骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的新技术

骨髓间充质干细胞移植是治疗心肌梗死的新途径之一,其技术和方法不断发展.诸如建立更好的大型活体实验动物模型;改进对植入细胞的标记追踪技术;进一步研究细胞植入的适宜方式和时间等.骨髓间充质干细胞移植和基因疗法相结合可能得到叠加的治疗效果.     

骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的新技术

骨髓间充质干细胞移植是治疗心肌梗死的新途径之一,其技术和方法不断发展。诸如建立更好的大型活体实验动物模型；改进对植入细胞的标记追踪技术；进一步研究细胞植入的适宜方式和时间等。骨髓间充质干细胞移植和基因疗法相结合可能得到叠加的治疗效果。     

骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的研究进展

骨髓间充质干细胞是一种多能干细胞,在体外培养时,可以通过诱导使其分化为心肌细胞等。目前进行的动物实验和临床Ⅰ期实验表明骨髓间充质干细胞具有促进血管增生以及改善心肌梗死后心脏功能的作用,为心肌梗死的治疗提供了广阔前景。     

经静脉移植骨髓间充质干细胞向心肌梗死区趋化的组织学观察

目的 采用2-脱氧5氮杂胞苷（5-aza-2’-deoxycytidine，5-aza-CdR）诱导的骨髓间充质干细胞（MSCs）经尾静脉移植入不同时期的心肌梗死（MI）后心衰大鼠中,观察其向病损心肌的趋化作用及其在局部分布的特点，探讨其对心肌α-肌球蛋白重链（α-MHC）mRNA表达的影响。方法 培养Wistar大鼠的MSCs，用0.3 μmol/L的5-aza-CdR两次诱导第2代的MSCs。用溴氮胞苷（BrdU）标记后，经尾静脉植入MI后不同时期的心衰大鼠中，实验分为MI 1 d、8 d、3周、1月后移植组及MI 3周、1月后DMEM假移植组。采用免疫组化染色法检测移植后3 d及1月的MSCs在大鼠心肌中的分布情况，并用RT-PCR检测移植1月后MI局部α-MHC mRNA水平的变化。结果 在MI后不同时期（1 d内、8 d、3周、1月），通过尾静脉给予相同数量的MSCs，3 d后在各组大鼠的心肌中均发现抗BrdU＋的移植细胞。移植的MSCs主要分布在心肌受损区域，分布特点与移植时心肌的病理特点有一定的关系。急性、亚急性期，有较多的移植细胞，与自身细胞均匀分布。进入慢性期，移植细胞沿着纤维方向线样排列，呈团簇样分布，数目较急性期减少。移植后1月，各组大鼠心脏中仍有抗BrdU+的移植细胞，移植细胞分布的特点与移植后3 d所观察的结果相似。研究发现，MI区域rattus α-MHC mRNA的表达，与MI 3周移植的MSCs相比，在MI 1 d或8 d后移植，差异无显著性。MI 3周后移植MSCs，rattus α-MHC mRNA的表达较DMEM假移植组有明显提高(P<0.01)，但在MI 1月后移植与假移植组差异无显著性。结论 在不同的MI时间段经尾静脉植入MSCs，其能向心肌趋化，主要分布在心肌的受损区域，分布特点与移植时心肌的病理特点有关。MI后早期给予MSCs移植，更有利于提高MI区域rattus α-MHC mRNA的表达。     

骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死机制的研究进展

心肌梗死（myocardial infarction,MD是由于冠状动脉循环改变引起冠状血流和心肌需求之间不平衡而导致的心肌损害,是临床上一种严重的缺血性心脏病（ischemic heart isease,IHD）。梗死的心肌细胞逐渐被瘢痕组织取代,由于瘢痕组织缺乏弹性,难以满足心脏收舒功能的要求,     

