维A酸受体mRNA在寻常性银屑病外周血单一核细胞中表达水平的研究

目的　探讨寻常性银屑病患者外周血单一核细胞中维A酸受体 (RARα、RARγ、RXRα)mRNA的表达情况。方法　用RT PCR法对比研究了 2 0例寻常性银屑病患者和 10例正常对照组外周血单一核细胞中维A酸受体mRNA表达情况。结果　寻常性银屑病患者外周血单一核细胞中的维A酸受体mRNA的表达水平与正常对照组无差异。结论　用维A酸治疗寻常性银屑病过程中 ,免疫细胞是否为维A酸的作用靶细胞还不能确定。     

银屑病患者外周血干扰素γ和白介素18的表达

目的 探讨进行期银屑病患者外周血干扰素γ(IFN-γ)和白介素18(IL-18)的表达和相关性,及各型银屑病患者外周血IFN-γ的表达变化。方法 进行期寻常性银屑病20例,红皮病性银屑病19例,脓疱性银屑病10例,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中IFN-γ表达水平;对进行期寻常性银屑病患者,检测血浆中IL-18表达水平;检测葡萄球菌肠毒素(SEB)刺激下,进行期寻常性银屑病患者外周血单一核细胞(PBMC)上清液中IFN-γ和IL-18的表达水平。结果 进行期寻常性银屑病患者血浆IFN-γ水平为8.91±2.65,红皮病性银屑病为10.19±5.93,脓疱性银屑病为17.96±10.44,各型银屑病患者均高于正常人(5.70±2.82)。进行期寻常性银屑病患者血浆IL-18水平高于正常人。进行期寻常性银屑病患者PBMC在SEB刺激组IFN-γ和IL-18表达水平均高于空白对照组,且IFN-γ与IL-18表达水平呈显著正相关,r=0.55,P<0.05。结论 在银屑病的发病和进展中,检测IFN-γ的表达量,对早期判断银屑病病情进展、转归和治疗效果有指导意义。IL-18表达增高,推测IL-18可能也参与银屑病发病。     

寻常性银屑病皮损中神经生长因子受体P75NTR和TrkA的表达

目的 探讨神经生长因子受体P75^NTR和TrkA在寻常性银屑病发病机制中的作用。方法 应用原位杂交和免疫组化技术对38例寻常性银屑病患者(进行期21例,静止期17例)皮损区、非皮损区及10例正常人皮肤组织中P75^NTR和TrkA受体mRNA及蛋白表达水平进行检测。结果 与正常人比较,寻常性银屑病皮损及非皮损区P75^NTR和TrkA受体mRNA及蛋白表达水平明显上调,且皮损中的表达明显高于非皮损区(P<0.01);进行期患者皮损与非皮损区P75^NTR和TrkA受体mRNA及蛋白表达水平分别高于静止期(P<0.01)。结论 神经生长因子受体P75^NTR和TrkA mRNA及蛋白水平在进行期、静止期寻常性银屑病皮损及非皮损区的不同表达,提示神经生长因子可能参与了银屑病的发病。     

窄谱中波紫外线对寻常性银屑病患者趋化因子受体CCR6mRNA水平的影响

目的:探讨窄谱中波紫外线(NB-UVB)对银屑病患者趋化因子受体CCR6 mRNA水平的影响.方法:分别记录30例寻常性银屑病患者NB-UVB照射治疗前后患者皮损面积和严重程度指数(PASI)评分.应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测其前后外周血单一核细胞CCR6 mRNA的表达水平,并与30例正常对照比较.结果:30例寻常性银屑病患者光疗15次后PASI分值显著降低(P ＜ 0.01).银屑病患者CCR6 mRNA的表达水平显著高于正常对照(P ＜ 0.01),而光疗后CCR6 mRNA的表达水平显著降低(P ＜ 0.01).结论:降低CCR6水平可能是NB-UVB治疗银屑病的机制之一.     

