戊四氮致痫大鼠脑GFAP的变化及甜菜碱的干预作用

目的:观察戊四氮致痫大鼠脑神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)变化及甜菜碱的干预治疗,研究癫痫的发病机理及甜菜碱的作用机制.方法:健康雄性的Wistar实验大鼠共24只,按体重随机分为正常对照组、癫痫模型组、甜菜碱干预组,每组8只.模型组和甜菜碱干预组均以致痫亚惊厥剂量的戊四氮(PTZ)腹腔注射点燃Wistar大鼠模型.在低温条件下迅速取脑,通过免疫组化检测大鼠脑GFAP的变化.结果:实验性癫痫大鼠模型复制成功,甜菜碱组和癫痫模型组的实验大鼠均已达到点燃标准,与癫痫组动物相比,甜菜碱组大鼠潜伏期明显延长,但持续时间之间的差别没有显著性.免疫组化检测实验结果表明:癫痫模型组脑GFAP含量比正常对照组增加,差异具有显著性(P＜0.05);甜菜碱组脑GFAP含量与癫痫模型组比较,差异有显著性(P＜0.05).结论:甜菜碱能够降低GFAP的表达从而减轻癫痫发作,维持神经元存活起到抗癫痫作用.     

灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠大脑皮质及海马区PCNA变化的影响

目的：探讨灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致痫大鼠大脑皮质及海马区增殖细胞核抗原（PCNA）变化的影响,进一步研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的干预机制。方法：免疫组织化学法（SABC法）检测皮质和海马区PCNA的免疫反应性;Western-blot检测海马区PCNA蛋白含量的变化。结果：癫痫模型组PCNA阳性细胞数目明显增多与对照组比较差异有显著性（P〈0.01）,灵芝孢子粉干预组与癫痫模型组比较PCNA阳性细胞数明显减少差异有显著性（P〈0.01）;PCNA在戊四氮致痫组的大脑海马区的蛋白含量与对照组比较差异有显著性（P〈0.01）,灵芝孢子粉干预组与癫痫模型组比较差异有显著性（P〈0.01）。结论：灵芝孢子粉可以通过调节PCNA含量抑制星形胶质细胞（AS）增生,从而影响戊四氮致痫大鼠癫痫发作的发生与发展。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠海马区TNF-α、ET-1影响的研究

目的：观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致痫大鼠海马区肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、内皮素-1（ET-1）含量变化的影响。方法：用亚惊厥刑量的戊四氮（PTZ）复制慢性癫痫模型,用药组以灵芝孢子粉灌胃,记录癫痫发作的级别及潜伏期,并采用放射免疫法检测各组海马区TNF—α、ET-1的含量。结果：癫痫模型组与正常对照组相比,TNF—α、ET-1的含量明显增高（P〈0．01）;灵芝孢子粉组与癫痫模型组相比,造模第17、21、25天时癫痫发作的潜伏期二者差异有显著性（分别为P〈0．05;P〈0．05;P〈0．01）,TNF—α、ET-1的含量明显降低（P〈0．05）。结论：TNF—α、ET-1可能参与了PTZ致痫的发生发展过程,灵芝孢子粉能明显减弱TNF—α、ET-1过度表达对癫痫大鼠中枢神经系统的毒性损害,可能是通过调节神经系统免疫炎症反应而实现的,对癫痫发作导致的神经细胞损伤具有保护作用。     

灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠脑组织BDNF表达的影响

目的:观察使用灵芝孢子粉后,癫痫点燃大鼠模型皮质和海马区脑源性神经营养因子(BDNF)的含量及神经元形态学的改变,探索癫痫发病机制以及灵芝孢子粉对癫痫的干预作用.方法:采用戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型,并将其分为空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉组,点燃后断头取脑,免疫组化染色观察BDNF含量的变化及神经元形态学的改变.结果:所有大鼠均达到癫痫模型点燃标准.使用灵芝孢子粉的中药干预组与癫痫模型组相比,脑内BDNF含量明显升高,同时神经元形态学改变明显好转.结论:灵芝孢子粉能够增强脑源性神经营养因子的表达,从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤,所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用.     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑电图、IL-10影响的探讨

