耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药基因分析

目的了解铜陵市人民医院分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药基因型。方法收集2011年5月至2016年8月铜陵市人民医院临床标本中分离的CRKP,采用VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定仪进行鉴定,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因(bla_(KPC)、bla_(IMP)、bla_(VIM)、bla_(NDM)和bla_(OXA-48)),并对各碳青霉烯酶基因阳性扩增产物进行基因测序。结果共收集CRKP 90株,其中改良Hodge试验阳性84株(93. 3%),51株(56. 7%)携带blaKPC-2基因,2株(2. 2%)携带bla_(IMP-4)基因,1株(1. 1%)携带bla_(VIM-1)基因。结论该院肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的主要耐药机制是产KPC-2型碳青霉烯酶。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药监测及分子耐药机制的研究进展

肺炎克雷伯菌是社区及医院获得性感染重要的病原菌,随着耐碳青霉烯类抗菌药物广泛应用,耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌检出率持续上升,其多重耐药性给临床治疗带来严峻挑战.本文就近年来耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药监测及分子耐药机制研究进展进行综述,为预防与控制该菌的传播和流行提供依据.     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药机制研究

目的:探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因及耐药特性.方法:对42株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌进行药敏试验、改良Hodge试验,并采用聚合酶链反应(PCR)方法检测细菌肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)基因.结果:42株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中,药敏试验结果显示耐药情况严重,仅对替加环素、阿米卡星、妥布霉素、复方新诺明较敏感.改良Hodge试验及KPC基因检测全部阳性,基因测序为KPC-2型.结论:KPC-2是引起肺炎克雷伯菌耐药的主要原因,应引起临床及实验室的关注.     

产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的耐药性检测及变迁

目的探讨产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的流行及耐药情况,为临床合理使用抗生素提供依据。方法采用BD Phoenix 100全自动细菌鉴定药敏系统及纸片扩散法测定病原菌的耐药性,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶和Etest MBL确认纸条法表型筛查金属-内酰胺酶。结果近3年临床肺炎克雷伯菌检出株数并无明显变化,但改良Hodge试验阳性株检出率逐年增加,金属-内酰胺酶阳性株检出率也逐年增加。耐碳青霉烯类菌株对大多数抗生素的耐药率较高且逐年上升,但对氨基糖甙类抗生素的敏感性尚可。结论产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的耐药情况日益严重,应加强院感的监测和预防。     

NICU分离碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌分子流行病学特征

目的 研究新生儿重症监护病房(NICU)中碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)流行特征及耐药机制.方法 收集某三甲医院NICU的CRKP 11株,采用自动化仪器法或纸片扩散法(K-B法)检测其对常用抗菌药物的耐药性,乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验和3'-氨基苯硼酸(APB)协同试验进行碳青霉烯酶表型分析,PCR扩增...     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染危险因素分析

目的 探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染的危险因素.方法 选取我院2019年2月～2020年3月收治的肺炎克雷伯菌感染患者133例作为观察对象,依据耐药性不同分为碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯组(观察组)73例和碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯组(对照组)60例.结果 观察组男52例(71.2％)、女21例(28.8)％,年龄>60岁...     

碳青霉烯类耐药克雷伯菌属细菌的药物敏感性及同源性探讨

目的研究分析碳青霉烯类耐药克雷伯菌属细菌的耐药机制,探究碳青霉烯类耐药克雷伯菌属细菌流行状况,建立克雷伯菌属细菌的脉冲场凝胶电泳分型数据库,以便此菌属在医院流行爆发时快速的溯源,及时控制该细菌的传播。方法收集我院2013年3月-2014年6月临床分离的300株肠杆菌科细菌,经药物敏感性实验筛选出碳青霉烯类耐药克雷伯菌属细菌,应用聚合酶链式反应(PCR)和改良的Hodge试验分别测定其基因型和表现型,后应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源分析。结果本研究中菌属细菌的以产生碳青霉烯酶为主要耐药机制,经PFGE分析得出克雷伯菌22株,可大体分为A、B两型,数目各半。结论我院克雷伯菌属细菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要机制为产生了碳青霉烯酶,因此加强对细菌耐药机制的监测有利于医院感染的控制。     

区域性耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌耐药基因型的分析

目的:分析区域耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae,CR-KPN)的耐药性及耐药基因型.方法:筛选黑龙江省医院2018年1月—2020年12月临床分离的菌株,通过BD PhoenixTM-100全自动细菌鉴定、药敏系统细菌鉴定和药敏试验,改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)表型筛查CR-KPN36株,分析CR-KPN的临床分布特点、耐药特性及耐药基因型.结果:医院分离的CR-KPN主要来源于神经外科、ICU、康复科等,除氨基糖苷类和四环素类抗生素有一定抑制作用外,一、二、三、四代头孢菌素和碳青霉素类抗生素等β-内酰胺类抗生素耐药率接近100％,主要携带blaKPC基因型(97.22％).结论:CR-KPN临床检出逐年增加,其耐药性强,临床抗感染难道大,需加强病原菌监测,并进行耐药基因检测,指导区域临床合理使用抗菌药物,做好院感防控.     

