Celecoxib抑制胃癌发生发展的实验研究

目的:研究胃癌组织与癌旁组织中的环氧化酶-2(COX-2)的表达,COX-2抑制剂Celecoxib对胃癌发展的影响。方法:采用SP免疫组织化学染色检测胃癌组织与癌旁组织中的COX-2表达;细胞计数法检测Celecoxib对胃癌细胞SGC7901和BGC823生长曲线的影响;MTT比色法检测Celecoxib对SGC7901细胞和BGC-823存活率的影响;ELISA法测定Celecoxib对胃癌细胞SGC7901细胞和BGC823分泌释放VEGF蛋白的影响。结果:胃癌组织与癌旁组织中的COX-2表达存在显著差异。Celecoxib对胃癌细胞SGC7901、BGC823均有抑制作用,表现出剂量依赖性和时间依赖性。Celecoxib对胃癌细胞SGC7901、BGC823分泌VEGF均有抑制作用,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,其VEGF分泌量也相应降低。结论:胃癌组织中的COX-2表达高于癌旁组织,Celecoxib可以抑制胃癌组织的发生发展。     

化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid对胃癌BGC-823细胞生长抑制作用的实验研究

目的：研究化合物K_1(ent-kaur-16-en-19-oic acid)对BGC-823胃癌细胞的生长抑制作用。方法：采用MTT法观察不同浓度化合物K_1对BGC-823胃癌细胞的生长抑制作用。结果：化合物K_1对BGC-823胃癌细胞增殖有明显的抑制作用。     

大蒜素对胃癌BGC823细胞株PPARγ基因的影响

目的观察大蒜素对胃癌BGC823细胞生长以及对PPARγmRNA表达的影响,探讨大蒜素抑制BGC823细胞增殖的可能作用机制。方法不同浓度的大蒜素处理胃癌BGC823细胞,MTT法观察细胞增殖抑制作用;RT-PCR法检测胃癌BGC823细胞中PPARγmRNA表达的变化。结果大蒜素抑制BGC823细胞增殖,呈浓度和时间依赖性;大蒜素作用72h后明显抑制胃癌BGC823细胞PPARγmRNA表达,呈浓度依赖性。结论大蒜素可能通过下调PPARγmRNA表达抑制胃癌BGC823细胞增殖,发挥抗肿瘤作用。     

沙利度胺联合替尼泊苷对人胃腺癌移植瘤生长的影响

目的探讨沙利度胺联合替尼泊苷在对胃腺癌BGC-823裸鼠移植瘤生长及肿瘤细胞周期的影响,了解二者联合对移植瘤的抑制作用。方法建立人胃腺癌BGC823移植瘤模型,实验分组,计算抑瘤率,流式细胞仪检测肿瘤细胞生长周期及凋亡情况。结果沙利度胺联合替尼泊苷组肿瘤组织S期细胞比例明显下降,大量肿瘤细胞阻滞于G2/M期,并可见明显凋亡峰。结论替尼泊苷联合沙利度胺对抑制人胃腺癌BGC823细胞生长具有协同作用,可诱导肿瘤细胞凋亡。     

基于熵权TOPSIS法综合评价不同产地枇杷叶质量

目的 对不同产地枇杷叶的质量进行综合评价。方法 以不同产地的30份枇杷叶为样品，采用热浸法测定其醇溶性浸出物含量，采用紫外分光光度法分别测定其总黄酮含量和总三萜酸含量，采用高效液相色谱法测定其5个三萜酸类成分（野鸦椿酸、山楂酸、科罗索酸、齐墩果酸及熊果酸）的含量。采用熵权逼近理想排序法（TOPSIS）综合评价不同产地枇杷叶的质量；运用SPSS22.0软件对枇杷叶片重、综合评价值、醇溶性浸出物含量、总黄酮含量、总三萜酸含量及5个三萜酸类成分含量进行双变量相关性分析。结果 30份不同产地枇杷叶中醇溶性浸出物含量为（24.56±0.08）%～(34.85±0.13)%，总黄酮含量为（4.69±0.11）～(14.23±0.27) mg/g，总三萜酸含量为（27.58±0.59）～(63.95±1.27) mg/g，野鸦椿酸、山楂酸、科罗索酸、齐墩果酸、熊果酸的含量分别为（0.728±0.011）～(6.064±0.063)、（0.526±0.013）～(3.245±0.022)、（1.222±0.025）～(8.807±0.094)、（0.856±0.021）～(2.931±0.075)、（...     