目的:观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮(PTZ)致痫大鼠脑电图、细胞因子IL-10含量变化的影响.方法:10周龄Wistar雄性大鼠30只,体重150～220g,随机分成3组,每组10只,分别是空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉组.点燃后各组大鼠描记脑电图,低温条件下迅速断头取脑,用放射免疫法测定血清及脑组织细胞因子IL-10含量变化.结果:灵芝孢子粉组与癫痫模型组相比血清及脑组织IL-10明显降低(P＜0.05).结论:灵芝孢子粉能有效降低癫痫大鼠血清及脑组织细胞因子IL-10水平,纠正免疫失调而起到抗癫痫的作用.     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠皮质和海马区NMDAR1免疫反应影响的研究

目的:观察灵芝孢子粉对癫痫大鼠模型皮质和海马区NMDAR1含量及神经元形态学的影响,探索癫痫发病机制以及灵芝孢子粉对癫痫的干预作用.方法:采用戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型,并将其分为空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉干预组,点燃后断头取脑,行免疫组化染色观察NMDAR1含量的变化及神经元形态学的改变.结果:所有大鼠均达到癫痫模型点燃标准.使用灵芝孢子粉的中药干预组与癫痫模型组相比,脑内NMDAR1含量明显下降(P<0.05),同时神经元形态学改变明显好转.结论:灵芝孢子粉能够有效降低皮质和海马区兴奋性氨基酸受体NMDAR1的含量,使神经元兴奋性减弱,抑制癫痫的发作,从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤, 以达到抗癫痫作用.所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用.     

同病异治复方对戊四氮慢性点燃大鼠痫性发作的影响

目的:研究癫痫"从肝论治"、"从痰论治"的复方柴胡疏肝汤及定痫丸对戊四氮(PTZ)慢性点燃大鼠痫性发作的影响。方法:建立大鼠PTZ慢性点燃的癫痫模型,选取完全点燃大鼠随机分为4组,即生理盐水组(A组)、丙戊酸钠组(B组)、定痫丸组(C组)、柴胡疏肝汤组(D组),连续灌胃给药28天,于给药第7、14、21及28天观察大鼠阵发性痉挛发作潜伏期、痫性发作级别以及强直性惊厥发生率。结果:C组与D组在各用药时间点均能不同程度延长PTZ慢性点燃大鼠的阵发性痉挛发作潜伏期,与A组相比有显著性差异(P<0.05或P<0.01),与B组作用相当(P>0.05),而C组与D组无显著性差异(P>0.05)。结论:癫痫"从肝论治"的复方柴胡疏肝汤、"从痰论治"的复方定痫丸均能明显抑制PTZ致痫大鼠的痫性发作,有明显的抗癫痫作用,但两复方在时效关系中可能存在差异。     

环孢素A对戊四氮致痫过程中大鼠海马GFAP的干预研究

目的:研究环孢素A对戊四氮致痫过程中大鼠海马GFAP的影响,并观察大鼠癫痫发作行为变化.方法:72只大鼠随机分为空白对照组(N组)24只,非药物干预组(P组)24只和药物干预组24只(C组);P组和C组于每日给予腹腔注射戊四氮30mg/kg;同时C组每隔两日给予尾静脉注射环孢素A10mg/kg.采用免疫组化方法观察胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)于4d、7d、14d的增生变化;同时观察各组大鼠癫痫发作的时间、发作级别和发作次数.结果:P组大鼠在4d、7d、14d各时间点均未出现癫痫发作时,已经出现胶质细胞增生,并且随着时间的增加胶质细胞增生的程度逐渐升高,与空白对照组(N)比较有显著性差异(P＜0.01);与C组比较有显著性差异(P＜0.01);C组大鼠在4d、7d、14d各时间点也均未出现癫痫发作,随着时间的增加胶质细胞增生的程度也逐渐升高,但胶质细胞增生的程度明显低于P组,与P组对应时间点比较,有显著性差异(P＜0.01);C组大鼠各时间点胶质细胞增生的程度与N组比较也有显著性差异(P＜0.05).结论:环孢素A干预后大鼠海马星形胶质细胞增生程度降低,减低了大鼠癫痫发作的级别和次数,延迟癫痫发作时间,因此环孢素A具有预防癫痫发作的作用.     

