大白鼠实验性心肌缺血再灌注模型制备与心电图改变的特点

通过较大数量的动物实验，在制作大白鼠心在再灌注模型方面进行尝试，除对目前流行制作方法有所改进外，提出大鼠 缺血再灌注的心电图表现特点，这对于制作动物在体模型时判断缺轿再灌注成功与否具有价值。     

心肌缺血-再灌注损伤大鼠心电图变化机制的研究

[目的]探讨大鼠心肌缺血再灌注损伤过程中,氧自由基及心肌细胞凋亡与缺血再灌注性心律失常的关系。[方法]建立大鼠心肌缺血-再灌注模型,对比缺血期与再灌注期的心律失常发生率及平均持续时间、ST段改变、心肌丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、心肌细胞凋亡情况。[结果]缺血期房室传导阻滞、室性早搏及室速的发生率分别为7.5%、15%及10%;再灌注后分别为30%、67.5%及32.5%,与缺血期相比,再灌注后上述指标均明显增高。室速的平均发作时间由缺血期的(40±14)s上升到(495±103)s(P<0.01);再灌注后室颤平均持续时间为(198±22)s。再灌注后心肌MDA含量高于缺血组(P<0.01),且有逐渐递增趋势;心肌SOD活力较缺血组降低(P<0.01),再灌注120 min后下降趋缓。再灌注组心肌细胞凋亡明显高于缺血组(P<0.05)。缺血再灌注损伤过程中,心律失常发生率与SOD活力变化呈负相关,与MDA值变化及心肌细胞凋亡变化均呈正相关。[结论]氧自由基及心肌细胞凋亡很可能是造成心肌缺血再灌注后心律失常的重要因...     

大鼠心肌缺血再灌注损伤模型的改进

目的 改进心肌缺血再灌注模型制备，提高制模成功率。方法 采用成年SD大鼠制作心肌缺血再灌注模型，对传统造模方法进行了改进，不做气管插管，不剪断肋骨，冠状动脉结扎在胸外进行，冠状动脉结扎前放一引线，避免了二次开胸。大大减少了造模时间，提高了造模成功率。用心电图J点抬高与高耸T融合呈弓背向上的单相曲线，肉眼观及病理检查作为判断结扎成功指标。结果 造模25只，成功20只，成功率80％。结论 本方法造模成功率高，心脏暴露好、结扎可靠，操作简单、方便。     

大鼠心肌缺血再灌注模型的建立

临床上,急性心肌梗塞的有效治疗方法就是通过溶栓、心脏搭桥等手段使冠状动脉重新再通,而冠状动脉再灌注后会带来一系列的损伤问题。我们把心脏缺血后重新得到灌注后,心肌细胞能量代谢障碍及结构破坏反而加重的现象称为心肌缺血再灌注损伤（ ischemia-reperfusion）。在实验室,对心肌缺血再灌注损伤的机制、治疗等方面的研究是通过建立动物模型实现的。其中,大鼠冠状动脉侧支循环较少,容易建立比较稳定的缺血再灌注模型,并且所需实验仪器简单,成本较低,是实验中较常选用的动物。本实验主要介绍了大鼠心肌缺血再灌注损伤模型的制备方法。     

川芎嗪抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用

目的：研究川芎嗪（TMP）对大鼠心肌超微结构再灌注损伤的影响。方法：24只SD大鼠分为川芎嗪处理组与损伤组,每组12只,分别于心肌缺血再灌注前于30sec内从尾静脉注入TMP（50mg/kg)及等容生理盐水,再灌注10min后观察缺血区心肌超微结构的变化,结果：损伤组心肌细胞水肿,糖原颗粒分布减少,线粒体明显肿大、空胞线粒体膜完整,肌丝片状溶解,断裂,TMP处理组心肌缺血改变有明显减轻。结论：川芎嗪对再灌注心肌超微结构的改变有明显的保护作用。     

牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨牛磺酸(taurine)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法建立心肌缺血再灌注损伤模型,观察牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注后血清中SOD、LDH、MDA、TNF-α以及心肌组织中TNF-α活性的影响.结果 与假手术组比较,其余各组大鼠血清SOD含量明显降低,血清中LDH、MDA...     

