水通道AQP1的研究进展

水通道蛋白是水分子通过生物膜脂质双分子层的一种膜蛋白,在动植物尤其在哺乳动物体内被发现并得到鉴定。AQP1（aquaporin1）是水通道蛋白家族中最早被发现的一个亚型,对水的转运有高度选择性。现已发现,AQP1分布在多种器官组织中,特别是那些与液体吸收和分泌有关的上皮细胞及可能协同水跨细胞转运的内皮细胞中,参与水的跨膜转运及水平衡调节。研究AQP1对于了解水代谢疾病的发生机制以及指导临床水代谢疾病的治疗具有十分重要的意义。     

颈椎舒颗粒对椎间盘退变大鼠模型AQP1的影响

目的:探讨颈椎舒颗粒治疗颈椎病作用的机制。方法:以动静力失衡方法建立颈椎间盘退变模型,测定椎间盘含水量了解颈椎间盘退变情况,用免疫印迹法检测大鼠椎间盘中AQP1含量,观察模型大鼠给药4周、8周后的变化。结果:其中用药4周后,与模型组相比,各组组均能增加椎间盘的含水量,差异有显著性意义(P<0.05)。各药物干预组,以高剂量组疗效最佳,高剂量组含水量最高,模型组最低。用药8周后,与模型组相比,各组组均能增加椎间盘的含水量,差异有显著性意义(P<0.05)。各药物干预组,以高剂量组疗效最佳,高剂量组含水量最高,模型组最低。用药4周后,与模型组相比,各组均能增加颈椎间盘AQP1的含量,差异有显著性意义(P<0.05)。各药物干预组,以高剂量组疗效最佳,高剂量组颈椎间盘AQP1的含量最高,模型组最低。用药8周后,与模型组相比,各组组均能增加颈椎间盘AQP1的含量,差异有显著性意义(P<0.05)。各药物干预组,以高剂量组疗效最佳,高剂量组AQP1最高,模型组最低,并且随着治疗时间的延长,效果有增加的趋势。结论:颈椎舒具有改善颈椎间盘退变的作用,对水通道蛋白1的调节作用是其疗效机制之一。     

AQP1、AQP2及AQP3在人睾丸肿瘤组织中表达的检测

目的 研究水通道蛋白(Aquaporin,AQP)1、2、3在人睾丸肿瘤组织的分布及表达情况.方法 选取经手术切取的睾丸肿瘤组织10例,应用免疫组织化学S-P法检测AQP1、AQP2、AQP3的分布及表达.结果 在睾丸肿瘤组织中AQP1主要表达在微血管内皮细胞;AQP2及AQP3主要表达在睾丸肿瘤细胞的胞膜及胞质内.结论 AQP1、AQP2及AQP3表达于睾丸肿瘤组织,说明睾丸肿瘤组织水通道蛋白表达增加.     

青蒿琥酯对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用

目的:观察青蒿琥酯对前列腺癌细胞株PC-3的体外作用,并探讨其可能作用机制。方法:应用光镜形态学、MTT法、流式细胞仪观察不同浓度青蒿琥酯在体外对前列腺癌细胞系PC-3的作用和对细胞DNA含量的影响。结果:青蒿琥酯对前列腺癌细胞系PC-3有明显的生长抑制作用,并能诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖周期。结论:青蒿琥酯对前列腺癌PC-3细胞有明显生长抑制和凋亡诱导作用,提示青蒿琥酯有用于治疗激素非依赖性前列腺癌的可能性。     

枸杞多糖对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响

目的研究枸杞多糖(LBP)对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响。方法体外培养的人前列腺癌PC-3细胞经枸(LBP)处理后,采用MTT法测定细胞的增殖情况,流式细胞仪分析LBP对PC-3细胞周期和凋亡的影响,TUNEL法观察PC-3细胞凋亡的变化,用免疫组化法检测其Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果LBP可明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的生长,并能诱导PC-3细胞凋亡,凋亡率分别为8.5%、17.5%、29.5%、37.5%和41.5%,与对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01);同时PC-3细胞Bcl-2/Bax蛋白比值显著下降,呈明显的剂量-效应关系。结论LBP对人前列腺癌PC-3细胞DNA具有损伤作用,能诱导PC-3细胞的凋亡,调节其相关基因的表达。     