尼莫地平对癫痫大鼠海马突触后致密物95表达的影响

目的探讨尼莫地平(nimodipin,NIM)对戊四氮(Pen-tylenetetrazol,PTZ)点燃癫痫大鼠空间学习记忆能力及海马突触后致密物95(postsynaptic density95,PSD-95)表达的影响。方法动物分为正常对照组、PTZ组和NIM组,采用PTZ慢性点燃癫痫模型,应用Morris水迷宫观察各组大鼠空间学习记忆能力,Western blot及反转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测各组大鼠海马PSD-95蛋白和PSD-95 mRNA的表达。结果PTZ致痫组大鼠空间学习记忆能力受损,其海马PSD-95蛋白水平及PSD-95 mRNA表达较对照组明显减少(P<0·05);与PTZ组比较,NIM组大鼠空间学习记忆能力好转,其海马PSD-95蛋白水平及PSD-95 mRNA表达均升高(P<0·05)。结论PTZ点燃癫痫大鼠存在空间学习记忆受损,可能与PSD-95表达减少有关;NIM可以提高PSD-95的表达,改善癫痫大鼠的学习记忆能力。     

脑源性神经营养因子对戊四氮致癫痫大鼠海马神经肽Y表达的影响

目的 研究侧脑室内注入脑源性神经营养因子(BDNF)对戊四氮(PTZ)致癫痫大鼠海马区神经肽Y(NPY)表达的影响.方法 采用PTZ制备大鼠癫痫模型.立体定向自侧脑室注入BDNF.免疫组化观察NPY在海马CA1 区的表达,放射免疫测定海马,皮层,下丘脑组织NPY匀浆浓度.结果 免疫组化显示点燃模型组阳性反应神经元增多,BDNF干预组阳性反应神经元明显增多.点燃模型组海马组织匀浆NPY的放射免疫测定浓度增高 (P＜0.05);BDNF干预组海马组织匀浆NPY的放射免疫浓度明显高于点燃模型组(P＜0.05).结论 NPY参与了癫痫的发病过程,BDNF可以增加脑组织NPY浓度.     

咪唑啉I2受体激动剂BU224对小鼠致痫作用研究

目的:本文主要探讨咪唑啉I2受体的高选择性激动剂BU224 对戊四氮(PTZ)诱导小鼠癫痫发作的协同作用研究.方法:成年C57B6L 小鼠40 只分为四组,第一组10 只,对照组10 只,第二组10 只,对照组10 只,两组分别腹腔注射BU224(18mg/Kg),对照组注射等量生理盐水.将小鼠分别置入树脂玻璃箱观察30Min 后,第一组和对照组腹腔注射PTZ(25mg/Kg);第二组和对照组注射PTZ(30mg/Kg)诱导其癫痫发作,观察其行为学改变.结果:咪唑啉I2受体激动剂BU224 注射组小鼠呈明显的阵发性肌痉挛,而对照小鼠无明显反应.再分别经过高低两浓度PTZ诱导癫痫,发现药物处理组用较低浓度PTZ 即可诱发癫痫发作,对照组却没有诱发癫痫发作;药物处理组和对照组用较高浓度PTZ 诱发癫痫后,给药组发作等级明显高于对照组,潜伏期较对照组缩短且发作持续时间明显延长(P＜0.05).结论:I2受体激动剂BU224 有一定的至痫作用,或与戊四氮具有协同诱导癫痫的作用,其确切作用机制有待进一步研究.     

戊四氮慢性致痫大鼠海马区NF-kB、I-kBα动态表达及地塞米松的影响

目的:研究戊四氮慢性点燃大鼠即癫痫形成过程中海马区NF-Kb及其抑制蛋白I-kBα的动态变化及作用,并同时探讨地塞米松的抗痫作用机制.方法:将81只Wistar大鼠随机分为对照组(C),非用药组(P),用药组(D)即地塞米松干预组,除对照组外,均给予戊四氮(PIZ)35mg/kg·d腹腔注射.用免疫组织化学法检测不同时间点(4,7,11,15d)海马区NF-Kb、I-kBα的蛋白表达,同时行为学观察和脑电图确定痫性发作.结果:注射PIZ的各组大鼠海马区NF-Kb的表达随着注射时间逐渐增加,并于第15天达到高峰,且用药组相同时间点NF-Kb表达较非用药组减少(P<0.05); I-kBα蛋白量随着PTZ的注射逐渐减少(P<0.05),并于第15天降到最低,用药组相同时间I-kBα蛋白的减少较非用药组少(P<0.05);且地塞米松明显改善了大鼠点燃时的痫性发作程度,延长了发作潜伏期.结论:慢性癫痫的形成过程中海马区神经细胞中存在NF-Kb 的激活及其I-kBα的减少;NF-Kb介导了癫痫形成过程中的炎症反应过程,同时,地塞米松可能通过抑制NF-Kb活性发挥抗痫作用.     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑组织细胞因子IL-6的影响