寻常性银屑病患者皮损白介素17、干扰素γ及巨噬细胞炎性蛋白3α mRNA的表达

目的 探讨寻常性银屑病患者皮损中白介素17(IL-17)、干扰素γ(IFN-γ)以及巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α)mRNA的表达与发病的关系.方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了31例寻常性银屑病患者皮损和16例正常人皮肤中IL-17、IFN-γ和MIP-3αmRNA的表达.结果寻常性银屑病患者皮损及正常人皮肤组织中均有IL-17、IFN-γ和MIP-3α mRNA的表达.在寻常性银屑病患者皮损中IL-17 mRNA的表达水平为1.142±0.059(A值,下同),较正常人对照组(0.879±0.034)明显增高(P＜0.001);IFN-γ mRNA的表达水平在皮损和正常人对照分别为1.114±0.056和0.905±0.026,差异有显著性(P＜0.001);MIP-3αmRNA的表达水平为1.140±0.052,亦明显高于正常人对照组(0.868±0.031)(P＜0.001).结论寻常性银屑病患者皮损中IL-17、IFN-γ及MIP-3αmRNA表达水平的上调可能与银屑病的发病相关。     

寻常性银屑病患者外周血中性粒细胞中趋化因子受体的表达

目的:了解趋化因子受体在寻常性银屑病外周血中性粒细胞活化及趋化中的作用,探讨寻常性银屑病的发病机制。方法:应用反转录(RT)-PCR检测33例进行期斑块状银屑病患者及其中16例患者治疗后外周血中性粒细胞中趋化因子受体CXCR1～3及CCR1、5mRNA的表达水平,并设30名正常人作对照。将检测结果与银屑病皮损面积严重度指数(PASI)进行相关性分析。结果:寻常性银屑病患者治疗前中性粒细胞中CXCR1、CXCR2与CCR1mRNA表达水平分别为1.36±1.19、1.45±0.87与1.43±1.28,明显高于正常对照及治疗后的患者[正常对照分别为0.55±0.37(P<0.01),0.74±0.58(P<0.001),0.68±0.37(P<0.001);治疗后分别为0.46±0.33(P<0.001),0.63±0.58(P<0.01),0.73±0.86(P<0.05)],其中CXCR1、CXCR2与PASI呈显著正相关。结论:CXCR1、CXCR2与CCR1在寻常性银屑病患者外周血中性粒细胞中表达异常增高,它们可能参与了中性粒细胞的活化及趋化,进而参与了银屑病的发病。     

慢性特发性荨麻疹患者外周血单一核细胞干扰素-γ受体mRNA表达

目的探讨慢性特发性荨麻疹(CIU)患者外周血单一核细胞(PBMC)干扰素-γ受体(IFN-γR)mRNA表达情况。方法收集45例CIU患者,38例正常人作为对照,采集PBMC提取RNA,应用逆转录聚合酶链扩增(RT-PCR)法检测IFNR mRNA表达水平。结果CIU患者PBMC中Th1细胞因子受体IFN-γR mRNA表达水平(0.636±0.194),高于健康对照组(0.540±0.184)(t=2.315,P(0.05)。结论CIU患者PBMC中IFN-γR的mRNA表达增高,可能与该病发病机制有关。     

寻常型银屑病患者外周血单个核细胞TLR4和NF - кBp65的表达

检测寻常型银屑病患者外周血单个核细胞Toll样受体4(TLR4)和核转录因子кBp65(NF -кBp65)的表达.采用直接免疫荧光法定位并分别用流式细胞术及免疫细胞化学法检测22例寻常型银屑病外周血单个核细胞TLR4、NF- кBp65的表达,15名正常人做正常对照.结果:寻常型银屑病外周血单个核细胞TLR4的表达高于正常对照组(P＜0.05),而进行期寻常型银屑病外周血单个核细胞TLR4表达明显高于稳定期寻常型银屑病患者的表达(P＜0.05).寻常型银屑病组和正常对照组,进行期寻常型银屑病组和稳定期寻常型银屑病组活化NF-кBp65的表达,各组之间差异无显著性(p＞0.05).     