大鼠心肌缺血再灌注模型建立方法的改进

【目的】改进大鼠心肌缺血再灌注动物模型制作方法。【方法】雄性Sprague-Dawley大鼠麻醉开胸后，用310医用单丝线穿过冠状动脉，在结扎线下垫聚乙烯管，结扎缝线缺血30min，剪断缝线再灌注120min。可省却呼吸机。【结果】24只SD大鼠，行单纯冠状动脉结扎术模型组大鼠存活率为10／12，再灌注后模型组存活率为9／12。假手术组存活率为12／12。经过氯化三苯基四氮唑（TIE）染色，梗死心肌和正常心肌组织分界清晰。Nagar Olsen心肌组织特殊染色，光镜下对照组心肌组织染成黄色，而模型组心肌组织可见大片红染的阳性反应区。【结论】采用本方法制作大鼠心肌缺血／再灌注损伤模型成功率较高，且操作简单、创伤小。     

改良式大鼠心肌缺血再灌注模型的复制

[目的]改良大鼠心肌缺血再灌注(I/R)模型的制作方法。[方法]SD大鼠30只,体质量(220±20)g,雄性,随机分为常规造模组,改良组,比较结扎时垫以直径为0.6mm的鱼线,30min后拔出鱼线的方法制造I/R模型与常规造模方法的优缺点。[结果]改良后的模型制造方法在保持实验稳定性情况下术中心率最低值,术后平均苏醒时间,大鼠术后3d内的生存率分别为(303±16)次/分,(38±9)min,86.67%,而常规造模组大鼠术中心率最低值,术后平均苏醒时间,术后3d生存率分别为次/分,(63±12)min,66.67%,[结论]改良后的造模方法较常规造模方法保护了动物机能状况,提高了术后动物生存率,具有明显优越性。     

褪黑素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨褪黑素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响。方法：采用大鼠在体心肌缺血再灌注模型,观察褪黑素对再灌注心律失常的影响。测定其血清ＬＤＨ、ＣＫ、ＳＯＤ、ＭＤＡ的含量。结果：褪黑素降低再灌注心律失常的发生率,降低室颤发生率,缩短心律失常持续时间,升高血清ＳＯＤ活性,降低血清ＭＤＡ、ＬＤＨ、ＣＫ含量。结论：褪黑素对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用。     

黄芩素对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用

目的：观察黄芩素（Bai）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并进一步探讨其作用机制。方法：结扎大鼠左冠状动脉前降支制备心肌缺血再灌注损伤模型。比色法检测大鼠血清中乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和髓过氧化物酶（MPO）水平;显微镜镜下观察心肌坏死程度。结果：与模型组比．Bai能降低血清中LDH、MDA、MPO含量（P〈0．05,0．01,0．001）,提高血清中SOD含量（P〈0．05,0．01）,减轻心肌坏死程度。结论：Bai对心肌缺血再灌注损伤有保护作用,作用机制可能与抗氧化、减少心肌酶的漏出有关。     