目的:观察和探讨灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑组织细胞因子IL-6含量变化的影响。方法:10周龄Wistar雄性大鼠30只,体重(150±10)g,随机分成3组,每组10只,分别是灵芝孢子粉组、癫痫模型组和空白对照组。灵芝孢子粉组和癫痫模型组用戊四氮(PTZ)亚惊厥剂量(32mg/kg),每日1次,腹腔注射28d,停药1周,再用相同剂量的PTZ测试,凡显示连续5次2级以上惊厥的大鼠为达到点燃标准,空白对照组用同体积生理盐水腹腔注射。同时灵芝孢子粉组经灌胃给予灵芝孢子粉(灌胃前禁食6h),灌胃体积为1.0ml/次;癫痫模型组和空白对照组经灌胃给予同等体积的生理盐水。实验结束处死动物,在低温条件下迅速取出鼠脑,用放射免疫法测定脑组织细胞因子IL-6含量变化。结果:灵芝孢子粉组与癫痫模型组动物相比脑组织IL-6明显降低(P<0.05)。结论:灵芝孢子粉能够有效降低癫痫大鼠脑组织细胞因子IL-6水平,纠正免疫失调而起到抗癫痫作用。     

戊四氮慢性致痫大鼠海马区PPARγmRNA的表达及神经细胞损伤的影响

目的:探讨戊四氮慢性点燃大鼠在癫痫形成过程中海马区PPARγmRNA表达变化及神经细胞损伤,探讨PPARγ在癫痫发作后神经元炎症损伤的潜在作用机制。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为正常组、PTZ组,除正常组外均给予戊四氮(PIZ)35mg/kg·d腹腔注射,持续28d。实验结束后以RT-PCR法检测检测不同时间点(24h、48h、72h)海马区PPARγmRNA含量,同时尼氏染色观察海马组织形态变化。结果:通过RT-PCR及尼氏染色,PTZ组大鼠脑海马PPARγmRNA含量比正常对照组增高,注射PIZ的各组大鼠海马区PPARγmRNA的表达随着注射时间逐渐增加,尼氏染色显示PTZ组海马区炎症改变较正常组显著。结论:PPARγ低表达可能是癫痫发作后神经元炎症损伤的潜在机制之一。     

癫痫发作过程中细胞内钙、一氧化氮合酶与细胞凋亡的关系

目的 探讨癫痫发作过程中神经细胞内钙、一氧化氮合酶(NOS)与细胞凋亡的关系.方法 采用戊四氮(PTZ)致痫大鼠模型,分为对照组,致痫后30 min、1、3、6、12、24、48 h组,每组8只.流式细胞术检测细胞内钙和细胞凋亡,紫外分光光度计检测NOS.结果 对照组钙水平较低,癫痫发作后钙迅速升高,1 h达高峰,之后下降;NOS在癫痫发作后1、24 h有2个分泌高峰,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);细胞凋亡在癫痫发作后6 h开始升高,24 h达高峰,与对照组比较有显著性差异(P<0.05).结论 钙超载和NOS过度表达可能与癫痫后的细胞凋亡有关.     

卡马西平对青霉素点燃癫痫大鼠脑内GABA_B受体蛋白表达的影响

目的研究两种剂量卡马西平(CBZ)对青霉素慢性点燃大鼠的抗癫痫作用及对癫痫大鼠脑内GABAB受体蛋白表达的影响,从蛋白水平探讨CBZ抗癫痫作用的新机制。方法采用腹腔注射青霉素(PNC,3×106U·kg-1·d-1×13d)慢性点燃大鼠癫痫模型,两种剂量CBZ(50和100mg/kg体质量)灌胃给药,以痫性发作潜伏期和Racine癫痫行为分级标准为判定指标,观察CBZ的抗癫痫作用。用免疫组织化学SABC法测定大鼠脑内GABAB受体蛋白表达,分析CBZ对GABAB受体蛋白表达的影响。结果两种剂量CBZ灌胃给药后,均可使青霉素慢性点燃大鼠痫性发作的潜伏期延长,与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),同时使癫痫大鼠的发作程度均较模型对照组减轻。青霉素慢性点燃大鼠脑内GABAB受体蛋白表达量较正常组降低,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。CBZ1组、CBZ2组脑内GABAB受体蛋白表达量分别与正常对照组和模型对照组比较,均显示增高,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论两种剂量CBZ可延长青霉素慢性点燃大鼠痫性发作的潜伏期,减轻发作程度,具有明显的抗癫痫作用。青霉素慢性点燃大鼠癫痫发作与降低脑内GABAB受体蛋白表达有关,而CBZ抗癫痫作用机制与增加大鼠脑内GABAB受体蛋白表达有关。     

