表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术筛选肺腺癌血清肿瘤标记物

背景与目的:肺癌是目前世界上最常见的恶性肿瘤,由于大多数患者确诊时疾病已属进展期,总体5年生存率较低,所以改善预后的关键在于早期诊断。表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术(SELD I-TOF-MS)是一种检测肿瘤标志物的新兴技术。本研究使用该技术筛选了肺腺癌患者血清相对特异标记物。方法:肺腺癌患者71例,均经手术病理证实;正常人71名,按照性别,年龄,吸烟史与71例肺腺癌患者配对。用WCX2芯片检测各血清标本,筛选肺腺癌相对特异性蛋白质峰。结果:与正常人比较发现肺腺癌显著高表达的潜在标记物5个,相对分子量分别为4047.79±1.60、4203.99±1.91、4959.81±2.13、5329.30±2.55和7760.12±4.11,以峰值比1.5为界值时,其诊断肺腺癌的敏感性分别为90.14%、78.87%、50.70%、57.75%、73.24%,特异性分别为97.18%、92.96%、70.42%、76.06%、94.37%。结论:SELD I-TOF-MS蛋白质质谱技术是一种快速、简便易行且高通量的分析方法,不仅能直接筛选出肺腺癌患者血清中相对特异的潜在标记物,而且可能具有较好的临床应用前景。     

应用SELDI蛋白质芯片技术筛选肺腺癌血清标志物的研究

目的 通过SELDI蛋白质芯片技术筛选肺腺癌特异血清标志物。方法 采用表面增强激光解析离子化一飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS），选用弱阳离子加疏水膜芯片对15例肺腺癌患者，30例健康人血清进行检测，筛选在肺腺癌患者血清中差异表达的蛋白质。结果 在质荷比0—20000范围内，共检测到180个蛋白峰，建立了由8个差异表达蛋白质组成的肺腺癌诊断模型。这8个蛋白质中有6个在肺腺癌中表达上调，2个表达下调。软件分析结果显示在预测组中诊断肺腺癌的敏感性为93．33％（14／15）、特异性为100．00％（30／30）；对检测组进行双盲检测，敏感性为73．33％（11／15）、特异性为86．67％（26／30）。结论 由8个差异表达蛋白及其特定组合构成的诊断模型可以区分肺腺癌和健康人。SELDI蛋白质芯片技术能直接筛选出肺腺癌患者血清中相对特异的潜在标志物，具有较好的临床应用价值。     

应用SELDI-TOF-MS技术筛选肺腺癌患者血清诊断标志物

目的 探讨肺腺癌患者及正常人血清中蛋白质质谱的不同,筛选出肺腺癌血清诊断标志物.方法 用WCX2蛋白芯片结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,检测24例肺腺癌和10例正常人血清蛋白质谱,筛选出差异表达蛋白质.结果 本实验共检测到86个有效的蛋白质波峰,其中m/z位于分子质量2000～10 000的波峰有78个.筛选出m/z分子质量为8129.55,2022.18,3271.91,3933.44,3504.49,3811.71的6个血清肿瘤标志物.结论 SELDI-TOF-MS技术是寻找肺腺癌血清诊断标志物的有效工具.利用蛋白组学和生物信息学及相关技术,将有利于建立新的疾病诊断模式--蛋白质指纹图谱.     

肺腺癌患者血清CEA和蛋白质谱联合检测的临床意义

目的:探讨在肺腺癌患者中联合应用CEA检测和SELDI蛋白芯片技术诊断的价值。方法:应用免疫化学发光技术检测69例肺腺癌患者及71例健康对照者血清标志CEA;同时应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF)和CM10芯片检测该血清,经BiomarkerWizard软件分析,结合临床病理资料分析两种手段的联合诊断价值。结果:免疫化学发光法检测CEA的敏感度为62.319%(43/69),特异度为92.958%(66/71);SELDI-TOF-MS技术检测的敏感度为88.406%(61/69),特异度为68.182%(15/22);两者联合检测的敏感度为82.609%(57/69),特异度为92.958%(66/71)。结论:免疫化学发光法检测CEA和SELDI-TOF-MS技术联合检测蛋白标志比单用免疫化学发光法检测CEA能提高对肺腺癌诊断的敏感度。但与单独使用SELDI-TOF-MS技术相比,两者联合检测的敏感度无明显提高。     

