新型器官保存液低温保存猪肾效果的研究

目的研究新型器官保存液Lifor液对猪肾脏的低温保存效果。方法 24只白色杂种猪,随机均分为Lifor液保存组和威斯康星大学保存液（UW液）组各12只,建立离体肾脏非循环灌注模型,供肾取出后分别以0~4℃的Lifor液和UW液灌注并低温保存,再根据保存时间随机分成2个亚组,分别为保存24h、48h组,然后行猪自体肾移植。比较两组肾脏低温保存结束后其病理学及肾皮质三磷腺苷（ATP）含量的改变,并观察自体肾移植后肾功能恢复情况。结果供肾离体保存24h、48h后,Lifor液组与UW液组的肾组织病理学改变基本一致,肾皮质ATP含量比较差异无统计学意义（P〉0.05）。移植后两组血清肌酐水平比较差异亦无统计学意义（P〉0.05）。结论 Lifor液低温保存肾脏的效果与UW液相当,且成本低廉,因此更具有临床应用前景。     

大鼠肝脏缺血再灌注损伤后5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶活性变化的研究

目的探讨大鼠肝脏经过UW、Celsior和HTK三种不同类型保存液低温保存和常温再灌注后5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶活性的变化.方法将大鼠肝脏在UW、Celsior和HTK液中低温4℃保存0、8、16和24 h后,采用离体连续灌注模型,用Krebs-Henseleit液37℃连续循环灌注90 min,灌注结束后取肝脏组织标本测定5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶活性,并测定胆汁分泌量的变化.结果经过16和24 h的UW和Celsior低温保存后的肝组织5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶的活性出现降低;HTK组8 h就出现降低.UW和Celsior组经过24 h的低温保存后,胆汁分泌量开始明显降低;在HTK组16 h后,胆汁分泌量就显著降低.结论 5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶的活性随着低温缺血时间的延长逐渐降低;UW和Celsior液对肝窦内皮细胞和肝实质细胞的保护作用均强于HTK.     

大鼠肝脏缺血再灌注损伤后5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶活化变化的研究

目的 探讨大鼠肝脏经过UW、Celsior和HTK三种不同类型保存液低浊保存和常温再灌注后5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶活性的变化。方法 将大鼠肝脏在UW、Celsior和HTK液中低温4℃保存0、8、16、和24h后,采用离体连续灌注模型,用Krebs-Henseleit液37℃连续循环灌注90min,灌注结束后取肝脏组织标本测定5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶活性,并测定胆汁分泌量的变化。结果 经过16和24h的UW和Celsior低温保存后的肝组织5′核式酸酶和乳酸脱氢酶的活性出现降低;HTK组8h就出现降低,UW和Celsior组经过24h的低温保存后,胆汁分泌量开始明显;在HTK组16h后,胆汁分泌量就显著降低。结论 5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶的活性随着低温缺血时间的延长逐渐降低;UW和Celsior液以肝窦内皮细胞和肝实质细胞的保护作用均强于HTK。     

SMO保存液对犬肾低温保存期间线粒体功能的保护作用

目 的研究SMO保存液对犬肾低温保存期间线粒体功能的保护作用。方法 建立犬离体肾脏单纯低温保存模型，分别采用0～4℃的SMO保存液、HTK保存液和UW保存液对犬肾进行灌注和保存，并根据所用保存液的不同分为SMO组、HTK组和UW组。分别于低温保存2、24、48和72h后取各组的肾组织皮质标本，进行病理学观察并应用氧电极（Clark）法测定肾组织细胞线粒体的呼吸控制率（RCR）和磷／氧比（P／O）。结果 犬肾在保存48h和72h后，SMO组肾组织病理学改变较HTK组轻；保存24h内肾组织RCR与HTK组无明显差异，但其余时间点均高于HTK组（P〈0．05），保存72h时差异最为明显（P〈0．01）。SMO组犬肾保存2h后，肾组织的P／O比值与HTK组无明显差异（P〉0．05），但在保存24h后则明显高于HTK组（P〈0．05）。SMO组与UW组各项观察指标比较，差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 SMO保存液在减轻细胞形态学改变和保持线粒体整体功能方面显著优于HTK保存液，与UW保存液效果相当。     