寻常型银屑病患者外周血中Th17细胞的表达及临床意义

目的:探讨银屑病患者外周血PBMC中的Th17细胞的表达及与其临床相关性,初步明确Th17细胞在银屑病发病中的作用机制及临床意义.方法:抽取43例寻常型银屑病患者(进行期25例,静止期18例)及30例正常对照者外周血,采用流式细胞术检测外周血单核细胞CD4(+)IL-17(+)细胞表达水平,并分析进行期银屑病组和静止期银屑病组与对照组间的差异.结果:流式细胞染色示银屑病患者PBMC CD4(+)IL-17(+)细胞数量相对于正常人明显上调(t=12.057,P<0.01),对照组、进行期组、静止期组三者差异有统计学意义(F=142.34,P<0.01).银屑病患者PBMC CD4(+)IL-17(+)细胞的表达与寻常型银屑病严重程度指数PASI呈正相关.结论:银屑病患者外周血Th17细胞数量上调,其水平与寻常型银屑病严重程度呈正相关,Th17细胞在银屑病的发病中可能有着重要作用.提示针对Th17细胞的生物靶向治疗也许可以作为治疗银屑病的新的有效方法.     

NB-UVB对寻常性银屑病患者外周血Th17/Treg细胞转录因子RORγt和Foxp3表达的影响

目的观察窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗寻常性银屑病的疗效以及对患者外周血单一核细胞RORγt和Foxp3 mRNA表达的影响,探讨NB-UVB治疗寻常性银屑病的作用机制。方法选取90例中、重度寻常性银屑病患者(进行期45例,稳定期45例),使用NB-UVB照射治疗8周,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)方法,检测光疗前后外周血转录因子RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平。以银屑病皮损面积和严重程度(PASI)评分评价临床疗效。同时选50例健康体检者作为正常对照组。结果治疗前,进行期及稳定期银屑病患者外周血RORγt mRNA表达量(9.12±1.46,8.77±1.25)显著高于正常对照组(3.01±0.71),差异有统计学意义(P0.01);患者RORγt/Foxp3的比值(5.79±1.86,5.21±1.73)也显著高于正常对照组(0.91±0.42)(P0.01);而Foxp3 mRNA的表达量(1.56±0.92,1.70±0.89)则显著低于正常对照组(3.26±1.05)(P0.01)。NB-UVB照射治疗8周后外周血RORγt mRNA的表达量及RORγt/Foxp3的比值较治疗前明显下降,而Foxp3 mRNA的表达量较治疗前明显升高,与治疗前相比差异均有统计学意义(P0.01)。NB-UVB治疗后PASI评分明显下降,与治疗前相比,差异有统计学意义(P0.01)。总有效率达85.56%。患者治疗前、后PASI评分与RORγt mRNA表达量和RORγt/Foxp3比值呈正相关,而与Foxp3 mRNA的表达量呈负相关(P均0.01)。结论寻常性银屑病的发生及病情严重程度可能与外周血RORγt mRNA的高表达及Foxp3mRNA的低水平有关;NB-UVB可明显下调外周血RORγt mRNA的表达,上调Foxp3 mRNA的表达,从而调节RORγt/Foxp3比值的失衡,这可能是NB-UVB治疗银屑病的机制之一。NB-UVB治疗各期寻常性银屑病疗效好,安全性高。     