苦豆碱对胃癌细胞生长抑制作用的研究

目的 探究苦豆碱对胃癌细胞生长的抑制作用.方法 分别用0 mmon· L-1、1 mmon· L-1、2 mmon·L-1和4 mmon· L-1的苦豆碱处理SGC7901和BGC823细胞0、12、24、36和48 h,通过MTT实验检测苦豆碱对细胞增殖能力的影响;通过流式细胞术及Annexin V-PI染色检测苦豆...     

他莫昔芬对BGC-823细胞Caveolin-1表达的影响

目的:观察Caveolin-1蛋白在胃癌细胞系BGC823中的表达情况,并探讨胃癌细胞BGC823经他莫昔芬(TAM)处理后,Caveolin-1蛋白表达的变化。方法:使用5×10-6M和1×10-5M TAM处理胃癌细胞系BGC823 24h后,通过免疫荧光细胞化学的方法及细胞计数,检测细胞的凋亡情况以及Caveolin-1蛋白的表达变化。结果:Caveolin-1在胃癌BGC-823中高表达,经不同浓度的TAM处理24h后Caveolin-1的表达均下降(P<0.05),同时均出现明显凋亡(P<0.05)。Caveolin-1的表达下降与细胞凋亡数呈正相关关系(P<0.05)。结论:Caveolin-1在胃癌细胞BGC823中发挥生物学作用且与TAM介导的BGC823细胞的凋亡相关。     

新型Topo Ⅰ抑制剂CPUY013对胃腺癌细胞BGC823的体内外作用

探讨CPUY013在体内外对人胃腺癌BGC823细胞的抗肿瘤活性及其机制.采用MTT法、克隆原形成法检测CPUY013对BGC823细胞增殖的抑制作用;体外实验以pBR322 DNA为底物,依据质粒的松弛和超螺旋形式在琼脂糖电泳上泳动度对药物抑制解旋的作用进行定性分析.用AO/EB荧光染色技术、DNA凝胶电泳及JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测细胞凋亡.口服给药CPUY013后观察其对裸鼠移植瘤的生长抑制作用;用流式细胞术观察CPUY013对BGC823细胞周期的影响;采用Western blotting分别检测CPUY013处理后的BGC823细胞中Topo Ⅰ及凋亡相关蛋白表达的改变.结果表明,CPUY013呈明显的剂量依赖性抑制BGC823细胞的增殖.随着剂量的增加,CPUY013对Topo Ⅰ松弛活性的抑制趋势增强.100 μmol·L-1 CPUY013和拓扑替康(TPT)对Topo Ⅰ松弛活性的抑制呈现相似的变化趋势.CPUY013可使大部分BGC823细胞阻滞在S期,并诱导细胞凋亡;出现DNA片段化,亚G1峰显著增加,线粒体膜电位降低,荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等.同时,CPUY013能明显抑制BGC823裸鼠移植瘤的生长,150 mg·kg-1剂量组的瘤重抑制率为62.1%.CPUYOl3使BGC823细胞内Topo Ⅰ和bel-2蛋白表达均有所下调,p53和bax蛋白表达有明显上调趋势,bcl-2/bax比值明显降低,caspase-3蛋白表达增高.新型Topo Ⅰ抑制剂CPUY013在体内明显抑制移植瘤的生长,体外可诱导细胞凋亡从而抑制BGC823细胞增殖,其机制可能与抑制Topo Ⅰ,从而下调bcl-2,上调bax和p53蛋白的表达有关.     

