急性散发性戊型肝炎病毒（HEV）部分核苷酸序列分析

应用逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测杭州市散发性成型肝炎病人的急性或血清，３例ＨＥＶＲＮＡ阳性（３／１０），对其中一份扩增产物用荧光法测序，并与ＨＥＶ墨西哥株、缅甸流行株和散发株以及中国流行株ＣＨ１．１序列比较表明，该株散发性ＨＥＶ与墨西哥株核昔酸和氨基酸序列的同源性分别为７９．４％和９５．０％，与缅甸流行株和散发株的核苷酸同源性分别为ｇ３．５％和９５．１％，氨基酸同源性分别为９６．６％和９８．３％，与中国新疆流行株ＣＨ１．１核苷酸和氨基酸同源性分别为９５．９％和９５．８％。提示该ＨＥＶ散发株与新疆流行株一样，与ＨＥＶ缅甸株可能为同一亚型。     

HBV感染孕妇血清HBVM与TORCH抗体检测

目的了解ＨＢＶ感染孕妇血清ＨＢＶＭ与ＴＯＲＣＨ抗体阳性率。方法应用ＥＬＩＳＡ法筛查出９３例ＨＢＶ感染孕妇,并用ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ。分娩时取脐血测弓形体（Ｔｏｘ）、风疹病毒（ＲＶ）、巨细胞病毒（ＣＭＶ）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ－Ⅱ）四种病原血清特异性ＩｇＭ和风疹病毒ＩｇＧ抗体。结果９３例ＨＢＶ感染孕妇中ＴＯＲＣＨ总感染率４７．３１％。单项抗体阳性率２５．８１％,７例为２项抗体阳性,２例３项抗体阳性。原发宫内感染以Ｔｏｘ最高（１２．９０％）,ＣＭＶ次之（６．４５％）,随后ＨＳＶ－Ⅱ（５．３８％）,ＲＶ最低（３．２３％）。孕妇ＨＢｓＡｇ阳性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率７６．９２％,ＴＯＲＣＨ感染率６１．５４％。ＨＢｓＡｇ阴性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率３８．８９％,ＴＯＲＣＨ感染率３７．０４％。结论脐血ＴＯＲＣＨ感染率与母血ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ相关（相关系数分别为０．１４、０．２９、０．１５）。乙肝感染孕妇ＴＯＲＣＨ的抗体筛查对优生优育是非常有用的指标。     

1995～1997年辽宁,河南,河北省麻疹病毒流行株基因型分析

以反转录二步多聚酶链反应方法（ＲＴ－ＰＣＲ）直接测定麻疹病人唾液、尿液标本中的麻疹病毒（ＭＶ）血凝基因（Ｈ）、核衣壳基因（Ｎ）。以ＲＴ－ＰＣＲ产物纯化后进行ＭＶ４５０ｎｔＨ、２８２ｎｔＮ基因核苷酸片段测序分析,测序结果一致表明１９９５～１９９７年期间中国部分地区ＭＶ流行株存在２种基因型。其中一种基因型只发现１株,与ＥＤｗ５４株相同,另一种基因型占流行株的绝大多数（称新基因型）,与其它国家以前报道的ＭＶ流行株基因型的Ｎ基因最大差异为１５．４％,与ＥＤｗ５４、疫苗株相差８．８％;Ｈ基因最大差异是１０．８％     

山东地区HGV—RNA检测及部分核酸序列测定

目的 了解山东地区慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）患者中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的状况，并测定其结构基因ＣＥ１区部分核苷酸序列。方法 用逆转录套式聚合酶链反应法（ＲＴ－ｎＰｃＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ，并对部分阳性血清扩增的产物采用ＰＣＲ技术片段直接克隆法测定。结果 从１１６例慢性丙型肝炎患者血清中检出ＨＧＶＲＮＡ阳性３１例（２６．７％），其中１例患者ＨＧＶＣＥ１区部分核苷酸序列与中国第一株Ｕ７５３５６及另一例     

