量分析缺血区域内皮细胞型一氧化氮合酶（eNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和神经元型一氧化氮合酶（nNOS）基因表达。结果对照组神经功能缺失评分高于有氧运动组,低于疲劳运动组,j组之间差异均有统计学意义（P〈0．05）;透视电镜发现对照组细胞形态和核不规则,有氧运动组细胞形态结构和细胞器完整,疲劳运动组细胞核分裂,线粒体肿胀;有氧运动组和疲劳运动组NO含量、NOS的活性以及eNOS、nNOS、iNOS基因表达量均高于对照组,NOS在有氧运动组和疲劳运动组中分别以eNOS和iNOS表达显著,所测指标在各组之间的差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论NO和NOS在脑缺血神经功能修复中发挥神经修复和神经毒性双重作用,有氧运动能够增强局部脑缺血区血液循环,促进神经修复,而疲劳运动促进NO和NOS过表达,产生局部神经毒性作用。     

一氧化氮合酶在恶性黑素瘤皮损中的表达

目的研究神经型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在皮肤恶性黑素瘤与色素痣中的表达,并探讨其意义。方法应用免疫组化方法检测43例恶性黑素瘤nNOS、iNOS和eNOS的表达。结果①nNOS在黑素瘤细胞中表达率67.44％,在色素痣细胞中表达率20％,其中在原发无转移的黑素瘤中,阳性表达17例,阴性表达9例;转移的黑素瘤中,阳性表达12例,阴性表达5例。②iNOS在黑素瘤细胞中表达率76．74％,在色素痣细胞中表达率90％,其中在原发无转移的黑素瘤中,阳性表达16例,阴性表达10例;有转移的黑素瘤中,阳性表达17例,无阴性表达。③eNOS在黑素瘤细胞中表达率72．09％,在色素痣细胞中表达率80％。其中原发无转移的黑素瘤中,阳性表达15例,阴性表达11例;有转移的黑素瘤中,阳性表达16例,阴性表达1例。结论①nNOS在黑素瘤细胞与色素痣细胞中的阳性表达率具有显著差异,可作为鉴别良恶性黑素细胞肿瘤的指标之一。②iNOS和eNOS在恶性黑素瘤转移中起促进作用。