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱蛋白质芯片筛查肺癌血清相关蛋白质及其临床意义

目的 探讨用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS）筛查肺癌血清特异性蛋白质的临床意义.方法 应用CM-10蛋白质芯片对肺鳞状细胞癌38例,肺腺癌30例,健康对照组50例的血清样品进行蛋白质指纹图谱测定,其中34例肺癌患者进行术前和术后对比检测,用BioMarker Wizard及BioMarker pattern system分析软件对所得的数据进行处理并建立诊断模型.结果 共检测到167个蛋白质峰,筛选出2个肺癌特异蛋白质峰[质荷比（M/Z）分别为6 010、5 330]建立了诊断模型.模型的原始判别敏感度为100％,特异度为100％.交叉验证敏感度为98％,特异度为96％.肺癌术前和术后有9个差异蛋白质（P＜0.05）,转移和无转移肺癌患者血清有8个差异蛋白质（P＜0.05）.结论 SELDI技术在肺癌的诊断中具有较高的敏感性和特异性,可能成为一种有效的筛查手段.     

应用蛋白芯片技术筛选肺腺癌化疗敏感血清蛋白标志物

目的 探讨肺腺癌化疗敏感患者与化疗耐药患者血清蛋白质质谱的不同,筛选肺腺癌化疗敏感血清蛋白标志物。方法 用WCX2蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,检测22例肺腺癌化疗敏感的患者和21例化疗不敏感的血清蛋白质谱,筛选出差异表达蛋白质。结果 发现利用M/Z(质荷比)为16083.50Da,7963.17Da,16121.50Da,15921.60Da,8066.79Da,8040.17Da和3394.57Da的7个差异蛋白可区分标准含铂类方案化疗敏感组和耐药组,联合m/z为7963.17Da与16083.50Da的差异蛋白建立预测模型,可预测肺腺癌标准含铂类方案化疗敏感/耐药性,其敏感性86.36%和特异性80.95%。结论 SELDI-TOF-MS技术是寻找肺腺癌化疗敏感血清诊断标志物的有效工具。     

SELDI-TOF-MS筛查乳腺癌患者血清特异性蛋白的探讨

目的：应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术寻找乳腺癌患者血清特异性蛋白.方法：应用弱阳离子蛋白质芯片（WCX2）及SELDI-TOF-MS技术检测12例正常人、10例乳腺良性病患者和22例乳腺癌患者血清中蛋白的相对含量.结果：三组样本质荷比在2000～30000 Da间3939.314Da与3960.478Da的2个蛋白峰有显著差异.结论：SELDI-TOF-MS技术对乳腺癌早期诊断和特异性肿瘤标记物的筛选等方面具有一定价值,值得推广.     

