CD4+CD25+调节性T细胞与造血干细胞移植免疫

CD4 CD25 调节性T细胞是抑制性T细胞的一种亚群,能抑制效应细胞CD4 T细胞和CD8 T细胞的活化与增殖。CD4 CD25 调节性T细胞在免疫调节中发挥重要作用,并能诱导移植免疫耐受。本文就CD4 CD25 调节性T细胞与造血干细胞移植免疫进行综述。     

异基因造血干细胞移植中供体CD4+CD25+T细胞与aGVHD的相关性研究

目的探讨供体CD4 CD25 免疫调控T细胞的表达水平与受者急性移植物抗宿主病(Agvhd)的相关性.方法 13例异基因造血干细胞移植中,采用流式细胞仪检测供体CD4 CD25 免疫调控T细胞的表达水平,并随访患者移植后Agvhd的发生情况及严重程度.结果 13例患者均获造血重建,Ⅰ (a)GVHD 5例, Ⅱ (a)GVHD 2例 ,ⅣaGVHD 1例.发生aGVHD组供体CD4 CD25 免疫调控T细胞水平为(1.52±1.25)%,未发生aGVHD组为(2.70±2.08)%,两组免疫调控T细胞水平差异有显著性(P<0.05).结论供体CD4 CD25 免疫调控T细胞的表达水平与受者aGVHD的发生有相关性,提高供体免疫调控T细胞水平有望减低移植后aGVHD发生率.     

T细胞去除在异基因造血干细胞移植中的应用

T细胞去除(TCD)对allo-HSCT的疗效具有双重性,既能预防GVHD,又会导致移植排斥、 白血病复发率的升高及免疫重建延迟和EB病毒相关的淋巴增殖性疾病增加,因此限制了它的临床应用。 通过改进TCD技术有望达到既预防GVHD又不影响植人、抗白血病活性及免疫重建的目的。     

免疫毒素去除T细胞在异基因造血干细胞移植中的应用

观察应用免疫毒素部分去除T细胞(TCD)的方法进行人类白细胞抗原／混合淋巴细胞培养(HLA/MLC)不相合异基因造血干细胞移植的临床疗效。采用蓖麻免疫毒素部分去T细胞对13例恶性血液病患者行HLA-MLC配型不相合的造血干细胞移植，其中慢性髓性白血病(CP1)6例；急性淋巴细胞白血病CR1 1例，CR2 1例，复发1例；急性髓性白血病CR1 2例，CR2 1例；骨髓增生异常综合征转化成急性髓性白血病M4型(CR1)1例。结果表明：13例患者中8例成功植入，其中2例发生Ⅱ度急性移植物抗宿主病(aGVHD)，2例发生Ⅲ-Ⅳ度aGVHD。随访8-90个月，2例发生Ⅲ-Ⅳ度aGvHD患者早期死亡，另有1例患者死于迟发感染，其余5例均无病存活至今。5例未植活的患者中4例回输同一供者外周血造血干细胞后3例未植入，1例植活，但死于移植相关合并症；1例再次行同基因造血干细胞移植成功并无病存活至今。结论：采用蓖麻免疫毒素部分去T细胞的方法行HLA/MLC配型不相合的异基因造血干细胞移植可减少重度aGVHD的发生，但移植早期排斥率(HVG)较高，临床应用效果有待进一步评估。     

T细胞去除在异基因造血干细胞移植中的应用

T细胞去除(TCD)对allo-HSCT的疗效具有双重性，既能预防GVHD，又会导致移植排斥、白血病复发率的升高及免疫重建延迟和EB病毒相关的淋巴增殖性疾病增加，因此限制了它的临床应用。通过改进TCD技术有望达到既预防GVHD又不影响植入、抗白血病活性及免疫重建的目的。     

异基因造血干细胞移植免疫相关细胞的探讨

异基冈造血干细胞移植(allo-HSCT)是治疗血液系统疾病的主要方法之一.多种免疫细胞(包括T细胞、B细胞、抗原提呈细胞和NK细胞等)参与allo-HSCT后的造血重建和免疫重建,但也能引起移植物抗宿主病(GVHD).深入理解移植后各种免疫细胞,特别是T细胞各亚群之间的相互作用以及和细胞因子风暴的关系.是有效预防和治疗GVHD的重要前提.本篇综述主要介绍关于allo-HSCT后抗原提呈细胞、T细胞亚群以及NK细胞在移植物抗白血病效应(GVL)和GVHD病理生理过程中作用的实验研究进展.     

