补气活血方对慢性支气管炎肺气虚证大鼠肺组织细胞凋亡的影响

目的探讨补气活血方对慢性支气管炎肺气虚证模型大鼠肺组织细胞凋亡的影响。方法 50只SD大鼠随机选取10只作为空白对照组,其余采用改良烟熏法复制慢性支气管炎肺气虚证大鼠模型,造模后按随机数字表法分为模型组、补气活血方高剂量组、补气活血方低剂量组、补肺汤组,每组10只。空白对照组和模型组灌服生理盐水,其余3组分别应用高、低剂量补气活血方和补肺汤进行灌胃干预。采用TUNEL法和流式细胞仪观察肺组织细胞凋亡情况。结果模型组大鼠肺组织炎性细胞凋亡率低于空白对照组,肺实质细胞凋亡率高于空白对照组（P〈0.05）;补气活血方高、低剂量组和补肺汤组肺组织炎性细胞凋亡率高于模型组,且补气活血方高剂量组高于低剂量组和补肺汤组（P〈0.01）;补气活血方高、低剂量组和补肺汤组肺组织实质细胞凋亡率低于模型组,且补气活血方高剂量组和低剂量组均低于补肺汤组（P〈0.01,P〈0.05）。结论补气活血方能够改善慢性支气管炎肺气虚证大鼠肺组织的形态,控制炎症及加强肺组织的自我修复,其机制与诱导肺组织内炎性细胞的凋亡,并抑制肺组织实质细胞的凋亡有关。     

补气利湿活血方干预慢性肾衰竭研究

目的探讨补气利湿活血方对慢性肾衰竭（CRF）的作用机制。方法采用5/6肾脏切除法制备大鼠慢性肾衰竭模型,2周后随机分为模型组和补气利湿活血方高、低剂量组各10只,另设一组为假手术组（对正常大鼠行假手术）。补气利湿活血方低、高剂量组分别灌胃给予补气利湿活血方15,30 g•kg-1•d-1,10 mL•kg-1;假手术组和模型组灌胃给予等量纯化水。检测各组大鼠尿蛋白量、血清尿素氮（BUN）、肌苷（Cr）水平、肾脏病理。结果模型组大鼠尿蛋白、BUN 与Cr显著增加。补气利湿活血方低剂量组BUN 与Cr显著下降,补气利湿活血方高剂量组尿蛋白、BUN 与Cr均显著下降,两给药组肾脏病变均减轻。结论补气利湿活血方能减慢CRF进程。     

原花青素对实验性脑出血大鼠脑组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨原花青素对脑出血大鼠脑组织细胞凋亡的影响及其可能机制。方法采用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血,建立脑出血模型。54只健康SD大鼠随机分为假手术组、模型组、原花青素低剂量组(50 mg.kg-1)、中剂量组(100 mg.kg-1)、高剂量组(200 mg.kg-1)及尼莫地平对照组(10 mg.kg-1)。术后24 h,检测大鼠脑组织谷胱甘肽(GSH)含量与过氧化氢酶(CAT)的活性,采用免疫组化法检测各组大鼠脑组织切片bax和bcl-2蛋白表达,TUNEL法检测各组大鼠脑组织凋亡细胞的数量。结果与模型组比较,原花青素低、中、高剂量组大鼠脑中GSH含量与CAT活性明显升高(P<0.01)。免疫组织化学结果显示,与模型组相比,原花青素低、中、高剂量组的大鼠脑组织bax蛋白表达降低,原花青素中、高剂量组大鼠脑组织bcl-2蛋白表达升高,差异均有显著性(P<0.05,P<0.01)。TUNEL结果显示,与模型组相比,原花青素低、中、高剂量组细胞凋亡数有所减轻(P<0.05,P<0.01)。结论原花青素能够减轻脑出血大鼠的细胞凋亡,其机制可能与原花青素能够提高机体的抗氧化能力,同时增强抗凋亡基因bcl-2的表达,降低促凋亡基因bax的表达有关。     