套式聚合酶链反应及限制酶分析对孕妇巨细胞病毒感染及其母婴？…

用套式聚合酶链反应（ｎＰＣＲ）及限制酶分析，病毒分离和特异性抗体测定检测孕妇外周血，脐带血及互胎组织巨细胞病毒（ＨＣＭＶ０。结果３６７例孕妇中，孕早、中、晚期ＨＣＭＶ阳性率分别为８．６％、１．６％和７．０％，ｎＰＣＲ检出率（４．９％）高于病毒分离（３．０％，Ｐ〈０．０２５）。６份ｎＰＣＲ阳性母血中，３份配对脐血ｎＰＣＲ阳性。提法：ｎＰＣＲ能提高诊断ＨＣＭＶ的特异性与敏感性，对孕妇及胎儿／新生儿ＨＣ     

三种危险因素的协同致肝癌作用

为分析黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）、乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）在致人原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）时可能的协同作用，对同份人ＨＣＣ组织分别采用高效液相色谱法、嵌套式ＰＣＲ及逆转录嵌套式ＰＣＲ检测ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，检出率分别为６７．７％（２１／３１）、８８．２％（６０／６８）和１３．２％（９／６８）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为５８．１％（１８／３１），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为８．８％（６／６８），由４例ＨＣＣ患者重叠检出ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组，３种危险因素全部阴性。结果表明，３种危险因素均与人类肝癌直接相关，并且存在着协同致癌效应     

血液透析患者丙型肝炎病毒高变区核苷酸序列分析

目的探讨维持性血液透析（血透）患者感染丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的传播途径。方法应用核苷酸序列分析技术检测１５例血透患者感染的ＨＣＶ高变区（ＨＶＲ）核苷酸序列,并进行同源性比较。结果比较１５例血透患者ＨＣＶＨＶＲ核苷酸序列发现,分离株８、１２和１４间核苷酸序列同源性高达９７．００％,株４、５和１０间同源性高达９５．００％,株１、３～８、１０～１４相互间同源性均在８０．００％以上,这些患者均在同一房间透析或有共用透析机史;株２与其他各株间同源性为６１．２５％～６６．２５％,株９与其他各株间同源性５７．５０％～６７．５０％,两者均有大量输血史。结论血透患者感染ＨＣＶ的主要原因为输血,同时在血透环境中亦可能存在ＨＣＶ感染的医源性传播途径。     

应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV一DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０８例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ一ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｓ、抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率为２０％（２／１０）；（４）在抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率为２５％（２／８）；文中就ＰＣＲ检测的结果及临床意义作了扼要的讨论。     

三种危险因素的协同致肿癌作用

为分析黄曲霉毒素，乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒在致人原发性肝细胞癌时可能的协同作用，对同份人ＨＣＣ组织分别采用高效液相色谱法，嵌套式ＰＣＲ及逆转录嵌套式ＰＣＲ检测，ＡＦＢ１，ＨＢＶ，ＤＮＡ和ＨＣＶ ＲＮＡ，检出率分别为６７．７％，８８．２％，和１３．２％。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶ ＤＮＡ重叠检出率为５８．１％，ＨＢＶ ＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为８．８％，由４例ＨＣＣ患者重叠检出ＡＦＢ１，ＨＢＶ、     

用RT—PCR法分析合肥地区HCV基因型

应用逆转录－ＤＮＡ聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），对合肥地区的１９５例病人的血清进行了ＨＣＶＲＮＡ检测及基因型分析。结果显示，８０例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本中，７０例（８７．５％）为Ⅱ／１ｂ型ＨＣＶ感染，７例（８．８％）为Ⅲ／２ａ型，３例（３．７％）为Ⅱ和Ⅲ型混合感染，未发现Ⅰ／１ａ和Ⅳ／２ｂ型ＨＣＶ感染。     