还原型谷胱甘肽在离体肝脏保存中应用的实验研究

目的:研究UW液中加入还原型谷胱甘肽在离体肝脏保存中对肝细胞的保护作用。方法:封闭群雄性Wistar大鼠,采用原位灌注切取肝脏,分别用UW液、改良UW液(加入谷胱甘肽0.95g/L)0～4℃保存12h、24h、36h后行Krebs-Henseleit液离体灌注,记录肝脏胆汁分泌总量,并检测灌注流出液AST、LDH含量。结果:随着保存时限延长,灌洗液中AST、LDH值升高,胆汁分泌总量呈下降趋势。12h、24h,两组之间均无统计学差异(P>0.05)。保存36h,两组差异均无统计学意义(P<0.05)。离体灌注液生化指标显示改良UW液组长时间保存时肝脏细胞损伤程度较低。结论:在离体肝脏保存过程中,UW液中加入还原型谷胱甘肽对肝脏长期保存(36h)有保护作用,但24h内对肝脏保存效果影响不大,临床需在24小时内完成肝移植手术,故保存不需要添加还原型谷胱甘肽。     

三甲氧苄嗪对大鼠心脏保存作用的实验研究

目的 探讨UW、HTK器官保存液以及加入三甲氧苄嗪（TMZ）对大鼠心脏离体低温保存的保护效果。方法 以离体灌注鼠心为研究对象，观察鼠心在UW、HTK保存液中4℃保存8h后，以及在UW液、HTK液中加入10^-6mol/L TMZ后的心功能、心肌ATP及乳酸盐的变化。结果 HTK液保存的心脏，心功能恢复明显优于UW液（P＜0．05），心肌ATP储存量多于UW液（P＜0．05），心肌乳酸盐含量少于UW液（P＜0．05）；在UW液、HTK液中加入10^-6mol/L TMZ后，可显著提高UW、HTK液的心肌保护效果（P＜0．05）。结论 HTK液对离体低温保存鼠心的心肌保护效果优于UW液；TMZ能显著提高UW、HTK保存液的心肌保护效果。     

新型器官保存液低温保存猪小肠的实验研究

目的探讨Lifor器官保存液对猪小肠的低温保存效果。方法24只白色杂种猪,随机分成Lifor液组和威斯康星大学保存液（University of Wisconsin solution,UW液）组,分别采用4℃的Lifor液和uw液灌洗并低温保存移植小肠,每组再根据供肠保存时间的不同随机分成两个亚组,分别为保存6h、9h组,每个亚组6只动物。建立猪自体节段性小肠移植模型。比较低温保存小肠结束时Lifor液组和UW液组小肠黏膜的组织病理学及三磷腺苷（ATP）含量的改变,并测定移植小肠造口输注麦芽糖后各时间点的血糖水平,观察移植后小肠吸收功能情况。结果供肠保存6h和9h后,Lifor液组与UW液组的小肠组织病理学改变基本一致,比较差异无统计学意义（均为P〉0．05）,保存9h的小肠黏膜形态异常,损伤较保存6h的小肠黏膜严重。供肠保存6h和9h后,Lifor液组与UW液组的小肠黏膜ATP含量比较差异无统计学意义（均为P〉0．05）,小肠黏膜的ATP含量随保存时间的延长逐渐降低。移植后7、14d两组小肠吸收功能差异亦无统计学意义（P〉0．05）。结论Lifor液低温保存小肠的效果与UW液相当,且成本低廉,具有一定的临床应用前景。     