强化胰岛素治疗对糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡蛋白bcl-2和bax的影响

目的观察强化胰岛素治疗对糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的影响。方法将36只Wistar大鼠随机分为对照组和高脂组,对照组给予基础饲料喂养,高脂组给予脂肪乳灌胃＋基础饲料喂养10d,然后给高脂组大鼠腹腔注射链脲佐菌素,3d后再将高脂组大鼠随机分为2个亚组,即糖尿病对照组和糖尿病治疗组,疗程4周。在脂肪乳灌胃第10天、注射STZ第3天和治疗4周末测大鼠各项指标;实验结束时用免疫组化法测大鼠胰岛β细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达。结果大鼠在强化胰岛素治疗4周末,与糖尿病对照组相比,糖尿病治疗组的bcl-2蛋白表达升高,bax蛋白表达降低,两组差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论强化胰岛素治疗可增强2型糖尿病大鼠胰岛β细胞bcl-2蛋白表达,降低bax蛋白表达,减轻2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡。     

硫化氢供体硫氢化钠对肺缺血-再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的：探讨硫氢化钠（NaHS）对肺缺血-再灌注损伤（LIRI）时细胞凋亡的影响。方法：采用在体大鼠单肺原位肺缺血-再灌注模型。健康SD大鼠30只,随机均分成3组：假手术对照（Sham）组,肺缺血-再灌注（LIR）组,肺缺血-再灌注＋硫氢化钠（LIR＋NaHS）组。各组大鼠实验结束后取肺组织,观察肺组织bcl-2、bax蛋白的表达、凋亡指数（AI）、肺系数（LW/BW）、肺组织肺泡损伤率（IAR）及光镜、电镜下的肺组织形态学改变。结果：在肺小血管内膜、肺泡上皮及细支气管上皮,LIR＋NaHS组bcl-2蛋白表达及bcl-2/bax的比值显著高于LIR组（均P〈0.01）,bax蛋白的表达显著低于LIR组（均P〈0.01）;AI、LW/BW、IAR值显著低于LIR组（P〈0.05）;肺组织形态学异常改变不同程度减轻。结论：硫化氢供体（NaHS）可上调bcl-2蛋白的表达,下调bax蛋白的表达,调控bcl-2/bax之间的平衡而减轻细胞凋亡,对LIRI具有保护作用。     

肠淋巴液引流对降低失血性休克大鼠肺组织细胞凋亡的作用

目的 探讨肠淋巴液引流对失血性休克大鼠液体复苏后肺组织细胞凋亡的作用.方法 18只SPF级Wistar雄性大鼠随机分成假手术组(仅麻醉与手术)、休克组(复制失血性休克模型)、休克+引流组(复制失血性休克模型,并于休克1h后引流休克肠淋巴液)各6只,采用末端脱氧核糖转移介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记法测定肺组织细胞凋亡,细胞核呈棕色的细胞为凋亡细胞,应用免疫组化链酶亲合素-生物素-过氧化物酶复合物法测定bcl-2和bax蛋白表达.结果 休克组与休克+引流组肺组织细胞凋亡率均显著高于假手术组,但休克+引流组肺组织细胞凋亡率显著低于休克组.假手术组bcl-2、bax蛋白均有一定的表达;休克组肺组织细胞bcl-2表达显著低于假手术组,bax表达明显高于假手术组;休克+引流组肺组织细胞bcl-2表达增强,bax表达降低,且休克+引流组肺组织细胞的bcl-2表达显著高于休克组,bax表达显著低于休克组.结论 肺组织细胞凋亡过度是休克后肺损伤的发生机制之一;引流休克肠淋巴液可减少肺组织细胞的凋亡,其作用机制与调节bcl-2/bax蛋白表达有关.     

肝病二号合剂对肝纤维化大鼠肝星状细胞(HSC)凋亡及相关蛋白表达的影响

目的研究肝病二号合剂能否诱导肝纤维化大鼠肝星状细胞凋亡,且能使bcl-2、bcl-2a、bax蛋白表达增加。方法雄性SD大鼠50只,体质量200g±25g,50只大鼠均用40%(V/V)四氯化碳溶液按0.15mL/100g皮下注射,每周2次,连续用药8周后,随机处死其中5只证实肝纤维化模型形成,将剩余45只随机分成空白组(A组)20只,模型组5只(C组)、治疗组(B组)20只,B组20只予肝病二号合剂4mL/(100g d)灌服8周,A组20只,用等量的生理盐水灌服8周治疗结束,C组为模型组。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)检测肝细胞凋亡,采用免疫组化法检测bcl-2 bcl-2a和bax蛋白。结果 B组与A、C组比较,肝星状细胞数量B组的细胞数量明显减少,肝星状细胞凋亡的数量明显增加,细胞凋亡指数增加明显。B组bcl-2 bcl-2a和bax蛋白明显增加。结论肝病二号合剂可以诱导肝纤维化大鼠肝星状细胞凋亡,且能使bcl-2、bcl-2a、bax蛋白表达增加。     

