多种神经组织修复成鼠脊髓损伤的实验研究

背景脊髓损伤后以游离周围神经片断(雪旺氏细胞)与胚胎脊髓联合移植能协同诱发宿主再生潜能,而带血管蒂周围神经移植后有更多的雪旺氏细胞存活,但其与胚胎脊髓协同作用的研究较少.目的探讨不同神经组织移植修复成鼠急性脊髓损伤的能力.设计单盲随机对照实验.地点和对象实验在解放军第三军医大学大坪医院全军战创伤中心骨创伤科完成,研究对象为150只4月龄雌性Wistar属成年大鼠,由解放军第三军医大学实验动物中心提供.干预成鼠胸髓损伤后,分别移植游离正中神经(FPN组)、带血管蒂正中神经(VPN组)、孕14天胚胎脊髓(FSC组)、游离正中神经加胚胎脊髓(P+F组)、带血管蒂正中神经加胚胎脊髓(V+F组).主要观察指标术后8周行神经解剖及电生理检查.结果V+F组再生轴突和存活雪旺氏细胞数目、胚胎脊髓体积增长速度和神经元密度显著高于对照组(P＜0.01),细胞分化较好,突触较成熟o SEP的P1,N1波潜伏期显著缩短(P＜0.01).结论带血管蒂周围神经与胚胎脊髓联合移植,在解剖和电生理上均优于其他组织,对FSC的生长发育及损伤神经元的再生能力均有一定的促进作用.     

胚胎脊髓对损伤脊髓的修复作用研究

目的探讨不同条件下胚胎脊髓移值修复成鼠急性脊髓损伤(SCI)的能力。方法成鼠胸髓损伤后分别移植孕14d胚胎脊髓(FSC组)、游离正中神经加胚胎脊髓(P＋F组)、带血管蒂正中神经加胚胎脊髓(V＋F组),术后8周行组织学检查。结果V＋F组胚胎脊髓与受体融合佳,体积增长速度、神经纤维和神经元数目显著高于P＋F、FSC组（P<0.01）,细胞分化比较好,突触较成熟,界面区也无明显的胶质增生。结论带血管蒂周围胚胎脊髓联合移植,对FSC的生长发育、对损伤神经元的再生能力均有一定的促进作用。     

多种神经组织修复成鼠脊髓损伤的实验研究

背景：脊髓损伤后以游离周围神经片断(雪旺氏细胞)与胚胎脊髓联合移植能协同诱发宿主再生潜能，而带血管蒂周围神经移植后有更多的雪旺氏细胞存活，但其与胚胎脊髓协同作用的研究较少。目的：探讨不同神经组织移植修复成鼠急性脊髓损伤的能力。设计：单盲随机对照实验。地点和对象：实验在解放军第三军医大学大坪医院全军战创伤中心骨刨伤科完成，研究对象为150只4月龄雌性Wistar属成年大鼠，由解放军第三军医大学实验动物中心提供。干预：成鼠胸髓损伤后，分别移植游离正中神经(FPN组)、带血管蒂正中神经(VPN组)、孕14天胚胎脊髓(Fsc组)、游离正中神经加胚胎脊髓(P+F组)、带血管蒂正中神经加胚胎脊髓(V+F组)。主要观察指标：术后8周行神经解剖及电生理检查。结果：V+F组再生轴突和存活雪旺氏细胞数目．胚胎脊髓体积增长速度和神经元密度显著高于对照组(P&;lt;0．01)，细胞分化较好，突触较成熟。SEP的P1，N1波潜伏期显著缩短(P&;lt;0．01)。结论：带血管蒂周围神经与胚胎脊髓联合移植，在解剖和电生理上均优于其他组织，对FSC的生长发育及损伤神经元的再生能力均有一定的促进作用。     