异基因造血干细胞移植后CD4+CD25+调节性T细胞与移植物抗宿主病关系的研究

目的研究异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)后患者CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 Treg)与急性移植物抗宿主病(aGVHD)、慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的关系。方法采用流式细胞术检测50例Allo-HSCT后患者及24例健康者外周血CD4 CD25 Treg在CD4 T细胞中的百分含量。结果50例患者均获得造血功能重建。正常对照组与无移植物抗宿主病(GVHD)组CD4 CD25高度敏感(CD4 CD25high)、CD4 CD25 CD127低度敏感(CD4 CD25 CD127low)T细胞百分比分别为(2.185±0.582)%和(6.365±2.155)%vs(2.320±2.813)%和(7.515±5.457)%(P>0.05)。aGVHD组为(1.270±1.385)%和(4.575±3.900)%,低于正常对照组与无GVHD组(均P<0.01);其中,Ⅱ~Ⅳ度aGVHD组显著低于Ⅰ度aGVHD组(P<0.01)。cGVHD组为(1.375±0.812)%和(5.620±1.770)%,低于无GVHD组(P<0.01);其中,广泛性cGVHD组低于局限性cGVHD组(P<0.05)。结论CD4 CD25 Treg的水平与Allo-HSCT后GVHD的发生及严重程度有密切关系;通过监测CD4 CD25 Treg水平对临床早期诊断GVHD及判断GVHD预后、指导免疫调节剂的应用具有重要意义。     

异基因造血干细胞移植中CD4+CD25+调节性T细胞与急性移植物抗宿主病的相关性

背景:CD4+CD25+调节性T细胞是调节性T细胞的一个重要亚群,在诱导移植耐受方面起着重要作用.目的:综述CD4+CD25+调节性T细胞的特性、免疫调节作用机制及其与急性移植物抗宿主病的相关性.方法:应用计算机检索PubMed、Medline数据库1990-01/2010-02,维普数据库2000-01/2010-02以及运用Google网络数据库有关CD4+CD25+调节性T细胞及其他与急性移植物抗宿主病相关性研究的文献.结果与结论:CD4+CD25+调节性T细胞在异基因造血干细胞移植后产生的急性移植物抗宿主病中起着重要作用,不仅能有效预防和治疗急性移植物抗宿主病,同时还能保留移植物抗白血病效应作用.随着研究的深入,发现CD4+CD25+调节性T细胞很有希望成为急性移植物抗宿主病早期风险预测的一项重要实验诊断指标,并且有可能通过调控移植后患者体内CD4+CD25+调节性T细胞水平来预防和控制急性移植物抗宿主病的发生.但是,要将CD4+CD25+调节性T细胞应用于临床尚有问题有待解决,例如CD4+CD25+调节性T细胞细胞表面特异性标志物是什么,如何提高CD4+CD25+调节性T细胞在人体内的活性以及怎样充分发挥其免疫抑制功能等.     

T细胞受体分析在造血干细胞移植中的研究进展

异基因造血干细胞移植是目前根治各种恶性血液病和免疫缺陷性疾病的有效手段之一,T细胞免疫重建的速度和质量是影响移植后机体抗感染、移植物抗白血病等的关键环节.T细胞作用的发挥主要是通过T细胞表咏受体(TCR)来完成的,对TCR的动态研究分析将有助于了解移植后机体的免疫功能状态,为降低移植后感染和肿瘤复发以及防治急性移植物抗宿主病(aGVHD)提供新的策略.     

异基因造血干细胞移植中NK细胞的作用

摘要异基因造血干细胞移植后，供者细胞可产生强大而持久的免疫治疗功效，其中异源反应性NK细胞活性是T细胞异源反应活性以外的，具有显著抗肿瘤／白血病活性的自然免疫现象，并逐渐受到人们的重视。已证实，NK细胞通过其受体与靶细胞MHC分子特异性的识别机制参与移植物抗白血病（GVL）作用并影响移植物抗宿主病（GVHD）的发生。异基因造血干细胞移植后异源反应性NK细胞输注已从动物实验逐渐应用于临床。本文就NK细胞异源反应性及其在异基因造血干细胞移植中的作用进行综述。     

CD4＋CD25＋Treg细胞的分选、表型鉴定及Foxp3表达鉴定

目的为验证从C57BL／6小鼠脾脏中分离出高纯度CD4＋CD25＋Treg细胞及证实CD4＋CD25＋Treg细胞中Foxp3基因的表达。方法使用免疫磁珠分选出CD4＋CD25＋Treg细胞,流式细胞仪检测纯度;使用TRIZOL抽提Foxp3基因mRNA,使用RT—PCR方法逆转录出Foxp3基因的cDNA。结果从C57BL／6小鼠脾脏中分离出了纯度达到90％CD4＋CD25＋Treg。进一步应用RT—PCR技术克隆出Foxp3的cDNA,通过凝胶电泳证实了克隆出了Foxp3的cDNA。结论使用免疫磁珠方法能够分离出C57BL／6小鼠CD4＋CD25＋Treg细胞,并进行了Foxp3基因表达的鉴定。     