聚合酶反应在HBV感染诊断中的意义──附544例检测结果分析

为探讨多聚酶链反应（ＰＣＲ）在评价乙肝病毒（ＨＢＶ）感染中的意义，笔者分析了５４４例ＰＣＲ检测结果。按每六届全国病毒性肝炎学术会议诊断标准分类：慢活肝１１５例、慢迁肝８６例、肝硬化１８例、无症状病原携带者３２５例。据乙肝五项（ＥＬＩＳＡ法）结果分类：１．３．５阳性者２１６例，１．３阳性者４２例，１．４．５阳性者８３例，１．５阳性者９２例，单项ＨＢｓＡｇ阳性者６５例，单项抗ＨＢｓ阳性者４６例。结果：１．３．５和１．５阳性组ＨＢＶＤＮＡ阳性率分别为９９．１％；１．４．５和１．５阳性组ＨＢＶＤＮＡ阳性率分别３４．９％、６０．１％：单项ＨＢｓＡｇ阳性和单项抗ＨＢｓ阳性组ＨＢＶＤＮＡ阳性率分别为１８．５％；６．５％。肝功能正确组和肝功能异常组ＨＢＶＤＮＡ阳性率分别为５４．６％（１６６／３４０）、９２．６％（１８９／２０４），其差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。慢活肝、慢迁肝、肝硬化、无症状组ＨＢＶＤＮＡ阳性率分别为８８．７％（１０２／１１５）、８０．２％（６９／８６）、１００％（１８／１８）、５１．１％（１６６／３２５）。经统计学分析，前三组与无症状组之间的差异均具显著性意义（Ｐ＜０．０１）。结果提示：（１）用ＰＣＲ     

保定地区肾综合征出血热病人血清PCR分型及核苷酸序？…

为明确保定肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）疫区的型别采用ＲＴ－ＰＣＲ方法,检测急性期ＨＦＲＳ病人血清的汉坦病毒（ＨＶ）ＲＮＡ,并进行分型及部分核苷酸序列的测定,并与国内外ＨＶ的代表株进行比较。结果３１份急性期病人血清经ＲＴ－ＰＣＲ分型,２４份为汉城型（ＳＥＯ型）,２份为汉滩型（ＨＴＮ型）,并测得ＳＥＯ型Ｃ３株Ｍ基因（位于１９８５－２３１４位）,ＨＴＮ型ＬＢＹ株Ｍ基因（位于１９９６－２３１４位）核苷酸序列     

HCV体外感染多种细胞株的观察

目的 寻找ＨＣＶ体外感染的细胞培养系统。方法 选用ＨＣＶ ＲＮＡ阳性血清感染人单核细胞株（Ｕ９３７）、人Ｔ淋巴细胞株（Ｍｏｌｔ－４）、人胆囊细胞株（Ｋｉｒｌｉｃｈ）、猪肾细胞株（ＰＫ１５）、鼠睾丸细胞株（ＳＴＥ）、人肝癌细胞株（ＨｅｐＧ２、Ｈｅｐ３Ｂ）等７种细胞。应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＣＶ ＲＮＡ在这种７种细胞中的感染和复制情况。结果 ７种细胞中均能检测到ＨＣＶ ＲＮＡ正链，并且在Ｕ９３７、Ｍｌ     

山东省部分地区献血员丙型肝炎病毒感染状况及分型研究

选择４２４例有偿献血员用ＥＬＩＳＡ检测抗－ＨＣＶ,对抗－ＨＣＶ阳性血清用ＥＬＩＳＡ进行血清深发型,对已确定血清者采用ＲＴ－ＰＣＲ作基因分型。结果４２４例献血员中,ＨＣＶ率为２１．７０％（９２／４２）,献血并血浆者的ＨＣＶ阳性者中,血清学分型率为３４．７８％（３２份）,其中血清学１型３０例（９３．７５％）、２型２例（６．２５％）,该３２例血清中３０例可用基因分型,其中基因２型２６例（８６．６７％）,     

慢性丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正、负链的检测

选择ＨＣＶ基因组５’非编码区的两对引物，利用逆转录巢式ＰＣＲ技术对３５例慢性丙型肝炎患者的血清中正链ＨＣＶＲＮＡ、ＰＢＭＣ中正、负链ＨＣＶＲＮＡ进行检测。结果血清中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６２．９％（２２／３５），ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ的阳性率为５４．３％（１９／３５），负链ＨＣＶＲＮＡ的阳性率为３４．３％（１２／３５）。同时对第２次ＰＣＲ的阳性产物进行限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ），进一步证实ＰＣＲ产物为ＨＣＶ特异性扩增产物，结果说明ＨＣＶ能在ＰＢＭＣ中存在或复制，即肝细胞并非ＨＣＶ感染与复制的唯一场所。ＰＢＭＣ可能作为病毒长期滞留场所，使病毒感染持续存在，是丙型肝炎易发生慢性化的原因之一。     