应用SELDI-TOF-MS技术建立卵巢浆液性乳头状囊腺癌诊断的血浆蛋白质组学模型

目的：通过蛋白质芯片-质谱技术结合生物信息学的支持向量机方法，筛选卵巢浆液性乳头状囊腺癌患者差异表达的蛋白质峰，探讨建立数学逻辑的卵巢浆液性乳头状囊腺癌诊断模型及其意义。方法：采用表面增强激光解离飞行时间质谱（surface-enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS）技术，运用CM10蛋白质芯片（一种弱阳离子芯片）分别检测26例卵巢浆液性乳头状囊腺癌和51例对照组（其中卵巢囊肿12例、子宫肌瘤31例、卵巢良性囊腺瘤8例）的血浆标本，对所得到的质谱数据采用Biomarker Wizard软件分析，初步筛选蛋白质峰，结合生物信息学的支持向量机（support vector machines，SVM）方法建立并测试卵巢浆液性乳头状囊腺癌患者以及对照组的血浆蛋白质谱诊断模型。结果：应用SELDI-TOF-MS在CM10芯片上捕获到的蛋白质，经过Biomarker Wizard软件分析筛选出了卵巢浆液性乳头状囊腺癌患者与对照组的71个差异蛋白质峰（P〈0．01），利用SVM方法再次筛选获得7个蛋白质峰组成卵巢浆液性乳头状囊腺癌的蛋白质谱最优化模型，这7个蛋白质中质荷比（m／z）为4099、4477、4123、4081和3938的表达上调，质荷比（m／z）为8785和13783的表达下降。经三倍交叉验证后用盲法测定，所建模型用于卵巢浆液性乳头状囊腺癌患者与对照组鉴别的敏感度和特异度分别为84．62％和96．08％，阳性预测值为92．21％。结论：蛋白质芯片-质谱技术可以快速、有效地筛选出卵巢浆液性乳头状囊腺癌患者血浆差异蛋白质，结合SVM可建立有效的蛋白质质谱诊断模型，对卵巢癌诊断方法的建立具有潜在意义。     

人工神经网络在孤立性肺结节良恶性诊断中的应用

目的评估计算机辅助诊断技术在孤立性肺结节（SPN）良恶性诊断中的意义。方法搜集经CT引导下肺组织活检穿刺病理证实的SPN193例（恶性结节144例,良性结节49例）,分析薄层CT指标。对比CT引导下肺活检穿刺的病理结果,统计神经网络和人工诊断两种方法对SPN的诊断准确率。结果神经网络模型诊断准确率71．5％,人工诊断准确率80．3％;敏感性分别为84．0％、91．0％;特异性分别为34．7％、49．O％。结论计算机辅助诊断有较好的诊断准确率,神经网络敏感性接近医师人工诊断。对SPN的诊断有一定意义,能够具有较好的诊断价值,但准确率低于人工诊断,还不能完全代替人工诊断,可作为辅助诊断应用。     

血清蛋白质谱诊断模型在乳腺癌辅助诊断中的价值

目的 建立乳腺癌的血清蛋白质谱诊断模型,评价其在乳腺癌辅助诊断中的价值.方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测113例乳腺癌患者、103例乳腺良性肿瘤患者及92例健康女性的血清蛋白质谱,采用Biomarker Pattern(BPS)软件分析蛋白质谱,建立分类树模型,然后对模型进行盲筛验证.结果 比较乳腺癌患者与健康女性的血清蛋白质谱,筛选出12个差异蛋白质峰.经验证,所建立的分类树模型Ⅰ诊断乳腺癌的灵敏度为91.9%,特异度为81.2%.比较乳腺良性肿瘤患者与健康女性的血清蛋白质谱,筛选出11个差异蛋白质峰.经验证,所建立的分类树模型Ⅱ诊断乳腺良性肿瘤的灵敏度为87.9%,特异度为81.2%.比较乳腺癌与乳腺良性肿瘤患者的血清蛋白质谱,筛选出2个差异蛋白质峰.经验证,所建立的分类树模型Ⅲ诊断乳腺癌的灵敏度为81.8%,特异度为78.3%.应用这些差异蛋白及分类树模型,分别对93例CA15-3阴性乳腺癌患者与36例乳腺良性疾病患者的血清、20例CA15-3阳性乳腺癌患者与36例乳腺良性疾病患者的血清进行盲筛,诊断乳腺癌的敏感度和特异度分别为80.6%和91.7%、75.0%和91.7%,明显高于传统的乳腺癌标志物CA15-3,而CA15-3阴性与CA15-3阳性乳腺癌未见明显的差异蛋白质峰.结论 应用SELDI-TOF-MS技术可筛选出乳腺癌、乳腺良性肿瘤和健康女性血清蛋白质谱存在的差异蛋白质峰,据此建立的诊断模型可用于乳腺癌的辅助诊断.     

