国产重组白细胞介素—2的抗肿瘤研究

作研究了国产重组白细胞介素－２（ｒＩＬ－２）的抑瘤作用，延命作用及其诱导ＬＡＫ细胞的效应。小鼠移植性肿瘤用ｒＩＬ－２的较大剂量（２×１０＾４Ｕ／天）治疗，实验结果表明，抑瘤作用明显。由于靶细胞不同，ｒＩＬ－２的抑瘤率有差异。对Ｓ１８０的抑瘤率较差，对小鼠肝癌实体瘤（ＨＡＣ）的抑瘤作用较强。小鼠注射ｒＩＬ－２２×１０＾４Ｕ／天后肿瘤体积缩小，但２天不注射则逐渐增大。较大剂量的ｒＩＬ－２对荷瘤小鼠的     

牛膝多糖抗肿瘤作用及免疫机制实验研究

作者研究了牛膝多糖（ＡＢＰ）对Ｓ＿（１８０）荷瘤小鼠的抑瘤作用和脾细胞诱生ＴＮＦ和ＬＡＫ细胞活性的影响。结果证实ＡＢＰ２５～１００ｍｇ·Ｋｇ￣（－１）·ｄ￣（－１）×７的抑瘤率为３１％～４０％。环磷酰胺１２．５ｍｇ／ｋｇ单次的抑瘤率为１７％，与ＡＢＰ１００ｍｇ·ｋｇ￣（－１）·ｄ￣（－１）合用的抑瘤率为５８％，有明显协同作用。ＡＢＰ１～２μｇ／ｍｌ对小鼠肉瘤Ｓ＿（１８０）细胞和人白血病Ｋ＿（５６２）细胞的增殖均有明显抑制作用，ＡＢＰ５０及１００ｍｇ／ｋｇ腹腔注射能明显提高Ｓ＿（１８０）荷瘤小鼠ＬＡＫ细胞活性和ＴＮＦ－β生成。诱生ＴＮＦ的达峰时间是２次腹腔注射后的第８天。为探讨其抗肿瘤机理，对Ｓ＿（１８０）细胞膜成份进行了分析，结果显示ＡＢＰ与细胞接触２４小时，引起细胞膜唾液酸含量升高，膜磷脂含量降低，这些变化差异均有显著性意义（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）；但膜胆固醇含量、膜流动性（Ｃ／Ｐ比值）不受影响。提示ＡＢＰ的抗瘤机理与其增强宿主免疫功能及改变细胞膜生化特性有关。     

NDV联合热固化瘤苗的抗肿瘤作用

为了研究新城疫病毒（ＮＤＶ） 联合热固化瘤苗抑制肿瘤生长和免疫调节的作用，检测了荷瘤小鼠的抑瘤率和细胞免疫。结果显示，实验组Ⅰ与Ⅱ抑瘤率分别为２４．８％ 、４１．１％ ，２ 组的平均瘤重明显小于对照组，实验组Ⅱ在不同时间段的ＮＫ 细胞活性高于对照组（ Ｐ＜０ ．０１） 。提示ＮＤＶ联合热瘤苗对荷瘤小鼠的抑瘤作用和增强ＮＫ 细胞活性均比单独应用ＮＤＶ效果好。     

石斛多糖增强脐带血和肿瘤病人外周血LAK细胞体外杀伤作用的研究

目的：探讨石斛多糖（ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＤＣＰ）与ｒＩＬ－２联合应用对脐带血ＬＡＫ细胞（ＣＢ－ＬＡＫ）和肿瘤病人外周血ＬＡＫ细胞（ＰＢ－ＬＡＫ）体外杀伤肿瘤细胞作用的影响。方法：应用＾３Ｈ－ＴｄＲ释放法测定ＣＢ－ＬＡＫ和ＰＢ－ＬＡＫ细胞的杀伤活性。结果：①ｒＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）能明显提高ＣＢ－ＬＡＫ对Ｒａｊｉ细胞的杀伤活性，０ｈ的ＣＢ－ＬＡＫ活性为１３．６３％，ｒＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）诱导４８、７２、９６、１２０ｈ后，ＣＢ－ＬＡＫ活性分别提高至２２．２８％、２６．２３％、２８．５５％和２５．７６％（Ｐ〈０．０１）；②ＤＣＰ（１００ｍｇ／Ｌ或４００ｍｇ／Ｌ）与ｒＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）联合诱导ＣＢ－ＬＡＫ的活性，比单纯ｒＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）的作用     