丹曲林对大鼠缺血再灌注心肌能量代谢的影响

目的 探讨丹曲林对大鼠心肌缺血再灌注过程中能量代谢的影响.方法 48只健康雄性Wistar大鼠分为对照组、缺血再灌注组和丹曲林处理组,建立Langendorff离体心脏灌注模型.各组均先用Krebs液灌注平衡30 min.缺血再灌注组在平衡30 min后全心缺血30 min,再灌注60min;丹曲林处理组Krebs液中加入5 μmol/L丹曲林.以氯化四唑染色法观察心肌梗死面积,并用乳酸脱氢酶(LDH)活性和血液动力学变化评估心肌损伤程度.采用高效液相色谱法测定心肌组织中高能磷酸化合物,以及嘌呤核苷酸补救合成的两个酶,次黄嘌呤(鸟嘌呤)磷酸核糖转移酶(HGPRT)和腺嘌呤磷酸核糖转移酶(APRT)的活性,来研究丹曲林对缺血再灌注心肌能量代谢的影响.结果 丹曲林处理的心肌梗死面积和LDH释放均显著低于缺血再灌注组[22.1%比25.3%、(70±6)U/g比(116±10)U/g,均P＜0.05];丹曲林对缺血再灌注心脏的血液动力学没有明显作用,只是冠脉流量有轻微增加.丹曲林处理组高能磷酸化合物含量明显高于缺血再灌注组(P＜0.05),而HGPRT和APRT的活性均显著低于缺血再灌注组[(7.63±0.72)nmol·mg-1·min-1比(12.42±1.12)nmol·mg-1·min-1、(4.14±0.22)nmol·mg-1·min-1比(4.57±0.39)nmol·mg-1·min-1,均P＜0.05].结论 丹曲林减轻缺血再灌注损伤,显著促进再灌注心肌的能量代谢,对心肌有保护作用.

Abstract：

Objective To investigate the effect of dantrolene on energy metabolism in rats with myocardial ischemia-reperfusion. Methods Forty-eight male rats were randomly divided into 3 groups:control group, ischemia-reperfusion group and dantrolene treatment group. With a Langendorff model system, the hearts were perfused with Krebs buffer for 30 min as pre-ischemia control. For ischemiareperfusion, the hearts were subjected to global ischemia for 30 min and reperfusion for 60 min. The dantrolene treatment group was perfused in the presence of 5 μmol/L dantrolene before ischemia.Tetrazolium chloride (TTC) staining, lactate dehydrogenase (LDH) release and hemodynamics were used to evaluate the tissue injuries. The effect of dantrolene on energy metabolism was evaluated by measuring the quantity of high-energy phosphates and the activity of 2 enzymes in purine salvage synthesis: hypoxanthineguanine phosphoribosyl transferase (HGPRT) and adenine phosphoribosyl transferase (APRT) by highperformance liquid chromatography (HPLC). Results The myocardial infarct size and LDH release in dantrolene treatment group were lower than those of ischemia-reperfusion hearts [22.1% vs 25.3%, (70 ± 6) U/g vs (116 ± 10) U/g, both P ＜0.05]. Dantrolene had no effect on the hemodynamics, except for a slight increase in coronary flow. The hearts receiving dantrolene showed a significantly higher levels of highenergy phosphates and a lower activity of HGPRT and APRT than those in the ischemia-reperfusion group [(7.63 ±0.72) nmol · mg-1 · min -1 vs (12.42 ± 1.12) nmol · mg-1 · min-1, (4.14 ±0.22) nmol ·mg-1·min-1 vs (4.57±0.39)nmol·mg-1· min -1 , both P ＜ 0. 05]. Conclusion Dantrolene is cardioprotective for ischemia-reperfusion injury through reducing infarct size and improving energy metabolism.     

促红细胞生成素对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用

目的：探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)的保护作用及其机制。方法：采用结扎左冠状动脉前降支30min、再灌注120min的方法建立大鼠MIRI模型。将50只SD大鼠随机分为假手术组、缺血-再灌注组、EPO100U／kg治疗组、EPO1000U／kg治疗组、EPO5000U／kg治疗组5组，每组10只。连续监测肢体Ⅱ导联心电图记录再灌注时心律失常情况；测定再灌注末血清磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)，心肌丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、Na^ -K^ -ATP酶和Ca^2 -ATP酶的变化；观察心肌超微结构改变。结果：EPO显著降低再灌注室性心律失常的发生；减少再灌注末血清CK-MB和心肌MDA含量，提高心肌GSH-PX、CAT、Na^ -K^ -ATP酶和Ca^2 -ATP酶的活性；明显减轻缺血-再灌注对心肌超微结构的损伤。对心肌SOD活性无影响。结论：EPO对大鼠MIRI有明显的保护作用，其机制可能与减轻氧自由基及钙超载损害有关。     