对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的肺炎克雷伯菌耐药机理探讨

目的 研究临床分离的1株肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的分子机制.方法 对临床分离的1株肺炎克雷伯菌,通过纸片扩散法(KB法)检测其对抗生素的敏感性;利用改良Hodge试验、乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验对此菌株进行碳青霉烯酶表型确证;利用PCR及DNA序列分析,确定其基因型;通过质粒提取、质粒接合试验,对耐药基因进行定位.结果 药敏纸片法显示该菌株对碳青霉烯类抗生素敏感,其抑菌圈直径16～17 cm,提示分离的菌株可能产碳青霉烯酶,改良Hodge试验、EDTA协同试验确证产金属β-内酰胺酶(MBLs),PCR扩增和序列分析发现该菌携带MBLs基因blaIMP,药敏纸片法证实接合子对美罗培南的敏感性降低,IMP-4基因位于接合子约73 000 bp质粒上.结论 肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的分子机理是携带MBLs基因的blaIMP.     

产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌研究进展

产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌自1998年被发现后,迅速在世界各地传播流行;其耐药机制主要与外膜蛋白缺失、产KPC酶有关;检测须经过表型筛选、菌株确证试验、基因检测等技术确定;替加环索联合多粘菌素B治疗产KPC肺炎克雷伯菌是常规方法;产KPC肺炎克雷伯菌传播速度快,须加强预防控制.     

携带不同耐药基因对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌适应性及毒力的影响

目的 探讨携带不同耐药基因对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的生长适应性及毒力作用的影响。方法 通过PCR方法扩增碳青霉烯类耐药基因（blaKPC、blaNDM、blaVIM、blaOXA、blaIMP）及β-内酰胺类耐药基因（blaTEM、blaSHV、blaCTX、blaLAP）,测序确定基因型。扩增7个管家基因rpoB、gapA、mdh、pgi、phoE、infB和tonB,测序确定基因型并获得菌株ST类型。根据所携带的碳青霉烯类耐药基因不同,将菌株进行分组,在不同亚胺培南抗生素浓度（0、2、8 mg/mL）下培养细菌,绘制生长曲线,比较各组细菌的生长适应性变化;通过线虫侵染模型用CRKP感染线虫,绘制线虫生存曲线,比较各组细菌对线虫的毒力作用。结果 无抗生素压力下各组菌株生长适应性相似;在2 mg/mL亚胺培南培养基中,双抗性基因组中blaKPC+blaNDM组、blaIMP+blaOXA组生长适应性最强,单抗性基因组中blaIMP组生长适应性最低,差异具有统计学意义（P＜0.05）。在8 mg/mL亚胺培南培养基中,双抗性基因组中blaKPC+blaNDM组和blaNDM+blaOXA组生长适应性最强,且分别强于单抗性基因组blaKPC组和blaOXA组;单抗性基因组中blaOXA组生长适应性最弱,blaKPC和blaNDM生长最快,差异具有统计学意义（P＜0.05）。在无抗生素压力下,各组菌株对线虫毒力作用有所不同,blaKPC组、blaKPC+blaNDM组和blaIMP+blaOXA组生存曲线右移,线虫中位生存时间延长,菌株毒力减弱;blaIMP+blaNDM组生存曲线左移,线虫中位生存时间缩短,菌株毒力增强,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 携带不同的耐药基因以及携带单个或多个耐药基因均会对菌株的生长适应性和毒力产生不同的影响     

碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌耐药机制及分子流行病学研究

目的 分析耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌（CRKP）的耐药情况及耐药基因,为临床治疗提供依据。方法 收集并鉴定临床分离非重复CRKP 27株,采用VITEK-2 compact全自动微生物鉴定药敏分析仪鉴定和药敏试验,碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测A类丝氨酸碳青霉烯酶和B类金属β内酰胺酶,聚合酶链反应（PCR）法和基因测序技术检测常见的耐药基因。使用肠杆菌科基因间重复一致序列PCR(ERIC-PCR)对菌株进行同源性分析。结果 27株肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类、头孢菌素类、喹诺酮类等抗生素的耐药率均>96%。碳青霉烯酶抑制剂增强试验显示,26株A类丝氨酸碳青霉烯酶阳性,1株B类金属β内酰胺酶阳性。PCR和基因测序结果显示,26株CRKP携带KPC-2基因,1株携带NDM-1基因。ERIC-PCR将27株CRKP分为8型,以Ⅰ型和Ⅱ型为主。结论 分离的CRKP对临床常用抗生素表现出高水平耐药,其耐药机制主要是该类细菌产KPC-2型碳青霉烯酶。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌院内肺炎的易感因素研究

