胆盐输出泵在胆道梗阻-再通大鼠肝组织中的表达及意义

目的探讨胆盐输出泵(BSEP)在胆道梗阻-再通大鼠肝组织中的表达及意义。方法将54只Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、胆总管结扎(CBDL)组、胆道再通(BR)组,测定各时相点血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆汁酸(TBA)以及肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平,采用RT-PCR方法和二步法免疫组化染色分别在基因转录、蛋白表达及肝细胞膜定位上检测BSEP在大鼠肝组织中的表达情况,运用Mias99病理图像分析系统半定量检测BSEP的平均积分光密度(IOD),与TBA和TNF-α作相关分析。结果CBDL术后大鼠血清ALT,TBA及TNF-α显著增高(P<0.05);BR术后上述指标逐步好转,7d时仍显著高于Sham组水平(P<0.05)。BSEP mRNA水平随着梗阻时间的延长明显降低(P<0.05),CBDL术后14d仅微弱表达,梗阻解除后缓慢增高;BR术后7d仍未恢复至Sham组水平。免疫组化染色显示BSEP表达定位于肝细胞膜上,变化规律与前述一致,并且与TBA和TNF-α呈显著负相关(r1=-0.9257,r2=-0.8536,P<0.05)。结论胆道梗阻-再通大鼠模型中胆盐的代谢与BSEP水平密切相关,而TNF-α可能是影响BSEP变化的重要因素。     

急性重症胆管炎大鼠肝组织高迁移率族蛋白-1对肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨急性重症胆管炎（ACST）大鼠肝组织高迁移率族蛋白1（HMG-1）改变及其对肿瘤坏死因子（TNF-α）表达的调节作用。方法通过制作ACST大鼠模型，正丁酸钠干预，不同时相点检测肝组织HMG-1及TNF-α表达，同时观察肝功能及结构改变。结果ACST组12-24h肝组织HMG-1和TNF-amRNA表达均显著增强（P〈0．05或0．01）。正丁酸钠处理可显著抑制ACST后12-24h肝组织HMG-1mRNA表达（P〈0．01），并明显下调肝组织TNF-αmRNA表达及TNF-α水平（P〈O．05或0．01），同时血清谷丙转氨酶（ALT）水平显著降低（P〈0．05或0．01），肝脏的病理形态得到明显改善。结论ACST大鼠肝组织HMG-1表达可促进局部TNF-α的合成与释放，从而诱导ACST大鼠急性肝功能损害。     

优化溃结方对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织TNF-α含量与蛋白表达的影响

为研究优化溃结方对溃疡性结肠炎大鼠肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-a,TNF-α）的影响及其可能的治疗机制,将健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、补脾益肠丸组、柳氮磺吡啶（SASP）组和优化溃结方组。以三硝基苯磺酸（TN—BS）乙醇法建立溃疡性结肠炎大鼠模型。分组灌胃治疗后,检测溃疡性结肠炎大鼠结肠组织TNF-α含量和TNF-α蛋白表达。结果显示,模型组与正常组比较,TNF-α含量和TNF-α蛋白表达明显增高（P〈0．05）;优化溃结方组、补脾益肠丸组、SASP组与模型组比较,TNF-a含量和TNF-a蛋白表达均明显下降（P〈0．05）;优化溃结方组与补脾益肠丸组比较,TNF_a含量和TNF-d蛋白表达均下降（P〈0．05）;优化溃结方组与SASP组比较,TNF-α含量和TNF-α蛋白表达均下降（P〈0．05）。结果表明,优化溃结方可以降低溃疡性结肠炎大鼠结肠组织TNF-a含量和TNF-α蛋白表达。     

吻合肝动脉对大鼠部分肝移植早期损伤的影响

目的探讨吻合肝动脉在大鼠部分肝移植早期损伤中的作用。方法选取雄性SD大鼠180只，随机分成3组：全肝移植组（A组）；部分肝移植组（B组）；部分肝移植肝动脉化组（C组）。在恢复血供后30min，2、3、6、12、24h等6个时间点分别取材，检测：血清肝功能指标；血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平；原位末端标记法（TUNEL）检测肝组织细胞凋亡；荧光半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测TNF-α和TNF-α受体在肝组织中的表达。结果各组总胆红素（TB）、谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）峰值均出现在术后6、12h后逐渐下降，TB、ALT和AST峰值依次为B组〉C组〉A组（P值均〈0．05）；移植术后各组血清TNF-α表达水平在3h时达到峰值，随后逐渐下降，峰值B组〉C组〉A组。其中B组峰值显著高于A和C组，而A、C组峰值差异无统计学意义（P〉0．05）；B组各时间点细胞凋亡数均显著多于A组和C组；B组肝组织TNF-α表达峰值位于术后2h，A、C组峰值位于术后3h，B组12h表达显著减少，A、C组术后12h为阴性表达。B组TNF-α受体2基因表达水平显著高于A、C组。结论吻合肝动脉可显著减轻部分移植肝早期损伤。TNF-α及其受体的表达强度与肝脏损伤程度有密切关系，可能是参与大鼠部分肝移植早期损伤过程的重要细胞因子。     

