亚慢性染毒B[a]P与大鼠海马细胞凋亡及学习记忆损伤的关系

[目的]观察亚慢性染毒苯并[a]芘（benzo[a]pyrene,B[a]P）对大鼠海马细胞凋亡的影响,分析其与学习记忆损伤的关系,探讨B[a]P神经毒性机制。[方法]选取健康雄性SD大鼠48只,饲养一周后根据Morris水迷宫检测结果将其分为空白对照组、溶剂对照组、B[a]P染毒组[0.5、1.5、4.5和10.0mg（/kg.bw）]。隔日腹腔注射染毒90d后,Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;流式细胞仪检测海马细胞凋亡。[结果]4.5、10.0mg/kg B[a]P组大鼠平均潜伏期显著高于空白和溶剂对照组和0.5、1.5mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义（P〈0.05）;10.0mg/kg B[a]P组大鼠穿越平台次数和平台象限滞留时间百分比显著低于空白和溶剂对照组及0.5、1.5mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义（P〈0.05）;4.5mg/kg B[a]P组大鼠穿越平台次数和平台象限滞留时间百分比显著低于空白和溶剂对照组及0.5mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义（P〈0.05）;10.0mg/kg B[a]P组大鼠平台象限滞留时间显著低于空白和溶剂对照组及0.5mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义（P〈0.05）。10.0mg/kg B[a]P组海马细胞早期凋亡率和总凋亡率显著高于空白和溶剂对照组及0.5、1.5和4.5mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义（P〈0.05）。Pearson相关性分析结果显示,B[a]P染毒大鼠海马细胞早期凋亡率与平均潜伏期呈正相关（r=0.542,P〈0.05）;海马细胞早期凋亡率与平台象限滞留时间呈负相关（r=-0.395,P〈0.05）、与平台象限滞留时间百分比呈负相关（r=-0.592,P〈0.05）。[结论]亚慢性染毒B[a]P可导致大鼠海马细胞凋亡和学习记忆能力损伤,海马细胞凋亡可能是B[a]P诱发大鼠学习记忆能力损伤的机制之一。     

苯并[a]芘亚慢性染毒对大鼠海马胆碱能系统的影响

目的 通过观察亚慢性染毒苯并[a]芘(B[a]P)对大鼠神经行为及海马组织中乙酰胆碱(Ach)含量、胆碱酯酶(AChE)活力和乙酰胆碱受体α7亚型(nAChRα7)mRNA和蛋白表达的影响,探讨B[a]P的神经毒性机制.方法 选择60只健康雄性SD大鼠,随机分为空白对照组,溶剂对照组,1.0、2.5、6.25 mg/kg B[a]P染毒组,隔日腹腔注射连续染毒90 d.Morris水迷宫和跳台试验检测大鼠学习记忆能力.碱性羟胺法检测海马组织Ach含量,DNTB法检测AChE活力.荧光定量PCR和Western-blot法分别检测海马组织nAChRα7 mRNA和蛋白表达水平.结果 Morris水迷宫、跳台试验结果显示,2.5、6.25 mg/kg B[a]P组大鼠学习记忆能力比空白和溶剂对照组大鼠明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).2.5、6.25 mg/kgB[a]P组大鼠海马组织Ach含量明显低于空白、溶剂对照和1.0 mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义(P＜0.05),6.25 mg/kg B[a]P组AChE活力明显低于空白对照、溶剂对照和1.0 mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义(P＜0.05).各组之间nAChRα7 mRNA和蛋白表达水平的差异无统计学意义(P＞0.05).大鼠海马组织Ach含量与大鼠平均逃避潜伏期和总路程呈负相关(相关系数r分别为-0.567和-0.503,P＜0.01),与平台象限滞留时间呈正相关(r=0.800,P＜0.01).结论 亚慢性染毒B[a]P可损伤大鼠学习记忆功能,其机制与大鼠海马组织Ach含量下降有关     

