β-珠蛋白生成障碍性贫血基因分析

本文分析了宜昌地区3个家系8例β-珠蛋白基因突变类型，发现以IVS-2-654(C→T)占多数6/8，次为41-42(-4bp)2／8．3例先证者分别为41-42(-4bp)／IVS-2-654(C→T)双重杂合子；IVS-2-654(C→T)纯合子；IVS-2-654(C→T)杂合子．β-珠蛋白生成障碍性贫血治疗困难，脾切除对于双重杂合子及纯合子患者疗效差于杂合子患者，目前进行产前诊断能达优生目的．     

β—球蛋白生成障碍性贫血基因分析

本文分析了宜昌地区3个家系8例β—珠蛋白基因突变类型,发现以IVS—2—654(C→T)占多数6/8,次为41—42(-4bp)2/8。3例先证者分别为41—42(-46p)/IVS—2—654(C→T)双重杂合子;IVS—2—654(C→T)纯合子;IVS—2—654(C→T)杂合子。 β—珠蛋白生成障碍性贫血治疗困难,脾切除对于双重杂合子及纯合子患者疗效差于杂合子患者,目前进行产前诊断能达优生目的。     

深圳地区β-珠蛋白生成障碍性贫血基因突变分析

目的对深圳地区β-珠蛋白生成障碍性贫血患者的β-珠蛋白基因序列进行分析,了解深圳地区人群β-珠蛋白基因的突变类型。方法收集100例深圳地区β-珠蛋白生成障碍性贫血患者的外周血并抽提基因组DNA,通过聚合酶链反应扩增全长β-珠蛋白基因,经DNA测序确定β-珠蛋白基因的突变类型。结果在89例深圳地区β-珠蛋白生成障碍性贫血患者中,我们在β-珠蛋白基因中共发现7种突变,以突变频率高低依次为IVS-Ⅱ-654(C→T)、Codon17(A→T)、Codon41/42(-TTCT)、Codon71/72(+A)、Codon27/28(+C)、Codon43(G→T)、-28(A→G)。剩余11例临床诊断的β-珠蛋白生成障碍性贫血患者的β-珠蛋白基因未检出突变。结论在深圳地区人群中IVS-Ⅱ-654(C→T)、Codon17(A→T)和Codon41/42(-TTCT)为β-珠蛋白基因的常见突变。不排除未检出突变患者存在β-珠蛋白基因座控制区存在突变,这将给产前诊断带来困难。     

珠蛋白生成障碍性贫血的实验室诊断进展

1地贫的发病机制及分类 珠蛋白生成障碍性贫血,因早年发生病例多属于地中海沿岸民族,故原名为地中海贫血或海洋性贫血。本病是由于遗传的珠蛋白基因缺失,使血红蛋白的中一种或一种以上珠蛋白链合成缺如或不足所致的贫血。本病广泛分布于世界各国,我国广东、广西、海南、香港、云南、贵州、四川为高发区。     

桂西地区珠蛋白生成障碍性贫血基因型构成比研究

目的研究桂西地区2013年的珠蛋白生成障碍性贫血患者的基因型及构成比。方法3种α珠蛋白生成障碍性贫血缺失型检测应用跨跃断裂位点聚合酶链法（GAP-PCR）,3种α-珠蛋白基因点突变型和17种β地贫基因突变位点检测采用聚合酶链反向点杂交法（PCR-RDB）。结果基因确诊为α珠蛋白生成障碍性贫血患者211例,排前五位基因型及构成比依次为αα／--^SBA（46．45％）、-α^3.7／αα（10．90％）、α^csα／--^SEA（10．43％）、α^csα/αα（8．06％）和-α^3.7／--SEA（7．11％）;β珠蛋白生成障碍性贫血患者114例,17M／N和41-42M／N基因型占主导地位,构成比分别是36．84％和29．82％;另外检出α＋β混合型珠蛋白生成障碍性贫血34例。结论αα／--SEA、17M／N和41-42M／N是桂西地区α和β珠蛋白生成障碍性贫血最常见的突变类型。     

