华支睾吸虫病的免疫学诊断研究进展

华支睾吸虫病在世界范围内，尤其是在亚洲国家，发病率和死亡率还很高。华支睾吸虫病的免疫学诊断敏感性和特异性高，简便易行，发展也较快。近10年来。关于免疫学诊断技术的研究主要集中在ELISA、IFAT、IEST、免疫酶测定技术和各种华支睾吸虫特异的抗原抗体，其中对ELISA的改进方法和有关的抗原抗体研究得最多。今后，华支睾吸虫病的免疫学诊断方法主要向着更加敏感、特异、高效、经济、方便和安全的方向发展。     

排泄分泌抗原以ELISA法用于华支睾吸虫病血清学诊断优于粗抗原

粪检法是华支睾吸虫病的标准诊断方法 ,但由于依从性较差 ,应用起来有困难。为有效控制华支睾吸虫病 ,需要进行高效的群体检测。血清学诊断已快速发展起来并逐渐取代粪检法。虽然皮试法简单快速 ,但特异性较差 ,目前广为应用的是ELISA法。传统ELISA法用华支睾吸虫的粗抗原进行检测 ,敏感性和特异性较好 ,但存在交叉反应 ,因此需要更加敏感和特异的血清学诊断方法以检测华支睾吸虫病。本研究对华支睾吸虫的排泄分泌抗原 (ESA)检测抗体的ELISA法和粗抗原 (CA)检测抗体的ELISA法的诊断价值进行了比较和评估。收集流行区的华支睾吸虫…     

华支睾吸虫病诊断抗原研究进展

随着华支睾吸虫病防治工作的进展，其患病率及感染度逐步下降，而诊断的难度渐趋加大，原主要诊断方法粪检固有的缺陷愈加突出，免疫学诊断在临床辅助诊断和疫区流行病学调查中占据愈来愈重要的地位。诊断抗原的优劣决定着血清抗体检测、皮肤试验等免疫学方法的诊断效果。本文就近年来国内外有关华支睾吸虫诊断抗原的研究情况作一综述。     

华支睾吸虫成虫四种抗原的电泳及血清学分析

华支睾吸虫病在我国的流行仍有一定的广度和深度。目前对该病的免疫学诊断仍主要是使用全虫粗抗原,其敏感性,尤其是特异性不够理想。至今有关华支睾吸虫表皮膜抗原、代谢抗原的免疫学特性的资料还未见报道。本文首次建立了华支睾吸虫表皮膜抗原的提取方法,制备华支睾吸虫代谢抗原、全虫抗原及     

唾液检查诊断华支睾吸虫感染的效果观察

免疫学检查方法一直是华支睾吸虫病诊断的重要方面。新的免疫学检测方法的开发和应用不仅对于华支睾吸虫病的临床诊断,而且对于其现场流行病学调查都有重要意义。目前,血清是华支睾吸虫病免疫学诊断的主要材料。但要取得血清就会对组织造成一定的损伤。甚至引起感染。近年来已有一些应用唾液作为免疫学检测的样本。用于诊断血吸虫等其他寄生虫病的报告,显示了较高的诊断价值。我们尝试通过感染大鼠的研究了解唾液检查诊断华支睾吸虫病的实际效果。现将实验结果报告如下。     

用酶联免疫吸附试验评价不同华支睾吸虫成虫抗原在免疫诊断中的价值

用硫酸铵分段沉淀法将华支睾吸虫成虫粗抗原分离成为四种成分。以五种抗原制品(一种粗抗原制品和四种部分提纯抗原制品A、B、C和D)作为抗原,用微量酶联吸附试验(ELISA)检测华支睾吸虫病患者血清中相应抗体的存在。实验表明在五种抗原制品中,以抗原A在诊断华支睾吸虫病方面具有最高的阳性率,患者血清与正常人血清OD值的比值也最高。     

麝猫后睾吸虫病的诊断研究进展

麝猫后睾吸虫病是主要流行于东南亚地区的一种由麝猫后睾吸虫所引起的寄生虫病。传统的病原学诊断方法有着明显的局限和弊病。免疫学和分子生物学的发展为诊断提供了新的途径。随着对诊断抗原、抗体研究的深入以及诊断方法的改进 ,麝猫后睾吸虫病诊断的敏感性和特异性不断提高。本文着重对麝猫后睾吸虫病的免疫诊断研究和分子生物学技术的进展作一简要综述     