苯并[a]芘对大鼠海马组织氧化应激及ATP酶的影响

目的 通过研究苯并[a]芘(B[a]P)对大鼠行为学、海马氧化应激及ATP酶的影响,探讨B[a]P的神经行为毒性分子机制.方法 将120只21d龄雄性SD大鼠,随机分为空白对照组、植物油组(溶剂对照组),2.5、5.0、10.0 mg/kg B[a]P染毒组,每组24只.腹腔注射给药,每天1次,连续4周.染毒结束后,用Morris水迷宫和穿梭箱检测学习记忆能力;用化学比色法测定海马超氧化物歧化酶(SOD)、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活力及丙二醛(MDA)含量;用荧光标记方法测定海马Ca2+浓度.结果 各染毒组大鼠的水迷宫逃避潜伏期、穿梭箱主动回避反应潜伏期(AARL)和被动回避反应潜伏期(RARL)均明显高于空白对照组和溶剂对照组,水迷宫末次跨平台次数和穿梭箱主动回避反应次数(AARF)均明显低于空白对照组和溶剂对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);且呈剂量-效应关系.与空白对照组和溶剂对照组比较,染毒组大鼠海马组织SOD活力、Na+-K+-ATP酶和ca2+-Mg2+-ATP酶活力明显下降,且呈剂量-效应关系,差异均有统计学意义(P＜0.05).染毒组大鼠海马组织MDA含量、Ca2+浓度均明显高于空白对照组和溶剂对照组,且呈剂量-效应关系,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 B[a]P所致神经行为毒性,可能与染毒后大鼠海马组织氧化应激受损,Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力下降有关.     

苯并[a]芘对大鼠学习记忆能力及氨基酸类神经递质的影响

[目的]探讨苯并[a]芘(B[a]P)对大鼠学习记忆能力的影响及机制。[方法]40只Wistar大鼠随机分为5组:空白对照组、溶剂对照组和3个染毒组(分别为6.25、2.5和1mg/kg体重),连续腹腔染毒B[a]P13周(90d)。染毒结束后用Morris水迷宫测定大鼠的空间学习记忆能力,用免疫组化法观察其大脑皮层、海马内γ-氨基丁酸(GABA)及谷氨酸(Glu)阳性神经元表达。[结果]在Morris水迷宫试验中,高、中剂量组寻找平台的潜伏期较对照组延长(P﹤0.05),末次跨平台次数和在目标区域游泳时间所占比例较对照组明显减少(P﹤0.05),各暴露组Glu、GABA阳性平均光密度与对照组比较差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]苯并[a]芘可能通过影响大鼠海马和大脑皮质Glu和GABA含量,使大鼠学习记忆能力降低。     

苯并[a]芘对大鼠脑组织中神经细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因表达的影响

目的 观察苯并[a]芘(B[a]P)染毒大鼠神经细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达,以探讨B[a]P对大鼠神经毒性及其作用机制.方法 32只SD大鼠,按体重随机分为4组,每组8只,染毒组分为高、中、低3个剂量组(126.2、63.1、31.5 μg/kg的B[a]P溶液),并设溶剂对照组(50 μl/kg橄榄油),均采用侧脑室微量注射染毒处理,每周1次,连续3周;在染毒3周后采用原位末端缺口标记(TUNEL)法和免疫组织化学法分别对各组大鼠脑组织凋亡细胞的分布及Bcl-2、Bax免疫反应阳性细胞进行观察和检测.结果 TUNEL染色结果显示,在大鼠大脑皮质及海马区的细胞核中可以见到棕黄色的凋亡小体,而且随着染毒剂量的增高,出现凋亡小体的细胞数逐渐增多.与溶剂对照组相比,高剂量组大鼠大脑皮质及海马神经细胞凋亡指数(AI)均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).免疫组化染色结果显示,与溶剂对照组相比,中、高剂量染毒组大鼠大脑皮质及各剂量组海马区神经细胞的Bcl-2蛋白表达均明显下降,Bax蛋白表达均明显升高,各组大鼠皮质及海马神经细胞的Bcl-2/Bax比值均下降,差异均有统计学意义(P＜0.05或(P＜0.01).大鼠大脑皮质及海马区神经细胞AI与Bel-2呈负相关(r=-0.927,P＜0.01;r=-0.934,P＜0.01),AI与Bax呈正相关(r=0.858,P＜0.01;r=0.874,P＜0.01),AI与Bcl-2/Bax比值呈负相关(r=-0.939,P＜0.01;r=-0.942,P＜0.01).结论 B[a]P可引起大鼠大脑皮质及海马区神经元细胞的凋亡,且调控凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达,在B[a]P致神经细胞凋亡的过程中发挥了重要的作用.     