上海地区丙型和戊型肝炎人群流行病学调查及其流行因素的研究

１９９３～１９９４年上海地区病毒性肝炎监测点２３５５０例散发性急性肝炎血清学分型检测结果，丙型肝炎分别占 ２． ２％，２． ５％，戊型肝炎分别占１５． ５％，１８． １％。 １９９１～１９９４年对不同年龄健康人群 １２３０ 人，作抗－ＨＣＶ检测，阳性２８人，流行率为２．３％。对２０８６人作抗－ＨＥＶ检测，阳性１７１人，流行率为８．２％。并对 １３４０名特殊人群开展ＨＣＶ和 ＨＥＶ感染率调查，发现透析病人和静脉吸毒者ＨＣＶ流行率分别为 ６９． ６％和 ６７． ７％，献血员为 ２．７％，性乱人群为 １． ９％，弱智儿童为 １． １％，在押犯人 ２． ３％。 ＨＥＶ流行率分别为性乱人群１７．６％，弱智儿童３０．１％，卡拉ＯＫ女３２．１％，在押犯人２１．６％。本次病例配对调查结果发现，经血传播丙型肝炎主要传播途径（ＯＲ值在 １０以上），戊型肝炎以粪－口途径传播为主（ＯＲ值在３～４）。通过调查证实，上海地区存在着丙型和戊型肝炎流行，其中戊型肝炎已成为第三种（甲型肝炎、乙型肝炎）影响上海地区的肝炎病种。作者建议应继续加强对丙型戊型肝炎的防治研究。     

应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV—DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０３例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清     

PCR检测HBVDNA与ELISA检测HBVM对比研究

我院于１９９５年２月－８月对乙型肝炎及表面抗原携带者１６８例同时采用ＰＣＲ技术检测ＨＶＤＮＡ和ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢＶＶＭ，结果发现；大三阳２１例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率９５．２％，小三阳９９例中ＨＢＶＤＮＡ阳性性率４７．５％，抗－ＨＢｅ，抗－ＨＢｃ阳性ＨＢＶＤＮＡ阳性率３３．３％，ＨＢＶＭ全部转阴者中ＨＢＶＤＮＡ阳性率亦占３０％。     

戊型肝炎病毒结构区编码多肽检测相应抗体方法的建立及应用

利用多肽合成技术在戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）的结构区内的开放读码框（ＯＲＦ）－２和ＯＲＦ－３区合成了Ｐ１、Ｐ２二条具有明确抗原表位的合成多肽,作为ＥＩＡ法抗－ＨＥＶ诊断试剂的固相抗原测定抗－ＨＥＶ。在７８例急性甲型肝炎中抗－ＨＥＶ检出率为７．８％,慢性乙型肝炎的检出率为２．９％,志愿献血员为１．４％,急性输血性丙型肝炎检出率为０。本室抗－ＨＥＶ诊断试剂的精密度检测ＣＶ值为６．８％～９．１％。优于部颁体外诊断试剂ＣＶ值≤１５％的标准。抗－ＨＥＶ的灵敏度测定Ｐ１合成肽为１∶１６００,而Ｐ２合成肽１∶１２…     

慢性丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正,负链的…

选择ＨＣＶ基因组５＇非编码区的两对引物，利用逆转录巢式ＰＣＲ技术对３５例慢性丙型肝炎患的血清中正链ＨＣＶ ＲＮＡ、ＰＢＭＣ中正、负莲ＨＣＶ ＲＮＡ进行检测。结果血清中正链ＨＣＶ ＲＮＡ阳性率为６２．９％（２２／３５），ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性率为５４．３％（１９／３５），负链ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性率为３４．３％（１２／３５）。同时对第２次ＰＣＲ的阳性产物进行限制性片段长度多态性分析（ＲＦ