生酮饮食治疗Rett综合征1例

<正>Rett综合征(Rett syndrome,RTT)(在线《人类孟德尔遗传》编号:#312750)是一种神经发育障碍性疾病。RTT呈X连锁显性遗传,本病主要累及女性,男性患者罕见,RTT在女性中的发病率约为1∶15 000～1∶10 000,X染色体上的甲基化CpG结合蛋白2基因(methyl-CpG binding protein 2,Me CP2)是其主要的致病基因^[1]。典型RTT患者在6～18个月之前智力运动基本发育正常,之后发育停止,接着是智力运动退化,然后逐渐丧失语言和沟通技能,并丧失获得的运动技能且经常出现手部刻板的动作,可出现小头畸形、癫痫发作、自闭症、共济失调、间歇性过度通气和脊柱侧凸等^[2-5]。     

Rett综合征2例报告

Rett综合征是一种严重影响婴幼儿智力运动发育的遗传性疾病,由Andreas Rett于1966年首先报告.本病主要累及女性,发病率为1/10 000～1/15 000.染色体Xq 28的MecP2基因是Rs的致病基因.我院儿科2003年收治2例Rett综合征患儿,现报告如下.     

Rett病的女性患儿早期发育是否正常

典型的Rett综合征在出生早期往往表现为发育正常。然而几项研究指出Rett综合征是一种在出生后很快即出现症状的发育性疾病。22例Rett综合征患儿的录像资料被用以评估他们在生后6个月时的运动、姿势和行为情况。对任何偏离正常的征象加以仔细记录,特别是对脸、手和身体的运动情况。仔细的分析显示患儿中有全身运动异常(100%)、伸舌(62%)、姿势僵硬(58%)、闭眼睁眼不对称(56%)、异常的手指运动(52%)、手刻板症(42%)、突发性面部表情异常(42%)、奇异微笑(32%)、震颤(28%)、躯体刻板动作(15%)。作者首次使用这种特殊的标准化手段测量Rett病患…     

MECP2基因新生无义突变导致Rett综合征1例的临床特点及分子遗传学分析

Rett综合征(Rett syndrome)是一种X连锁显性遗传神经发育退行性疾病,发病率为1/(10000~15000)[1]。X染色体上甲基化CpG结合蛋白2(methyl-CpG binding protein 2,MECP2)基因缺失突变是引起Rett综合征最常见的原因,该基因定位于Xq28染色体上[2-3]。该病多为新生突变,家族遗传少见;多见于女性,男性儿童罕见[4]。临床特征为6~18月龄开始起病,早期运动功能、智力发育正常,渐出现手部刻板动作,已获得手部功能丧失、智力发育倒退或低下[5],目前Rett综合征诊断主要根据临床表型及基因检测分析。现报道郑州大学附属儿童医院神经内科确诊的1例MECP2基因新发无义突变所致女性Rett综合征,结合文献总结其临床表现,分析实验室及分子遗传学特征,了解其基因型与表型的相关性,旨在提高临床医生对本病的进一步认识。      

Rett综合征1例

<正>Rett综合征又称为大脑萎缩性高血氨综合征,是一种严重影响婴幼儿智力运动发育的遗传性疾病,它的突变基因是X染色体上的编码甲基化CpG结合蛋白2(MECP2),由AndreasRett于1966年首先报道[1].1999年,Amir等[2]确定Rett的致病基因位于染色体Xq28的MeCP2基因,主要累及女性,发病率为1/10 000~1/15 000.延边大学附属医院近     

MECP2基因变异所致Rett综合征患儿1例的临床表型与遗传学分析

本文探讨MECP2基因变异所致Rett综合征的临床表型与遗传学病因,分析了1例因“发育落后”就诊于广东医科大学附属医院,最终确诊为Rett综合征女性患儿的基因型及临床表型。患儿婴幼儿期起病,有发育迟缓、手部刻板动作、癫痫发作、技能及语言丧失、智力低下及步态异常,查体提示头围小、四肢肌张力低下;检查发现异常视频脑电图,基因检测提示MECP2基因的新生杂合变异,为错义变异c.710C＞G（p.Pro237Arg）,诊断典型Rett综合征,予丙戊酸钠、拉莫三嗪抗癫痫治疗及物理刺激干预如脑深部电刺激、经颅磁刺激等处理可以缓解该Rett综合征患者神经元的病理表型,基因检测为Rett综合征最独特的诊断依据,早期基因检测诊断与治疗可改善预后,为遗传咨询及产前诊断提供重要参考依据。     