同种异体移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠心肌梗死

目的　探讨同种异体骨髓间充质干细胞 (MSCs)在梗死大鼠心脏局部存活、迁移、分化及对心功能的影响 ;明确同种异体细胞移植治疗心肌梗死 (MI)的可行性及效果。方法　雌性Wistar大鼠 3 5只 ,随机分为正常对照组、急性心肌梗死 (AMI)组及MI MSCs治疗组。分离纯化雄性Wistar大鼠骨髓MSCs ,于左冠状动脉前降支结扎后 1～ 3h植入到雌性大鼠心脏组织 ,移植后 10周检测心功能并取心脏检测各种相关指标。结果　异体大鼠MSCs经纯化后可在梗死心脏组织定居、生存 ,并与宿主心肌纤维排列方向一致 ,免疫组化检测胞质心肌特异蛋白染色阳性 ,与MI组比较 ,异体细胞移植组左室收缩压升高 (P <0 0 5) ,舒张末压明显降低 (P <0 0 1)、左心室内压最大上升和下降速率显著增快 (P <0 0 5) ,梗死边缘区心肌面毛细血管数目明显增加 (P <0 0 5) ,多功能真彩色病理图像分析系统显示MI面积缩小 (P <0 0 5)。结论　同种异体MSCs移植治疗MI可行、有效     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的进展

心肌梗死可引起心肌细胞的丢失,进而引起心脏功能的下降,是心力衰竭最主要的病因。骨髓间充质干细胞（BM—MSCs）是一类具有横向分化为各系统器官和组织能力的干细胞,能补充丢失的心肌细胞并通过旁分泌等机制增强心功能,为心肌梗死提供一种全新的治疗方法,极具发展潜力。本文对BM—MSCs的分离培养、诱导因素、移植以及临床研究等方面进行了综述。     

自体骨髓间充质干细胞移植对急性心肌梗死后心功能的影响

目的观察骨髓间充质干细胞（MSCs）经冠脉移植对急性心肌梗死后心功能的影响。方法24只日本大耳白兔,随机分为MSCs移植组（n=12）和培养液对照组（n=12）。从兔股骨抽取骨髓,体外培养MSCs。通过结扎左冠前降支建立急性心肌梗死模型。冠脉结扎后7d,细胞移植组和对照组直接经冠脉注入MSCs和培养液。于心肌梗死前、细胞移植前、细胞移植后1、2和4周对兔进行超声心动图检查。移植后4周处死动物,进行BrdU和第Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测。结果移植后2周,MSCs移植组在射血分数（LVEF）和左室收缩末直径（LVESD）方面与移植前和对照组相比有显著改善（P<0.05）;移植4周后,LVEF、LVESD和左室舒张末直径（LVEDD）在MSCs移植组与移植前及对照组相比均有显著改善（P<0.05）。免疫组化检测发现,MSCs移植组BrdU染色阳性,血管计数较对照组明显增多（P<0.01）。结论经冠脉移植的MSCs可在梗死区心肌内存活并逐渐分化成心肌样细胞,促进毛细血管生成,显著改善心功能。     

左卡尼汀提高大鼠心肌梗死后移植骨髓间充质干细胞的存活和作用

目的探讨左卡尼汀（LC）是否能提高心肌梗死后移植骨髓间充质干细胞（MSCs）的存活率,从而提高其疗效。方法60只大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、LC组、MSCs组和左卡尼汀联合骨髓间充质干细胞（LC＋MSCs）组。4周后检测心功能、MSCs存活情况和梗死区心肌纤维化水平。结果4周后,与MSCs组比较,LC＋MSCs组MSCs的存活、左室心功能、心肌纤维化均改善（P〈0．05）。结论LC联合MSCs使用可提高MSCs的存活率,更好地改善心肌梗死后的心功能和心肌纤维化。     