桂西地区珠蛋白生成障碍性贫血的红细胞参数筛查价值探讨

目的研究红细胞参数在不同类型珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的诊断价值,为珠蛋白生成障碍性贫血患者提供敏感度和特异度高而又经济快捷的筛查方法。方法选取经我院基因诊断确诊的不同类型的珠蛋白生成障碍性贫血患者149例,正常对照51例,采用HORIBA ABX PENTRA DX 120全自动血细胞分析仪进行以下红细胞参数测定：血红蛋白（HGB）、红细胞平均体积（MCV）、红细胞平均血红蛋白含量（MCH）、红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）和红细胞分布宽度（RDW）,并进行分析统计。结果地贫各组红细胞参数与正常对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。HGB、MCV、MCH、MCHC和RDW筛查α、β和α＋β珠蛋白生成障碍性贫血的灵敏度分别是69.6%、83.3%和72.7%,84.8%、97.9%和100%,88.6%、100%和100%,78.5%、77.1%和77.3%,57.0%、64.6%和63.6%,HGB、MCV、MCH、MCHC、RDW筛查珠蛋白生成障碍性贫血的特异度分别是76.5%、96.1%、70.6%、49.0%和80.4%。结论红细胞参数MCV〈80 fl作为桂西地区珠蛋白生成障碍性贫血的筛查指标是最佳的。     

血常规在缺铁性贫血和珠蛋白生成障碍性贫血鉴别诊断中的应用

目的 探究血常规鉴别诊断缺铁性贫血和珠蛋白生成障碍性贫血的方法及临床应用价值。方法 选取2017年1月~2018年1月在本院确诊并行治疗的贫血患者为研究对象,按照疾病分型将缺铁性贫血38例设为甲组,珠蛋白生成障碍贫血42例设为乙组,选取同期接受体检的健康者40例设对照组,比较3组血常规各项指标。结果 甲组、乙组HGB、MCV、MCH、MCHC水平均低于对照组,甲组、乙组的RDW水平高于对照组,乙组的RBC（4.78±0.79）1012/L、RDW（0.20±0.02）%、HGB（94.29±6.58）g/L、均高于甲组,乙组RBC（4.78±0.79）1012/L高于对照组,甲组RBC（3.55±0.63）1012/L低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 血常规检测结果可以作为鉴别诊断缺铁性贫血和珠蛋白生成障碍性贫血的方法。     

去铁酮和去铁胺治疗珠蛋白生成障碍性贫血临床疗效及安全性的Meta分析

目的采用Meta分析对去铁酮＋去铁胺联合治疗重型珠蛋白生成障碍性贫血的临床疗效及安全性进行综合定量评价。方法制定原始文献的纳入标准、排除标准以及检索策略,检索Cochrane图书馆、PubMed、EMBASE、Ovid、Springer、中国生物医学文献光盘数据库、中国期刊全文数据库和维普期刊数据库,检索时间为1985年1月1日至2008年5月31日,获得去铁酮＋去铁胺联合治疗重型珠蛋白生成障碍性贫血的相关文献。采用Cochrane中心推荐的方法对文献质量进行评价。选取血清铁蛋白（SF）、肝组织铁浓度（LIC）、心肌铁含量和不良反应发生率作为主要测量指标,总铁排泄量和心功能作为次要测量指标。采用Review Manager4．3．2软件对满足纳入标准的RCT文献进行Meta分析。计量资料采用加权均数差（WMD）或标准化均数差（SMD）及其95％CI表示,计数资料采用RR及其95％CI表示。结果共检索到相关文献216篇,符合纳入标准的5篇RCT文献（n=229）进入Meta分析,其中4篇文献质量评价为B级,1篇为C级。去铁酮＋去铁胺联合治疗组（联合治疗组）与单用去铁胺治疗组（去铁胺组）比较：治疗12个月后sF下降程度：SMD=-0．04,95％CI：-0．48～0．41;LIC下降程度：SMD=-0．1,95％CI：-0．47—0．27;总铁排泄量：WMD=0．18,95％CI：0—0．37,两组差异均无统计学意义。左心室射血分数改善情况：WMD=3．40,95％CI：0．97～5．82,提示左心室射血分数联合治疗组高于去铁胺组。安全性分析：胃肠道不良反应发生率联合治疗组高于去铁胺组,RR=2．77,95％CI：1．41—5．42。联合治疗组关节不良反应发生率：RR=1．45,95％CI：0．59～3．52;中性粒细胞减少症发生率：RR=0．85,95％CI：0．27～2．68;注射部位不良反应发生率：RR=0．57,95％CI：0．20～1．65,与去铁胺组差异均无统计学意义。1篇文献采用MRIT2^＊测定心肌铁含量,结果显示联合治疗组心肌铁含量下降程度高于去铁胺组。结论联合治疗组的短期疗效及安全性与去铁胺组相当,去除心肌铁含量和改善心功能方面效果优于去铁胺组;联合治疗组最常见的不良反应为胃肠道反应。因纳入文献较少,临床应用本研究结果应谨慎,进一步结论仍有待大样本、多中心和高质量的RCT研究来验证。     