灰离褶伞菌中活性物质体外抗肿瘤实验研究

目的:选择野生的灰离褶伞子实体作为研究对象,采用层析法,并辅助以萃取和重结晶等分离提取的方法,分离纯化灰离褶伞活性物质并测定其体外抗肿瘤活性。方法:采用层析法并辅助以萃取和重结晶等多种方法,进行活性物质的提取、分离;采用MTT法测定灰离褶伞活性物质对体外培养的大肠癌HT29、人胃癌细胞株BGC823两种肿瘤细胞的抑制作用。结果:灰离褶伞活性物质对大肠癌HT29、人胃癌细胞株BGC823两种细胞的抑制率均随着浓度的增大而增大。灰离褶伞活性物质的MTT检测OD值均显著或极显著低于阴性对照组。结论:灰离褶伞活性物质对大肠癌HT29、人胃癌细胞株BGC823两种肿瘤细胞均有较强的抑制作用,且其抑制率与浓度呈良好的量效关系。     

新型Topo I抑制剂CPUY013对胃腺癌细胞BGC823的体内外作用

探讨CPUY013在体内外对人胃腺癌BGC823细胞的抗肿瘤活性及其机制。采用MTT法、克隆原形成法检测CPUY013对BGC823细胞增殖的抑制作用；体外实验以pBR322 DNA为底物，依据质粒的松弛和超螺旋形式在琼脂糖电泳上泳动度对药物抑制解旋的作用进行定性分析。用AO/EB荧光染色技术、DNA凝胶电泳及JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测细胞凋亡。口服给药CPUY013后观察其对裸鼠移植瘤的生长抑制作用；用流式细胞术观察CPUY013对BGC823细胞周期的影响；采用Western blotting分别检测CPUY013处理后的BGC823细胞中Topo I及凋亡相关蛋白表达的改变。结果表明，CPUY013呈明显的剂量依赖性抑制BGC823细胞的增殖。随着剂量的增加，CPUY013对Topo I松弛活性的抑制趋势增强。100 μmol·L^-1 CPUY013 和拓扑替康(TPT)对Topo I松弛活性的抑制呈现相似的变化趋势。CPUY013可使大部分BGC823细胞阻滞在S期，并诱导细胞凋亡；出现DNA片段化，亚G1峰显著增加，线粒体膜电位降低，荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等。同时，CPUY013能明显抑制BGC823裸鼠移植瘤的生长，150 mg·kg^-1剂量组的瘤重抑制率为62.1%。CPUY013使BGC823细胞内Topo I和bcl-2蛋白表达均有所下调， p53和bax蛋白表达有明显上调趋势， bcl-2/bax比值明显降低， caspase-3蛋白表达增高。新型Topo I抑制剂CPUY013在体内明显抑制移植瘤的生长， 体外可诱导细胞凋亡从而抑制BGC823细胞增殖， 其机制可能与抑制Topo I， 从而下调bcl-2，上调bax和p53蛋白的表达有关。     

力达霉素诱导人胃癌BGC823细胞凋亡和抑制裸鼠移植瘤生长

观察力达霉素(LDM)对人胃癌BGC823细胞的诱导凋亡作用及体内抗肿瘤活性。采用MTT法观察LDM对人胃癌BGC823细胞增殖的抑制作用。利用Annexin V-FITC/PI双染结合流式细胞仪和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术检测细胞凋亡的改变。采用Western blotting法检测细胞中VEGF蛋白的表达情况。建立裸鼠胃癌皮下移植瘤模型，观察LDM的体内抗肿瘤活性。LDM能够明显抑制BGC823细胞增殖，诱导细胞凋亡，降低细胞VEGF蛋白的表达，抑制胃癌裸鼠移植瘤的生长。LDM剂量0.02和0.04 mg·kg^-1的抑瘤率分别为57%和72%(P<0.01)。LDM可诱导胃癌细胞凋亡并抑制裸鼠移植肿瘤的生长。     