诱发电位在组织移植修复脊髓损伤中的变化及意义

目的:通过测定诱发电位变化探讨不同神经组织移植对成鼠损伤脊髓功能恢复的影响。方法:成鼠胸髓损伤后,分别移植带血管蒂正中神经(VPN组)、孕14d胚胎脊髓(FSC组)、带血管蒂正中神经加胚胎脊髓(V+F组)。术后1,2,4,8,12周行体感诱发电位(SEP)和运动诱发电位(MEP)检查。结果:各组SEP和MEP的峰潜伏期在2-8周内均有恢复,V+F组显著优于对照组(P<0.05)。结论:带蒂神经与胚胎脊髓联合移植对脊髓传导功能的恢复有较好作用。     

诱发电位在组织移植复脊髓损伤中的变化及意义

目的通过测定诱发电位变化探讨不同神经组织移植对成鼠损伤脊髓功能恢复的影响.方法成鼠胸髓损伤后,分别移植带血管蒂正中神经(VPN组)、孕14d胚胎脊髓(FSC组)、带血管蒂正中神经加胚胎脊髓(V+F组).术后1,2,4,8,12周行体感诱发电位(SEP)和运动诱发电位(MEP)检查.结果各组SEP和MEP的峰潜伏期在2～8周内均有恢复,V+F组显著优于对照组(P<0.05).结论带蒂神经与胚胎脊髓联合移植对脊髓传导功能的恢复有较好作用.     

诱发电位的组织移植修复脊髓损伤中的变化及意义

目的：通过测诱诱发电位变化探讨不同神经组织移植对成鼠损伤脊髓功能恢复的影响。方法：成鼠胸髓损伤后，分别移植带血管蒂正中神经（VPN组）、孕14d胚胎脊髓（FSC组）、带血管蒂正中神经加胚胎脊髓（V＋F组）。术后1，2，4，8，12周行体感诱发电位（SEP）和运动诱发电位（MEP）检查。结果：各组SEP和MEP的峰潜伏期在2－8周内均有恢复，V＋F组显优于对照组（P＜0．05）。结论：带蒂神经与胚胎脊髓联合移植对脊髓传导功能的恢复有较好作用。     

高压氧与带血供周围神经移植修复鼠脊髓损伤的研究

目的探索联合应用高压氧与带血供周围神经移植修复脊髓损伤的作用。方法将40只雌性Wistar成年鼠分为A、B两组,A组为单纯带血供的正中神经移植修复脊髓损伤;B组为带血供的正中神经移植后给予高压氧治疗。结果在组织学、神经传导速度及移植神经内再生轴突形态计量分析诸方面,效果明显好于A组。结论带血供周围神经是修复脊髓损伤较为理想的移植材料,高血氧能够提高带血供周围神经移植修复脊髓损伤的能力。     

胚胎脊髓和大网膜联合移植对脊髓损伤犬行为学和诱发电位的影响

目的:胚胎脊髓移植治疗脊髓损伤的实验研究已进行多年,效果并不理想,带蒂大网膜移植可建立及时有效的血供是肯定的,对脊髓损伤的疗效尚无定论。为此探讨采用犬胚胎脊髓和大网膜联合移植治疗脊髓损伤的效果。方法:选用西北犬24只,雌雄不拘,按随机数字分成4组:单纯损伤组;大网膜移植组;单纯胚髓细胞移植组;胚胎脊髓和大网膜联合移植组。致伤前及治疗后2个月行脊髓体感诱发电位,动作诱发电位检查,观察行为变化,并行电镜及苏木精-伊红染色检查。结果:伤后2个月胚胎脊髓和大网膜联合移植组左后肢脊髓体感诱发电位潜伏期71.65±3.33)ms与各组间对比差异具有显著性意义F=3.891,((P=0.037),脊髓体感诱发电位波幅1.04±0.11)μV与各组间对比差异(具有显著性意义(F=5.516,P=0.013),左后肢动作诱发电位潜伏期(6.28±1.45)ms与各组间对比差异具有显著性意义(F=6.49,P=0.008),行为学有恢复;胚髓细胞在术后2个月可存活。结论:胚胎脊髓与大网膜联合移植治疗脊髓损伤动物从行为学和诱发电位均优于其他组,但尚需进一步研究以确定其功能。     