冷冻保存大鼠肝脏离体再灌注时嘌呤核苷磷酸酶活性和透明质酸吸收率的变化

目的探讨不同保存液保存大鼠肝脏后离体再灌注时嘌呤核苷磷酸酶(PNP)活性和透明质酸吸收率的变化及意义。方法分别采用UW液、HTK液和Celsior液灌洗、冷保存Wistar大鼠肝脏16及24 h,然后用37℃的Kreb-Henseleit液在常温下连续灌注90 min,分别于灌注0、15、30、60和90 min时,从灌注液中取样,测定嘌呤核苷磷酸酶活性和外源性透明质酸吸收率的变化,据此评价肝窦内皮细胞的状况。结果经过16 h的低温保存,在再灌注60 min以前,HTK液组灌注液中PNP的含量明显高于UW液组和Celsior液组(P<0.01);再灌注60 min后,HTK液组和Celsior液组灌注液中PNP的含量明显高于UW液组(P<0.01)。经过24 h的低温保存,在再灌注15 min后,HTK液组灌注液中PNP含量明显高于Celsior液组(P<0.01),而Celsior液组又明显高于UW液组(P<0.01)。透明质酸的吸收率均为负值,说明内源性透明质酸的释放大于外源性透明质酸的吸收,且随着保存时间和再灌注时间的延长,这一趋势更加明显,其中HTK液组最明显,Celsior液组次之。结论随着低温保存和再灌注时间的延长,肝脏中PNP活性逐渐升高,外源性透明质酸的吸收率下降,二者可作为评价肝脏缺血-再灌注损伤的指标。     

初始灌注液对离体低温保存大鼠肝脏的影响

目的 探讨缺血再灌注过程中初始灌注液对离体低温保存大鼠肝脏的影响。方法采用离体大鼠肝脏低温缺血保存再灌注模型90例,分别选择UW液、HC-A液和乳酸林格液作为不同的初始灌注液,观察大鼠肝脏在低温保存0、3、6、12、24 h后再灌注流出液中ALT、AST、LDH和ET的水平,同时比较3组之间肝脏细胞形态和细胞凋亡。结果 使用HC-A液作为初始灌注液的大鼠肝脏再灌注流出液中ALT、AST、LDH和ET水平较其他两组低(P<0.05),肝脏形态和细胞凋亡的发生3组差异无显著性。另外,上述指标均受低温保存时间的影响。结论 初始灌注液可影响离体低温保存大鼠肝脏的质量,细胞凋亡可能参与了肝脏的缺血再灌注损伤。     

不同胆道灌洗方法对大鼠肝内胆管冷保存再灌注损伤的影响

目的观察不同胆道灌洗方法对大鼠移植肝肝内胆管冷保存再灌注损伤的影响。方法应用大鼠原位肝移植模型，将88只SD大鼠随机分为假手术组、胆道非灌洗组、UW液胆道灌洗组、生理盐水（NS）胆道灌洗＋UW液肝内胆道灌注保存组、HTK液胆道灌洗＋UW液肝内胆道灌注保存组、HTK液胆道灌洗＋HTK液肝内胆道灌注保存组。移植肝置于4℃林格液中保存2h后行原位肝移植。移植肝再灌注后24h，检测血清总胆红素（TB）、直接胆红素（DB）、碱性磷酸酶（AKP）、γ-谷酰转肽酶（GGT）及胆汁中GGT、葡萄糖（Glu）含量。在光镜及电镜下观察肝内胆管上皮细胞的形态学变化。结果与非灌洗组比较，胆道灌洗组术后各项指标明显改善（P〈0．01）；HTK液及NS灌洗组较UW液灌洗组术后指标改善明显（P〈0．05）。病理检测发现非灌洗组胆道损伤明显，各灌洗组胆道损伤程度明显改善，HTK液灌洗＋UW或HTK液灌注组对胆管上皮细胞的损伤较轻。结论移植肝冷保存前进行胆道灌洗可以明显减轻胆管上皮细胞的损伤，4℃HTK液灌洗＋4℃UW或HTK液灌注保存效果比较理想。     