戊地昔布对人胃癌细胞生长的抑制作用

目的　探讨选择性环氧化酶 2 (COX 2 )抑制剂戊地昔布对人胃癌BGC 82 3细胞的作用及其作用机制。方法　用MTT法检测戊地昔布对人胃癌BGC 82 3细胞生长的作用 ,用流氏细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布 ,用激光共聚焦显微镜、透射电镜和DNA片段进一步检测细胞凋亡 ,用乳酸脱氢酶 (LDH)试剂盒测定BGC 82 3细胞的LDH含量。结果　戊地昔布 (2 5～ 4 0 0 μmol·L-1 )可时间和浓度依赖性抑制人胃癌BGC 82 3细胞的生长 ,作用 72h后 ,对细胞生长抑制率可达 2 4 0 %～ 92 0 % ,凋亡率由 (2 6± 0 7) %增加到 (7 6±1 5 ) %～ (1 6 5± 1 5 ) %。 1 0 0～ 4 0 0 μmol·L-1 也降低增殖指数 ,减少细胞周期S期细胞 ,增加G0 /G1 期细胞。随浓度增加 ,戊地昔布引起的LDH释放率有增加趋势 ,但只有 4 0 0μmol·L-1 戊地昔布可显著增加LDH释放率。结论　戊地昔布可通过诱导凋亡和细胞周期停滞而抑制人胃癌BGC 82 3细胞生长 ,4 0 0 μmol·L-1 戊地昔布抑制BGC 82 3细胞生长作用与细胞坏死有关     

青果多糖提取物对人胃癌5-FU耐药细胞的逆转作用

目的：建立胃癌5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）耐药细胞BGC823/5-FU,探讨青果多糖提取物对BGC823/5-FU的逆转作用及机制。方法：采用逐步递增5-FU浓度、体外间歇诱导法诱导胃癌BGC823细胞,建立胃癌5-FU耐药细胞BGC823/5-FU;CCK-8试剂盒（Cell Counting Kit-8）检测青果多糖提取物对BGC823/5-FU细胞增殖的抑制作用;不同药物处理BGC823/5-FU细胞后,qRT-PCR分析对谷胱甘肽S-转移酶π（GST-π）和多药耐药基因MDR1 mRNA的表达,Western blot检测GST-π和P糖蛋白（P-gp,由MDR1基因所表达）的表达。结果：历时5个月建立BGC823/5-FU,对5-FU耐药性稳定,耐药指数为6.28,对顺铂、长春新碱和阿霉素也有不同程度的交叉耐药性;青果多糖提取物对BGC823/5-FU的5-FU耐药性有逆转作用,逆转倍数达到3.11倍;与BGC823/5-FU细胞对照组比较,5-FU处理组对GST-π和MDR1的mRNA表达及GST-π和P-gp的蛋白表达无明显影响,但青果多糖提取物组及青果多糖提取物+5-FU组GST-π和MDR1 mRNA及GST-π和P-gp的表达明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论：青果多糖提取物对BGC823/5-FU有逆转作用,其机制可能与降低耐药基因GST-π和MDR1 mRNA及GST-π和P-gp的表达有关。     

miR-4795-3p通过靶向EGFR抑制胃癌细胞的增殖和侵袭

目的:探讨微小RNA（miRNA）-4795-3p通过靶基因表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）抑制胃癌细胞增殖和侵袭。方法:本研究于2020年6月至12月分别转染阴性对照模拟物（阴性对照组）和miR-4795-3p模拟物（miR-4795-3p组）至胃癌BGC...     