胚胎脊髓和大网膜联合移植对脊髓损伤犬行为学和诱发电位的影响

目的：胚胎脊髓移植治疗脊髓损伤的实验研究已进行多年，效果并不理想，带蒂大网膜移植可建立及时有效的血供是肯定的，对脊髓损伤的疗效尚无定论。为此探讨采用犬胚胎脊髓和大网膜联合移植治疗脊髓损伤的效果。方法：选用西北犬24只，雌雄不拘，按随机数字分成4组：单纯损伤组；大网膜移植组；单纯胚髓细胞移植组；胚胎脊髓和大网膜联合移植组。致伤前及治疗后2个月行脊髓体感诱发电位，动作诱发电位检查，观察行为变化，并行电镜及苏木精—伊红染色检查。结果：伤后2个月胚胎脊髓和大网膜联合移植组左后肢脊髓体感诱发电位潜伏期(71．65&;#177;3．33)ms与各组间对比差异具有显著性意义(F=3．891，P=0．037)，脊髓体感诱发电位波幅(1．04&;#177;0.11)μV与各组间对比差异具有显著性意义(F=5．516，P=0．013)，左后肢动作诱发电位潜伏期(6．28&;#177;1．45)ms与各组间对比差异具有显著性意义(F=6．49，P=0．008)，行为学有恢复；胚髓细胞在术后2个月可存活。结论：胚胎脊髓与大网膜联合移植治疗脊髓损伤动物从行为学和诱发电位均优于其他组，但尚需进一步研究以确定其功能。     

神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后皮质脊髓束神经元和皮层体感诱发电位的影响

目的:研究神经干细胞(NSCs)移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后皮质脊髓束神经元和皮层体感诱发电位(CSEP)的影响。方法:40只SD大鼠随机分为正常对照组(Normal组)、脊髓损伤组(SCI组)、神经干细胞组(NSC组)、神经干细胞标记组(BrdU+NSCs组)。采用电控脊髓损伤打击装置制作模型,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法标记处于对数生长期的NSCs,SCI后即刻进行NSCs移植。免疫组化法观察BrdU标记NSCs的存活、迁移,CSEP监测大鼠神经电生理的变化。用辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪技术标记皮质脊髓束神经元并用四甲基联苯胺(TMB)呈色反应显示皮质脊髓束神经元的存活情况。结果:BrdU+NSCs组在SCI区域可检测到BrdU标记的阳性NSCs,HRP标记皮质脊髓束神经元数目较SCI组明显增多(P<0.05),CSEP-P波潜伏期比SCI组明显缩短(P<0.05)。HRP标记皮质脊髓束神经元数目与CSEP-P波潜伏期变化呈负相关(r=-0.914,P<0.001)。BrdU+NSCs组与NSC组之间比较差异无显著性(P>0.05)。结论:体外培养的胚胎大鼠NSCs可在SCI区域存活、迁移,并可减轻皮质脊髓束神经元的逆行性损伤、缩短SCI后CSEP-P波潜伏期,从而促进大鼠瘫痪肢体功能的恢复。     

高压氧促进成鼠脊髓损伤后功能恢复的实验研究

目的研究高压氧(HBO)对带血供周围神经(VPN)移植修复成鼠脊髓损伤(SCI)功能恢复的作用。方法将40只成年Wistar大鼠做成脊髓半切损伤模型,随机分为A、B两组,A组单纯VPN移植修复SCI,B组为VPN移植后给予HBO治疗。手术后1、2、4、8、10周进行感觉诱发电位(SEP)和运动诱发电位(MEP)检查。结果SEP和MEP潜峰时的恢复B组优于A组。结论HBO与VPN移植对成鼠损伤脊髓功能恢复有较好的促进作用。     