京尼平苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

【目的】研究京尼平苷（Geniposide,Gen）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。【方法】采用开胸结扎冠状动脉左降支的方法,制备大鼠心肌缺血再灌注模型。40只大鼠随机分成5组：假手术组、缺血再灌注模型组、京尼平苷低剂量组、京尼平苷中剂量组、京尼平苷高剂量组,每组各8只。连续监测Ⅱ导心电图（ECG）,比色法检测血清中肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）含量,硫代巴比妥酸法测定心肌组织中丙二醛（MDA）含量,黄嘌呤氧化酶法测定心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）活力。【结果】与模型组相比,京尼平苷低、中、高3个剂量组显著降低ST-段抬高幅度（P〈0.01）、CK值（P〈0.01）、LDH值（P〈0.05）、MDA值（P〈0.05）,SOD值明显增高（P〈0.05）。【结论】京尼平苷能够明显减轻缺血再灌注对心肌细胞损伤程度,对心肌有明显的保护作用,其机制可能与其能够提高SOD活力、减少MDA生成有关。     

福辛普利和缬沙坦对大鼠缺血再灌注模型心肌细胞凋亡的影响

目的:观察福辛普利和缬沙坦对大鼠缺血再灌注模型心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响.方法:SD大鼠随机分为四组:假手术组、缺血再灌注组、福辛普利组和缬沙坦组.分别于实验终点采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学方法检测心肌组织Bcl-2、Bax蛋白表达.结果:心肌细胞凋亡数目随再灌注时间延长而增加,以缺血30min再灌注48小时最高(247.2±25.9),与缺血30min再灌注4h比较有显著性差异(P＜0.01).福辛普利组与缬沙坦组心肌细胞凋亡数、心肌组织中Bax蛋白表达均低于缺血再灌注组(P＜0.05).结论:心肌缺血再灌注过程中心肌细胞凋亡、心肌组织中Bax蛋白表达是个动态的变化,福辛普利与缬沙坦减少心肌细胞凋亡的数量,其抑制作用可能与部分下调Bax蛋白表达有关.     

丙泊酚对大鼠心肌缺血后处理的作用

目的 探讨不同剂量丙泊酚缺血后处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的作用.方法 制备大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型,结扎冠状动脉左前降支60 min,再灌注120 min.随机分为假手术组(S组)、生理盐水对照组(C组)、丙泊酚1 mg/kg组(P1组)、丙泊酚2 mg/kg组(P2组)、丙泊酚5 mg/kg组(P3组),除S组其余各组所用药物均以生理盐水稀释至2.5 ml,于再灌注前3 min经股静脉匀速输注至再灌注后5 min,测定心肌危险区面积和梗死区面积;采用免疫组化方法 检测心肌组织Caspase-3的表达;应用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;运用Western印迹方法 测定Akt磷酸化水平.结果 与C组[危险区面积(41.5±1.0)%,梗死区面积(45.5±1.0)%,Caspase-3表达5.87±0.29,心肌细胞凋亡率(26.8±1.3)%,Akt磷酸化(10.8±1.9)%]相比,P1组和P2组大鼠危险区面积和梗死区面积明显减小[危险区面积(38.3±1.0)%和(37.3±1.2)%;梗死区面积(33.8±1.2)%和(30.2±1.7)%,均P<0.05];Caspase-3表达降低(1.50±0.36和1.48±0.30,均P<0.05);心肌细胞凋亡率下降[(16.3±1.2)%和(16.5±1.0)%,均P<0.05];而Akt磷酸化水平明显升高[(68.7±4.0)%和(58.3±2.8)%,均P<0.05].结论 丙泊酚1 mg/kg和2 mg/kg通过促进Akt磷酸化发挥I-postC保护作用.     