siRNA干扰LOXL2基因对人胃癌细胞株BGC823侵袭的影响及机制

目的 研究小干扰RNA(siRNA)抑制胃癌细胞中LOXL2的表达情况,并探讨LOXL2基因对人胃癌细胞株BGC823侵袭能力影响及机制.方法 QRTPCR及蛋白印迹(Western blot)技术检测人胃癌细胞株BGC823、正常胃上皮细胞株GES-1中LOXL2表达;合成针对LOXL2的siRNA,并转染胃癌细胞株BGC823;应用Transwell实验检测BGC823细胞侵袭能力;检测转染前后BGC823侵袭相关基因基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达变化.结果 LOXL2在BGC823细胞中的表达明显高于胃上皮细胞株(P<0?.01);与未转染和转染阴性对照质粒组相比转染组胃癌细胞BGC823中LOXL2 mRNA和蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05),侵袭实验显示LOXL2-siRNA转染组胃癌细胞BGC823穿膜细胞数显著低于阴性对照质粒组和未转染组(P<0.05);转染后BGC823中MMP-2、MMP-9表达均较转染前降低(均P<0.05).结论 抑制胃癌细胞BGC823 LOXL2表达可降低细胞的侵袭能力.     

蚯蚓纤溶酶的抗肿瘤作用

目的　观察蚯蚓纤溶酶 (EFE)对体外人癌细胞株及体内人癌裸鼠移植性肿瘤生长的影响 ,对该药进行临床前抗肿瘤药效学评价。方法　采用MTT法观察蚯蚓纤溶酶对体外人癌细胞的生长抑制作用 ;用人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤模型对蚯蚓纤溶酶进行体内抗肿瘤药效学观察。结果　蚯蚓纤溶酶在体外对人癌细胞的生长无抑制作用 ;灌胃给予蚯蚓纤溶酶 2 0 0～ 10 0 0mg·kg-1,可明显抑制人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤的生长。结论　蚯蚓纤溶酶具有抗肿瘤作用。     

单克隆抗体与丝裂霉素交联物对人胃癌细胞的选择性杀伤作用

本文选用抗胃癌单克隆抗体(MoAb)3H 11与Mitomycin C(MMC)制备交联物。体外实验结果表明,3H 11-MMC对人胃癌细胞BGC 823有明显的杀伤作用。而且有明显的选择性:3H 11-MMC(相当于MMC 100 ng/ml)对靶细胞的杀伤率为71%,而对非靶细胞MCF-7仅为14%。MoAb 3H11与靶细胞预温后可使杀伤率(1 μg/ml)由85%下降为38%,而与MoAb 3G9预温却无明显影响。体内实验表明。3 H 11-MMC处理组,肿瘤形成的时间较各对照组明显延长,肿瘤生长速度明显减慢,具有显著性差异。     

丹参酮ⅡA抑制胃癌细胞株BGC823增殖活性研究

目的探讨丹参酮ⅡA对胃癌细胞株BGC823的抑制增殖活性及其可能的作用机制。方法应用MTF比色法检测不同浓度丹参酮ⅡA对BGC823细胞的增殖能力的影响,应用tit—PCR法检测给药后bel-2,bax以及c—myc基因mRNA表达水平的变化。结果MrITI’结果显示：用浓度0、2．5、5、10、20及40斗M丹参酮ⅡA处理24h后,BGC-823细胞抑制率分别0．00％、12．23％、21．79％、46．35％、77．32％和95．93％。克隆形成实验结果显示,低浓度的丹参酮ⅡA处理后的BGC．823细胞的增殖能力显著受到抑制。另外,PCR研究表明,在给药24h后,丹参酮ⅡA显著降低bcl—2和c—myc基因表达。结论丹参酮ⅡA对BC,C823细胞具有明显的抑制增殖以及诱导凋亡的作用,其可能的作用机制是通过降低bcl-2／bax的比值以及癌基因c-my~的表达有关。