苯并[a]芘对大鼠学习记忆和海马氨基酸类神经递质含量的影响

目的 研究苯并[a]芘(B[a]P)对大鼠学习记忆和海马氨基酸类神经递质含量的影响.方法 健康雄性SD大鼠32只,按脑室插管后的体重随机分为4组:溶剂对照组及2.5、5.0、10.0mmol/L B[a]P染毒组.以不同浓度(2.5、5.0、10.0 mmol/L)的B[a]P橄榄油溶液各10μl侧脑室注射染毒大鼠,溶剂对照组注射等体积的橄榄油.用Morris水迷宫测试大鼠的学习记忆能力.高效液相色谱一荧光检测器法测定海马氨基酸类神经递质的含量.结果 与对照组相比,B[a]P染毒组大鼠学习记忆能力明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);而且染毒组大鼠海马谷氨酸(Gh)含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);而天冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)、γ-y.氨基丁酸(GABA)含量在各组未见明显变化.结论 B[a]P能使大鼠空间学习记忆能力降低,这可能与海马兴奋性氨基酸含量的降低有关.     

苯并[a]芘对大鼠海马神经元形态学的影响

目的研究苯并[a]芘(B[a]P)对大鼠海马形态学和突触的影响。方法初断乳雄性Wistar大鼠40只,随机分为空白对照组、溶剂对照组和3个染毒组(分别为6.25、2.5和1mg/kg体重),连续腹腔染毒13周(90d)。在染毒结束后,用电镜和光镜观察海马形态学改变。结果 HE染色对照组和B[a]P暴露各组大鼠海马神经元形态结构未见明显异常,电镜仅高剂量组偶有线粒体肿胀和核浓缩现象出现。高剂量组神经元突触PSD厚度和突触活性区长度均明显小于对照组和低剂量组(P﹤0.05),突触界面半径明显大于对照组和低剂量组(P﹤0.05)。结论低剂量B[a]P暴露对海马神经元形态和超微结构无明显影响,但B[a]P可能引起突触形态学的改变,降低突触的传递效率,因而影响学习记忆能力。     

苯并(a)芘对大鼠学习记忆行为及海马NOS和NO的影响

[目的]探讨不同剂量苯并[a]芘对大鼠学习记忆能力的影响及其机制。[方法]将40只Wistar幼鼠随机分为5组,空白对照组、溶剂对照组、3个染毒组(浓度分别为1.0、2.5和6.25mg/kg体重),连续腹腔染毒13周(90d)。染毒结束后用Morris水迷宫测定大鼠的空间学习记忆能力,测定海马组织中NOS活性和NO含量。[结果]BaP暴露各组大鼠寻找平台的平均逃避潜伏期比对照组明显延长,末次跨台次数明显减少(P﹤0.05),BaP暴露各组大鼠海马NOS活性和NO含量均低于对照组(P﹤0.05)。[结论]长期BaP暴露使大鼠空间学习记忆能力降低,其机制可能与BaP抑制NOS活性,影响海马NO含量,从而使LTP的诱导和维持受损有关。     

锰对大鼠大脑热休克蛋白27、70 mRNA表达的影响

[目的]探讨锰染毒条件下大鼠大脑热休克蛋白27(HSP27)和70(HSP70)的变化规律。[方法]健康2月龄雄性SD大鼠50只,随机分为5组:生理盐水对照组和Mn2+染毒2.5、5.0、10.0、20.0mg/kg组(分别以A、B、C、D和E组表示)。每只大鼠每天腹腔注射染毒0.5mL,连续30d,处死大鼠后采用等离子体原子发射光谱(ICP-AES)测定脑组织锰含量。通过实时荧光定量PCR(QT-PCR)检测大鼠亚慢性锰染毒后脑组织中HSP27和HSP70mRNA的相对表达水平。[结果]不同剂量组脑组织中的锰含量与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,B、C、D、E组HSP27mRNA的相对表达量增加,分别为对照组的2.00、5.51、8.78和6.61倍;HSP70mRNA的相对表达量也增加,分别是对照组的1.68、10.27、22.88和2.20倍。[结论]锰可以调节大鼠脑组织HSP27和HSP70表达的变化。     