胆道梗阻肝损伤早期NF-KB活性变化的影响及意义

目的探讨胆道梗阻导致的胆汁淤积性肝损伤时NF—KB活性变化的意义。方法将20只大鼠随机分为假手术组（SO组）和梗黄试验组（Ja组）,,la组通过胆总管结扎建立大鼠胆道梗阻模型。所有大鼠均于术后7d处死。采集血清测定血清谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）和总胆汁酸（TBA）水平。免疫组化染色测定肝组织NF—KBp65含量。RT—PCR测定肝脏组织中TNF-amRNA水平。结果Ja组ALT水平明显高于sO组（145．7±33．5μmol／Lys40．7土7．3Nmoi／L,（P〈0．001）,Ja组的TBIL和TBA水平较sO组升高,差异有统计学意义（Jp均〈0．001）。da组的NF—KBp65亚基阳性染色率（15．5土4．3）明显高于s0组（5．14-1．9）（P〈0．001）。而RT-PCR发现Ja组TNF-a mRNA相对表达量（1．3士0．4）明显高于sO组（0．8土0．1）（尸〈0．001）。结论NF-KB在胆汁淤积早期呈高表达状态,其可能是调控胆汁淤积性肝损伤的重要通路,能为防止肝损伤提供治疗靶点。     

雌激素调节大鼠去卵巢后骨髓细胞OPG、RANKL、RANK基因表达

目的 观察大鼠去卵巢后骨髓细胞核因子κB受体活化子配体（RANKL）、核因子κB受体活化子（RANK）、护骨素（OPG）以及TNF-α基因表达的改变和雌激素的影响。方法 健康3m龄雌性SD大鼠72只，24只为假手术对照组，48只去卵巢，随机分为去卵巢组和雌激素组，每组24只。分别于去卵巢后2、4、6、12w每组各取6只大鼠骨髓细胞提取RNA，RT-PCR半定量分析其表达。结果 与对照组相比，去卵巢后2W．去卵巢组骨髓细胞TNF-α和RANKLmRNA表达显著升高（P〈0．05—0．01），第4-6w，上述改变达高峰，至第12w TNF-α仍呈有意义增高；而OPG表达在第2-6W则明显降低（P〈0．01），2-4W为最低点；OPG／RANKL比值2-6W为最低（P〈0．01），12W仍低于对照组。雌激素组以上各时间TNF-α和RANKL表达低于去卵巢组（P〈0．05，P〈0．01）而OPG表达和OPG／RANKL比值明显高于去卵巢组（P〈0．01）。各组全程未见RANK基因表达水平有明显变化。结论 雌激素抑制大鼠去卵巢后骨髓细胞过度表达RANKL和TNF-α而增加OPG的表达。     

核因子-κB、细胞间黏附分子-1和炎症细胞因子在急性胰腺炎肝损伤中的作用

目的 观察核因子（NF）-κB、细胞间黏附分子（ICAM）-1和炎症细胞因子在急性胰腺炎（AP）肝损伤中的作用。方法 36只SD大鼠随机分为AP组、假手术组（SO组），通过胰胆管逆行注射3．5％牛磺胆酸钠溶液制作大鼠AP模型。术后3、6、12h胰腺组织光镜检查；肝组织光镜、电镜观察；检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）；放射免疫法（RIA）测定血清肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β、IL-6；酶联免疫吸附法（ELISA）检测IL-10；实时定量聚合酶链反应（Real—time PCR）检测肝组织TNF-αmRNA、IL-6mRNA；肝组织Envision法免疫组织化学测定NF-κB、ICAM-1。结果 病理学证实建立AP组，出现肝损伤的病理形态变化；与SO组比较，AP组的血清ALT以及TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10水平显著增高（P〈0．05），其中血TNF-α水平在3h升高、6h达高水平，血IL-6在AP3h明显升高，下降缓慢。AP6、12h组肝NF-κB活化，AP各组间肝NF-κB活性表达差异均有统计学意义（χ^2=15．048，P〈0．05），ICAM-1无表达。AP3～12h内，AP组肝TNF-αmRNA在3h明显升高、6h高表达；AP组的肝IL-6mRNA则在3h已增加、3h后缓慢下降，均显著高于各自时段的SO组（P〈0．05）。结论 AP发生后，肝脏NF-κB活化，可能介导肝TNF-αmRNA、IL-6mRNA的表达来参与肝损伤，ICAM-1对AP早期肝损伤无明显作用。     