聚乙二醇修饰重组人白细胞介素－2的体内抗小鼠宫颈癌作用

聚乙二醇（ＰＥＧ－８０００）化学修饰重组人白细胞介素－２（ＰＥＧ－ｒＩＬ－２）显著地延长了ｒＩＬ－２的循环半衰期。本研究比较了不同剂量方案的ＰＥＧ－ｒＩＬ－２和ｒＩＬ－２的体内抗小鼠宫颈癌作用，采用局部用药抗移植的小鼠腹水瘤型和皮下实体瘤型宫颈癌Ｕ１４。结果表明：腹腔内注射一定剂量的ＰＥＧ－ｒＩＬ－２（４５００ＩＵ，ＱＤ×５）能较相同剂量的ｒＩＬ－２显著延长荷腹水瘤小鼠的存活期（２３．１±３．６天比１６．５±２．０天，Ｐ＜０．０１），但ＰＥＧ－ｒＩＬ－２剂量过低则无明显疗效。在小鼠皮下移植肿瘤的局部并于肿瘤移植后的第４天开始注射给药，不同剂量的ＰＥＧ－ｒＩＬ－２（１５００～１３５００ＩＵ，ＱＤ×５）对皮下移植瘤的生长抑制作用显著强于相同剂量的ｒＩＬ－２（Ｐ＜０．０１），且抗肿瘤作用呈剂量依赖效应。本研究提示，ＰＥＧ－ｒＩＬ－２的抗小鼠宫颈癌作用优于ｒＩＬ－２，对人宫颈癌的局部免疫治疗具有潜在的临床价值。     

多抗甲素对LAK细胞增殖及杀伤活性的影响

将Ｃ５７ＢＬ／６小鼠脾淋巴细胞分成四组：①单纯培养液组；②单纯ＰＡ组；③ｒＩＬ－２组；④ｒＩＬ－２＋ＰＡ组。采用ＭＴＴ比色方法及间接免疫荧光法测定并比较各组淋巴细胞增殖反应，淋巴细胞对ｐ８１５肿瘤细胞的细胞毒作用以及淋巴细胞表面ＩＬ－２表达的情况，以此观察ＰＡ体外对小鼠脾ＬＡＫ细胞增殖反应、杀瘤活性及ＩＬ－２Ｒ表达的影响。结果表明，ＰＡ单独对静止淋巴细胞增殖反应无作用，也不能诱导出ＬＡＫ活性，但能显著增强ＩＬ－２诱导的淋巴细胞增殖反应，杀瘤活性及其表面ＩＬ－２Ｒ表达。当浓度为１０μｇ／ｍ１的ＰＡ与低剂量（２００ｕ／ｍ１）ＩＬ－２联合应用时，诱导出的ＬＡＫ活性强度相当于浓度为１０００ｕ／ｍ１ＩＬ－２水平。提示，ＰＡ与ＩＬ－２合用能共同诱导ＬＡＫ活性，降低ＩＬ－２用量，ＰＡ可望作为一种新的免疫调节剂用于肿瘤的ＬＡＫ／ＩＬ－２生物治疗。     

健康人和骨肉瘤病人来源的LAK细胞体外抗瘤作用

采用５１Ｃｒ释放试验对健康人和骨肉瘤病人外周血单个核细胞（ＰＢＭ）在重组白细胞介素－２（ｒＩＬ－２）条件下，ＬＡＫ细胞的诱导形成及对４种传代瘤细胞的体外杀伤活性进行探讨。实验结果表明：２种来源ＬＡＫ细胞对Ｋ５６２（人慢性髓样红白血病细胞系）、ＳＭＭＣ７７２１（人肝癌细胞系）、ＬＡＸ（人肺腺癌细胞系）的杀伤活性均在５５％以上（按效靶比例５０：１），而对ＯＳ细胞（人骨肉瘤细胞系）的活性普遍低下，杀伤率低于３５％。结果证实：１）健康人和骨肉瘤病人的ＰＢＭ均能在ｒＩＬ－２条件下诱导形成具有广谱抗瘤活性的ＬＡＫ细胞群，二者的杀伤格局和效力相近。２）骨肉瘤细胞本身对ＬＡＫ细胞的杀伤作用存在强烈抗性。     

流感病毒抗肿瘤作用的初步研究

目的：探索流感病毒的抗肿瘤作用。方法：通过用小白鼠肉瘤细胞（Ｓ１８０）接种昆明系小鼠而形成荷瘤小鼠，再注射流感病毒于荷瘤小鼠，观察其抑制肉瘤细胞生长情况。结果：活流感病毒注射后的抑瘤率达到５８．２０％，而ＰＨＡ和５－氟脲嘧啶（５－ＦＵ）的抑瘤率分别为６５．９２％和５９．０６％，三者之间无显著性差异（Ｐ〉０．５）。结论：活流感病毒在试验动物体内具有抑制Ｓ１８０瘤细胞生长的作用。     