孤立性肺结节恶性概率估算临床预测模型的建立

目的：筛选恶性孤立性肺结节（solitary pulmonary nodules,SPN）的危险因素,构建判断SPN良恶性的临床预测模型。方法回顾性分析孤立性肺结节患者270例的临床资料及胸部影像学特征。结果270例患者中,肺癌110例（40．7％）,良性病变160例（59．3％）。在SPN的影像学分析中,分叶、毛刺、胸膜牵拉、增强后强化、支气管充气征与结节恶性病变显著相关,P＜0．05,而边缘清晰、钙化、密度均匀均与良性病变显著相关,P＜0．05。在单因素分析中,恶性孤立性肺结节与患者年龄、吸烟史、影像学特征、结节最大径等因素显著相关,P＜0．05。在多因素分析中,患者年龄、恶性影像学特征及结节最大径是恶性SPN的独立危险因素（P＜0．01）。建立的SPN恶性概率估算的临床预测方程为：SPN恶性预测值P＝ex／（1＋ex）,X＝－5．882＋0．050×年龄＋1．672×影像学良恶性＋0．123×结节最大径,其中e为自然对数。选取截断点为0．46,敏感性达82％,特异性达85％,阳性预测值80％,阴性预测值87％。临床预测模型的受试者工作特征曲线下面积为0．901。结论患者年龄、恶性影像学特征及结节最大径是判断SPN良恶性的独立影响因素,建立的数学预测模型的准确性较高,有较高的临床应用价值。     

低剂量螺旋CT联合肿瘤标志物CEA,SCC-Ag,ProGRP,NSE对良恶性孤立性肺结节的鉴别诊断价值

目的探讨低剂量螺旋CT联合肿瘤标志物癌胚抗原(CEA),鳞状上皮细胞癌相关抗原(SCC-Ag),胃泌素释放肽前体(ProGRP),神经特异性烯醇化酶(NSE)对良恶性孤立性肺结节的鉴别诊断价值。方法回顾性分析孤立性肺结节患者420例的临床资料,患者均有完整的低剂量螺旋CT及肿瘤标志物CEA、SCC-Ag、ProGRP、NSE检查结果和病理结果,以病理结果为金标准确定结节性质,比较良、恶性孤立性肺结节患者的低剂量螺旋CT的结节显示情况及肿瘤标志物CEA、SCC-Ag、ProGRP、NSE水平,比较低剂量螺旋CT和肿瘤标志物CEA、SCC-Ag、ProGRP、NSE单独检查及联合检查对良、恶性孤立性肺结节的检出率。结果病理结果提示420例孤立性肺结节患者中,良性287例,恶性133例。低剂量螺旋CT检查显示:良、恶性患者的结节直径、类型、结节形态、结节与肺的交界面、结节的边缘特征比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。肿瘤标志物检查显示良性患者的血清CEA、SCC-Ag、ProGRP、NSE水平均显著低于恶性患者(P<0.05)。低剂量螺旋CT和肿瘤标志物联合检查对良、恶性孤立性肺结节的检出率均显著高于单独检查(P<0.05)。结论低剂量螺旋CT联合肿瘤标志物CEA、SCC-Ag、ProGRP、NSE对良恶性孤立性肺结节检出率高,并且对良、恶性结节具有鉴别诊断价值,可以为临床诊治工作提供指导信息。     