目的探讨如何针对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP）院内肺炎感染的易感因素进行有效的防控。 方法以性别、年龄±2岁作为匹配因素,采用1〖DK〗∶1个体匹配病例对照研究,随机抽取2018年确诊的CRKP引起的院内肺炎成年患者85例作为病例组,并筛选同期肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,KP）引起的院内肺炎中对碳青霉烯类（carbapenem,CA）敏感的成年患者85例作为对照组。利用电子病历收集发生院内肺炎感染前的易感因素进行调查。采用二分类Logistic回归筛选出引起感染的独立易感因素。 结果病例组患者主要分布在麻醉ICU病房,占32.94%。单因素分析结果显示：病例组冬季感染、呼吸机使用时间≥4 d、导尿管留置时间≥4 d、中心静脉置管时间≥4 d、双联非CA抗生素使用时间≥4 d占比高于对照组（P均＜0.05）。二分类Logistic回归分析结果显示,冬季、呼吸机使用时间≥4 d、导尿管留置时间≥4 d和中心静脉置管时间≥4 d为病例组的独立易感因素（均P＜0.05）。病例组对阿米卡星和复方新诺明敏感性较好（耐药率均＜60.00%）;对替加环素敏感性最好（耐药率均为0.00%）。对照组对头孢哌酮舒巴坦、美罗培南、哌拉西林他唑巴坦和替加环素的敏感性较好（耐药率均＜10.00%）;对亚胺培南、比阿培南、头孢替坦和阿米卡星的敏感性最好（耐药率均为0.00%）。 结论医务人员应在冬季,针对使用呼吸机、导尿管留置和中心静脉置管时间均≥4 d的住院患者做好两个卫生（严格执行手卫生和增加环境消毒次数）、两个检测（做好患者检测和环境检测）和两个隔离（执行接触隔离和患者隔离）,一旦发现病例组患者,应结合抗菌药物的耐药,选取敏感的抗菌药物积极治疗。     

碳青霉烯耐药克雷伯菌耐药机制研究

目的:探讨天津医科大学第二医院分离得到的碳青霉烯耐药克雷伯菌的耐药机制。方法:2013-2014年度临床微生物实验室分离到36株碳青霉烯耐药克雷伯菌,改良Hodge试验、EDTA协同试验及 PCR法检测碳青霉烯酶耐药基因,PCR法检测ESBLs及Ampc酶耐药基因,PCR、实时荧光定量PCR（RT-PCR）法检测外膜蛋白基因Ompk35及Ompk36存在及表达情况。结果:9株改良Hodge试验阳性,EDTA协同试验均阴性,碳青霉烯酶耐药基因均阴性;36株碳青霉烯耐药克雷伯菌至少存在1种β内酰胺酶耐药基因;外膜蛋白基因无缺失,33株存在外膜蛋白表达量下降。结论: 分离的碳青霉烯耐药克雷伯菌耐药机制可能为ESBLs及Ampc酶表达合并外膜蛋白表达下降。     

耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的流行病学特点及药物敏感性分析

目的 通过多角度分析本地区耐药碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)的相关数据,了解其临床流行病学特征和耐药特点。方法 收集我院2017年1月至2021年9月临床分离的CRKP,对年龄、科室分布和样本类型进行分析,并从不同科室和不同年龄段多个角度分析其药敏结果。结果 CRKP在2021年的检出率从2020年的3.30%明显升高至2021年的12.23%,菌株有流行趋势;检出的疾病类型以呼吸系统疾病(41.71%)为主,其次为心脑血管疾病(18.59%);CRKP在2017年≤17岁(65.71%)是主要检出年龄段,但此后≥66岁年龄段的检出量逐年增加,2020年和2021年均高于50%,位居第一;呼吸道样本的菌株检出量最多(146株,73.37%),主要科室分布是成人及儿童ICU(74株,37.19%和24株,12.06%);CRKP在年龄段≥41岁,复方新诺明的耐药率较低(49.4%),其次为阿米卡星(54.5%和68.2%),≤17岁年龄段则是妥布霉素的耐药率最低(4.3%)。成人ICU耐药率最低是复方新诺明(47.3%),其次为阿米卡星(52.7%),儿童病区暂未发现妥布霉素耐药,阿...     

肺部耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染/定植患者死亡的相关危险因素分析

目的 分析肺部感染/定植耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)患者死亡的相关危险因素.方法 收集2017年1月—2019年6月内蒙古自治区人民医院呼吸道标本培养出CRKP的住院患者190例,进行一般资料分析和死亡相关的单(多)因素logistic回归分析.结果 单因素logistic回归分析结果显示,除合并高血压病、入院...