U50 488H预处理及低温保存对离体兔心的保护作用

目的观察U50 488H预处理及低温保存对离体兔心的保护作用。方法将40只大白兔均分为5组，每组8只。通过Langendorff装置建立离体心脏灌注模型，对照组：不用药物进行预处理，用UW液保存心脏6h；组Ⅰ：用含U50 488H（1．6mmol／L）的St．ThomasⅡ心脏停搏液预处理，离体心脏低温保存4h；组Ⅱ：预处理同组Ⅰ，低温保存6h；组Ⅲ：预处理同组Ⅰ，低温保存8h；组Ⅳ：预处理同组Ⅰ，低温保存10h。离体心脏在再灌注30min后检测心功能、心肌肌浆网钙离子三磷酸腺苷酶（SRCa^2＋-ATPase）活性和心肌线粒体Ca^2＋浓度。结果随着离体心脏低温保存时间的延长，心功能各项指标的恢复率、冠状动脉流量（Cf）的恢复率和SRCa^2＋-ATPase的活性呈下降趋势，而线粒体Ca^2＋浓度随着心脏低温保存时间的延长而逐渐升高。组Ⅰ和组Ⅱ上述心功能指标恢复率分别高于组Ⅲ和组Ⅳ（P〈0．05，0．01），组Ⅲ恢复率高于组Ⅳ（P〈0．05）。组ⅡCf的恢复率（84．56％±10．38％）高于组Ⅲ（79．45％±9．67％）、组Ⅳ（68．31％±6．84％，P〈0．01），组Ⅲ高于组Ⅳ（P〈0．05）。组ⅡSRCa^2＋-ATPase的活性（4．43±0．41μmol／mg·h）分别高于对照组（3．04±0．22μmol／mg·h）、组Ⅲ（3．26±0．29μmol／mg·h）和组Ⅳ（2．57±0．63μmol／mg·h，P〈0．05），组Ⅲ高于组Ⅳ（P〈0．01）。组Ⅱ线粒体Ca^2＋浓度（38．76±4．30μmol／g·dw）和对照组（40．23±3．75μmol／g·dw）分别低于组Ⅲ（43．25±5．16μmol／g·dw）和组Ⅳ（45．78±3．26μmol／g·dw，P〈0．05，0．01）。结论U50 488H预处理及U50 488H保存液对离体供心的低温保存时间应控制在8h以内；UW液对离体心脏的保存作用与U50 488H预处理及低温保存6h效果相当。     

大鼠离体肝脏保存再灌注后肝脏中ICAM-1mRNA的表达及丹参对其表达的影响

目的探讨大鼠离体肝脏保存再灌注后肝脏组织中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）mRNA的表达变化及丹参对其表达的影响。方法选取健康Wistar雄性大鼠54只,用完全随机方法选6只大鼠作为正常组,切除肝脏后立即灌注;随机选24只大鼠作为对照组,切除肝脏后置入4℃UW液中分别保存8、16、24、32 h后再行肝脏循环再灌注;余下的24只作为实验组,切除肝脏后置入含丹参的4℃UW液中分别保存8、16、24、32 h后再行肝脏循环再灌注。应用RT-PCR方法检测各组大鼠离体肝脏保存再灌注后肝脏组织中ICAM-1 mRNA表达。结果正常组肝脏中的ICAM-1 mRNA表达为3.61±1.56,对照组和实验组8、16、24、32 h时肝脏中ICAM-1 mRNA表达分别为15.71±1.78、33.70±3.35、45.83±4.37、66.98±5.89和11.69±1.25、16.55±1.37、24.73±2.74、32.65±3.39,对照组和实验组各时相均分别明显低于正常组（P〈0.05）,且均随保存时间延长,ICAM-1 mRNA表达逐渐增加（P〈0.05）,实验组16 h后ICAM-1 mRNA表达均分别明显低于对照组相应时相（P〈0.05）。结论丹参能够降低离体肝脏保存再灌注后肝脏组织中ICAM-1 mRNA表达,对肝脏保存再灌注损伤可能具有防护作用。     