苯并(a)芘对大鼠睾丸胰岛素样因子3基因表达的影响

目的 观察青春期大鼠苯并(a)芘(BaP)亚慢性染毒对睾丸间质细胞功能标志物胰岛素样因子3(Ins13)mRNA表达水平的影响.方法 72只青春期健康雄性SD大鼠随机分为溶剂对照组(玉米油)、1、5mg/kgBaP染毒组,每组24只.隔日染毒,等体积灌胃,连续染毒90d.分别于染毒后30、60和90 d,每组各随机选取8只大鼠处死.取睾丸、附睾、心、肝、脾、肾称重并计算脏器系数,放免法检测血清睾酮含量,实时荧光定量PCR法检测睾丸Ins13 mRNA表达差异.结果 60dBaP各染毒组以及90 d5 mg/kg组附睾系数显著低于对照组(P＜0.05);染毒30 d5 mg/kg组肝脏系数显著大于对照组(P＜0.05),90d时显著小于对照组(P＜0.05);血清睾酮水平30 d和60 d 5 mg/kg染毒组明显高于对照组(P＜0.05),90 d 5 mg/kg组明显低于1 mg/kg组(P＜0.05);BaP处理组睾丸Ins13 mRNA表达水平各时相点比对照组显著下调(P＜0.01),染毒60 d比30 d显著下调(P＜0.05),尤其是5mg/kg组(P＜0.01).结论 青春期大鼠BaP亚慢性暴露可以干扰血清睾酮及睾丸Ins13基因表达水平,对附睾、肝脏可能有潜在毒性.     

出生后早期接触功夫菊酯对仔鼠大脑突触蛋白表达的影响

目的 观察出生后早期功夫菊酯(LCT)染毒对ICR仔鼠不同脑区突触蛋白表达的影响.方法 健康清洁级ICR小鼠按2∶4(雄∶雌)合笼受孕,出生小鼠每窝随机分为5组,分别为0.1、1.0和10.0 mg/kg LCT染毒组及溶剂对照组(0.01%二甲亚砜)和生理盐水对照组,每组雌雄各4只,仔鼠出生当天为出生后第0天(PND 0),PND5开始灌胃染毒,隔天1次,连续5次,PND14取材.蛋白质印迹法检测皮层、海马、纹状体突触蛋白的表达.结果 与溶剂对照组比较,各染毒组雄性仔鼠和10.0mg/kg组雌性仔鼠海马组织及1.0、10.0 mg/kg组雄性仔鼠和10.0 mg/kg组雌性仔鼠皮层胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达升高,差异均有统计学意义(P＜0.05),且有剂量相关性(雄性:r海马=0.986,r皮层=0.945;雌性:r诲马=0.993,r皮层=0.969,P＜0.05);仔鼠各脑区的β微管蛋白Ⅲ型(Tuj)表达无明显改变;10.0 mg/kg组雄性仔鼠和各染毒组雌性仔鼠的海马及10.0 mg/kg组雌性仔鼠皮层生长相关蛋白43(GAP-43)表达升高,差异均有统计学意义(P＜0.05),且有剂量相关性(雄性:r海马=0.882;雌性:r海马=0.997,r皮层=0.99,P＜0.05);仔鼠各脑区的突触蛋白Ⅰ(Synapsin Ⅰ)表达无明显改变.10.0 mg/kg组雄性仔鼠海马、纹状体及雌性仔鼠皮层组织,各染毒组雌性仔鼠海马组织及1.0、10.0 mg/kg组纹状体组织突触后致密蛋白95(PSD95)表达降低,差异均有统计学意义(P＜0.05),PSD95表达与染毒剂量呈依赖性下降(雄性:r海马=-0.991;雌性:r纹状体=-0.996,r皮层=-0.995,P＜0.05).结论 出生后早期接触LCT,对仔鼠大脑突触蛋白的表达均有一定的影响;提示LCT可能影响仔鼠大脑突触联系的构建.