家庭辅助干预对脊髓损伤患者心理疗效和生理疗效的探讨

目的探讨家庭辅助干预对脊髓损伤患者心理健康和生理健康的影响。方法选取脊髓损伤患者164例,按入院时间分为观察组和对照组各82例;对照组患者接受常规护理,观察组在常规护理的基础上实施一系列家庭辅助干预措施。结果观察组患者的脊髓独立功能评分、生活质量评分均高于对照组(P0.01),焦虑、抑郁评分及并发症发生率均低于对照组(P0.01)。结论家庭辅助干预能有效促进脊髓损伤患者的康复,改善生活质量,值得临床推广应用。     

自体施万细胞神经膜管移植修复大鼠脊髓损伤的实验研究

目的探讨自体施万细胞神经膜管（SCNC）移植对脊髓半横断损伤的修复作用。方法成鼠30只，随机分3组：1O只造模后行SCNC移植（A组）；10只造模但不移植（B组）；10只不造模也不移植作正常对照组（C组）。下段胸髓半切法造模。术后8周每周行动物行为测试和斜板试验；术后6周测定皮层体感诱发电位（CSEP）；术后8周行组织学观察及计算机图像分析。结果A组、C组可测出CSEP波形，B组未测出。行为测试、斜板试验及图像分析A组、C组与B组差异显著，A组与C组之间斜板试验有显著差异。A组通过脊髓损伤处的再生神经纤维数量明显多于B组。结论自体施万细胞神经膜管移植有助于引导再生轴突生长通过，对损伤脊髓再生有较明显的促进作用。     

肢体负压对周围动脉闭塞犬脊髓及背根神经节降钙素基因相关肽免疫反应性神经的影响

背景伤害性刺激可引起脊髓及背根神经节降钙素基因相关肽分泌的增多,及其微血管的强烈扩张.应用肢体负压治疗周围动脉闭塞性病变时,其扩张血管,减轻肢体疼痛症状的作用是否伴随着降钙素基因相关肽合成增多.目的对周围动脉闭塞性病变犬行肢体负压干预后,检测脊髓及背根神经节中降钙素基因相关肽免疫反应阳性神经纤维的变化.设计随机分组,实验组及空白组对照的验证性研究.单位一所军医大学医院普外科.材料实验于2003-01/08在第四军医大学西京医院完成.成年健康杂种犬17只,体质量(12～18)kg,雌雄不限.干预犬17只,随机分为3组.①治疗组10只将动物制作左后肢缺血模型,制作后14 d,开始行患肢负压治疗10 d,结束后,取L1～5的脊髓及背根神经节,行免疫组化染色,检测降钙素基因相关肽免疫反应阳性纤维.②单纯造模组5只造模后不进行患肢负压治疗,处理、检查均同治疗组.③正常对照组2只不行缺血模型制作及负压治疗,仅行免疫组化染色检测.主要观察指标3组犬脊髓及背根神经节中降钙素基因相关肽免疫反应阳性纤维分布.结果17只犬均进入结果分析.①脊髓及背根神经节中降钙素基因相关肽免疫反应阳性纤维单纯造模组明显高于治疗组和正常对照组[(75.00±4.30)%,(68.20±2.60)%;(58.20±5.10)%,(52.20±6.20)%;(37.00±4 20)%,(34.00±1.40)%,P＜0.01].②阳性神经纤维检测结果治疗组比单纯造模组染色变浅,但仍较正常对照组加深,3组比较差异意义显著(P均＜0.01).结论肢体负压疗法可以减少周围动脉闭塞性病变后脊髓及背根神经节中降钙素基因相关肽免疫反应阳性纤维的合成与痛觉的传递,即减少伤害性刺激的传入,从而达到缓解肢体疼痛的效果.     