川芎嗪改善高渗枸橼酸盐嘌呤溶液保存犬肾的效果

目的探讨一定浓度的川芎嗪对低温保存的犬肾的影响。方法分别以2～4℃加入川芎嗪（终浓度为4mg／L）的新型高渗枸橼酸盐嘌呤溶液（HC-A Ⅱ液，实验组）、HC-A Ⅱ液（HC-AⅡ液组）及UW液（UW液组）灌注肾脏，然后进行组织病理学观察及细胞凋亡测定。将按上述方法保存48、72h的肾脏进行自体移植，术后观察血肌酐浓度、恢复正常的时间以及受者的存活情况。结果体外保存实验中，在保存时间不超过48h时，三个组的组织形态基本相似，但保存72h后，实验组和UW液组肾组织的病理改变明显轻于HC-A Ⅱ液组，细胞凋亡指数也明显低于HC-A Ⅱ液组（P〈0．05），实验组和UW液组的上述指标相比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。经保存的肾脏自体移植后，单纯HC-A Ⅱ液保存72h者有2只犬（2／5）因肾功能衰竭死亡；不论是保存48h还是72h，采用含川芎嗪的HC-AⅡ 液和UW液保存者移植后血肌酐水平明显低于单纯HC-A Ⅱ液保存者（P〈0．05），其肾功能恢复正常的时间也较单纯HC-AⅡ液保存者缩短（P〈0．05）。结论HCA-Ⅱ液中加入一定浓度的川芎嗪能改善肾脏低温灌注保存的效果。     

SMO保存液对犬肾低温保存期间细胞凋亡和能量代谢的影响

目的研究SMO保存液对犬肾低温保存期间细胞凋亡和能量代谢的影响。方法建立犬离体肾脏单纯低温保存模型，根据保存液的不同分为3组，分别用0～4℃HTK保存液（HTK组）、UW保存液（UW组）和自制的SMO保存液（SMO组）对供肾进行灌注和保存；于犬肾保存24、48、72h后取各组的肾皮质标本，进行组织病理学、细胞凋亡和组织能量代谢的检测。结果犬肾保存48和72h时的组织病理学损害，SMO组比HTK组轻，但在各时间点与Uw组基本相似。犬肾保存24h时的细胞凋亡指数，SMO组与HTK组比较，差异无统计学意义（P〉0．05），保存48和72h后，SMO组显著低于HTK组（P〈0．05）；但SMO组与Uw组在各时点比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。犬肾保存24和48h时组织中Na^＋ -LK^＋ATP酶的活性，SMO组与HTK组比较，差异无统计学意义（P〉0．05），保存72h时，SMO组明显高于HTK组（P〈0．05）；而SMO组与Uw组在保存的各时点差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论SMO保存液在减轻细胞形态学改变、减缓肾脏细胞凋亡和保持Na^＋ -LK^＋ATP酶活性方面显著优于HTK保存液，与UW保存液相当。     

不同器官保存液对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时嘌呤核苷磷酸酶活性和透明质酸吸收率的影响

目的 探讨大鼠肝脏低温保存及常温缺血再灌注过程中在不同的保存液中嘌呤核苷磷酸酶(PNP)活性和透明质酸(HA)吸收率的变化.方法 将大鼠肝脏在三种不同保存液中低温保存16 h和24 h后,用37℃Krebs-Henseleit液连续循环灌注90 min,分别于不同灌注时间检测灌洗液中PNP活性和外源性透明质酸的吸收率的变化.结果 经过16 h的低温保存后,再灌注60 min前,HTK保存的肝脏中PNP明显高于uw和Celsior;60 min后HTK和Celsior保存的肝脏中PNP明显高于UW;经过24 h的低温保存后,再灌注15 min后,HTK保存的肝脏中PNP明显高于Celsior,而Celsior又明显高于UW.低温保存16 h后,再灌注时,3种保存液保存的肝脏对外源性透明质酸的吸收率均为负值,表明肝窦内皮细胞受到一定程度的损伤;保存24 h者,UW液保存肝脏外源性透明质酸的吸收率明显高于Celsior液和HTK液.结论 随着低温保存和再灌注时间的延长,大鼠肝脏中PNP活性逐渐增高,而外源性透明质酸的吸收率下降;二者可作为评价肝脏缺血再灌注损伤的指标.     