麝猫后睾吸虫病的诊断研究进展

麝猫后睾吸虫病是主要流行于东南亚地区的一种由麝猫后睾吸虫所引起的寄生虫病。传统的病原学诊断方法有着明显的局限和弊病。免疫学和分子生物学的发展为诊断提供了新的途径。随着对诊断抗原、抗体研究的深入以及诊断方法的改进，麝猫后睾吸虫病诊断的敏感性和特异性不断提高。本文着重对麝猫后睾吸虫病的免疫诊断研究和分子生物学技术的进展作一简要综述。     

重组华支睾吸虫诊断抗原研究进展

华支睾吸虫多种诊断抗原的基因已被克隆和重组表达，一些重组抗原已初步应用于华支睾吸虫病的免疫学诊断，显示出较高的诊断价值。     

病毒性肝炎患者华支睾吸虫抗体检测及临床意义

黑龙江省是华支睾吸虫病的高发区，感染率较高。由于病毒性肝炎和华支睾吸虫病均可导致肝胆系统损害，临床表现十分相似，容易混淆。在诊断为病毒性肝炎的人群中华支睾吸虫感染情况如何，相关报告甚少。为此，作者应用ELISA方法对108例病毒性肝炎患者进行了华支睾吸虫抗体检测和分析。结果报道如下。     

华支睾吸虫病金标诊断试剂盒的研制和现场初步实验

目的 研制华支睾吸虫病金标快速免疫诊断试剂盒，评价其敏感性、特异性和现场试用效果。方法 以华支睾吸虫成虫水溶性抗原、分泌排泄抗原和重组抗原磷酸甘油酸激酶(PGK)作为诊断试剂，制备胶体金免疫层析检测(Immunochromatography test，ICT)试剂盒，检测患者血清和唾液中抗华支睾吸虫IgG，并与常规ELISA血清学检测方法和粪便虫卵检查法相比较。结果 实验室检测临床确诊的华支睾吸虫病人血清中特异的IgG，3种抗原的敏感性均为100％。天然抗原除与慢性血吸虫病人血清有较强的交叉反应外，与囊虫、包虫、弓形虫病人血清没有交叉反应。重组PGK抗原同慢性血吸虫病人血清也没有交叉反应。用分泌排泄抗原制备的ICT检测试剂盒在流行区现场检测被调查者的血清和唾液，总符合率为92．31％；ICT与ELISA血清检测的总符合率为81．54％。现场获取了9人的粪便样本，其中4人检出华支睾吸虫卵，其血清ICT和ELISA检测均呈强阳性，另外未检出虫卵的5人中，1人血清ICT和ELISA均呈阳性，另1人仅血清ELISA呈弱阳性。结论 诊断华支睾吸虫感染的ICT抗体检测技术，尤其是无创性唾液检测技术，简便、快速、准确、安全，优于血清ELISA检测和粪便虫卵检测，适用于临床检验和现场大规模流行病学调查。     

华支睾吸虫病免疫诊断研究进展

华支睾吸虫病是华支睾吸虫寄生于人体肝胆管内引起,又称肝吸虫病,该病的诊断主要依靠检获虫卵,但因虫卵小或感染度轻、排卵少而易于漏诊,免疫诊断可弥补不足。随着高新技术的发展和应用,显著提高了免疫诊断的敏感性、特异性和诊断效果,其在临床辅助诊断和疫区流行病学调查中的作用越来越突出。现将近年来有关本病免疫诊断的研究进展综述如下。１　特异性抗体的检测１１　检测用特异性抗原的选择　检测抗体的特异性主要取决于所用抗原的特异性,华支睾吸虫诊断抗原的研究,大多限于粗抗原或初步纯化抗原［１］。１１１　华支睾吸…     