CD_3单克隆抗体活化的杀伤细胞对人胃癌细胞株MNK_（45）体外杀伤及裸鼠体

用人的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）与抗ＣＤ３单克隆抗体和基因重组的人ＩＬ－２，共同培养制备ＣＤ３ＡＫ细胞（ＣＤ３ＭｃＡｂＡｃｔｉｖａｔｅｄＫｉｌｌｅｒＣｅｌｌｓ），ＰＢＭＣ与ｒＩＬ－２共同培养制备ＬＡＫ细胞，用单纯ＰＢＭＣ作为对照细胞。对这三种细胞的增殖及在体外和裸鼠体内的抗人胃癌细胞株ＭＮＫ４５作用进行了实验研究。体外试验结果表明，ＣＤ３ＡＫ对ＭＮＫ４５有明显杀伤作用，而ＬＡＫ细胞杀伤率较低，二者差异有非常显著性意义（Ｐ＜０．０１）；用的ＭＴＴ法和台盼蓝活细胞计数法测定这三种细胞的增殖能力和细胞数量的增加，表明ＣＤ３ＡＫ的增殖能力和扩增数量均明显高于ＬＡＫ细胞（Ｐ＜０．０１）。裸鼠体内试验结果显示，对照组及ＬＡＫ组全部长出瘤结节，而ＣＤ３ＡＫ组无一例长出皮下结节，且生存期明显长于前者。     

腺病毒介导的胞嘧啶脱氨酶自杀基因联合IL-2基因疗法的肿瘤治疗作用及免疫机理分析

目的以腺病毒作为载体，将大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因与小鼠ＩＬ－２基因联合转移，研究其体内抗肿瘤作用及免疫机理。方法小鼠皮下接种黑色素瘤Ｂ１６Ｆ１０细胞后３天，肿瘤局部注射表达ＩＬ－２的重组腺病毒ＡｄＩＬ－２和表达ＣＤ的重组腺病毒ＡｄＣＤ，然后连续１０天给予５－氟胞嘧啶（５－Ｆｃ）３００ｍｇ／ｋｇ进行治疗。结果联合治疗组荷瘤小鼠皮下肿瘤结节的生长明显受到抑制，小鼠存活期明显长于ＡｄＩＬ－２、ＡｄＣＤ／５－Ｆｃ、ＡｄｌａｃＺ／５－Ｆｃ或ＰＢＳ组。经联合治疗后，小鼠脾细胞的ＮＫ活性和ＣＴＬ杀伤活性明显增强；肿瘤瘤体内ＣＤ４、ＣＤ８细胞浸润增加；肿瘤细胞表达Ｈ－２Ｋｂ和Ｂ７－１分子明显增加。结论联合应用自杀基因和ＩＬ－２基因治疗，一方面可以明显抑制荷瘤小鼠肿瘤生长，另一方面可以提高机体对肿瘤细胞免疫应答，增加机体的抗肿瘤作用，是肿瘤基因治疗中一条行之有效的途径。     

热疗对荷瘤小鼠NK细胞活性的影响

为研究热化疗综合治疗癌症对机体免疫功能的影响，采用ＹＡＣ－１细胞￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入抑制的ＮＫ细胞活性检测法，测定了经不同方法治疗的荷瘤鼠脾脏ＮＫ细胞的变化情况。ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠６８只，设５组，为正常对照组，实验组分为不治疗组、平阳霉素治疗组、热疗组及热疗联合平阳霉素组。实验组小鼠于右后足底支下接种Ｓ＿（１８０）细胞２×１０￣７／０．１ｍｌ．治疗两次，间隔７天后处死取脾脏进行ＮＫ细胞活性检测。结果表明不治疗组与平阳霉素组ＮＫ细胞活性无差异（Ｐ＞０．０５）；热化疗组与正常对照组无差异。证实单纯化疗组其ＮＫ效应细胞功能受到严重损害，不能发挥应有的免疫作用；而联合热疗则可恢复其正常ＮＫ细胞活性，增强免疫功能。     