利多卡因对家兔心肌缺血-再灌注损伤自由基及NO的作用

目的:研究利多卡因对家兔缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:24只家兔随机分为3组:假手术组(A组)、缺血-再灌注组(B组)、利多卡因组(C组),每组8只。B组、C组阻断左冠状动脉前降支40min,再灌注90min,A组仅穿线不结扎。C组于开放冠状动脉再灌注前经颈静脉注射利多卡因5mg/kg,B、C组注射等量生理盐水。于再灌注90min取颈静脉血测定NO。再灌注90min后取心肌组织测定GSH-PX、MDA、NOS。结果:心肌组织GSH-PXB组较A、C组降低(P<0.01),MDA较A、C组升高(P<0.01);血清NO、心肌组织NOSB组较A、C组降低(P<0.01)。结论:利多卡因对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。     

硝酸甘油对离体大鼠心脏心肌缺血-再灌注损伤的作用研究

目的：探讨硝酸甘油（NTG）对离体大鼠心脏缺血期补充一氧化氮（NO）供体对缺血-再灌注损伤的影响。方法：取36只大鼠建立Langendorff离体心脏灌流模型,离体大鼠心脏缺血30min,再灌注60min,分为用药组（18只）及对照组（18只）。用药组于缺血期给予4.4×10-3mmol/L硝酸甘油,碳酸氢盐缓冲液灌注。对照组仅给予碳酸氢盐缓冲液灌注。全部心脏均测定NO释放量、肌酸激酶漏出量及（或）心脏功能。结果：用药组大鼠心脏使用NTG后表现为两种效应。其中,非心室颤动组10只,NTG增加肌酸激酶漏出量,减弱再灌注期心脏功能的恢复,伴随缺血期NO释放量的增加;心室颤动组8只,NTG减少肌酸激酶的释放,但心脏于再灌注期持续心室颤动,缺血期NO释放量无明显增加。结论：缺血期给予同一剂量NTG对心肌缺血-再灌注损伤产生双重效应,既可增加心肌损伤,又可减轻心肌损伤。     

尾加压素Ⅱ对针刺预处理I/R损伤大鼠心肌细胞血管VEGF的影响

目的：研究尾加压素Ⅱ（UⅡ）在针刺抗心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法：选择健康SD大鼠120只,随机分为6组,正常对照组（A）、模型组（B）、针刺预处理组（C）、针刺＋尾加压素低浓度组（20pmol/kg）（D）、针刺＋尾加压素高浓度组（60pmol/kg）（E）和血管紧张素Ⅱ特异性受体拮抗剂（Losartan,氯沙坦）（F）,每组20只。针刺预处理组连续3d电针预处理,第3天复制心肌缺血再灌注模型。D组、E组造模前尾静脉给药,给药后即刻造模。F组于造模前进行灌胃给药,给药后即刻造模。造模成功后常规饲养24h,处死取材,用ELISA法测定心肌组织中的VEGF。结果：心肌缺血再灌注损伤时模型大鼠心肌组织中的VEGF含量显著升高,针刺预处理、针刺结合不同剂量UⅡ以及使用UⅡ拮抗剂均可使缺血区心肌组织中的VEGF含量降低（P〈0.05）,以针刺预处理结合低剂量UⅡ效果最优（P〈0.01）。结论：UⅡ可能是抗急性心肌缺血再灌注损伤的重要作用途径之一。     

利多卡因减轻家兔心肌缺血-再灌注炎性损伤的研究

目的研究利多卡因的抗炎作用对心肌缺血-再灌注损伤的保护作用。方法 18只家兔随机分为3组(每组6只),假手术组、缺血-再灌注组和利多卡因组。监测家兔左室内压峰值(LVSP)、±dp/dtmax,测定血浆IL-6的水平,光镜观察心肌损伤及中性粒细胞的浸润程度。结果与缺血-再灌注组比较,利多卡因组LVSP及±dp/dtmax再灌注后的恢复率均高于缺血-再灌注组(P<0.01),血浆IL-6浓度明显低于缺血-再灌注组(P<0.01),心肌损伤及中性粒细胞浸润程度较轻。结论利多卡因可以提高心功能,抑制炎症反应,减轻家兔心肌缺血-再灌注损伤。