免疫金电转移印斑技术检测华支睾吸虫病人血清抗体

我们应用电转移印斑结合免疫金技术,进行了华支睾吸虫病人血清中抗体的研究,以寻找一个敏感、特异的华支睾吸虫病免疫诊断方法。一、材料和方法 (一)抗原的制备自人工感染华支睾吸虫囊蚴的猫肝中取华支睾吸虫成虫100条,以生理盐水洗涤数次.超声粉碎100w,10min,4℃冰箱冷浸72h,5000r/min离心15min,取上清液。 (二)实验血清1.华支睾吸虫病人血清:采自山东金乡县及宁阳县,经粪便检查,华支睾吸虫虫卵阳性     

华支睾吸虫病免疫诊断及分子生物学研究进展

华支睾吸虫病是亚洲东部的一种感染人的寄生虫病 ,主要分布在中国、日本、韩国和越南北部。传统的病原学诊断方法存在着一些弊病 ,免疫诊断抗原的提纯以及免疫诊断方法的改进则提高了诊断的敏感性和特异性 ,为华支睾吸虫病的诊断提供了科学的辅助手段。本文对华支睾吸虫病的免疫诊断抗原、诊断方法以及在分子生物学方面的研究进展作一简要综述     

华支睾吸虫特异性富甘氨酸2a类抗原基因的克隆、表达和免疫学诊断价值评价

目的采取免疫学方法筛选华支睾吸虫成虫cDNA表达文库,寻找新的抗原基因。方法使用华支睾吸虫病人混合血清以及华支睾吸虫排泄分泌抗原的免疫小鼠血清,分别免疫学筛选华支睾吸虫成虫λ ZAP cDNA表达文库;将阳性噬菌体克隆、测序以及核苷酸序列比对分析;将目的基因的编码区克隆至原核表达质粒pET28a(+)中,采用制备不带N端融合标签的天然蛋白的策略表达融合蛋白,使用组氨酸标签亲和纯化柱（Ni NTA树脂）纯化融合蛋白;采用间接ELISA法,检测血清中的特异性抗体,共检测35例华支睾吸虫虫卵粪检阳性血清,36例正常人血清,15例日本血吸虫、15例卫氏并殖吸虫和13例猪囊尾蚴病人血清,评价重组蛋白的免疫学诊断价值。结果发现华支睾吸虫特异性富甘氨酸2a（GRA2a）类抗原基因家族,将其中的Cs4抗原基因植入重组表达质粒pET28a(+)的NcoI位点,成功实现融合蛋白的表达,并进一步纯化得到可溶性重组蛋白。采用间接ELISA法检测血清中的特异性抗体,该ELISA法的敏感性为80.0%,特异性为97.2%,总符合率为88.7%;日本血吸虫、卫氏并殖吸虫和猪囊尾蚴病人血清的假阳性率分别为6.7%、6.7%和7.7%。经核苷酸序列同源性比较,华支睾吸虫GRA2a类抗原是迄今为止尚未进行功能研究的华支睾吸虫特异性抗原。结论发现华支睾吸虫GRA2a类抗原基因家族;成功构建重组表达质粒,并表达、纯化出可溶性重组蛋白;该抗原具有较高的免疫学诊断价值。     

华支睾吸虫病血清循环抗原的检测及动态观察

应用华支睾吸虫生虫抗原、代谢抗原以I-ELISA及双夹心ELISA法检测兔感染华支睾吸虫病血清中的循环抗原(CA)。结果显示,兔感染囊蚴后第3～10天血清中可检测出CA,以后CA量及检出阳性率逐渐增加,于38～45天达高峰,以后很快下降,呈一锐峰型,然后维持在一定水平。实验表明ELISA检测CA较为敏感、特异、简便,可用于早期诊断。     

斑点金免疫渗滤法检测华支睾吸虫病患者血清抗体的研究

目的　建立一种检测华支睾吸虫病血清抗体的简便、快速、敏感和特异的新方法。方法　以华支睾吸虫成虫抗原为包被抗原 ,金标记葡萄球菌A蛋白 (SPA)为显色剂 ,建立检测华支睾吸虫病患者血清抗体的斑点金免疫渗滤法 (DIGFA) ;并以dot ELISA作平行对照。结果　DIGFA和dot ELISA分别检测 119例华支睾吸虫病患者血清抗体 ,其阳性率分别为 96 6 %和 92 4% ,两法差异无显著性。DIGFA分别检测正常人血清 40例、囊虫病患者血清 2 0例、日本血吸虫病患者血清 2 5例 ,前者均为阴性 ,后两者的交叉反应率分别为 5 %和 4%。DIGFA与dot ELISA两法的符合率达 90 9%。结论　DIGFA的敏感性和特异性与dot ELISA相近 ,且具简便、快速及不需特殊设备等优点 ,是一种检测华支睾吸虫病患者血清抗体的新方法。     