人羊膜间充质干细胞静脉移植后在心肌梗死大鼠体内的定植及分化

目的 观察大鼠心肌梗死(MI)后经静脉移植的人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)在体内的定植、分化及对心功能的影响.方法 SD大鼠随机分为hAD-MSCs移植组,模型组和假手术组各12只.分离hAD-MSCs用流式细胞仪和免疫组化染色鉴定其表型特征.制模后1w经舌下静脉移植Brdu标记的hAD-MSCs,于移植后6 w将大鼠心脏取出并切片行组织病理学、免疫组织化学、双重免疫荧光染色等检测,以观察植入的细胞在MI区的定植、分化,在肝、脾中的分布情况.结果 分离的hAD-MSCs具有典型的间充质干细胞表型特征,高表达CD44和波形蛋白;静脉移植后6w,心脏MI区、肺脏和脾脏中均可见Brdu阳性细胞,但在肝脏中未见阳性细胞,移植的hAD-MSCs表达心肌特异蛋白连接蛋白43和α-辅肌动蛋白.移植后6 w,移植组大鼠心功能没有进一步恶化.结论 hAD-MSCs经静脉移植能够定植于大鼠MI区域,可分化为心肌细胞,并改善心功能.     

静脉移植骨髓间充质干细胞治疗心肌梗塞的可行性研究

目的：探讨经静脉注射骨髓间充质干细胞（MSCs）对心肌梗塞大鼠模型心功能的影响及其在体内的分布情况。方法：在心肌梗塞后1周将标记的MSCs注射到大鼠舌下静脉内,在细胞移植后不同时间点取心、肝、脾、肺、肾脏器,进行组织学检查,观察移植细胞的分布。选取心肌梗塞模型大鼠通过心脏超声评价移植后3周、6周心功能改变情况。结果：静脉注射MSCs后其组织结构未发现明显异常改变,早期主要分布在正常心肌组织内,1周后主要分布在梗塞及交界区内,正常心肌组织内很少见细胞存留。超声检查发现在细胞移植后实验组（12只）左心室没有进一步扩大．左心功能明显好于对照组（12只）：[左心室收缩末期内径（0．92±0．16）：（1．078±0．15）cm;左心室舒张末期内径（0．66±0．13）：（0．79±0．11）cm;左心室短轴缩短率（28．4±4．2）：（24．3±3．1）％;左室射血分数（52．7±4）：（42．89±4．2）％,P均〈0．05]。结论：静脉注射移植MSCs后细胞可以分布到重要组织器官内,移植细胞有向梗塞心肌组织内迁移的趋势,能明显延缓左心室重构及其所导致的心功能恶化。     

骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠左心功能的影响

目的研究不同途径和不同浓度的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对心肌梗死大鼠左心功能的影响。方法结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌梗死模型,采用同种异体大鼠MSCs体外分离、纯化、扩增,4’,6-二脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记,将48只SD大鼠随机分为6组,A、B、C和D组于心肌梗死后2周经尾静脉移植MSCs(A组:细胞数5×105、B组:细胞数1×106、C组:细胞数5×106、D组:细胞数1×107),E组:经心外膜注射MSCs(细胞数5×106),对照组:注入等量培养基。4周后测定左心功能并行免疫组织化学检测。结果(1)经静脉和心外膜注射移植MSCs大鼠心肌组织中均可以观察到DAPI标记细胞存在,免疫组织化学阳性标记细胞α-肌动蛋白检测阳性,与对照组比较,两组左心功能均明显改善(P<0.05)和梗死面积均明显缩小[分别为(45±2)%,(40±4)%和(41±3)%,P<0.05]。(2)与对照组比较,A组左心功能无明显改善(P>0.05),B、C、D组左心功能明显改善(P<0.05),C和D组优于B组(P<0.05)。结论MSCs经不同途径归巢至心肌梗死区,改善心功能。     

自体骨髓间质干细胞移植治疗心肌梗死的研究进展

心肌梗死后心肌细胞数量大量减少。溶栓治疗，介入治疗及冠脉搭桥手术均不能挽救已经坏死的心肌。心脏移植由于手术复杂、供体受限、费用高且存在免疫排斥反应等原因而限制了其临床应用。虽然近年来研究发现心肌有再生现象，但是这种能力非常有限。骨髓间质干细胞（Mesenchymal stem cells，MSCs）具有分化成心肌细胞的能力，具有治疗心肌梗死的巨大潜能。同时MSCs具有易于分离和体外培养扩增，不存在伦理道德方面的争议，自体移植治疗心肌梗死没有免疫排斥反应等优势而在近年来倍受关注。     