肠淋巴液引流对失血性休克大鼠肺组织细胞bcl-2与bax mRNA表达的影响

目的 观察肠淋巴液引流对失血性休克大鼠肺组织细胞凋亡相关基因bcl-2、bax mRNA表达的影响.方法 18只SPF级Wistar雄性大鼠随机均分为假手术组(仅麻醉与手术)、休克组(复制失血性休克模型)、休克+引流组(复制失血性休克模型,并于休克1h引流肠淋巴液).在低血压3h或相应时间,留取固定位置的肺组织,应用原位杂交技术,观察肺组织细胞的bcl-2、bax mRNA表达.结果 假手术组bcl-2、bax mRNA均有一定的表达,休克组肺组织细胞bcl-2 mRNA表达弱于假手术组、bax mRNA表达强于假手术组,体克+引流组肺组织细胞bcl-2 mRNA表达强于bax、mRNA表达低于休克组.结论 肠淋巴液引流可显著上调失血性休克大鼠肺组织细胞抑凋亡基因bcl-2 mRNA表达、下调促凋亡基因bax mRNA表达.     

尤瑞克林对局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡的影响

目的观察尤瑞克林对缺血性脑卒中大鼠bcl-2、bax蛋白表达的影响,探讨尤瑞克林抑制神经细胞凋亡保护缺血性脑损伤的可能作用机制,为尤瑞克林治疗缺血性脑卒中在临床上的应用提供更深层次的理论依据。方法选用健康SD大鼠,随机分为假手术组、单纯缺血组、尤瑞克林低、中、高3个剂量组,每组12只。制作大鼠局灶性脑缺血模型,术后30min及23.5h尤瑞克林低、中、高剂量组舌下静脉注射尤瑞克林3.75×10-3、8.75×25-3、17.25×10-3PNA单位/kg,余2组以同样给药途径予等剂量0.9%氯化钠溶液。24h后行神经功能缺损评分;免疫组化法行凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白定量分析。结果单纯缺血组动物神经功能缺损评分最为严重,尤瑞克林不同剂量组神经功能缺损评分均明显低于单纯缺血组(P<0.05或<0.01)。尤瑞克林各组与单纯缺血组比较,bcl-2蛋白表达升高(P<0.05或<0.01)、同时bax蛋白表达降低(P<0.05或<0.01),且随剂量升高呈量效关系。结论尤瑞克林对缺血性脑损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高bcl-2蛋白表达、抑制bax蛋白表达而减轻细胞凋亡来减少脑缺血后迟发性神经元损伤。     

Lactuside B对大鼠脑缺血再灌注损伤大脑皮质bcl-2、bax mRNA及其蛋白表达的影响

探讨高翅果菊根茎中主要成分lactuside B对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮质bcl-2、bax mRNA及其蛋白表达的影响。建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,各组给予相应的实验药物,分别在缺血再灌注24和72 h处死所需动物,采用TTC染色法检测脑梗死体积,逆转录多聚酶链反应和免疫组化二步法分别检测bcl-2、bax mRNA及其蛋白在大鼠大脑皮质的表达情况。结果表明,lactuside B各剂量组均可缩小大鼠脑皮质的梗死体积,提高bcl-2 mRNA的表达、降低bax mRNA的表达,且12.5和25 mg.kg-1剂量组bcl-2、bax mRNA的比值较高,与模型组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01);总体上12.5和25 mg.kg-1剂量组作用较好,优于阳性对照药尼莫地平(P<0.05或P<0.01),用药72 h的脑梗死体积、bcl-2、bax mRNA与24 h比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。另外,bcl-2和bax蛋白的表达情况与其基因表达趋势基本一致。以上结果提示,lactuside B可能通过上调bcl-2 mRNA增加其蛋白的表达和下调bax mRNA减少...     