CD3单克隆抗体活化的杀伤细胞对人胃癌细胞株MNK45体外杀伤及…

用人的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）与抗ＣＤ３单克隆抗体和基因重组的人ＩＬ－２，共同培养制备ＣＤ３ＡＫ细胞，ＰＢＭＣ与ｒＩＬ－２共同培养制备ＬＡＫ细胞，用单纯ＰＢＭＣ作为对照细胞。对这三种细胞的增殖及在体外和裸鼠体内的抗人胃癌细胞株ＭＮＫ４５作用进行了实验研究。体外试验结果表明，ＣＤ３ＡＫ对ＭＮＫ４５有明显杀伤作用，而ＬＡＫ细胞杀伤率较低，二者差异有非常显著性意义（Ｐ＜０．０１）；用ＭＴＴ法和台盼蓝     

AK细胞及环磷酰胺治疗肝癌的实验研究

为研究１ 种新的过继免疫化疗治疗肝癌的方法,采用肝癌细胞株Ｈ２２ 接种于近交系Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠皮下,制成肿瘤模型。使用ＩＬ２ 、肿瘤活化的杀伤细胞（ＡＫ细胞）及环磷酰胺（Ｃｙ） 进行治疗,检测小鼠脾淋巴细胞ＮＫ、ＬＡＫ及ＣＴＬ 活性,用流式细胞仪检测Ｌ３Ｔ４ 亚群及Ｌｙｔ２ 亚群含量。结果表明在过继免疫化疗组小鼠ＬＡＫ 及ＣＴＬ活性明显高于其它治疗组（Ｐ＜ ０．０１）,荷瘤小鼠肿瘤结节生长较ＩＬ２ 组及Ｃｙ 组明显缓慢（Ｐ＜ ０．０１）,生存期也明显高于其它各治疗组（Ｐ＜０ ．０１）。该研究表明过继免疫化疗有较强的抗肿瘤作用。     

聚乙二醇修饰重组人白细胞介素—2的体内抗小鼠宫颈癌作用

聚乙二醇（ＰＥＧ－６０００）化学修饰竽组人白细胞介素－２（ＰＥＧ－ｒＩＬ－２）显地延长了ｒＩＬ－２的循不半衰期。本研究比较了不同剂量方案析ＰＥＧ－ｒＩＬ－２和ｒＩＬ－２的体内抗小鼠宫颈癌作用。采用局部用药抗移植的小鼠腹水瘤型和皮下实体瘤型宫颈癌Ｕ１４。结果表明：腹腔内注射一定剂量的ＰＥＧ－ｒＩＬ－２＊（４５００ＩＵ，ＱＤ×５）能较相同剂的ｒＩＬ－２显延长荷腹水瘤小鼠的存活期（２３．１±３．６天     

粘附性淋巴因子活化的杀伤细胞抗自体白血病细胞作用的研究

建立了一套培养和处理粘附ＬＡＫ细胞（Ａ－ＬＡＫ）的系统，将１２例缓解期急性髓系白血病（ＡＭＬ）患者（ＲＰＳ）的Ａ－ＬＡＫ细胞与常规制备ＬＡＫ细胞（ＲＴ－ＬＡＫ）进行了对照研究，结果显示ＲＰＳ－Ａ－ＬＡＫ细胞于培养第１０天时其扩增指数（２０．１±１３．９）较ＲＴ－ＬＡＫ细胞的扩增指数（７．５±２．１）明显提高（Ｐ＜０．０５）。形态学研究显示Ａ－ＬＡＫ细胞主要由大颗粒淋巴细胞组成，免疫表型分析显示其主要由ＣＤ１６＋的ＮＫ细胞组成，ＲＴ－ＬＡＫ细胞主要由ＣＤ３＋的Ｔ细胞组成。其杀伤活性与ＣＤ１６＋ＮＫ细胞之间有很好的相关性（ｒ＝０．８２，Ｐ＜０．０５）。这提示ＣＤ１６＋ＮＫ细胞是Ａ－ＬＡＫ细胞的主要组成细胞，代表了杀伤功能最强的亚群。     

免疫杀伤中LAK细胞的坏死和凋亡及黄芪多糖的影响

目的：进一步探讨ＬＡＫ细胞攻击Ｈｅｌａ细胞后的归宿及黄芪多糖（ＡＰＳ）的影响。方法：分别以ＩＬ－２和ＩＬ－２、ＡＰＳ激活的ＬＡＫ细胞与Ｈｅｌａ细胞共育，用电镜和电脑图像分析系统观察和测定ＬＡＫ细胞的存活、坏死、凋亡细胞及各期凋亡细胞不同时段的体密度。结果：对照组１６小时Ｈｅｌａ细胞大部分死亡，ＬＡＫ细胞本身死亡５７％。８、１６小时实验组ＬＡＫ细胞存活、坏死、凋亡细胞各自的体密度与对照组比均有差异（Ｐ＜０．０５）或明显差异（Ｐ＜０．０１），各期凋亡细胞的体密度也有差异或明显差异。结论：ＡＰＳ可降低ＬＡＫ细胞坏死和凋亡细胞的体密度，尤其是典型凋亡细胞的体密度，为抗肿瘤应用ＡＰＳ提高ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞的活性提供实验根据。     