苦参碱对人前列腺癌PC-3M细胞周期与凋亡的影响

目的研究苦参碱(MR)对人前列腺癌PC-3M细胞周期与凋亡的影响。方法稳定培养PC-3M细胞株系,经0(空白组)、30、60、120μM浓度MR给药72 h后,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测MR对PC-3M抑制率,碘化丙啶(PI)染色检测细胞形态学的变化,免疫组织化学法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达,Western blot法检测细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化蛋白水平。结果与空白组比较,MR给药后有效抑制PC-3M的细胞增殖(P<0.01),并促进癌细胞凋亡。同时,MR能显著减少Cyclin D1的表达以及下调内源性p-ERK1/2水平(P<0.01)。结论苦参碱可发挥有效的抗癌作用,推测其机制为抑制癌症细胞增殖并介导细胞凋亡,以及抑制内源性ERK1/2/Cyclin D1通路。     

姜黄素对前列腺癌PC-3M细胞生长抑制和凋亡的影响

为探讨姜黄素对人前列腺癌PC-3M细胞生长抑制及凋亡调控的作用,按姜黄素浓度分成10、20、30、40μmol/L4个处理组和对照组(未加姜黄素),处理PC-3M细胞不同时间后,倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT法检测细胞的增殖抑制情况;荧光染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪进行细胞周期时相分析;免疫组化SP法检测细胞内caspase-3蛋白的表达水平。结果表明,与对照组比较,姜黄素处理组可使细胞明显变圆,体积缩小,脱壁细胞增多;MTT法检测显示,姜黄素处理组随着浓度增加和作用时间延长,对PC-3M细胞的增殖抑制作用增强,并呈时间、剂量依赖性(P<0.01);荧光显微镜下部分细胞发生凋亡形态学改变,对照组和4个处理组凋亡率分别为(9.83±1.53)%、(19.50±1.00)%、(24.83±2.52)%、(30.17±2.08)%和(38.50±2.65)%;流式细胞仪显示,处理组停滞在S、G2/M期细胞增加,而G0/G1期细胞减少;免疫组化结果显示,随着姜黄素浓度增加,caspase-3蛋白表达增强,呈剂量依赖性(P<0.01)。结论:姜黄素对人前列腺癌PC-3M细胞的生长具有明显抑制作用,上调caspase-3蛋白的表达,诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一。     

RNA干扰LKB1基因对前列腺癌细胞增殖的影响

目的:探讨LKB1/STKll(Liver kinase B1/Serine-Threonine Kinase II)基因沉默对前列腺癌细胞株PC-3中增殖相关因子细胞周期素D1(cyclin D1)、微小染色体维持缺陷蛋白2(Mcm2)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响及其可能机制。方法:将重组表达质粒LKB1-shRNA1(LKB1-shRNA1组)和阴性对照质粒sh NC(阴性对照组)采用脂质体介导法转染至前列腺癌细胞株PC-3中,并设未转染组,经G418筛选出稳定转染细胞,RT-PCR法检测转染前后细胞中LKB1,cyclin D1,Mcm2和PCNA基因mRNA的转录水平;Western blot法检测转染前后细胞中LKB1,cyclin D1,Mcm2和PCNA蛋白表达水平;CCK-8法检测转染后细胞的增殖能力。结果:与未转染组和阴性对照组相比,LKB1-shRNA1组细胞中LKB1,cyclin D1,Mcm2和PCNA的mRNA和蛋白表达水平均明显上调,LKB1-shRNA1组PC-3细胞的生长速度明显增加。结论:LKB1基因沉默上调前列腺癌细胞中cyclin D1,Mcm2和PCNA的表达,LKB1可作为研究前列腺癌细胞增殖分子机制的新靶点。     

葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的凋亡作用

目的研究葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的影响。方法将低、中、高剂量(分别为16、32和64μl/ml)的葡萄汁加入体外培养的人前列腺癌PC-3细胞,检测葡萄汁对PC-3细胞的毒性作用,用单细胞凝胶电泳测其对DNA损伤作用,流式细胞术测细胞凋亡,免疫组化法测凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达。结果3种剂量的葡萄汁能抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖;DNA迁移长度与彗星细胞拖尾率逐渐增高,拖尾细胞率最高为71%;能诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡,细胞凋亡率分别是14.5%3、2.1%和40.5%,促凋亡基因Bax表达率分别是36.8%、50.4%和64.8%;抑凋亡基因Bcl-2表达率依次为39.1%、25.0%和12.4%。结论葡萄汁可抑制人前列腺癌PC-3细胞增长,诱导其细胞凋亡,能上调促凋亡基因Bax的表达,下调抑凋亡基因Bcl-2的表达。     