Abstract：

Objective To evaluate the influence on the synaptic protein expression in different brain regions of ICR mice after lambda-cyhalothrin (LCT) exposure during postnatal period. Methods Two male and 4 female healthy ICR mice were put in one cage. It was set as pregnancy if vaginal plug was founded.Offspring were divided into 5 groups randomly, and exposed to LCT (0.01% DMSO solution) at the doses of 0.1, 1.0 and 10.0 mg/kg by intragastric rout every other day from postnatal days (PND) 5 to PND13, control animals were treated with normal saline or DMSO by the same route. The brains were removed from pups on PND14, the synaptic protein expression levels in cortex, hippocampus and striatum were measured by western blot. Results GFAP levels of cortex and hippocampus in the LCT exposure group increased with doses, as compared with control group (P＜0.05), while Tuj protein expression did not change significantly in the various brain regions of ICR mice. GAP-43 protein expression levels in the LCT exposed mouse hippocampus and in female ICR mouse cortex increased with doses. as compared with control group (P＜0.05). Presynaptic protein (Synapsin Ⅰ) expression levels did not change obviously in various brain regions. However, postsynaptic density protein 95 (PSD95) expression levels of the hippocampus and striatum in male offspring of 10.0 mg/kg LCT group, of cortex of female LCT groups, and of female offspring in all exposure groups, of striatum, in 1.0 or 10.0 mg/kg LCT exposure groups significantly decreased (P＜0.05). Conclusions Early postnatal exposure to LCT affects synaptic protein expression. These effects may ultimately affect the construction of synaptic connections.     

过氯酸铵对大鼠甲状腺功能及其球蛋白和过氧化物酶mRNA表达的影响

目的 研究过氯酸铵(AP)对大鼠甲状腺功能及甲状腺球蛋白(Tg)、甲状腺过氧化物酶(TPO)基因mRNA表达的影响.方法 将雄性SD大鼠30只随机分为:正常对照组、低碘组(含碘量:50μg/kg)、AP染毒低(130 mg/kg)、中(260 mg/kg)、高剂量组(520 mg/kg)及AP+高碘组[AP:520 mg/kg,高碘饮水(10 mg/L)],每组5只.经口染毒90 d后处死,放射免疫法测定血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)及促甲状腺激素(TSH)的水平;荧光定量PCR法测定甲状腺球蛋白(Tg)、甲状腺过氧化物酶(TPO)基因mRNA表达水平.结果 AP中剂量和AP高剂量组FT4水平[(9.540±1.327)fmol/ml,(6.509±1.949)fmol/ml)明显低于正常对照组[(13.505±1.276)fmol/ml],差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).AP高剂量组的TSH水平[(1.227±0.295)mIU/L]明显高于正常对照组[(0.545±0.282)mIU/L],差异有统计学意义(P＜0.05);各AP剂量组Tg的mRNA表达相对值均明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.01),AP高剂量组TPO基因mRNA表达相对值明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 AP可降低大鼠FT3、FT4水平,引起TSH反馈性增高,并明显抑制Tg和TPO基因mRNA的表达;而高碘可以在一定程度上拮抗AP对大鼠甲状腺的毒作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of ammonium perchlorate (AP) on thyroid functions and mRNA expression levels of thyroglobulin(Tg) and thyroperoxidase (TPO) genes of rats. Methods Thirty SD male rats were randomly divided into six groups: control group, iodine-deficient group, low dose AP group ( 130 mg/kg), moderate dose AP group (260 mg/kg), high dose AP group (520 mg/kg) and high iodinecombined group. After the rats were exposed orally for 90 days, serum free-thyroxine (FT4), freetriiodothyronine (FT3) and thyroid stimulating hormone (TSH) were measured using radioimmunoassays.mRNA expression levels of thyroglobulin (Tg) and thyroperoxidase (TPO) genes were detected by real-time quantitative PCR. Results Serum FT4 levels in moderate dose AP group and high dose AP group were [(9.540±1.327) fmol/ml] and [(6.509±1.949) fmol/ml] respectively, which were significantly lower than that [ (13.505 ±1.276 ) fmol/ml] in control group (P＜0.05 or P＜0.01). Serum TSH level in high dose AP group was [(1.227±0.295) mIU/L], which was significantly higher than that [(0.545±0.282) mIU/L] in control group (P＜0.05). The mRNA expression levels of thyroglobulin (Tg)gene in all groups exposed to AP were significantly lower than that in control group (P＜0.01). The mRNA expression level of thyroperoxidase (TPO)gene in high dose AP group was significantly higher than that in control group (P＜0.05). Conclusion AP can reduce the serum FT3 and FT4levels of rats, increase the serum TSH level of rats and decrease obviously the mRNA expression levels of Tg and TPO genes. In addition, high iodine can reduce the toxic effects of AP on thyroid gland of rats to some extent.     