补中益气汤对LAK细胞抗肿瘤活性的加强作用

补中益气汤对ＬＡＫ细胞抗肿瘤活性的加强作用凌卓莹，李佳荃，凌鸿英Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ等［１］报道，ｒＩＬ２／ＬＡＫ疗法对放化疗无效的晚期肿瘤有治疗作用。本研究将补中益气汤与ｒＩＬ２／ＬＡＫ联合，试验治疗荷移植瘤小鼠，观察它是否能提高其抗瘤效果。现报告如...     

小鼠骨髓瘤杂交细胞在动物体内的抗肿瘤保护作用

将小鼠ＳＰ２／０骨髓瘤细胞与脂多糖（ＬＰＳ）活化的同系动物来源的Ｂ淋巴细胞融合，获得１Ｆ１１和２Ａ６杂交细胞。采用荷瘤小鼠模型，观察了１Ｆ１１、２Ａ６杂交细胞的免疫治疗对小鼠存活率、小鼠脾ＣＴＬ细胞体外杀瘤活性的影响。结果显示，腹腔荷骨髓瘤小鼠经ＳＰ２／０杂交细胞治疗后第３周时存活率均为５０．０％，对照组小鼠全部死亡；１Ｆ１１、２Ａ６治疗组分别有３０．０％、２０．０％小鼠长期存活；杂交细胞治疗组小鼠脾ＣＴＬ细胞杀伤ＳＰ２／０细胞活性显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。结果表明，１Ｆ１１和２Ａ６杂交细胞具有一定的体内抗肿瘤治疗作用，提示肿瘤细胞与活化Ｂ淋巴细胞的杂交细胞可作为一种肿瘤疫苗用于肿瘤的防治研究     

CD3AK细胞的体外诱导及免疫生物学特征的实验研究

目的：研究ＣＤ３ＡＫ细胞的体外诱导方法及其免疫生物学特征。方法：采用抗单克隆抗体（ａｎｔｉ－ＣＤ３ＭｃＡｂ）和基因重组人白细胞介素２（ｒＩＬ－２）、植物血凝素（ＰＨＡ０共同诱导人外周血单核细胞（ＰＢＭＣｓ）制备ＣＤ３ＡＫ细胞,应用ＡＰＡＡＰ法、吉姆萨染色法分析ＣＤ３ＡＫ细胞的表型、核型等免疫生物学特征。结果：微量的ａｎ－ｔｉ－ＣＤ３ＭｃＡｂ（终浓度３０～５０００ｎｇ／ｍｌ）辅以少量的ｒＩＬ－２（１     

甲氰咪呱对鼠体内IL—2／LAK抗肿瘤作用的影响

为探讨甲氰咪呱（ＣＩＭ）对鼠体内ＩＬ２／ＬＡＫ抗肿瘤作用的影响,将Ｂ１６细胞经尾静脉接种于Ｃ５７ＢＬ／６小鼠,第３ｄ分别应用ＤＨａｎｋｓ液、ＣＩＭ（１０ｍｇ／ｍｌ）＋ＣＩＭ（１μｇ／ｍｌ）诱导的脾细胞,ＩＬ２＋ＩＬ２（５００Ｕ／ｍｌ）诱导的ＬＡＫ细胞,ＣＩＭ（１０ｍｇ／ｍｌ）＋ＩＬ２＋ＣＩＭ（１μｇ／ｍｌ）和ＩＬ２（５００Ｕ／ｍｌ）共同诱导的ＬＡＫ细胞,观察鼠肺转移结节和生存期。结果显示,单用ＣＩＭ并不能减少肺转移结节和延长生存期;ＣＩＭ＋ＩＬ２／ＬＡＫ治疗组与ＩＬ２／ＬＡＫ治疗组相比,可减少肺转移结节（Ｐ＜０．０５）和显著延长生存期（Ｐ＜０．０１）。结果表明,ＣＩＭ能够增强ＩＬ２／ＬＡＫ抗肿瘤作用,可用于治疗肿瘤。