Foxp3转染小鼠CD4^＋CD25^-T细胞抑制树突状细胞功能

为了研究Foxp3基因表达与CD4^＋T细胞免疫活性的关系,用逆转录病毒转染Foxp3基因,在幼稚CD4^＋CD25^-T细胞内强制性表达FOXP3蛋白,进而研究转染后的CD4^＋CD25^-T细胞对树突状细胞的免疫共刺激分子和免疫功能的影响,并通过Transwell试验研究转染Foxp3的CD4^＋CD25^-T细胞对树突状细胞的作用是否依赖于细胞之间的直接接触。结果表明：通过逆转录病毒载体转染,成功建立了表达Foxp3的CD4^＋CD25^-T细胞模型,转染后1周Foxp3阳性表达的T细胞比例为38%。强制性表达Foxp3的CD4^＋CD25^-T细胞可以在体外发挥免疫抑制作用,可以诱导树突状细胞表面免疫共刺激分子CD80和CD86表达水平的下调。体外淋巴细胞增殖试验结果表明,Foxp3转染小鼠CD4^＋CD25^-T细胞可以抑制树突状细胞对异基因淋巴细胞的活化。结论：转染Foxp3的CD4^＋CD25^-T细胞对树突状细胞发挥的作用依赖于细胞之间的直接接触。     

不同树突状细胞对CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞体外扩增的影响

目的利用不同种类树突状细胞(dendritic cells,DC)体外扩增获得表型和功能稳定的CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)。方法免疫磁珠法(MACS)分离Balb/c小鼠CD4+CD25+调节性T细胞,利用与调节性T细胞同基因或异基因成熟DC、未成熟DC和调节性DC刺激其扩增,流式细胞术测定其纯度和表型。以CD4+CD25-T细胞作为反应细胞,验证扩增前后Treg细胞的免疫抑制功能。结果MACS分离的CD4+CD25+调节性T细胞纯度达到(95.38±1.82)%,同基因和异基因DC都能有效刺激Treg细胞体外扩增,其中同基因成熟DC扩增效果最为明显。而且同基因成熟DC扩增后CD4+CD25+调节性T细胞纯度达到(94.16±1.88)%,而且高表达Foxp3分子。当CD4+CD25+调节性T细胞与效应T细胞比例为1∶1时,能够有效的抑制效应T细胞的增殖,而且,同基因成熟DC扩增的CD4+CD25+调节性T细胞的抑制效果比新分离的Treg效果更好。结论同基因成熟DC能够体外扩增表型和功能稳定的Treg细胞。     

肺癌患者外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞的表达及临床意义

目的通过研究肺癌患者外周血中CD4 CD25 FOXP3 调节性T淋巴细胞的变化,探讨肺癌的发病机制。方法用荧光标记的单克隆抗体染色外周血单个核细胞,利用流式细胞仪检测CD4 CD25 FOXP3 调节性T淋巴细胞的改变。结果肺癌患者外周血CD4 CD25 FOXP3 调节性T淋巴细胞显著增多。结论CD4 CD25 FOXP3 调节性T淋巴细胞的增多与机体的免疫力下降以及肿瘤的发生发展有一定关系。     

CD4+CD25+ T细胞发育调控模型的建立及其意义

目的 建立小鼠胸腺CD4^＋CD25^＋双阳性T细胞发育调控的模型,为天然调节性T细胞调控研究提供基础平台。方法 采用14.5天龄胚鼠胸腺进行体外培养,以FACS检测不同时间点胸腺CD4^＋CD25^＋细胞的变化,同时计数每个胸腺小叶的细胞数变化。结果体外胸腺培养的第1-6天胸腺细胞比例、细胞数量趋势变化与胸腺体内发育的第14.5、15、16、17、18、19天CD4^＋CD25^＋双阳性T细胞的比例、细胞数量的趋势变化相似;在胸腺体外培养的第1-6天,CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的比例分别为58.29%、12.14%、6.08%、17.78%、9.06%、4.04%,占CD25^＋T细胞的比例分别为3.75%、10.81%、17.20%、51.93%、61.64%、80.06%,这一发育趋势与体内结果具有一致性。结论 体外培养的CD4^＋CD25^＋双阳性胸腺细胞数量和比例变化与体内发育变化趋势一致,这将为天然调节性T细胞的调控研究提供有效的参考依据。     