血清血管内皮生长因子在孤立性肺结节鉴别诊断中的价值

目的　检测血清血管内皮生长因子 (S VEGF)水平 ,探讨肺部孤立性结节良恶性的鉴别诊断价值。方法　采用酶联免疫吸附法 (ELISA)对 6 8例孤立性肺结节患者和 2 0例健康人的S VEGF进行测定 ,观察恶性结节 (肺癌组 )、良性结节和健康人之间S VEGF水平的差异。 6 8名患者均于术后获得病理诊断。结果　健康人S VEGF水平的中位数为 4 2 .5 (10～ 170 )pg/ml,良性结节为 4 4 .0 (18～36 0 )pg/ml,肺癌为 75 .0 (18～ 890 )pg/ml。肺癌组与健康对照组的S VEGF水平差异有显著性 (P <0 .0 1) ;与良性结节组的差异亦有显著性 (P <0 .0 5 ) ;而良性结节组与健康对照组的S VEGF水平差异无显著性 (P >0 .0 5 )。腺癌和鳞癌患者的S VEGF水平差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　在孤立性肺结节患者中 ,肺癌患者的S VEGF水平明显高于良性结节患者和健康人 ,高水平 (>10 0pg/ml)的S VEGF提示病灶为肺癌的可能性大 ,可考虑手术治疗。     

CT引导Hookwire定位下电视胸腔镜手术对孤立性肺小结节的诊疗价值

背景与目的：临床检查发现,孤立性肺小结节(solitary pulmonary nodule,SPN)包含了相当一部分的早期肺癌。本研究探讨CT引导Hookwire定位下胸腔镜手术对于SPN的诊疗价值。方法：从2011年7月至2013年6月,复旦大学附属肿瘤医院胸外科收治的SPN患者310例,CT引导下留置Hookwire定位针,行胸腔镜(video assisted thoracic surgery,VATS)肺楔形切除,根据术中冰冻病理结果决定进一步治疗方式。统计定位准确率、并发症发生率、VATS 肺楔形切除手术成功率、中转开胸率以及SPN病理分型等。结果：Hookwire定位成功率为100%,咯血2例需要处理,术中Hookwire脱落12例(3.87%),VATS肺楔形切除手术成功率为99.0%,中转开胸3例。SPN术后组织学病理结果: 原发性肺癌237例,良性病变73例。结论：采用CT引导Hookwire定位下VATS手术的方法治疗微小SPN,诊断准确率高、疗效可靠,并发症少,具有很好的临床推广价值。     

宝石能谱CT在孤立性肺结节鉴别诊断中的价值

目的探讨宝石能谱CT在孤立性肺结节（SPN）诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法回顾性分析接受胸部CT高压三期检查的32例SPN病例资料。所有病例经手术、穿刺活组织检查后病理证实。所有检查均在宝石能谱CT上进行,扫描完成后将单能量图像载入宝石能谱成像浏览器（GSIviewer）软件上,对SPN的能谱曲线图及碘基图像碘含量和水基图像水含量进行分析。结果肺鳞状细胞癌、肺腺癌、错构瘤、硬化性血管瘤、炎性假瘤碘含量分别为（11．66±2．72）μg／ml、（12．36±2．97）μg／ml、（10．20±3．11）μg／ml、（16．58±3．58）μg／ml、（21．67±3．76）μg／ml,肺腺癌及肺鳞状细胞癌的碘含量之间差异无统计学意义（P〉0．05）,其他不同结节的碘含量之间差异均有统计学意义（均P〈0．05）。肺鳞状细胞癌、肺腺癌、错构瘤、硬化性血管瘤、炎性假瘤的水含量分别为（1021．31±13．83）μg／ml、（1027．98±12．53）μg／ml、（1003．42±13．67）μg／ml、（1029．61±12．06）μg／ml、（1051．61±13．81）μg／ml,各类不同结节的水含量之间差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论宝石能谱CT成像通过应用碘含量测定,对鉴别不同来源的SPN有较大意义,可以提高SPN良恶性鉴别诊断的敏感性及特异性。     

Repeat needle biopsies combined with clinical observation are safe and accurate in the management of a solitary pulmonary nodule