乌司他丁对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法SD大鼠72只随机分为假手术组（C）、缺血再灌注组（I）和乌司他丁组（U）。采用ELISA和免疫组化方法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1B（IL-1β）、胰腺组织bcl-2蛋白和热休克蛋白70（HSP70）表达的变化；并观察胰腺病理组织学改变。结果缺血再灌注组的各时点TNF-α含量明显高于假手术组和乌司他丁组（P〈0．05）；缺血再灌注组和乌司他丁组的IL－1β含量在6，12，24h较假手术组明显增加（P〈0．05），但乌司他丁组增高水平明显低于缺血再灌注组（P〈0．05）；乌司他丁组在再灌注6，12，24h时bcl-2蛋白表达明显高于缺血再灌注组和假手术组（P〈0．05）．后两组各时点表达水平比较差异无统计学意义（P〉0．05）；缺血再灌注组和乌司他丁组HSP70的表达在12，24h较假手术组明显增加（P〈0．05）。病理组织学观察：乌司他丁组炎症反应较缺血再灌注组明显减轻。结论鸟司他丁能降低大鼠胰腺缺血再灌注损伤时血清TNF—α、IL-1β水平和上调胰腺组织bcl-2蛋白的表达，对大鼠胰腺缺血再灌注损伤有明显保护作用。     

雌激素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的保护作用

目的探讨雌激素对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化的作用。方法雌性SD大鼠30只，随机分为4组：Ⅰ组对照组；Ⅱ组生理雌激素组；Ⅲ组低雌激素组；Ⅳ组高雌激素组。UUO术后21d处死各组大鼠，光镜观察梗阻肾组织病理变化，并分别用免疫组化和RT-PCR方法检测各组肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和金属蛋白酶1组织抑制剂（TIMP-1）的表达。结果低雌激素组间质纤维化病变最明显，高雌激素组病变显著减轻（P〈0．01）。与生理雌激素组相比，低雌激素组α—SMA和TIMP-1蛋白和基因的表达增加（P〈0．05）；高雌激素组上述物质表达则减少（P〈0．05）。结论雌激素可能通过抑制α-SMA和TIMP-1的表达进而减少细胞外基质的沉积而发挥肾保护作用。     

外源性PTH对摘卵大鼠骨髓PPARγ mRNA表达的影响

目的观察骨质疏松大鼠骨髓微环境PPARγ mRNA表达变化和PTH治疗绝经后骨质疏松症的分子机制。方法雌性大鼠随机分为Sham、OVX和OVX＋PTH（1-34）20μg组，摘卵12周后给药，药后8周处死，观察骨髓脂肪细胞及PPARγmRNA表达变化。结果OVX组大鼠腰椎骨髓腔内脂肪空泡数较Sham组明显增加（P〈0．001），空泡百分面积为Sham组的26．81倍（P〈0．001）。OVX＋PTH20μg组的脂肪空泡数明显减少（P〈0．001），仅为OVX组的18．7％（P〈0．001）；OVX组骨髓PPARγmRNA表达较Sham组明显升高（P〈0．05—0．001），OVX＋PTH（1-34）20μg组PPARγmRNA表达则较不治疗组明显降低（P〈0．05～0．01）。结论OVX骨质疏松大鼠骨髓微环境PPARγmRNA表达上调，PTH对骨质疏松的促进骨形成作用与其抑制骨髓PPARγmRNA表达有关。     

Consequences of intraperitoneal bile: bile ascites versus bile peritonitis

Recent experience with patients with bile ascites and bile peritonitis prompted a review of other case histories in the medical literature of these conditions. The clinical courses of 24 patients with bile ascites and 34 with bile peritonitis were reviewed. Bile ascites occurred most often as a postoperative complication of biliary tract operations and also occasionally after trauma. Clinical signs were minimal except for abdominal distention, and operations were delayed for an average of 30 days. Peritoneal fluid was sterile in the 11 patients studied. In contrast, bile peritonitis occurred most commonly after spontaneous perforation of the gallbladder or hepatic ducts but also after trauma. All patients had severe signs of peritoneal irritation, and operation was performed earlier, at a mean of 4 days after onset of symptoms. Of 11 patients with specimens of their peritoneal fluid cultured, 6 had sterile fluid and 5 had bacteria. Although both bile salt concentration and bacteria have been implicated in the development of bile peritonitis rather than bile ascites, our understanding of the mechanisms involved is still incomplete.     