斑块状银屑病表皮干扰素-γ受体mRNA表达的研究

目的 探讨斑块状银屑病患者表皮干扰素-γ受体mRNA的表达及其在发病机制中的作用.方法 采集28例斑块状银屑病患者皮损及周围外观正常皮肤,28例正常人皮肤作为对照,分离表皮,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测干扰素-γ受体mRNA表达水平.PASI评分法评估银屑病的严重程度.结果 斑块状银屑病患者皮损和非皮损表皮干扰素-γ受体mRNA的表达率为100%,对照样本的表达率为17.86%(5/28);患者皮损、非皮损和对照表皮干扰素-γ受体mRNA的表达水平均值分别为1.002±0.563、0.188±0.095、0.005±0.012,皮损处的表达水平明显高于非皮损处(t=7.54,P<0.01),非皮损处明显高于正常人对照;进行期与稳定期皮损的表达水平分别为1.210±0.489和0.379±0.163,进行期显著高于稳定期(t=4.37,P<0.01);而皮损处的表达水平与PASI评分值无相关性.结论 表皮干扰素-γ受体mRNA的表达可能与银屑病皮损的形成和病情的活动性有关.     

CCL27和CCR10在寻常性银屑病皮损的表达及与PASI的相关性

目的 探讨皮肤特异性趋化因子CCL27及其受体CCR10在寻常性银屑病皮损中的表达和表达强度与疾病活动性的相关性.方法 SP免疫组化染色检测20例寻常性银屑病皮损区皮损和10例正常人皮肤中CCL27、CCR10的表达,以PASI评分评价银屑病患者疾病活动性.结果 ①CCL27在20例寻常性银屑病皮损和10例正常人皮肤中表达的阳性率分别为95%和20%,两者差异有统计学意义(X²=17.86,P<0.01);CCR10在20例寻常性银屑病皮损和10例正常人皮肤表达的阳性率分别为85%和10%,两者的差异有统计学意义(X²=15.63,P<0.01).②CCL27和CCR10在皮损中的表达水平与PASI评分均呈明显正相关,r值分别为0.82和0.83,P值均<0.01.结论 CCL27和CCR10的过度表达与银屑病患者的疾病活动性相关.     

促血管生成素-1、2及其受体在寻常性银屑病中的表达

目的 探讨促血管生成素-1(Ang-1)、促血管生成素-2(Ang-2)及其受体Tie-2在寻常性银屑病皮损组织中的意义.方法 免疫组化SABC法检测30例寻常性银屑病患者皮损中的Ang-1、Ang-2及其受体Tie-2蛋白表达,以CD34标记新生血管内皮并计数微血管密度(MVD).另取15例正常人皮肤组织作为对照组.结果 寻常性银屑病患者皮损处Ang-2及其受体Tie-2表达明显强于正常人对照组(P<0.01),而Ang-1蛋白的表达与正常人对照组表达差异无统计学意义.进行期与静止期比较,Ang-2及Tie-2表达差异均有统计学意义(P<0.05),而Ang-1蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05).寻常性银屑病患者皮损中MVD值明显高于正常人对照组(P<0.01),高密度组(MVD≥15.46)与低密度组(MVD<15.46)的Ang-1表达差异无统计学意义(P>0.05),但Ang-2及其受体Tie-2表达差异有统计学意义(P<0.05).相关性分析表明,银屑病皮损Ang-1与Ang-2蛋白表达水平呈负相关(r=0.521,P<0.05);MVD值与Ang-2蛋白表达呈正相关关系(r=0.656,P<0.01),与Ang-1蛋白表达无相关性(r=0.237,P>0.05 o结论Ang-2及其受体Tie-2与银屑病的血管生成关系密切,促血管生成素及其受体系统在银屑病新生血管生成中的调节作用可能是以Ang-2的作用为主导的.     