Rett综合征患儿甲基化CpG结合蛋白2基因和细胞周期依赖性激酶样5蛋白基因的突变

目的 了解Rett综合征(RTT)患儿甲基化CpG结合蛋白2基因(MECP2)和细胞周期依赖性激酶样5蛋白基因(CDKL5)突变及热点突变,建立适合临床诊断的检测方法和策略.方法 对1987至2007年北京大学第一医院儿科神经专业组诊断的177例散发RTT患儿抽取外周抗凝血提取DNA,用PCR-DNA测序方法对MECP2的全部外显子进行突变筛查,如未发现突变,用多重连接依赖的探针扩增(MLPA)法进行基因剂量分析.对MECP2未发现突变的患儿用变性高效液相色谱法(DHPLC)进行CDKL5突变筛查.结果 在177例患儿中发现145例MECP2突变,1例CDKL5突变,总的突变率82%.MECP2突变中错义突变频率最高(39%);其后依次为无义(28%)、移码(17%)和大片段缺失突变(14%).所有突变中8种最常见突变依次为p.T158M(13%)、p.R168X(12%)、c.806delG(7%)、p.R255X(6%)、p.R270X和p.R133C各(5%)、p.R306C(4%)、p.R106W(3%).11%的患儿存在一个或多个外显子的缺失.结论 中国RTT患儿MECP2突变谱和国外报道相似,有热点突变.c.806delG是中国人群特有的一个热点突变.     

线粒体损伤在散发性Rett综合征发病中的作用

目的探讨线粒体损伤在Rett综合征(RTT)发病中的作用.方法采用细胞融合技术将6例Rett综合征患儿及9例正常对照血小板与无线粒体DNA的ρ°细胞融合,用极谱法评价融合细胞氧自由基水平,用流式细胞计测定细胞凋亡率,应用电镜和TUNEL观察细胞凋亡.组间比较采用t检验.结果RTT患儿组抗氰呼吸较正常对照组增高23%(t=4.76,P<0.01),应用100μmol/L的H2O2刺激融合细胞6h后,细胞凋亡率正常组为(3.6±1.1)%,RTT患儿组为(9.9±2.7)%,显著高于正常对照组(t=6.30,P<0.01),电镜和TUNEL均证实凋亡.结论线粒体DNA转移后RTT患者融合细胞线粒体呼吸链氧自由基水平增多,RTT融合细胞对过多氧自由基的凋亡易感性增高,线粒体损伤在RTT发病中可能起着一定作用.     

MRI在中枢性性早熟中的应用

性早熟是指女童在8岁前,男童在9岁前呈现第二性征的发育异常性疾病.中枢性性早熟(central precocious puberty,CPP)是缘于下丘脑提前增加了促性腺激素释放激素(GnRH)的分泌和释放量,提前激活性腺轴功能,导致性腺发育和分泌性激素,使内、外生殖器发育和第二性征呈现.CPP多发生于女孩,男女之比大约为1:23.一般认为女孩80%～90%以上为特发性[1];男孩则80%以上是器质性.器质性CPP常与中枢神经系统炎症、畸形、创伤、肿瘤以及化疗和放疗等有关[2].     

先天性白内障致病基因研究现状

<正>医学上将出生时或出生1年后发生的晶状体部分或全部混浊称为先天性白内障(congenital cataract),它在初生儿中的发病率约为0.01%⁰.06%,在全世界儿童致盲疾患中约占10%[1-3],而其中约1/3是可遗传的[1]。先天性白内障可单眼发生,也可双眼同发,既可能单独发生,也可能与其他眼睛发育异常(如小眼畸形、虹膜缺失、前房发育异常等)相伴发生,或是遗传性多系统疾病的症状之一。致病因素包括基因突变、宫内感染、胚胎代谢障碍、外伤、婴幼儿眼部炎症等[4]。     