胃癌区域淋巴结中CD4~+CD25~+Foxp3~+T水平与细胞因子相关性分析

目的观察胃癌区域淋巴结中CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞(Treg细胞)分布及与外周血白介素(IL)-10和转化生长因子(TGF)-β_1的关系。方法采用流式细胞术检测48例胃癌患者(淋巴结转移26例,无转移22例)区域引流淋巴结中Treg细胞频数;ELISA方法检测外周血血清TGF-β_1和IL-10水平。分析Treg细胞与TGF-β_1、IL-10相关性。结果 Treg细胞在淋巴结转移患者阳性淋巴结中水平为(18.16±2.51)%,显著高于阴性淋巴结[(13.51±2.48)%],差异有统计学意义(P0.05),且阴性淋巴结Treg细胞比例显著高于无转移患者淋巴结[(9.27±2.16)%],差异有统计学意义(P0.05)。ELISA结果提示淋巴结转移患者外周血TGF-β_1和IL-10水平显著高于无转移患者,差异有统计学意义(P0.05)。胃癌患者引流区淋巴结Treg细胞分布比例与外周血血清TGF-β_1(r=0.73,P0.01)和IL-10水平(r=0.81,P0.01)呈明显正相关。结论胃癌患者区域引流淋巴结中Treg细胞分布与淋巴结转移密切相关,Treg细胞可能通过分泌TGF-β_1和IL-10导致胃癌淋巴结微环境发生免疫抑制,是胃癌发生淋巴结转移的重要因素之一。     

急性发作期和缓解期哮喘患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-Treg的检测和意义

目的：通过检测健康人、急性发作期和缓解期哮喘患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-Treg细胞的表达水平,探讨该细胞表达水平的变化与哮喘患者病情严重程度的关系。方法：采集急性发作期、缓解期哮喘患者及健康人外周抗凝血,用流式细胞术检测其外周血中CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-Treg细胞占CD4^＋T细胞的比例。结果：哮喘急性发作组和缓解组患者外周血中CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-Treg细胞占CD4^＋T细胞的百分比低于健康对照组（P〈0.05）;哮喘急性发作期组CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-Treg细胞占CD4^＋T细胞的百分比低于哮喘缓解组（P〈0.05）。结论：CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-Treg细胞数量减少可能参与了哮喘的发病过程。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在特发性血小板减少性紫癜发病中的作用

目的探讨CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞在特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者中的表达及意义。方法采用流式细胞技术分别检测20例健康人、33例初诊ITP患者,22例治疗后ITP患者CD4+CD25highTreg细胞和CD4+CD25+CD127dimTreg细胞的表达水平。将初诊ITP患者根据病情分为重型组和轻型组,治疗后ITP患者根据治疗疗效分为治疗有效组和无效组。将各组计量资料进行统计学分析。结果初诊ITP患者CD4+CD25highTreg细胞、CD4+CD25+CD127dimTreg细胞比例明显低于正常对照组(P<0.01),且重型ITP组明显低于轻型ITP组(P<0.01,P<0.05),结果具有统计学意义。治疗后患者CD4+CD25highTreg细胞、CD4+CD25+CD127dimTreg细胞比例升高(P<0.01),但仍低于正常对照组(P<0.05);治疗有效组CD4+CD25highTreg细胞和CD4+CD25+CD127dimTreg细胞比例均高于治疗无效患者(P<0.05),结果具有统计学意义。结论 CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的表达水平在ITP发病、疾病进展中具有重要的临床意义。     

调节性T淋巴细胞与反复体外受精-胚胎移植的研究

目的探讨外周血中调节性T淋巴细胞与反复体外受精-胚胎移植失败之间的相关性。方法用双荧光标记流式细胞分析技术,检测20例原因不明反复体外受精-胚胎移植失败患者、20例正常非孕妇女及18例第一周期体外受精-胚胎移植成功妇女外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞及CD4^＋CD25^highT细胞的水平。结果反复体外受精-胚胎移植失败患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞及CD4^＋CD25^highT细胞的百分率分别为（7．89±1．16）%和（1．06±0．33）％,低于正常非孕组的（11．73±1．05）％（P〈0．01）和（1．36±o．53）％（P〈0．05）,也低于第一周期体外受精-胚胎移植成功组的（9．67±1．87）％（P〈0．05）和（1．39±0．37）％（P〈0．05）。结论外周血中调节性T细胞的减少可能与反复体外受精-胚胎移植失败的发生有关。     

月经周期雌激素变化对外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞水平的影响

目的研究正常育龄妇女月经周期中雌激素变化对CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg细胞）水平的影响。方法采用流式细胞术检测20例正常育龄妇女月经周期中不同时期外周血Treg细胞水平;同时采用放射免疫法（RIA）检测外周血中雌激素水平,并分析两者相关性。结果 Treg细胞水平随雌激素的变化而波动,Treg细胞及雌激素水平在月经周期第13天最高,分别为[（20.72±2.24）%、（204.27±24.01）ng.L-1],在月经周期第3天最低,分别为[（11.27±1.23）%、（37.90±8.94）ng.L-1]（均P〈0.05）;Treg细胞水平与雌激素水平呈正相关（r=0.615,P〈0.005）。结论雌激素对体内Treg细胞的表达有调节作用。