肝移植术中应用S-腺苷-L-蛋氨酸对供肝热缺血损伤的影响

目的探讨术中S-腺苷-L-蛋氨酸（SAMe）加入UW液和血浆冲洗液对热缺血损伤供肝及其恢复的影响。方法建立10min热缺血大鼠肝移植模型，分为A组：UW液灌注＋乳酸钠林格氏液冲洗、B组：UW液灌注＋血浆冲洗、C组：SAMe加入UW液灌注＋血浆冲洗和D组：UW液灌注＋SAMe加入血浆冲洗4组，观察肝组织组织病理学变化和电子显微镜下超微结构变化，并检测血清AST和透明质酸。结果C组和D组术后24h血清AST均低于B组（P〈0．05）。A组术后3h和24h血清HA高于B组（P〈0．05），B组复流后3h及24h血清HA均高于C组和D组（P〈0．05）。组织病理学表现B组复流后3h和24h肝细胞损伤和微循环紊乱较C组和D组明显；超微结构表现，A组复流后3h线粒体肿胀，肝窦内皮细胞肿胀，细胞核不规则，可见内皮细胞凋亡，大部分区域肝窦状隙明显狭窄，内皮层结构模糊，红细胞淤积，受压变形，白细胞附壁，可见内皮层完整性破坏；复流后24h，可见线粒体嵴断裂，核融解。B组内皮细胞损伤较A组轻，C组和D组超微结构表现微循环紊乱和肝细胞损伤表现较B组轻。结论供肝切取术中UW液中加入SAMe灌注保存，血浆冲洗液中加入SAMe可改善热缺血供肝微循环，减轻缺血再灌注损伤，并减轻肝细胞热缺血损伤，有利于10min热缺血供肝功能的恢复。     

自制CMU-1液保存大鼠肝脏的实验研究

目的　探讨CMU 1液保存大鼠肝脏的效果。方法　根据灌注液和保存液的种类将Wistar大鼠分为两组 :UW组和CMU 1组 ,每组分 6h、12h、2 4h 3个保存时限 ,每亚组 6只大鼠。采用离体循环灌注模型 ,研究CMU 1保存液对保存肝脏能量代谢、生化功能、胆汁分泌及形态学方面的影响。结果　随着保存时间延长 ,肝组织TAN含量及AEC逐渐降低 ,CMU 1组较UW组下降略缓慢 ,保存 2 4h后高于UW组 (P <0 0 5 )。再灌注 12 0min后CMU 1组的肝脏分泌胆汁量较UW组多 (P <0 0 5 )。相同时限相比 ,灌出液中ALT、LDH值两组之间无显著差异 (P >0 0 5 )。肝脏组织学变化两组间无明显差异。保存 6h后 ,保存液pH值无明显变化 ;保存 12h后pH值下降 ,两组无明显差异 ;保存2 4h后 ,UW组pH值下降较CMU 1组明显。结论　CMU 1保存液保存大鼠肝脏效果与UW液相似 ,在改善保存肝脏能量代谢、预防细胞内酸中毒、胆汁分泌方面略优于UW液。     