再生障碍性贫血患者血清sICAM-1和TGF-β1水平及其意义

目的探讨再生障碍性贫血(AA,再障)患者血清可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)水平及其意义.方法采用ELISA法检测再障30例和骨髓增生异常综合征(MDS)15例,正常对照组20例血清sICAM-1和TGF-β1水平.结果慢性再障(CAA)组sICAM-1较正常组明显增高(p<0.05),TGF-β1较正常组明显降低(p<0.01);重型再障(SAA)和MDS组sICAM-1均较正常组显著增高(p均<0.01),TGF-β1均较正常组显著下降(p均<0.01).SAA组sICAM-1较CAA组显著增高(p<0.05),MDS组与CAA组比较,sICAM-1明显增高(p<0.01),MDS组与SAA组比较,TGF-β1明显增高(p<0.01).动态观察10例再障,随着病情的好转,sICAM-1水平逐渐下降,TGF-β1水平趋于上升;当病情加重时,sICAM-1上升,TGF-β1下降.血清sICAM-1和TGF-β1接近正常者疗效、预后好.结论高水平的sICAM-1和低水平的TGF-β1可能参与再障造血干/祖细胞衰竭的病理生理过程;动态检测sICAM-1和TGF-β1水平,为再障患者监测病情、评价疗效、指导临床治疗及预后判断提供较为客观的指标.     

珠蛋白基因表达的调控和β地中海贫血的治疗

人类珠蛋白基因是基因组中最富有代表性的基因，而珠蛋白基因突变所致的地中海贫血综合征则是最典型的单基因遗传病。由于珠蛋白基因表达的遗传调控的复杂性，致使对β地中海贫血的基因治疗仍处于探索阶段，目前应用某些药物和羟基脲等来调变珠蛋白基因表达的形状控制被认为是对β地中海贫血进行基因治疗的另一种有效的途径。     

β地中海贫血基因治疗的研究进展

基因治疗是根治β地中海贫血研究的重点方向。位点控制区 (L CR)的发现以及新型基因转移系统不断开发研制 ,给导入正常β珠蛋白基因以实现基因治疗的设想带来了希望但同时也产生了新课题 ;与此同时 ,分别从DNA和 RNA水平对受损的β珠蛋白基因进行修正治疗的研究也在开展当中。随着珠蛋白基因表达调控机制研究不断深入 ,同时开发出安全高效的新型病毒载体 ,有可能最终实现β地中海贫血基因治疗     

肿瘤坏死因子-β对重型再生障碍性贫血患者效应T细胞损伤骨髓造血的影响

目的:研究肿瘤坏死因子-β(TNF-β)对重型再生障碍性贫血(SAA)患者效应T细胞(CD8+HLA-DR+T细胞)损伤骨髓造血的影响,探讨TNF-β在SAA免疫发病中的作用。方法:以免疫磁珠阳性分选15例SAA患者骨髓CD8+HLA-DR+T细胞作为效应细胞,以阴性分选去除15名正常人骨髓单个核细胞中CD3+T细胞后作为靶细胞,两者混合培养,于体系中分别加入不同浓度TNF-β(终浓度分别为0、15、25、50 ng/ml)为实验组,并设空白对照组,孵育72小时后,通过流式细胞术以Annexin V检测靶细胞凋亡状况,采用ELISA法测定培养上清液IL-10、IFN-γ水平。结果:空白对照组及3个实验组细胞凋亡比例分别为(49.85±20.33)%、(51.65±20.34)%、(55.94±20.19)%、(57.72±19.45)%,TNF-β终浓度为50 ng/ml组及25 ng/ml组均明显高于空白组和15 ng/ml组细胞凋亡比例(P<0.05),但空白组与15 ng/ml组,25 ng/ml组与50 ng/ml组细胞凋亡比例无显著差异(P>0.05)。空白对照组及各实验组培养上清IL-10浓度分别为(217.99±29.47)ng/ml、(216.47±29.00)ng/ml、(212.15±13.19)ng/ml、(218.01±28.61)ng/ml,各组差异无统计学意义(P>0.05)。TNF-β终浓度50 ng/ml组培养上清IFN-γ水平[(593.50±48.18)ng/ml]明显高于空白对照组[(544.85±69.77)ng/ml],15 ng/ml组[(567.38±74.51)ng/ml]、25 ng/ml组[(544.05±79.69)ng/ml](P<0.05)。结论:TNF-β能增强SAA患者效应T细胞诱导骨髓造血细胞凋亡,并呈浓度依赖性;高水平的TNF-β可能还促进SAA患者CD8+HLA-DR+T细胞分泌IFN-γ,两者具有协同细胞毒作用。     