骨髓干细胞移植对大鼠急性心肌梗死后室性心律失常的影响

目的观察骨髓干细胞移植对大鼠急性心肌梗死(AMI)后室性心律失常的影响。方法30只AMI大鼠随机分为两组,心肌梗死后30min细胞移植组予以骨髓干细胞注射;对照组予以等量无血清培养基注射。观察注射后当天、28天24h动态心电图心律失常情况。结果注射后当天,两组心律失常无差异。注射后28天,细胞移植组1只、对照组4只大鼠死亡,细胞移植组室性心律失常的发生率显著降低。结论骨髓干细胞移植可有效减少AMI后室性心律失常的发生。     

动员自体骨髓干细胞对急性心肌梗死大鼠心功能的影响

目的:探讨联合应用粒细胞集落刺激因子（G-CSF）和干细胞因子（SCF）动员心肌梗死大鼠的骨髓干细胞并观察对心功能的影响及探讨其可能机制。方法:雄性W istar大鼠40只经结扎冠状动脉前降支制作心肌梗死模型后随机分为两组。①动员组:皮下注射rh-CSF和rh-SCF。②对照组:皮下注射等量生理盐水。28 d后通过测定血流动力学观察大鼠心功能变化,通过伊文氏蓝-TTC染色方法观察心肌梗死范围的变化。通过HE染色方法、免疫荧光标记染色和双重免疫荧光标记染色观察心肌梗死范围内心肌纤维化、血管和心肌再生的变化。结果:动员组心肌组织梗死范围内成纤维细胞增生程度轻,新生血管和心肌细胞的特异蛋白染色阳性,与对照组比较,动员组左室收缩压显著增大（P<0.05）,舒张末压显著减小（P<0.05）,左室压上升/下降变化最大速率显著增快（P<0.05）。动员组的缺血范围和心肌梗死的范围比对照组均有所缩小（P<0.05）。结论:G-CSF和SCF动员骨髓干细胞可以改善心肌梗死后大鼠的心功能。     

Increase in circulating bone marrow progenitor cells after myocardial infarction

BACKGROUND: Most circulating blood cells expressing the marker CD34 are bone marrow progenitor cells. These cells differentiate into cardiomyocytes, endothelial and smooth muscle cells after myocardial infarction in vivo. Mobilization of bone marrow progenitor cells into the peripheral blood after myocardial infarction may supply these cells to the heart. Rise in CD34+ cell concentrations following myocardial infarction would support the existence of myocardial-initiated mobilization. METHODS: Serial measurements of circulating CD34+ cells were made in 42 consecutive patients presenting with first ST-elevation myocardial infarction. Measurement of serum concentrations of monocyte chemoattractant protein-1, stromal derived factor-1, hepatocyte growth factor, interleukin-17 and thrombopoietin was also performed. Samples were drawn on day 1 after myocardial infarction, and on days 4, 8 and 12. Levels of CD34+ cells and cytokines were also measured in 15 controls. RESULTS: By day 8, the mean concentration of CD34+ cells rose by 74% above mean control level of 2527 cells/ml, and 41% above day 1 mean (P=0.02). This rise was sustained on day 12 (P=0.05). On day 1, there was a 9.3-fold rise in hepatocyte growth factor above the control level of 589 pg/ml (P=0.002). Hepatocyte growth factor levels declined from the day 1 mean of 6061 to 1485 pg/ml on day 12 (P=0.002). No significant change in stromal derived factor-1, interleukin-17, monocyte chemoattractant protein-1 and thrombopoietin was observed. Elevations in CD34+ cells and hepatocyte growth factor were not related to infarction size as estimated on echocardiography. CONCLUSIONS: Elevation in the concentration of circulating CD34+ cells after myocardial infarction suggests that myocardial initiated bone marrow progenitor cell mobilization exists in humans. The cytokines studied in our protocol are not likely to play a direct role in bone marrow progenitor cell mobilization.