华支睾吸虫病免疫诊断的近年进展

华支睾吸虫病的诊断,主要靠粪检虫卵。但在感染度较轻的情况下,常因粪便内虫卵少,加以虫卵很小,粪样镜检易致漏诊。近年来,随着酶、同位素、胶体金等标记技术和新方法的应用,华支睾吸虫病的免疫诊断获得较大进展,几种检测华支睾吸虫抗体或抗原的新方法具有较高的敏感性和特异性。现将这几种方法作一简要综述。     

华支睾吸虫成虫14～33 ku抗原诊断价值的研究

目的探讨纯化华支睾吸虫成虫14~33 ku抗原在华支睾吸虫病免疫诊断中的应用价值。方法使用SDS-PAGE和电洗提法,从可溶性华支睾吸虫成虫抗原中分离纯化14~33 ku抗原,用此抗原经ELISA方法检测华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病、日本血吸虫病、姜片虫病患者血清及健康人血清特异性IgG抗体,并与粗制可溶性成虫抗原和可溶性成虫脱脂抗原ELISA结果相比较。结果检测63例华支睾吸虫病患者血清,纯化华支睾吸虫成虫14~33 ku抗原ELISA阳性率为76.2%,可溶性成虫抗原和可溶性成虫脱脂抗原ELISA阳性率均为100%;检测25例卫氏并殖吸虫病、85例日本血吸虫病、27例姜片虫病患者血清,14~33 ku抗原的ELISA交叉反应阳性率分别为8.0%、3.5%、0,而可溶性成虫抗原分别为80.0%、62.4%、14.8%,可溶性成虫脱脂抗原分别为64.0%、55.3%、7.4%;检测127例健康人血清,14~33 ku抗原的ELISA假阳性率为0,可溶性成虫抗原和可溶性成虫脱脂抗原的假阳性率分别为5.5%、3.1%。结论纯化华支睾吸虫成虫14~33 ku抗原用于华支睾吸虫病免疫诊断的特异性优于粗抗原,但敏感性较低。     

华支睾吸虫重组半胱氨酸蛋白酶用于血清学调查的效果评价

目的 以华支睾吸虫重组半胱氨酸蛋白酶(CsCp)为ELISA包被抗原检测流行人群血清特异性抗体水平,与成虫粗抗原比较,评价其用于华支睾吸虫病血清学调查的价值. 方法 以佛山市南海区的1个行政村为调查点,用改良加藤厚涂片法检查粪便华支睾吸虫虫卵.同时采集血清,分别以rCsCP与成虫粗抗原(CsCAA)的ELISA方法检测血清特异性抗体水平,对粪检及两种抗原的ELISA结果进行统计学分析. 结果 接受血清检测的97人中,华支睾吸虫虫卵阳性率60.8%,CsCAA-ELISA阳性率75.3%,rCsCP-ELISA阳性率76.3%,特异性抗体阳性率高于虫卵阳性率(P<0.05),不同抗原ELISA阳性率差异无统计学意义(P>0.05);CsCAA-ELISA、rCsCP- ELISA结果与粪检结果的符合率分别为56.7%和55.7%,两种抗原ELISA结果的符合率为82.5%.59例粪检阳性者CsCAA-ELISA和rCsCP-ELISA阳性率均为76.3%,38例粪检阴性者CsCAA-ELISA和rCsCP-ELISA阳性率分别为73.7%和76.3%. 结论 以rCsCP为包被抗原,用ELISA检测华支睾吸虫病流行区人群血清特异性IgG抗体与使用CsCAA的检测结果有较高的符合率,但同样不能区分现症与既往感染.