再生障碍性贫血患者肾功能的放射免疫分析

用放射免疫分析法（ＲＩＡ）检测３４例再生障碍性贫血（ＡＡ）患者血清及尿β２－微球蛋白（β２－ｍ），糖蛋白（ＴＨＰ）及尿白蛋白（Ａｌｂ）以了解其肾脏功能。结果显示，重型和慢性ＡＡ血清β２－ｍ显著低于正常对照（Ｐ分别〈０．０５，〈０．０１），并与病程相关，病程长者降低更为显著，而尿β２－ｍ均显著升高（Ｐ〈０．０１）。慢性ＡＡ血清ＴＨＰ显著低于正常对照组（Ｐ〈０．０５），但其尿ＴＨＰ及病程超半年ＡＡ患者     

一个少见的β地中海贫血突变家系

目的　鉴定中国人中 1个少见的 β地中海贫血 (β-地贫 )家系成员的基因转录突变 (- 90C→ T)。　方法　表型分析采用常规的红细胞指数和血红蛋白电泳分析技术 ;反向点杂交技术用于检测中国人 18种已知类型的β-地贫突变 ;β珠蛋白基因全长 DNA测序技术用于确定样品的基因突变及其基因型 ;RT- PCR半定量法分析该突变对 β-珠蛋白基因转录水平的影响。　结果　家系分析发现 :先证者、先证者之兄和其母亲为有典型 β-地贫特征的个体 ,反向点杂交筛查未发现已知的 β-地贫突变 ,DNA直接测序分析发现该家系的这 3个成员均携带有 1种中国人中未见报道的 β地贫等位基因—— β-珠蛋白基因启动子区近侧 CACCC盒中 - 90位的 C→ T转录突变。RT- PCR分析显示该突变引起β-珠蛋白基因转录水平下降 (突变 :2 .2 33± 0 .0 1vs正常 :3.779± 1.19;95 % CI:3.0 6 0 ,4 .4 99) ,与其他类型的β-地贫杂合子β-基因的表达水平相当 (2 .110± 0 .5 3,95 % CI:1.732 ,2 .4 88)。　结论　 - 90位的 C→ T转录突变是中国人中未见报道的稀少类型的 β-地贫转录突变。     

人胎儿γ-珠蛋白基因的再活化及在β血红蛋白病治疗中的

在个体发育过程中,人β类珠蛋白基因的表达存在从胎儿(γ)到成人(β)珠蛋白基因的表达转换(或称开关).β-地中海贫血和镰刀型贫血症是两种最为常见的严重危害人类健康的单基因遗传病,通过诱导胎儿期血红蛋白(HbF,α2γ2)在成人期表达对该病的治疗是一种有效的策略.一些活化γ珠蛋白基因表达的转录因子和辅助因子已经被鉴定,一...     

再生障碍性贫血患者TH水平的观察

近年来，许多学者认为甲状腺激素（Ｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ，ＴＨ）降低与病种无关，但常能反映疾病的严重程度［１］。本文对３５例再生障碍性贫血（再障）患者进行ＴＨ水平测定，旨在观察ＴＨ水平在再障中的动态变化。现将结果报告如下。 对象和方法 一、对象：再障组３５例（男２０，女１９），年龄１３－６３岁，为住本院的再障患者，其中急性再障５例，慢性再障３０例，均符合１９８７年第四届全国再生障碍性贫血学术会议修订的诊断标准［２］。对照组３０例（男１６，女１４），年龄１９－５８岁，系健康体检者。 二、方法：采…     