灵芝对实验癫痫大鼠免疫功能的影响

目的：探讨灵芝对癫痫大鼠免疫功能的影响。方法：通过戊四氮（PTZ）腹腔注射诱发癫痫鼠模型，将模型鼠随机分为苯妥英钠组、灵芝组和盐水组。另设正常对照组。分别给予相应药物治疗，20d后，各组动物取血，进行红细胞免疫功能测定，血清补体测定。结果：灵芝组红细胞免疫功能提高，血清补体合成增加。结论：灵芝对癫痫有很好的治疗作用。     

丹参对发育期癫痫大鼠学习记忆的影响

目的探讨丹参对发育期癫痫大鼠的行为、学习记忆功能及海马CA3区超微结构的影响。方法戊四氮（PTZ）点燃发育期大鼠癫痫模型,在点燃过程分别用丹参（RSM）、苯巴比妥（PB）或两者联合用药干预大鼠观察发作情况,并记录脑电改变,4周后各组予Y迷宫评价大鼠的学习记忆功能,透射电镜下观察海马CA3区超微结构的改变。结果28d时PTZ模型组大鼠均点燃,RSM、PB及两者联合用药均能有效减轻癫痫的发作及延缓点燃,并改善脑电活动;Y迷宫测试中PTZ组及PB组较正常组均有不同程度的学习记忆障碍,RSM及联合用药组学习记忆能力有提高;与学习记忆相关的海马CA3区中,PTZ组出现神经元损害及神经纤维的水肿和空泡化等超微结构的改变,RSM、PB及联合用药组则有明显改善。结论丹参单独用药或联合苯巴比妥用药,均对戊四氮所致发育期癫痫大鼠的发作及学习记忆有一定的改善作用,其机制可能与改善海马CA3区超微结构有关。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑海马区NCAM-1表达影响的研究

目的：通过检测灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致癫痫大鼠脑海马神经细胞黏附分子1（NCAM-1）表达的影响,进一步探讨灵芝孢子粉对减轻癫痫症状的机制。方法：健康雄性Wistar大鼠30只．随机分为空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉用药组,每组10只。模型组和用药组复制癫痫模型。采用Western—blot方法检测大鼠脑海马区NCAM-1的表达。结果：模型组NCAM-1表达明显高于对照组（0．85±0．07vs0．36±0．08．P〈0.01）,用药组明显低于模型组（0．54±0．07vs0．85±0．07．P〈0．01）,高于对照组（0.54±0．07vs0．36±0．08,P〈0．05）。结论：灵芝孢子粉能有效降低癫痫大鼠NCAM-1的过度表达。从而降低NCAM-1对中枢神经系统的毒性损害。     

Effects of gabapentin on apoptotic neurons in hippocampus of rats with status epilepticus

目的 研究加巴喷丁(GBP)对癫痫持续状态(SE)大鼠海马区神经元凋亡的影响.方法 SD大鼠48只随机分为对照组、戊四氮致痫组(PTZ组)、GBP组、GBP干预组(干预组),每组12只.戊四氮溶液60 mg·kg-1·d-1腹腔注射诱发SE.干预组致痫后给予GBP 600 mg·kg-1·d-1;GBP组仅给予GBP 600 mg·kg-1·d-1;对照组和PTZ组给予0.9%氯化钠溶液灌胃.采用头皮针状电极单极导联法观察大鼠痫性放电的脑电图.缺口末端标记法(TUNEL)检验凋亡阳性细胞.结果 TUNEL阳性细胞在PTZ组显著高于对照组(P<0.01);GBP组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);干预组表达低于PTZ组(P<0.05).结论 戊四氮致SE大鼠海马CA1和CA3区神经元TUNEL阳性细胞显著增加,GBP能显著减少TUNEL阳性细胞.