自制KYL液对大鼠肝脏低温保存后细胞凋亡影响的研究

目的 研究自制的KYL液对大鼠肝脏低温保存后细胞凋亡的影响。方法 采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型（noncirculated isolated perfusion of ratliver，IPRL），随机以KYL液和UW液对大鼠肝脏保存0、4、8、16、24、48h，测定灌注流出液氧自由基代谢产物（丙二醛MDA和超氧化物歧化酶SOD）的含量，检测肝细胞内钙离子浓度，检测肝细胞凋亡率和凋亡相关基因表达，观察肝脏组织形态学变化。同时设生理盐水保存阴性对照组，了解器官保存液对大鼠肝脏有无保护作用。结果 KYL液保存的大鼠肝脏肝细胞内钙离子浓度较UW液保存者低，灌注流出液MDA和SOD含量与UW液保存者相近，两者肝细胞凋亡率及凋亡基因表达情况相近，光、电镜观察两者形态学变化基本一致。两组所有指标均较生理盐水保存组好，说明两种液体对大鼠肝脏均有保护作用。结论 自制的KYL液对大鼠肝脏的保存效果在钙拮抗方面略优于UW液，在抑制细胞凋亡方面与UW液相当，而在防止细胞水肿方面较UW液稍差。     

磷酸肌酸对离体大鼠肝脏冷保存的保护作用

目的探讨磷酸肌酸(CP)对大鼠离体肝脏冷保存的保护作用。方法建立大鼠肝脏单纯冷保存离体灌注模型,对照组予单纯威斯康星大学保存液(UW液)灌注肝脏,低剂量组以UW液为基液加入1 g/100 ml CP灌注肝脏,中剂量组以UW液为基液加入2 g/100 ml CP灌注肝脏;高剂量组以UW液为基液加入3 g/100 ml CP灌注肝脏。各组大鼠肝脏分别于4℃相应灌注液中冷保存后0、6、12、18、24 h共5个时间点,分别检测肝下下腔静脉内保存液的丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)含量,检测肝脏组织丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性,观察肝脏组织肝细胞的凋亡指数(AI)和肝脏组织核因子-κB阳性表达率,光学显微镜下观察肝脏组织的病理学变化。结果低、中、高剂量组大鼠肝脏在冷保存12 h后,ALT及LDH含量均低于对照组(均为P0.05);冷保存18 h后低、中、高剂量组大鼠肝脏组织的MDA、MPO含量均低于对照组(均为P0.05);在冷保存12 h及18 h时,低、中、高剂量组大鼠肝脏的肝细胞AI及核因子-κB阳性表达率均低于对照组(均为P0.05);冷保存24 h后,高剂量组保存液的ALT、MDA含量均明显高于对照组及低、中剂量组(均为P0.05)。病理检查结果显示,高、中、低剂量组大鼠肝脏的损伤明显轻于对照组,各剂量组之间比较无明显差别。结论在UW液中加入CP对大鼠离体肝脏冷保存有较好的保护作用,优于单纯应用UW液保存。     

大鼠断肢不同保存方法与肌肉生物学特性的实验研究

目的观察不同的保存断肢方法对再植后肌肉生物学特性的影响。方法用ETK液(extracellular-type trehalose containing kyoto solution),UW液(university of wisconsin solution),LR液(lactated ringer’s solution)。在4℃保存大鼠断肢6h或24h,并进行原位移植。移植8周后,检测胫骨前肌的末端潜伏期和振幅,以及血清中肌酸磷酸激酶、钾、天门冬氨酸转氨酶等含量水平,并用苏木素-伊红染色和马氏三色染色检查肌肉组织学形态。结果ETK-6h、UW-6h和LR-6h三个实验组末端潜伏期相似,但LR组的电振幅低于其他两组。从组织形态上看,LR液中保存的肌肉萎缩程度最高。在24h保存后移植模型中,LR组的存活率是37.5%,而在ETK和UW组中则为80%。LR组由于严重的肌肉萎缩和纤维化导致没有检测肌电流,而ETK组和UW组电生理学结果显示出肌肉的良好功能。结论 ETK保存液可以保护局部缺血再灌注损伤的肢体肌肉的形态和功能,并且增加长期保存后的肢体移植存活率,且ETK液更优于UW液。