地塞米松对人眼小梁细胞水通道蛋白-1表达的影响

目的 :观察地塞米松对人眼小梁细胞水通道蛋白 -1(AQP -1)表达的影响。方法 :通过RT -PCR方法 ,半定量检测原代培养的人眼小梁细胞AQP -1的mRNA水平及不同浓度地塞米松的作用。结果 :正常人眼小梁细胞AQP -1的mRNA(灰度比 )为1 643±0 354,10-8mol、5×10-8mol、10-7mol、5×10-7mol地塞米松作用3d为1 577±0 405、1 117±0 443、0 458±0 301、0 267±0 243。地塞米松浓度≥5×10 -8mol出现抑制作用 (P<0 05)。结论 :地塞米松使培养的正常人眼小梁细胞AQP -1的mRNA减少 ,可能是皮质类固醇性青光眼房水流出阻力增加的原因之一。     

蕃茄汁对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响

目的　研究番茄汁对人前列腺癌PC 3细胞增殖的影响及其可能的机制。方法　体外培养人前列腺癌PC 3细胞,分别加入不同浓度的番茄汁;用彗星试验测定经番茄汁处理的人前列腺癌PC 3细胞DNA链断裂情况,分析DNA的损伤作用;采用MTT法测定细胞的增殖情况。结果　番茄汁对人前列腺癌PC 3细胞的DNA具有损伤作用,可使DNA链断裂,DNA的迁移长度与彗星细胞拖尾率显著增高,与对照组相比,差异有非常显著性;能抑制PC 3细胞的增殖,与对照组相比,各实验组的吸光度逐渐降低,差异有非常显著性,且随着浓度的增加抑制作用逐渐加强。结论　番茄汁可诱导人前列腺癌PC 3细胞的DNA损伤,从而抑制其生长。     

水通道蛋白AQP4研究进展

水通道蛋白（Aquapofins,AQPs）是一个同源、四聚体结构的水通道蛋白家族,主要功能是运输水分,另外AQP3、AQP7和AQP9等水通道蛋白属于水甘油膜孔蛋白质,还可运输甘油和各类小的极性分子。脑组织中的水通道蛋白主要为水通道蛋白4（aquapofin-4,AQP4）,是1994年Jung等利用水通道蛋白家族的同源性克隆分离出来的,在中枢神经系统分布最为丰富,可能是脑脊液重吸收、渗透压调节,脑水肿形成等生理、病理过程的分子生物学基础。因此,研究AQP4可为脑水肿及水代谢疾病提供分子水平的理论依据,同时为临床治疗脑水肿及水代谢疾病提供一种新途径。     

苦参素对人前列腺癌PC-3细胞体外作用研究

目的探讨苦参素对人前列腺癌PC 3细胞的生长抑制作用及可能的作用机制。方法采用MTT法检测PC 3细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测PC 3细胞周期改变,免疫组化法检测PC 3细胞中Bcl 2和Bax的表达。结果随着苦参素浓度的增加和作用时间的延长,PC 3细胞生长抑制率呈明显上升趋势(P＜0.05)。随着苦参素浓度的增加,G0/G1期和S期PC 3细胞所占比例逐渐上升,而G2/M期所占比例逐渐下降,同时Bcl 2表达下调,而Bax表达上调。结论苦参素能通过诱导人前列腺癌PC 3细胞周期阻滞于G0/G1和S期,下调Bcl 2表达和上调Bax的表达抑制癌细胞的生长增殖。     

禁水后小鼠三叉神经节AQP1和AQP4表达的改变

目的 研究禁水后小鼠三叉神经节水通道蛋白( AQPs)的表达变化.方法 采用免疫组化方法比较观察禁水24 h模型组(A组,3只)和正常饮水对照组(B组,3只)小鼠三叉神经节内AQP1和AQP4的表达.结果 与B组比较,A组AQP1在三叉神经节内神经元上的阳性表达明显上调,而AQP4在微血管上的表达下调.结论 AQP1可能与AQP4一起协调参与渴觉的传导过程.     