经验值得注意——再论胆管损伤与损伤性胆管狭窄

自腹腔镜胆囊切除术普遍开展之后,胆囊切除的病例很快增多,而胆管损伤发生率也随之升高,胆管损伤与胆管狭窄又重新成为本世纪的热门话题。医源性胆管损伤重在预防,预防手术中胆管损伤的基本点仍然是强调外科手术的基本要求,认真细致地施行手术,必要时中转开放手术。在专科中心及有经验的外科医生手中,修复手术结果优良者一般可达到90％,初期修复的效果优于再次修复。恢复胆道生理功能是修复手术的最终目的,当前广泛应用的仍然是肝管Roux-en-Y空肠吻合术。     

腹腔镜胆总管切开取石方法探讨

目的 :探讨腹腔镜下胆总管探查胆道取石的方法。方法 :于腹腔镜下对胆总管结石 4 5例按由简单到复杂 ,由损伤轻到损伤重的原则应用冲洗、挤压及分离钳、胆道镜、改良取石钳取石。结果 :用冲吸法取净结石 3例 ,占 6 .6 % ;挤压和分离钳取净结石 13例 ,占 2 8 9% ;胆道镜取净结石 11例 ,占 2 4 % ;取石钳取净结石 18例 ,占 4 0 %。结论 :腹腔镜下胆总管取石应遵循由简到繁的原则 ,用取石钳取石较为可靠     

腹腔镜胆总管探查一期缝合术后胆瘘及胆总管狭窄的危险因素分析

目的 探讨腹腔镜胆总管探查（LCBDE）及一期缝合术后发生胆瘘及胆总管狭窄的临床危险因素。方法 收集自2017年1月至2019年6月湖州市中心医院收治的92例行LCBDE胆总管一期缝合术患者的临床资料，行回顾性对列研究及多因素回归分析。结果 全组患者术后胆瘘及胆总管狭窄发生率分别为11.9%（11/92）和18.5%（17/92）。合并糖尿病、胆总管直径＜1 cm、由胆总管一期缝合手术操作例数＜30例的主刀医师行手术治疗的患者术后胆瘘及胆总管狭窄的发生率明显升高（P＜0.05）。多因素回归分析发现，上述三个因素是LCBDE胆总管一期缝合术后胆瘘发生的独立危险因素[合并糖尿病：OR（95%CI）4.782（1.176～19.439），P=0.029；胆总管直径＜1 cm：OR（95%CI）5.743（1.535～21.481），P=0.009；胆总管一期缝合手术操作例数＜30例：OR（95%CI）4.693（1.251～17.612），P=0.022]，同时上述三个因素也是术后胆总管狭窄发生的独立危险因素[合并糖尿病：OR（95%CI）3.455（1.147～10.406），P=0.028；胆总管直径＜1 cm：OR（95%CI）4.667（1.500～14.518），P=0.008；胆总管一期缝合手术操作例数＜30：OR（95%CI）3.094（1.049～9.121），P=0.041]。结论 合并糖尿病、胆总管直径＜1 cm、主刀医师经验不足（操作例数＜30例）是LCBDE胆总管一期缝合术后发生胆瘘及胆总管狭窄的独立危险因素。对存在糖尿病或胆总管直径＜1 cm的患者应避免行胆总管一期缝合术；在学习曲线内的主刀医师应采取合理的胆总管一期缝合方式以避免术后胆瘘及胆总管狭窄的发生。     

Lithogenesis and bile metabolism

Gallstone disease exacts a considerable financial and social burden worldwide leading to frequent physician visits and hospitalizations. Based on their composition, gallstones are categorized as cholesterol, black pigment, and brown pigment, with each category having a unique structural, epidemiologic, and risk factor profile. Cholesterol crystal formation requires the presence of one or more of the following: (a) cholesterol supersaturation, (b) accelerated nucleation, or (c) gallbladder hypomotility/bile stasis. Some risk factors for cholesterol stones include age, gender, genetics, obesity, rapid weight loss, and ileal disease. Generally, pigment stones are formed by the precipitation of bilirubin in bile, with black stones associated with chronic hemolytic states, cirrhosis, Gilbert syndrome, or cystic fibrosis, and brown stones associated with chronic bacterial or parasitic infections.     

胆道术后胆漏的原因分析和防治

胆漏是肝胆外科术后常见的并发症之一,由于发生胆漏可明显延长住院时间,增加病人痛苦和经济负担,部分肿瘤病人可能因此而影响术后恢复及综合治疗.现就江都市扬州洪泉医院两年来30例术后胆漏病例的处理进行回顾性总结,并报道如下.