参芪补肺汤对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道结构和肺功能的影响

目的:研究参芪补肺汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠气道结构和肺功能的影响。方法:用烟、SO2定量熏吸并复合木瓜蛋白酶雾化吸入法复制COPD大鼠模型;实验分为6组,即正常、模型、布地奈德及参芪补肺汤高、中、低剂量组;光镜观察大鼠肺组织的病理形态学改变;半定量图像分析法测量大鼠小支气管管壁和平滑肌层厚度;实验动物肺功能分析系统测定肺功能。结果:与正常组比较,模型组大鼠小支气管管壁及平滑肌层均显著增厚(P<0.01),0.3s用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV0.3/FVC)显著下降(P<0.01),肺呼气阻力(Re)和吸气阻力(Ri)显著升高(P<0.05);与模型组比较,参芪补肺汤高剂量组大鼠小支气管管壁及平滑肌层厚度显著降低(P<0.05),参芪补肺汤高、中剂量组大鼠FEV0.3/FVC显著升高(P<0.01)、Re和Ri显著下降(P<0.01)。结论:参芪补肺汤可抑制COPD模型大鼠气道重构,阻止其肺功能下降。     

扶正化瘀方对实验性急性肝损伤肝细胞凋亡的影响

目的观察扶正化瘀方对内毒素诱导的急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡的影响与部分机制。方法雄性BABL／c小鼠30只．随机分为3组，正常组10只，模型组10只，治疗组10只。治疗组小鼠给予扶正化瘀方灌胃，每日2次，连续3d，第4日灌胃后1h开始造模；正常组与模型组给予等量生理盐水灌胃。模型组与治疗组小鼠以内毒素10μg／Kg、D-氨基半乳糖900mg／Kg刑量，腹腔注射，诱导急性肝损伤模型；正常组以等剂量生理盐水腹腔注射作为对照。各组小鼠于造模后6h处死，试剂盒法检测血清ALT、AST活性，肝组织TUNEL染色检测肝细胞凋亡，计算凋亡指数；HE染色观察炎症反应与肝细胞坏死；蛋白免疫印迹法分析肝组织细胞凋亡因子bct-2、bax表达。荧光定量PCR法检测bcl-2和bax的基因表达。结果与正常小鼠相比，模型组小鼠血清ALT、AST活性均明显升高，治疗组小鼠较模型组明显降低。大体病理观察，模型组小鼠肝脏明显肿胀、色泽紫黯、表面见散在点状及片状出血点；治疗组小鼠肝脏肿胀明显减轻、色泽红润、表面未见出血点或少量点状出血点。TUNEL染色显示，正常组小鼠肝组织无或偶见肝细胞凋亡；模型组小鼠肝组织中见大量凋亡肝细胞弥漫性分布于肝小叶各区，肝细胞凋亡指数明显升高；治疗组小鼠肝细胞凋亡指数明显降低。HE染色显示模型组小鼠肝组织小叶结构紊乱，肝窦明显充血，大量炎性细胞浸润，肝细胞灶性坏死；治疗组小鼠肝窦充血、炎性细胞浸润与肝细胞坏死均明显减轻。与正常小鼠比较，模型组小鼠肝组织凋亡调节因子bcl-2基因与蛋白表达明显减少，而bax基因与蛋白表达显著增加；扶正化瘀方能促进bcl-2基因与蛋白表达增加，减少bax基因与蛋白表达。结论扶正化瘀方可抑制LPS诱导急性肝损伤小鼠的肝细胞凋亡，部分机制与调节凋亡因子bcl-2     

益气活血解毒方对自发性高血压大鼠血管内皮功能保护作用的研究

目的:研究益气活血解毒方对自发性高血压大鼠(SHR)血管内皮功能的保护作用。方法:24只12周龄♂SHR随机分为模型、卡托普利、益气活血解毒方组,另取8只同龄♂Wistar-Kyoto大鼠(WKY)为空白对照组。通过BP-6动物无创血压测试仪测定各组大鼠治疗前血压再连续给药6周,每日1次,第1、2、4、6周的第7天下午定时测量各组大鼠血压,6周后由腹主动脉取血,检测血清血栓素A(2TXA2)、6酮前列环素(6-KPG)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)和血管性血友病因子(vWF)。结果:益气活血解毒方可降低SHR血压、TXA2、ET-1、MDA、ANG-Ⅱ和vWF,增加6-KPG、NO(P<0.05或P<0.01)。结论:益气活血解毒方可降低SHR的血压,改善血管内皮功能。     