辛伐他汀和非诺贝特对小鼠肝脏载脂蛋白M表达的影响及调控机制

目的 探讨辛伐他汀和非诺贝特及两者联合对小鼠肝脏载脂蛋白M（apoM）表达的影响及其机制,为防治动脉粥样硬化提供依据.方法 32只C57BL/6N小鼠按数字表法分为四组,对照组：普通饮食喂养;他汀组：辛伐他汀[10 mg/（kg·d）]干预;贝特组：非诺贝特[100 mg/（kg·d）]干预;联合组：辛伐他汀[10 mg/（kg·d）]和非诺贝特[100 mg/（kg·d）]干预,4周后分别检测小鼠肝脏apoM mRNA和蛋白、肝细胞核因子-1α（HNF-1α）mRNA、肝X受体-α（LXRα）mRNA的表达.结果 辛伐他汀和非诺贝特均上调apoM mRNA（1.97±0.04;2.02±0.02）和蛋白、HNF-1α mRNA（1.74±0.05;1.71±0.04）的表达,联合组（3.07±0.03;2.57±0.03）升高程度高于他汀组（1.97±0.04;1.74±0.05）和贝特组（2.02±0.02;1.71±0.04）（P＜0.05）.辛伐他汀下调LXRα mRNA（1.00±0.02）表达（P＜0.05）,非诺贝特上调LXRα mRNA（2.80±0.04）表达（P＜0.05）,联合组LXRα mRNA表达（1.56±0.03）与对照组（1.53±0.03）比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 辛伐他汀和非诺贝特可上调apoM表达,两者联合疗效更显著;其机制可能与两者调控HNF-1α和LXRα有关.     

苯并[a]芘对体外培养大鼠皮层神经元HSP70表达的影响

目的 研究苯并[a]芘(B[a]P)对体外培养大鼠皮层神经元热休克蛋白70(HSP70)表达的影响.方法 分离培养SD大鼠皮层神经元,用0、0.1、0.5 、1、5和10μmol/L浓度的B[a]P染毒24h观察剂量-效应关系;用0、0.5和5μmol/L浓度的B[a]P染毒24、48和72h观察时效关系.培养液中均添...     

苯并(a)芘对焦炉工和大鼠体内脂质过氧化水平的影响

[目的]探讨苯并(a)芘[B(a)P]对焦炉工及动物体内脂质过氧化水平的影响。[方法]对134名焦炉工和36名对照组人员进行问卷调查,并检测其血浆中的总超氧化物歧化酶(T-SOD)水平及全血中的谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平;40只雄性SD大鼠分为4组[对照组,B(a)P 1.3 mg/kg组、3．2 mg／kg组、7．8 mg/kg组],分别腹腔注射B(a)P染毒,隔天1次,历时60d后处死,用SOD、MDA、GSH、ROS(活性氧)试剂盒检测血浆中及脑海马回组织的上述指标。[结果]焦炉作业工人血浆中SOD、全血中GSH活性均显著低于对照组(P<0．05);而MDA活性显著性高于对照组(P<0．05)。大鼠血浆中SOD及ROS均值组问差异有统计学意义(P<0．05),MDA均值组间差异无统计学意义(P>0．05)。与对照组相比,B(a)P7．8mg／kg组SOD均值增高,差异有统计学意义(P<0．05);B(a)P 7．8mg/kg组及B(a)P 3．2mg/kg组ROS均值降低,差异有统计学意义(P<0．05)。海马回神经细胞SOD、MDA及GSH均值组间差异有统计学意义(P<0．05)。与对照组相比, B(a)P7．8mg/ks组SOD及GSH均值降低,MDA均值增高,差异有统计学意义(P<0．05);B(a)P 3．2mg/kg组GSH均值降低,差异有统计学意义(P<0．05)。[结论]苯并(a)芘可以引起生物膜脂质过氧化改变,对脑海马回组织的损害比对血液的损害严重。     