云南傣族儿童中β-地中海贫血HBB基因的变异分布特征

目的 探讨云南傣族人群中β-地中海贫血β珠蛋白基因(hemoglobin beta gene,HBB)变异分布特点.并建立检测相应常见变异位点的快速筛查方法.方法 获取209例云南傣族儿童β-地中海贫血阳性样本,用DNA序列测定的方法对包含有β珠蛋白基因(HBB)在内的1755bp DNA片段进行基因变异分析.建立检测3个常见变异位点的碱基突变特异性扩增系统(amplification refractory mutation system,ARMS),并对引物及扩增条件进行优化.结果 209例样本中共发现9个变异位点,按频率由高到低分别是CD2 T＞C(50.72%)、CD26 G＞A(35.41%)、CD17 A＞T(12.92%)、ⅣS-Ⅱ-17 C＞G(12.44%)、ⅣS-Ⅱ-16 G＞C(11.96%)、ⅣS-Ⅰ-30 A＞G(9.57%)、CD6G＞A(9.09%)、CD41-42(-TCTT)(7.18%)、CD5 T＞A(1.92%),有153人被检测出基因变异位点,占总人数的73.21%.引入错配碱基的ARMS引物,在65℃的退火温度能对CD2、CD26和CD17 3个常见变异位点进行特异筛查.结论 云南傣族β-地中海贫血人群中HBB基因的变异位点有其自身的特点,与其他地区有所不同.ARMS检测云南傣族β-地中海贫血基因变异是一种准确有效并简便经济的方法.

Abstract：

Objective To characterize the distribution of variation in hemoglobin beta gene ( hemoglobin beta gene, HBB )of β-thalassemia in Dai minority group in Yunnan province, and to establish a rapid and economical method for screening β-thalassemia mutation via optimizing ARMS technique.Methods DNA Sequencing was performed to detect variation in 1755 bp DNA fragment containing whole length of hemoglob beta gene ( 1606 bp) from 209 cases of Dai children with β-thalassemia. The primer design and PCR conditions of ARMS (amplification refractory mutation system ) have been optimized for detecting three frequent variations. Results Among 209 samples, there are 9 variations were detected:CD2 T＞ C (50.72%),CD26 G ＞A (35.41%),CD17 A ＞T(12.92%),IVS-Ⅱ-17 C ＞ G (12.44%), IVS-Ⅱ-16 G＞C(11.96%), ⅣS-Ⅰ-30 A＞G(9.57%) , CD6 G ＞A(9.09%) ,CD41-42 (-TCTT) (7. 18%) and CD5 T＞A(1.92%). Three mutations (CD21, CD35 and CD43) were first reported in China. There are 167, out of 209 participants (79.90%), carrying HBB gene variation. Three common mutations (CD2, CD26 and CD17 ) can be efficiently detected by combining condition of both ARMS mismatch primers and 65 ℃ of PCR annealling temperature. Conclusion The distribution of HBB gene variation in the Dai minority group in Yunnan province is different from those of other groups in China. ARMS is an effective, convenient and economical technique for rapid detection of gene mutations of β-thalassemia.     

β-珠蛋白基因簇表达调控的反式作用因子

β-珠蛋白基因簇是研究真核基因表达调控的良好模型,其基因表达具有红系组织特异性和不同发育阶段特异性。这些特异性的产生依赖于组织特异性表达的和发育阶段特异性表达的反式作用因子与顺式作用元件间的相互作用。     

再生障碍性贫血患者血清sICAM—l和TGF—β1水平及其意义

目的　探讨再生障碍性贫血 (AA ,再障 )患者血清可溶性细胞间粘附分子 - 1(sICAM - 1)和转化生长因子β1(TGF - β1)水平及其意义 .方法　采用ELISA法检测再障 3 0例和骨髓增生异常综合征 (MDS) 15例 ,正常对照组 2 0例血清sICAM - 1和TGF - β1水平 .结果　慢性再障 (CAA)组sICAM - 1较正常组明显增高 (p <0 0 5 ) ,TGF - β1较正常组明显降低 (p <0 0 1) ;重型再障 (SAA)和MDS组sICAM - 1均较正常组显著增高 (p均 <0 0 1) ,TGF - β1均较正常组显著下降 (p均 <0 0 1) .SAA组sICAM - 1较CAA组显著增高 (p <0 0 5 ) ,MDS组与CAA组比较 ,sICAM - 1明显增高 (p <0 0 1) ,MDS组与SAA组比较 ,TGF - β1明显增高 (p <0 0 1) .动态观察 10例再障 ,随着病情的好转 ,sICAM - 1水平逐渐下降 ,TGF - β1水平趋于上升 ;当病情加重时 ,sICAM - 1上升 ,TGF - β1下降 .血清sICAM - 1和TGF - β1接近正常者疗效、预后好 .结论　高水平的sICAM - 1和低水平的TGF - β1可能参与再障造血干 /祖细胞衰竭的病理生理过程 ;动态检测sICAM - 1和TGF - β1水平 ,为再障患者监测病情、评价疗效、指导临床治疗及预后判断提供较为客观的指标