Rett综合征患儿2例MECP2基因大片段缺失突变分析

目的研究Rett综合征患儿2例MECP2基因用常规突变筛查方法未检出异常者是否存在大片段的缺失突变。方法用标准的盐析法从外周血提取基因组DNA,用多重连接依赖的探针扩增法(MLPA)进行突变分析,对存在突变的样本进一步用长片段PCR-DNA直接测序进行验证,同时确定突变在基因组序列中的位置。结果2例典型的Rett综合征患儿发现第四外显子有大片段缺失突变。例1用MLPA方法发现在第四外显子的4d探针位置存在缺失,长片段PCR-DNA直接测序证实在cDNA的第905至1138位之间缺失234个核苷酸,并且插入三个核苷酸(c.905-1138delinsCAC);例2用MLPA方法发现在第四外显子的4d和4a探针位置存在缺失,长片段PCR-DNA直接测序证实在cDNA的第1047至1198位之间缺失152个核苷酸(c.1047-1198del152)。结论对于常规的突变筛查不能检出MECP2有突变的Rett综合征患儿,进一步进行MLPA筛查是必要的。MLPA不仅简便、快速,而且能够发现大片断缺失。     

小儿智能发育迟缓和MECP2基因

智能发育迟缓与几百种遗传性综合征有关,在Rett综合征,脆性X综合征等多种智能发育迟缓的患者中发现了MECP2基因突变,MECP2基因已成为研究基因型与人类神经发育性疾病的关系的一个热点方向,现将其研究现状作一综述。     

盐藻cbr基因启动子及其3''''-非翻译区序列的克隆

目的：克隆盐藻cbr基因启动子和3‘-非翻译9(3‘-UTR)片段。方法：设计2对引物，通过2轮巢式PCR反应，扩增cbr基因启动子，其中首轮PCR反应使用改良的降落PCR程序，第二轮巢式PCR反应的模板是第一轮PCR产物，使用普通PCR程序；cbr基因3‘-UTR片段的克隆采用一对引物，通过一般PCR程序得到。结果：通过巢式PCR得到长约1．1kb的cbr基因启动子片段，DNA测序结果表明碱基序列与文献记载完全相同，无任何碱基突变；克隆的长0．3kh的chr基因3‘-UTR片段经人工比较，与收录的序列吻合，无碱基突变。结论：利用普通Taq酶对用PCR方法克隆得到了盐藻胡萝卜素生物合成相天基因cbr的2个基因表达渊控序列；结合使用巢式PCR和改良降落PCR，可以非常有效地克隆具有复杂二级结构的DNA片段；通过两端人工添加的限制序列．将cbr基因启动子和3‘-UTR2个调控片段构建到同一个载体上，形成cbr基因表达盒，为构建转基因盐藻表达载体打下了基础。     

甲基化CpG 结合蛋白2（MeCP2）与神经精神疾病#br#

甲基化CpG结合蛋白2（methyl-CpG binding protein 2,MeCP2）是特异性识别甲基化CpG二核苷酸的转录抑制因子。MeCP2通过参与调节转录激活、调节染色体构象、RNA剪接等调控胚胎发育、神经发生、疾病发展等过程。研究表明,MeCP2在神经精神疾病扮演重要角色,可能成为神经精神疾病新的治疗靶点。因此,该文对MeCP2在Rett综合征、抑郁症、成瘾、孤独症和精神分裂症等疾病中的最新进展进行综述。     

小儿智能发育迟缓与MeCP2基因第4外显子的关系研究

目的了解小儿智能发育迟缓（MR）患者甲基化CpG结合蛋白2（MeCP2）基因第4外显子的突变情况,探讨MR与MeCP2基因第4外显子的相关性。方法采用韦氏智力测试方法筛选30例MR患儿,30例智力正常小儿。提取外周血DNA,采用聚合酶链式反应（PCR）技术扩增MeCP2基因第4外显子,用DNA直接测序法测定MeCP2基因第4外显子。结果对30例MR患儿与30例智力正常儿童进行基因检测,均未发现第4外显子基因突变。结论 MeCP2第4外显子突变可能不是小儿MR发生的主要机制。     