BACKGROUND: Sixty percent of removed solitary pulmonary nodules (SPNs) are benign. An approach that reduces the unnecessary excision of benign nodules is consistent with the oncologic objective of organ preservation. METHODS: A prospective observational study was performed at a lung cancer referral center in which consecutive patients were evaluated who presented with SPNs measuring < 4 cm on computed tomography (CT) scans. Patients underwent transbronchial biopsy (TBB), percutaneous needle aspiration (PCNA), clinical observation, repeat CT scans, and repeat biopsies. Patients were observed clinically and underwent repeat biopsies in an effort to reduce unnecessary surgical intervention. RESULTS: One hundred eighteen patients underwent 194 biopsy sessions, including 137 TBB sessions and 57 PCNA sessions. The mean follow-up was 4 years. The shortest follow-up of a benign lesion was 3 years. The incidence of malignancy was 61%. The positive predictive value, negative predictive value, sensitivity, specificity, and accuracy all were 100%. Five patients had a delayed change in diagnosis from benign to malignant. This delay in diagnosis neither resulted in a change in tumor stage nor had an impact on patient management or survival. CONCLUSIONS: Repeat needle biopsies combined with clinical observation and repeat CT scans can classify an SPN as benign versus malignant with 100% accuracy (95% confidence interval, 96.1-100.0%). An SPN diagnostic approach that includes a TBB, then PCNA, clinical observation, repeat CT scans, and repeat biopsies for continued suspicion of malignancy appears to reduce the unnecessary surgical excision of benign nodules from the current rate of 60% to 5% of SPN resections without affecting the survival of patients who have malignant SPNs.     

孤立性肺结节体素内不相干运动扩散加权磁共振成像研究

目的:探讨体素内不相干运动扩散加权磁共振成像（intravoxel incoherent motion diffusion weighted imaging,IVIM-DWI）在孤立性肺结节(solitary pulmonary nodules,SPN)中的应用价值。方法:对57例有明确病理诊断的孤立性肺结节分为良性结节组（n=16）与恶性结节组（n=41）,恶性结节分为小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）组（n=10）和非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）组（n=28）。对不同组扩散加权成像（diffusion weighted imaging,DWI）和IVIM-DWI图像进行分析,测量其ADC值、D值、D*值和f值。分析不同组之间各参数的差异性,评估各衍生参数的诊断效能。结果:ADC、D和f值在良恶性结节间差异有显著性。ADC值和D值在SCLC与NSCLC之间差异有显著性。良性结节与恶性结节,ADC、D及f值受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线下面积分别为0.822、0.864、0.736,D值显示出最高的诊断效能。SCLC与NSCLC,ADC、D值ROC曲线下面积分别为0.843、0.814,ADC值有最高的诊断效能。结论:IVIM-DWI可以对SPN良恶性作鉴别诊断,不仅能反映组织的扩散信息,还能反映其灌注信息,对孤立性肺结节的评估有重要指导意义。     

肿瘤防治研究论坛简报

本文分析CT/MRI在肺癌诊断上的应用价值及指征,研究良、恶性孤立性肺结节病灶在CT/MRI增强扫描上的特征,提出使用CT/MRI血管造影最佳技术发现肺癌病灶的特点,综述CT/MRI在肺癌TNM分期上的应用,简述CT仿真内窥镜技术在肺癌诊断上的使用价值及限度.     

肺内孤立结节病灶24例临床分析

目的：分析24例肺内孤立性肺病灶（ SPN）的发病特点、影像学表现、病理诊断、治疗及随访结果。方法：回顾性分析2007年7月-2010年12月经手术治疗的24例肺内孤立结节病灶的临床资料。结果：24例中恶性11 例（45. 8％）：肺腺癌7 例,鳞癌2 例,小细胞癌1 例,肺转移癌1 例。肺良性病变13 例（54. 2％）：肺结核球4 例,错构瘤3 例,硬化性血管瘤3 例,炎性假瘤、神经纤维瘤、肺霉菌病各1 例。结论：肺内孤立性肺病灶,病因多样,恶性约占50％,鉴别诊断上仍有一定困难。治疗上应采取积极的态度,及早手术切除,术中病理检查,恶性者以肺叶切除为主,良性者则应行局部切除包括肺楔形或病灶剔除术。