α-促黑素对银屑病患者外周血单一核细胞产生TNF-α和IL-10的影响

目的 探讨α-促黑素(α-MSH)对银屑病患者外周血单一核细胞(PBMC)产生TNF-α、IL-10的影响.方法 标本取自20例寻常性银屑病患者和10例健康献血者,用不同浓度α-MSH处理经过植物血凝素(PHA)刺激的PBMC,用ELISA法检测PBMC培养上清中TNF-α、IL-10水平,应用荧光实时定量PCR分析PBMC中TNF-α mRNA、IL-10 mRNA的表达.结果 银屑病患者PBMC培养上清中TNF-α水平高于正常对照(P<0.01),IL-10水平低于正常对照(P<0.01);各浓度α-MSH均可抑制TNF-α的分泌(P<0.01),浓度为10-13mol/L时作用最强(P<0.01);各浓度α-MSH均可诱导IL-10的分泌(P<0.01,P<0.05),浓度为10-13mol/L时作用最强(P<0.01).浓度为10-13 mol/L的α-MSH下调TNF-α mRNA的表达(P<0.01)、上调IL-10 mRNA的表达(P<0.01).结论 α-MSH可调节银屑病患者TNF-α和IL-10产生.     

Abnormal histone modifications in PBMCs from patients with psoriasis vulgaris

Excessive keratinocyte proliferation is thought to be responsible for the formation and development of psoriasis vulgaris. Evidence indicates that epigenetic modifications are associated with aberrant gene expression, however, nothing is known about the status of histone modifications in psoriasis vulgaris. We investigated alterations in histone modifications in patients with psoriasis vulgaris. Global histone H3/H4 acetylation and H3K4/H3K27 methylation in peripheral blood mononuclear cells from 30 psoriatic patients and 20 healthy control subjects were quanti?ed by the EpiQuik(TM) global histone H3/H4 acetylation and H3K4/H3K27 methylation assay kit. The mRNA levels of 12 members of 3 classes of chromatin modifier genes were measured by real-time quantitative polymerase chain reaction. Compared with normal controls, global histone H4 hypoacetylation was observed in PBMCs from psoriasis vulgaris patients. There was a negative correlation between the degree of histone H4 acetylation and disease activity in patients as measured by PASI. Global levels of H3 acetylation, H3K4/H3K27 methylation did not significantly differ between psoriatic patients and controls. mRNA levels of P300, CBP and SIRT1 were significantly reduced in PBMCs from patients with psoriasis vulgaris compared with healthy controls, while mRNA expression levels of HDAC1, SUV39H1 and EZH2 was significantly increased in psoriatic patients.We conclude that histone modifications are aberrant in the PBMCs of psoriasis vulgaris patients.     

miR-320及下游靶基因survivin在银屑病皮损中的表达

目的检测寻常性银屑病皮损中miR-320及其下游靶基因survivin mRNA的表达水平。方法采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例寻常性银屑病患者皮损及40名健康对照皮肤中miR-320、survivin mRNA的表达水平,运用双荧光素酶报告实验验证survivin是miR-320的靶基因。miR-320和survivin表达水平两组间比较采用t检验,寻常性银屑病皮损中miR-320与survivin表达的相关性采用Pearson相关分析。结果与健康对照皮肤相比,寻常性银屑病皮损中miR-320表达量为对照组的(0.561±0.11)倍,表达明显下调(t=3.06,P0.05);survivin mRNA表达量为对照组的(2.034±0.26)倍,表达水平明显上调(t=3.35,P0.05);双荧光素酶报告实验结果提示survivin是miR-320的靶基因,寻常性银屑病皮损中miR-320与survivin mRNA呈负相关(r2=0.634,P0.05)。结论 miR-320可能通过调控其下游靶基因survivin的异常表达参与寻常性银屑病皮损的形成过程。     