年龄相关听力损失小鼠耳蜗和蜗核组织中MeCP2_BDNF的变化

目的:探讨年龄相关性听力损失小鼠听觉系统中甲基化CpG结合蛋白2(MeCP2)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达随月龄增长的变化.方法:应用蛋白免疫印迹、荧光定量逆转录多聚酶链反应方法,分别检测3、6、12、18月龄鼠耳蜗和蜗核组织中MeCP2、BDNF的表达.结果:MeCP2、BDNF在4个不同月龄组小鼠耳蜗和蜗核组织中均有表达,随着月龄增加,MeCP2蛋白表达及BDNF mRNA表达水平呈一致性下降趋势,6、12、18月龄组均明显低于3月龄组,各组间比较差异有显著性.结论:年龄相关性听力损失与听觉系统中MeCP2及其相关基因BDNF的表达下调密切相关.     

发育中Wistar大鼠大脑皮层甲基化结合蛋白-2基因表达变化

目的:研究甲基化结合蛋白-2(methyl-CpG-binding protein 2,mecp2)基因在发育中正常Wistar大鼠大脑皮层表达水平的变化.方法:应用实时定量PCR(real-time PCR),Northern印迹杂交对mecp2基因在正常Wistar大鼠发育的不同阶段:胚胎第15天(E15)、第17天(E17)、第19天(E19)、出生当日(P0),生后第7天(P7)、生后第14天(P14)、生后第28天(P28),成年期大鼠mRNA的表达水平进行定性、定量分析;应用Western印迹杂交对MeCP2的表达水平进行半定量分析.结果:mecp2基因是在正常Wistar大鼠大脑皮层中表达的mRNA,约为10kb.从胚胎至成年期的发育过程中,mecp2基因mRNA的表达虽有波动,但差异无显著性.mecp2基因在正常Wistar大鼠大脑皮层中仅表达一种MeCP2,相对分子质量为75 000.在不同发育阶段其表达水平表现为,胚胎E15表达水平最低,自胚胎E19始至成年期MeCP2表达水平较E15明显增高.生后第7日至成年期,各时间点间表达水平的变化差异没有显著性.结论:随着正常Wistar大鼠大脑皮层神经元的发育成熟,MeCP2的表达水平逐渐增高,说明MeCP2对神经元的成熟有重要作用,并可能与维持神经元的成熟状态有关.     

大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定

目的 构建并鉴定大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体,以便应用RNAi技术进一步研究MeCP2功能.方法 设计针对大鼠MeCP2 mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成双链后,与酶切后的pLentiLox3.7载体片段进行连接、转化.用菌落PCR法、酶切及DNA测序鉴定重组克隆.结果 重组克隆经菌落PCR及酶切证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确.结论 两个大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体的成功构建为应用RNAi研究大鼠MeCP2功能打下了基础.     

大鼠MeCP2基因HSV-1型反义表达载体的构建与鉴定

目的以真核表达载体单纯疱疹病毒Ⅰ型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)质粒型载体(pHSV)作为表达载体,构建大鼠MeCP2基因反义表达载体.方法用PCR方法扩增出大鼠MeCP2 cDNA部分片段,将其反向插入表达载体pHSV,并以PCR、酶切电泳以及DNA测序等方法对重组质粒进行鉴定.结果经过PCR、酶切电泳以及DNA测序,鉴定出连接方向和插入序列正确的反义表达载体.结论成功构建了大鼠MeCP2基因HSV-1型反义表达载体,为进一步研究该基因的功能打下了基础.     

变性高效液相色谱检测IRS-2基因3′-非翻译区单核苷酸多态性

目的：探讨变性高效液相色谱(DHPLC)在胰岛素受体底物-2(IRS-2)基因3′-非翻译区单核苷酸多态性(SNP)检测中的应用。方法：采用聚合酶链式反应(PCR)，DHPLC，单链构象多态性(SSCP)和DNA序列分析对30例正常对照和30例2型糖尿病患者IRS-2基因3′-非翻译区进行SNP和突变检测。结果：PCR-DHPLC检测出4例PCR-SSCP分析未能发现的2型糖尿病患者IRS-2基因3′-非翻译区的SNP，并得到测序验证。结论：DHPLC是一种快速、自动化程度高、操作简单、检测片段长、准确率高的SNP检测技术。它为进一步研究IRS-2基因3′-非翻译区的变异与2型糖尿病的关系奠定了基础。