膀胱癌患者PF4水平及AQP1、AQP3表达与疾病进展、预后的关系

目的 分析膀胱癌患者血小板因子4(PF4)水平及水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白3(AQP3)表达与疾病进展、预后的关系。方法 将2016年1月—2018年1月我院92例膀胱癌作为观察组,同期体检健康者50例作为对照组。比较2组血清PF4水平及观察组癌、癌旁组织AQP1、AQP3表达情况;分析观察组临床病理特征与血清PF4及癌组织AQP1、AQP3的关系;比较不同预后患者血清PF4与癌组织AQP1、AQP3表达情况;采用Pearson相关性分析探讨血清PF4与癌组织AQP1、AQP3表达相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PF4及癌组织AQP1、AQP3表达对膀胱癌不良预后的预测效能。结果 观察组血清PF4水平高于对照组(P<0.01)。观察组癌组织AQP1、AQP3表达均高于癌旁组织(P<0.01)。TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、肿瘤最大径>2 cm、有淋巴结转移患者血清PF4水平与癌组织AQP1、AQP3表达分别高于TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、肿瘤最大径≤2 cm、无淋巴结转移患者(P<0.01)。膀胱癌患者血清PF4水平与癌组织AQP1、AQP3表达呈正相关...     

姜黄素对前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用

目的研究姜黄素对PC-3细胞增殖活性的影响。方法以不同浓度(10、20、40、60、80μmol/L)的姜黄素及顺铂作用于体外培养的PC-3细胞24h,以中效浓度(40μmol/L)的姜黄素及顺铂作用于体外培养的PC-3细胞4、12、24、48、72h,后用MTT法检测在不同浓度及时间作用下PC-3细胞的抑制率,应用流式细胞仪检测PC-3细胞周期的变化。结果姜黄素对PC-3细胞的增殖抑制作用与顺铂相似(P>0.05),具有剂量时间依赖性,并随着药物浓度及时间的增加,抑制率逐渐增高,流式细胞仪检测显示:姜黄素和顺铂组都能使PC-3细胞生长明显阻滞于G2/M期,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论姜黄素可以明显抑制PC-3细胞的增殖,在临床治疗前列腺癌方面有着良好的应用前景。     

肝硬化腹水患者血浆AVP和尿AQP2的检测及临床意义

目的探讨检测肝硬化腹水患者血浆AVP和尿液AQP2含量的临床意义。方法选择2009年1月-2011年9月该院收治的肝硬化患者100例,分为腹水组60例,无腹水组40例,观察2组患者的血浆AVP水平和24h尿液AQP2水平测定值。结果肝硬化腹水组患者血浆AVP水平和尿液AQP2含量明显高于无腹水组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肝硬化腹水患者存在血浆AVP和肾脏AQP2含量的增加,而且血浆AVP的含量影响肾脏AQP2的表达。     

熊果酸衍生物的合成及对前列腺癌PC-3细胞的抑制活性

目的:合成具有不同电负性基团的熊果酸衍生物并研究其抗癌活性。方法:合成一系列携带正电性基团或负电性基团的熊果酸衍生物,并用软件预测衍生物油水分配系数及水溶性的改善情况;采用MTT法考察熊果酸衍生物对人前列腺癌PC-3细胞的抑制活性;采用细胞周期分析及AnnexinV/PI双标记法探讨其抗癌机制。结果:熊果酸衍生物的水溶性较熊果酸有明显改善;荷负电基团的熊果酸衍生物抑癌活性远低于熊果酸,而负载正电性基团显著提高了熊果酸的体外抗癌活性,其作用机制为诱导细胞发生凋亡及细胞周期阻滞;其中熊果酸衍生物UA-3,UA-4,UA-5b的水溶性提高70倍以上,对PC-3细胞的IC50(48 h)均<10μmol.L-1,将细胞阻滞于G0/G1期并具有诱导凋亡作用(凋亡率均>50%)。结论:采用正电性基团修饰熊果酸是提高抗癌效果并改善其水溶性的有效途径之一。     

AQP1、ALP在肺腺癌早期诊断中临床研究

目的：本研究旨在探讨AQP1、ALP在肺腺癌患者血清中的表达情况,为找到一种简便易行且敏感性较高的肺腺癌早期诊断方法提供依据。方法：抽取高度可疑肺腺癌住院患者血清163例（不含酗酒者）,随访留取最终确诊的31例患者血清;抽取30例无吸烟、酗酒等不良嗜好健康者的血清作为对照组,采用ELISA法分别检测两组中AQP1、ALP表达情况。结果：肺腺癌患者血清中的AQP1、ALP的表达水平明显高于健康对照组（P〈0.05）。结论：血清中AQP1、ALP的表达异常有助于肺腺癌早期的诊断。