丹参对体外培养大鼠成纤维样滑膜细胞bcl-2和bax表达的影响

目的：探讨丹参对体外培养大鼠成纤维样滑膜细胞增殖及 bax、bcl-2表达的影响。方法取浓度为1.5＆#215;10-5个/ml的 RSC-364成纤维样滑膜细胞悬液100μl加入细胞培养板,培养24 h,加入含不同浓度丹参的培养液,采用 MTT法分析丹参对成纤维样滑膜细胞增殖抑制作用及其时效关系;免疫组化法检测 bcl-2、bax表达情况。结果丹参可明显抑制大鼠成纤维样滑膜细胞增殖,并显示出一定的量效和时效关系。丹参可显著上调大鼠成纤维样滑膜细胞 bax表达,下调 bcl-2表达,与空白对照组比较差异有统计学意义（ P 〈0.05）。结论丹参对体外培养大鼠成纤维样滑膜细胞的增殖具有抑制效应,其作用机制可能与调控 bax、bcl-2表达有关。     

苦碟子干预对横纹肌溶解性大鼠急性肾功能衰竭的肾脏保护作用

目的观察苦碟子干预对甘油所致急性肾衰竭（ARF）大鼠肾脏Bcl-2和Bax的表达影响。方法采用肌注甘油法复制横纹肌溶解性急性肾衰模型,分为正常对照组、ARF组、苦碟子干预组,其中ARF组、苦碟子干预组各分为6h,1d,4d,7d,10d等5个观察亚组。观察大鼠肾功能、肌酸激酶的变化,肾组织病理变化及Bcl-2和Bax表达变化。结果与ARF组相比,苦碟子干预组血肌酐、尿素氮、肌酸激酶浓度均明显降低,ATN评分下降（P〈0.05）。ARF组大鼠Bcl-2表达减弱,Bax表达增强,苦碟子组与同期急性肾衰组比较Bcl-2表达增强,Bax表达减弱。结论苦碟子可减轻横纹肌溶解大鼠急性肾衰肾组织病理改变,且可使肾组织中Bcl-2表达增加,Bax表达减弱。     

异丙酚对油酸性急性肺损伤模型大鼠肺组织细胞凋亡的影响

目的:探讨静脉麻醉药异丙酚对油酸性急性肺损伤(ALI)模型大鼠肺组织细胞凋亡的影响。方法:取40只SD大鼠随机分成正常对照组、ALI组及异丙酚低、中、高剂量(4、8、16mg·kg-1·h-1)组。除正常对照组不输注油酸外,其余4组大鼠均于颈静脉输注油酸,之后各组输注相应药物4h腹主动脉放血处死,留取肺组织,光镜观察肺病理变化,流式细胞仪检测肺组织细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Fas/FasL、Bax/Bcl-2的表达情况。结果:与正常对照组比较,ALI组肺组织细胞凋亡率显著升高(P<0.05);Bax、Fas和FasL蛋白表达均显著增强(P<0.05);Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05)。与ALI组比较,异丙酚中、高剂量组肺组织细胞凋亡率、Bax、Fas和FasL蛋白表达均显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达均显著增强(P<0.05),但低剂量组上述指标变化均不显著。结论:异丙酚可能通过调控油酸性ALI时肺组织Bax/Bcl-2、Fas/FasL系统的活化而显著抑制肺组织细胞凋亡,减轻肺损伤,从而发挥一定的保护作用。     

低温联合还原型谷胱甘肽对肝细胞缺血-再灌注损伤中bcl-2及bax的影响作用

目的观察低温联合还原型谷胱甘肽对缺血-再灌注诱导的L02肝细胞凋亡的影响,并探索相关分子机制。方法M1T11比色法检测低温联合还原型谷胱甘肽对细胞活力的影响;试剂盒检测低温联合还原型谷胱甘肽对细胞丙二醛（MDA）水平、乳酸脱氢酶（LDH）释放及超氧化物歧化酶（SOD）活力的影响;激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧簇（ROS）生成;Westernblot法检测低温联合还原型谷胱甘肽对bcl-2及bax蛋白表达水平的影响。结果低温联合还原型谷胱甘肽能明显抑制缺血-再灌注诱导的L02肝细胞活力降低（P〈0．05）;低温联合还原型谷胱甘肽处理细胞能明显抑制缺血-再灌注诱导的L｜02肝细胞MDA生成增加、LDH水平增高及SOD活力降低（P〈0．05）;低温联合还原型谷胱甘肽处理细胞能明显抑制缺血-再灌注诱导的L02肝细胞内bcl-2蛋白表达水平降低及bax蛋白表达水平增高（P〈0．05）。结论低温联合还原型谷胱甘肽可能通过上调bcl-2的表达及下调bax的表达抑制缺血-再灌注诱导的L02肝细胞凋亡发生。