高表达诱导型热休克蛋白70对甲醛所致损伤的体外试验研究

目的 研究诱导型热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)在甲醛所致损伤中的保护作用.方法 人支气管上皮细胞human bronchial epithelium,HBE)转染含有hsp70基因的质粒,以增高Hsp70的表达,转染载体质粒的细胞和正常培养的细胞作为对照,分别为Hsp70高表达组(HBE/hsp70)、转染对照组(HBE/pcDNA)和对照组(HBE),并对3组细胞Hsp70的表达量进行鉴定.HBE/hsp70组和HBE组在接受不同浓度甲醛(0、0.39、1.56、6.25 mmol/L)染毒4 h后,检测各组细胞谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量以及DNA-蛋白质交联(DNA-protein crosslink,DPC).结果 细胞转染含有hsp70基因的质粒后,Hsp70蛋白表达量与HBE组相比增高约80%.HBE/hsp70组GSH含量先增高,在甲醛浓度为0.39和1.56 mmol/L时分别为141.0、119.6 mg/gpro,与HBE组(分别为75.8、56.7 mg/gpro)比较,差异有统计学意义(P<0.01),但当甲醛浓度增高到6.25 mmol/L时,GSH含量降低.而HBE组细胞的GSH含量随着甲醛浓度的增高一直呈下降的趋势.HBE/hsp70组、HBE组细胞MDA含量均随甲醛浓度的升高而增加,且HBE/hsp70组细胞MDA含量一直低于HBE组,在甲醛浓度为1.56 mmol/L时MDA含量为0.088μmol/gpro,与HBE组(0.138 μmol/gpro)相比,差异有统计学意义(P<0.05),甲醛浓度为6.25 mmol/L时,HBE/hsp70组细胞MDA含量为0.140 μmol/gpro,与HBE组(0.289 μmol/gpro)相比,差异有统计学意义(P<0.01).HBE/hsp70组、HBE组细胞DPC百分含量均随甲醛浓度的升高而增加,且HBE/hsp70组一直低于HBE组,在甲醛浓度为0.39 mmol/L时,HBE/hsp70组DPC含量为3.94%,HBE组为6.25%,差异有统计学意义(P<0.01),甲醛浓度为1.56 mmol/L时,HBE/hsp70组DPC含量为11.86%,HBE组为20.89%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Hsp70可降低甲醛对体外支气管上皮细胞造成的损伤.

Abstract：

Objective To investigate the protective role of inducible heat shock protein 70 (Hsp70) against damage induced by formaldehyde. Methods Human bronchial epithelium (HBE) cells were transfected with plasmid harboring hsp70 gene to increase the protein expression level. HBE cells transfected with pcDNA3.1 plasmid were used as transfection control and HBE cells cultured at normal condition served as control. Three groups were marked as HBE/hsp70, HBE/pcDNA and HBE. Hsp70 expression levels of 3 groups were detected. The cells of HBE/hsp70 and HBE groups were exposed to different concentrations of formaldehyde (0,0.39,1.56,6.25 mmol/L) for 4 h. The contents of GSH and MDA were measured, and KC1-SDS method was applied to measure DNA-protein crosslink (DPC). Results Hsp70 level in HBE/hsp70 group increased by 80% compared with HBE group. GSH contents in HBE/hsp70 group significantly increased and were 141.0, 119.6 mg/gpro at 0.39, 1.56 mmol/L, respectively (P<0.01), as compared with HBE group. However, it decreased when formaldehyde concentration increased to 6.25 mmol/L. While GSH content in HBE group remained decreasing. MDA contents in HBE/hsp70 and HBE group increased with formaldehyde. MDA content in HBE/hsp70 was 0.088 μmol/gpro and significantly lower than that (0.138 μmol/gpro) in HBE group (P<0.05) when formaldehyde concentration was 1.56 mmol/L, At the formaldehyde dose of 6.25 mmol/L MDA content in HBE/hsp70 was 0.140 μmol/gpro which was significantly lower than that (0.289 μmol/gpro) in HBE group (P<0.01). DPC% in two groups increased with formaldehyde. At the formaldehyde dose of 0.39 mmol/L, DPC% in HBE/hsp70 group was 3.94% which was significantly lower than that (6.25%) in HBE group (P< 0.01). At the formaldehyde dose of 1.56 mmol/L, DPC% in HBE/hsp70 group was 11.86% which was significantly lower than that (20.89% ) in HBE group (P<0.05). Conclusion Hsp70 can reduce formaldehyde-induced damages in human bronchial epithelium cells in vitro.