自体富血小板血浆对大鼠脊髓损伤后神经功能的影响

目的 研究自体富血小板血浆对大鼠脊髓损伤后神经功能恢复的影响。方法 SD大鼠30只,随机分为PRP组(A组)和对照组(B组)各15只。采用改良Nystr?m法后路压迫大鼠胸段脊髓模型,A组予自体富血小板血浆灌注于损伤脊髓处,B组予自体血浆灌注于损伤脊髓处。术后第3、7、14天采用斜板试验和BBB运动功能评分观察大鼠后肢运动功能恢复情况、检测体感诱发单位(SSEP)检测神经传导功能。结果 大鼠脊髓损伤后7、14天,A组后肢运动功能评分明显高于B组,两者间差别有统计学意义(p<0.05)。SSEP潜伏期及波幅值变化：术后14天A组潜伏期12.37±1.689ms、波幅0.54±0.056mv；B组潜伏期14.14±1.553ms、波幅0.32±0.031mv,两组差别有统计学意义(P<0.05)。结论 自体富血小板血浆能促进大鼠神经功能的早期恢复。     

冻存神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的实验研究

目的 研究冻存大鼠胚胎神经干细胞(NSCs)异体移植对脊髓损伤(SCI)的修复作用.方法 45只Wistar大鼠于SCI后2 d随机分为A、B、C 3组,每组15只,分别在SCI处注入相同体积的生理盐水、NSCs、低温冻存后复苏的NSCs.术后分别通过免疫组化和组织切片鉴定移植细胞的分化与存活、BBB运动评分和斜板实验评定大鼠功能恢复,细胞存活率,以及评价NSCs低温冻存情况.结果 免疫组化及组织切片显示,B、C组在移植区均有NSCs的特异性表达nestin阳性细胞存活,而A组无表达;脊髓空洞面积A组[(3.9±0.1)mm2]与B组[(1.2±0.3)mm2]和C组[(1.1±0.3)mm2]比较,组间差异有统计学意义(F=423.949,P<0.01),而B、C组间的差异无统计学意义(P＞0.05).BBB评分:A组[(2.0±0.5)分]与B组[(16.4±0.8)分]和C组[(16.0±1.4)分]间的差异有统计学意义(F=970.157,P<0.01),但B、C组间差异无统计学意义(P＞0.05);斜板实验评分:A组[(31.3±2.9)度]与B组[(46.8±2.1)度]和C组[(46.5±2.4)度]间的差异有统计学意义(F=151.099,P<0.01),B、C组间差异无统计学意义(P＞0.05).低温冻存后复苏液的NSCs细胞存活率[(55.9±5.2)%]与未冻存[(65.1±3.4)%]差异无统计学意义(t=3.334,P＞0.05).结论冻存NSCs复苏后仍具有活跃的增殖和分化潜能,是SCI移植治疗有价值的细胞资源.     

Functional restoration of rabbit spinal cord using collagen‐filament scaffold

We report the first success of functional restoration of transected rabbit spinal cord using collagen‐filament nerve scaffold. We grafted 5 mm‐long 6000 collagen filaments parallel to the axis of the spinal cord to bridge 3 mm defects of 21 adult rabbit spinal cords; 18 rabbits were used as controls. Of the 39 rabbits, 22 survived the experimental period. At 12 weeks postoperatively, regenerated axons crossed the proximal spinal cord–implant interfaces in four out of six rabbits. At 24 weeks postoperatively, regenerated axons crossed the proximal and distal spinal cord–implant interfaces in four out of six rabbits. At 24 weeks postoperatively, the Basso–Beattie–Bresnahan (BBB) locomotor rating scale scores of the rabbits in the collagen‐filament grafted group were 4.7 ± 2.3, while the score in the control group was 2.8 ± 0.5. The BBB scale scores of the grafted group were significantly better than the control group. The results suggest that the collagen‐filament nerve scaffold supports the axonal regeneration of the transected spinal cord and the restoration of function when grafted parallel to the axis of the spinal cord. The functional restoration appeared to be permanent, raising the possibility of therapeutic application in humans. Copyright © 2008 John Wiley & Sons, Ltd.