白介素22及其相关因子在银屑病患者血清及外周血单一核细胞中的表达

目的 探讨白介素（IL）-22及其相关因子IL-23p19、IL-6在寻常性银屑病患者外周血单一核细胞（PBMC）及血清中表达的意义。方法 采用实时定量RT-PCR法检测寻常性银屑病患者及正常人对照者外周血PBMC中IL-22 mRNA、IL-23p19 mRNA及IL-6 mRNA的水平;采用ELISA法检测寻常性银屑病患者及正常人对照者血清和PBMC培养上清中IL-22的分泌水平。结果 银屑病组和正常人对照组PBMC中IL-22 mRNA的相对表达量分别为4.48 ± 2.64和2.35 ± 0.91;IL-23p19 mRNA的相对表达量分别为6.07 ± 4.09和2.61 ± 1.46;IL-6 mRNA的相对表达量分别为3.87 ± 1.49和1.48 ± 0.62;差异均有统计学意义（P < 0.01）。ELISA检测发现,银屑病组和正常人对照组血清中IL-22的水平分别为（86.23 ± 25.58） ng/L和（43.67 ± 14.82） ng/L（P < 0.01）,PBMC培养上清中IL-22的水平分别为（119.11 ± 21.51） ng/L和（57.70 ± 13.17） ng/L（P < 0.01）。结论 寻常性银屑病患者PBMC和血清中过度表达IL-22,提示IL-22可能参与银屑病的发病机制。     

寻常性银屑病患者血清趋化因子CCL27的检测及临床意义

目的 检测寻常性银屑病患者血清CCL27水平并探讨其临床意义。方法 采用酶联免疫吸附法检测61例寻常性银屑病患者治疗前后和45例健康人血清CCL27水平。结果 61例寻常性银屑病患者血清CCL27水平为（670.02 ± 262.15） ng/L,健康人对照组为（373.10 ± 92.84） ng/L,两组差异有统计学意义（t ＝ 8.18,P ＜ 0.01）。进行期患者血清CCL27水平为（799.94 ± 214.54） ng/L,静止期为（422.57 ± 135.53） ng/L,两组差异有统计学意义（t ＝ 8.39,P ＜ 0.01）。经药物治疗8周后,银屑病患者PASI评分下降70％以上者36例,其CCL27水平明显下降,与治疗前比较,差异有统计学意义（t ＝ 9.95,P ＜ 0.01）;PASI评分下降不足70％者25例,CCL27水平与治疗前比较差异无统计学意义（t ＝ 1.84,P ＞ 0.05）。61例银屑病患者血清CCL27水平与PASI评分呈正相关（r ＝ 0.58,P ＜ 0.01）。结论 寻常性银屑病患者血清CCL27水平明显增高,并与疾病活动性相关。     

浆细胞样树突状细胞和TLR9及其mRNA在银屑病患者皮损中的表达

目的：探讨浆细胞样树突状细胞（Plasmacytoid dendritic cells,PDCs）和toll样受体9（TLR9）在银屑病发病中的表达状态。方法：采用免疫组织化学SP法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测了22例银屑病患者皮肤损害中PDCs和TLR9及其mRNA的表达。15例整形外科患者的皮肤作为正常对照。结果：免疫组化结果显示银屑病组皮损中PDCs、TLR9的表达明显增多,而在正常对照组没有表达;RT-PCR检测显示银屑病皮损中TLR9mRNA的表达明显高于正常对照组（P〈0.01）。结论：银屑病患者皮损中有PDCs浸润,TLR9及其mRNA的表达水平上调,可能与银屑病的发病相关。     

Toll样受体2、4在麻风患者外周血单一核细胞中的表达

目的 探讨Toll样受体2、4 mRNA在麻风患者外周血单一核细胞中的表达.方法 运用SYBR Green荧光定量RT-PCR技术检测麻风现症患者与已痊愈患者各30例外周血单一核细胞中Toll样受体2、4 mRNA的表达水平,并用正常人作对照.结果 Toll样受体2 mRNA在麻风患者外周血单一核细胞中表达明显高于痊愈组和正常人对照组(P＜0.01).Toll样受体4 mRNA在麻风现症患者外周血单一核细胞中的表达与痊愈组和正常人对照组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Toll样受体2 mRNA在麻风患者外周血单一核细胞的表达明显升高,提示Toll样受体2 mRNA可能是麻风杆菌的特异识别受体.